1.

Microelisa strip plates

Holders with 96 wells each coated with anti-HBs (murine and human monoclonals). The wells are
presented as 12 removable strips with 8 wells each. The holders and strips are contained in a foil
pack with silica gel desiccant. The foil label contains 4 peel-off strip plate identification labels in bar
code format. Prepare for use as described in section 8.

Note : The strips can be broken in the middle to be used as 4-well strips.

2. Conjugate

HRP-labeled anti-HBs (ovine) in bovine serum with stabilizers.

Preservative: 1 mg/ml N-hydroxymethyl-2-chloroacetamin. Color: Blue-green.

Ready for use as supplied. Contents: 7.25 ml.

3. Specimen diluent

Sheep serum in buffer.

Preservative: 5 mg/ ml N-hydroxymethyl-2-chloroacetamin. Color: Pink

Ready for use as supplied. Contents: 10 ml.

4. Negative Control

Human serum nonreactive for HbsAg.

Preservatives: 0.1 g/l gentamicin sulfate and 0.2 ml/l cinnamaldehyde.

Color: Light yellow

Ready for use as supplied. Contents: 4.7 ml.

5. Positive Control

Bovine serum in sodium chloride solution containing HbsAg subtype ad produced by a human cell
line.

Preservatives: 0.1 g/l gentamicin sulfate and 0.2 ml/l cinnamaldehyde.

Color: bright yellow

Ready for use as supplied. Contents: 2.0 ml.

6. Phosphate buffer concentrate

Concentrate (25 x) phosphate buffer with 0.05% Tween-20. Dilute in distilled or deionized water as
described in section 8.
Contents: 100 ml.

7. TMB solution

Tetramethylbenzidine in citric acid.

Preservative: 1 g/l 2-chloroacetamide.

Combine with urea peroxide solution as described in section 8.

Contents: 11 ml.

8. Urea peroxide solution

Preservative: 1 g/l 2-chloroacetamide.

Combine with TMB solution as described in section 8.

Contents: 11 ml

9. Clamp and rod

Closure for foil pack.

10. Plate sealers

Perforated, adhesive

11. Sheet of labels

Protocol, reagent and working solution identification labels in bar code format.

Terjemahan
1. piring jalur Microelisa
Pemegang dengan 96 sumur masing-masing dilapisi dengan anti-HBs (murine dan
monoclonals manusia). Sumur disajikan sebagai 12 strip dilepas dengan 8 sumur masing-
masing. Pemegang dan strip yang terkandung dalam paket foil dengan gel silika pengering.
Label foil berisi 4 jalur label identifikasi piring peel off dalam format kode bar. Siapkan
untuk digunakan seperti yang dijelaskan di bagian 8.
Catatan: Strip dapat rusak di tengah untuk digunakan sebagai 4-baik strip.

2. Conjugate
HRP-label anti-HBs (domba) di bovine serum dengan stabilisator.
Pengawet: 1 mg / ml N-hidroksimetil-2-chloroacetamin. Warna: Biru-hijau.
Siap untuk digunakan sebagai disediakan. Isi: 7,25 ml.
3. Spesimen pengencer
Domba serum dalam buffer.
Pengawet: 5 mg / ml N-hidroksimetil-2-chloroacetamin. Warna: Pink
Siap untuk digunakan sebagai disediakan. Isi: 10 ml.

4. Kontrol Negatif
Serum manusia reaktif untuk HbsAg.
Pengawet: 0,1 g / l gentamisin sulfat dan 0,2 ml / l cinