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PRESENTADO POR:
TUTOR
ADALBERTO BARRAZA
ING. QUIMICO
CROMATOGRAFÍA:
La Cromatografía es un Método de Análisis Fisicoquímico de separación de
mezclas complejas
La Cromatografía consiste en un conjunto de técnicas muy variadas que separan
los componentes de una mezcla permitiendo identificarlos y determinar sus
cantidades.
La cromatografía es un tipo de técnica aplicada para la separación de varios
elementos que conjugan a una mezcla, esta división se fundamenta en las
características físicas y químicas que posea cada elementos, haciendo énfasis en
la capacidad de interacción de cada componente de la mezcla o de la solución con
una sustancia.
La cromatografía, puede ser clasificada según la metodología y los materiales
utilizados en: cromatografía plana, este tipo de técnica se realiza por medio de la
utilización de un material sólido como un papel, gracias a esto puede subclasificarse
en “capa gruesa” o “capa fina”, debido a que la fase estacionaria reposa sobre
soporte totalmente rígido, esta capa se pone en contacto con la fase móvil que es
líquida y el mismo comienza a ascender, de acuerdo a la ubicación de cada
elemento en el papel puede lograr su identificación; por otra parte se encuentra la
cromatografía en columna, en la cual se utiliza varios cilindros largos
cuyo nombre es “bureta” como fase estacionaria, y una mezcla liquida como fase
móvil, de igual forma pueden usarse otro estado físico para la fase móvil, como el
gas, los distintos compuestos a separar van a ir ascendiendo de forma progresiva
por la columna; de acuerdo al estado físico de las fases utilizadas para el proceso la
cromatografía puede clasificarse en: cromatografía de gases, ya que su fase móvil
es de carácter gaseoso, por otra parte está la cromatografía líquida, en la cual la
fase móvil está compuesta por un agente líquido, y por último la cromatografía HPLC
caracterizada por poseer un alto nivel de eficacia y precisión en la separación de
compuestos.
COLORIMETRÍA
Es la ciencia que estudia la medida de los colores y que desarrolla métodos para la
cuantificación de la percepción del color.
Existe una necesidad de estandarizar el color para poderlo clasificar y reproducir.
El procedimiento utilizado en la medida del color consiste sustancialmente en sumar
la respuesta de estímulos de colores y su normalización a la curva espectral de
respuesta del fotorreceptor sensible al color. Como referencia, se utiliza la curva
espectral codificada de la Comisión Internacional de Iluminación, (conocida por sus
siglas CIE en francés), la llamada función colorimétrica. Debe notarse que el color
es una característica subjetiva, pues solo existe en el ojo y en el cerebro del
observador humano, no siendo una característica propia de un objeto. Los
fotorreceptores del ojo humano son los conos de la retina, de los que existen
diferentes tipos, con sensibilidades diferentes a las distintas partes del espectro
luminoso.
El matemático alemán Israel Moreno enunció unas leyes sobre la mezcla aditiva del
color.1 Estas muestran que cualquier color puede expresarse como suma de tres
colores primarios, es decir, de tres colores, cada uno de los cuales no puede
obtenerse por la mezcla de los otros dos. Aplicando sus leyes, se obtiene la
denominada ecuación unitaria del color, que representada, da una forma parecida
a un triángulo, el triángulo internacional de color. El área dentro de las tres curvas
que se obtienen con este procedimiento dan origen a tres valores: las coordinadas
triestímulo X, Y y Z ligadas a las coordinadas de cromaticidad x e y por relaciones
lineales. El paso de un espacio de colores a otro son datos de relaciones de
transformación de coordenadas.
Para la enseñanza práctica inicial de la colorimetría se recomienda emplear los 8
colores básicos o elementales: amarillo, magenta, cian (los tres primarios
sustractivos de las impresiones), rojo, azul, verde (los tres primarios aditivos de los
monitores), blanco y negro.
PERTE 1
BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO
NORMAS GENERALES
Si tienes que mezclar algún ácido (por ejemplo, ácido sulfúrico) con agua,
añade el ácido sobre el agua, nunca al contrario, pues el ácido «saltaría» y
podría provocarte quemaduras en la cara y los ojos.
No dejes destapados los frascos ni aspires su contenido. Muchas sustancias
líquidas (alcohol, éter, cloroformo, amoníaco...) emiten vapores tóxicos.
PERTE 2
PRÁCTICA DE LABORATORIO N°1- PREPARACION DE SOLUCIONES
Ejercicios:
Calcular los gramos de NaCl para prepar una solución de concentración de
0,7 molar /gr prepara 600 ml.
Formulas empleadas:
𝑚𝑜𝑙 𝑚
𝑀= =
𝑙𝑡 𝑣
𝑛 𝑑𝑒 𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠
𝑀=
𝑣
𝑚𝑎𝑠𝑎
𝑃𝑀 =
𝑛 𝑑𝑒 𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠
Datos:
Molar= 0.7gr
PM= gr/mol
M=?
PM=m/n
Remplazamos:
𝑚𝑎𝑠𝑎
𝑃𝑀 = = 𝑛 = 𝑀. 𝑉 = 𝑚 = 𝑛. 𝑝𝑚
𝑛 𝑑𝑒 𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠
𝑛 = 0,7 . 0.6
𝑛 = 0,42 𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠
Peso molecular:
Na= 23
Cl= 35,45
= 58,45 NaCl
Remplazo: 𝑚 = 𝑛. 𝑝𝑚
𝑚 = 0,42 . 58,45 = 24,55 𝑔𝑟
Prepara una solución 2 molar de NaCl 100 ml
Dato: m=2
V= 0.1 l
𝑛 = 𝑀. 𝑣
𝑛 = 2 . 0.1
𝑛 = 0,2
𝑚 = 𝑛. 𝑝𝑚
𝑚 = 0,2 . 58,45 = 11,69 𝑔𝑟
Prepara 500ml de una solución 2 molar KOH
Peso molecular:
O= 16
H= 1
K= 39
= 56 gr
𝑛 = 𝑀. 𝑣
𝑛 = 2 . 0,5
𝑛=1
𝑚 = 𝑛. 𝑝𝑚
56𝑔
𝑚 =1.
𝑚𝑜𝑙
𝑚 = 56 𝑔
PRÁCTICA DE LABORATORIO N°2
PROCEDIMIENTO
Siempre use gafas de seguridad.
7. Añadir una gota de solución de cloruro de sodio al agua destilada. Revuelva para
que se mezcle bien.
8. Seleccionar muestreo manual para medir la conductividad de la solución en el
matraz.
9. Repita este proceso 9 veces hasta que haya agregado un total de 10 gotas al
agua.
10. Cambio de la velocidad de agitación durante el experimento y el seguimiento de
su efecto sobre la tasa de cambio en la conductancia.
11. Guarde los datos seleccionando Save desde la ventana de herramientas básicas
en la barra de menú superior.
Realización de la práctica:
MUESTRAS: Aguadulce
OBJETIVO
Esta normativa técnica se utiliza para la determinación de dureza total en aguas
superficiales, subterráneas y efluentes domésticos e industriales.
GENERALIDADES
El término dureza se refiere al contenido total de iones alcalinotérreos (Grupo 2) que
hay en el agua. Como la concentración de Ca2+ y Mg2+ es, normalmente, mucho
mayor que la del resto de iones alcalinotérreos, la dureza es prácticamente igual a
la suma de las concentraciones de estos dos iones. La dureza, por lo general, se
expresa como el número equivalente de miligramos de carbonato de calcio (CaCO3)
por litro. Es decir, si la concentración total de Ca2+ y Mg2+ es 1 mM, se dice que la
dureza es 100 mg L-1 de CaCO3 (= 1 mM de CaCO3). Un agua de dureza inferior
a 60 mg L-1 de CaCO3 se considera blanda. Si la dureza es superior a 270 mg L-1
de CaCO3, el agua se considera dura.
REACTIVOS
• solución buffer
• negro de eriocromo T (indicador)
• EDTA solución estándar: 1ml EDTA= mg CaCO3
• Agua destilada
PROCEDIMIENTO
Solución titulante de EDTA 0.01M: disolver 3.723 g de etilendiaminotetra-acetato
disódico dihidratado en agua destilada y diluir a 1000 mL. Guardar en botella de
plástico.
Dureza total
• En un vaso de 100ml mida 50cc de agua y agregue 1ml de solución buffer y 0.2 gr
de indicador negro de eriocromo T, agite La solución.
• Titule con solución de versenato sódico (EDTA) hasta que cambie el color rojo
vinoso a azul claro inicial.
• Anote el consumo de versenato.
A paritr del dato de volumen (ml)consumido de EDTA, en la titulación de 50ml de
H2O, se tiene que la dureza (DT) es:
DT=20 x volumen EDTA x equivalente en mg de CaCO3
Realización de la práctica:
GENERALIDADES:
CROMATOGRAFÍA: La cromatografía (chromo= color y graphie=escritura, escribir
en colores) fue inventada el 1903 por el botánico ruso Mikhail Tswe tt. Ismailov y
Scraiber utilizaron láminas de vidrio para colocar capas muy delgadas de alúmina y
luego aplicaron extractos vegetales, dando así la primera forma de cromatografía
de capa fina. Egon Stahl (1956) dió el nombre de cromatografía de capa fina,
estandarizó los procedimientos, equipos y adsorbentes dando un auge a esta
técnica simple, económica y eficiente.
TERMINOLOGÍA
• Fase Estacionaria (Adsorbente)
Es una de las dos fases que forman un sistema cromatográfico. Puede ser un sólido,
un gel o un líquido. Si es un líquido, puede estar distribuido en un sólido, el cual
puede o no contribuir al proceso de separación. El líquido puede también estar
químicamente unido al sólido (Fase Ligada) o inmovilizado sobre él (Fase
Inmovilizada). Los adsorbentes más utilizados son Silica gel (se utiliza en el 80% de
las separaciones)
• Óxido de Aluminio ó Alúmina (ácida, neutra ó básica)
• Tierra Silícea ó Kieselguhr
• Celulosa (Nativa o micro-cristalina)
• Poliamidas.
Estos sorbentes varían en tamaño de partícula, día metro del poro, homogeneidad
y pureza.
• Fase Móvil (eluente)
Es el fluido (solvente o mezcla de solventes) que se filtra a través o a lo largo del
lecho estacionario (fase estacionaria), en una dirección definida. Puede ser un
líquido (Cromatografía Líquida), un gas (Cromatografía de Gases) o un fluido
supercrítico (Cromatografía con Fluido Supercrítico). Cuando se utiliza un líquido
como fase móvil mediante una serie eluotrópica se escoge la mejor combinación de
solventes miscibles para una buena separación cromatografía de una muestra en
sus componentes.
Serie eluotrópica de solventes
Hidrocarburos «ligeros» (éter de petróleo, hexano, heptano. etc.)
Ciclohexano
Tetracloruro de carbono
Tricloroetileno
Tolueno
Benceno
Diclorometano
Cloroformo
Eter etílico
Acetato de etilo
Acetona
n-Propanol
Etanol
Metanol
Agua
Muestra
PROCEDIMIENTO
Tome 30g de muestra vegetal fresca triturada o rallada (Tomate de aliño rojo,
Pimentón verde-rojo, zanahoria, Pimentón rojo, ahuyama, mango cáscara roja,
pasta de tomate, salsa de tomate, espinacas, etc.) y colóquelo en un mortero de
porcelana
Adicione a la muestra vegetal triturada o rallada 4 ml de hexano y 2 ml de etanol
Usando el mortero con pistilo se tritura la muestra vegetal
Se transfiere el extracto del material vegetal a un tubo de ensayo (se puede separar
en forma directa o por filtración) donde se deja reposar hasta ver dos fases en el
tubo de ensayo una fase orgánica y una fase de extracto del material vegetal.
Se agrega con una espátula 0.5g sulfato de sodio anhídrido Na2SO4 suficiente para
que se aclare la turbidez del hexano y quede un poco de polvo fino Deja reposar por
5 minutos agitando de vez en cuando. Si no queda polvo fino de sulfato anhidro,
añade un poco más del sulfato y deja reposar otros 5 min. Posteriormente se agita
bien y se deja sedimentar.
Se lleva a cabo la preparación de los disolventes
Etanol - Cloroformo Hexano - Cloroformo Etanol – Acetona Acetona - Cloroformo
Hexano – Etanol Hexano - Acetona Se toma el papel absorbente y se cortan en
tiras o lamina de 3cm x 8 cm
Para llevar a cabo las mediciones colorimétricas es necesario tomar como punto de
comparación la llamada “curva espectral codificada” que permite asignar valores
numéricos a la respuesta de estímulos de colores. Una vez asignados los valores
se hace una suma de los mismos y se obtiene la cuantificación del o los colores.
A lo largo del tiempo las pruebas de colorimetría se han apoyado de los avances
tecnológicos. Uno de los instrumentos que ayudan a llevar a cabo una medición
colorimétrica más precisa es el colorímetro.
Realización de la práctica:
http://www.quimicayalgomas.com/quimica-general/estequiometria-y-soluciones-
quimicas/soluciones-quimicas/
https://www.quiminet.com/articulos/el-analisis-de-color-colorimetria-y-colorimetro-
2704601.htmg
http://www.quimicaweb.net/ciencia/paginas/laboratorio/normas.html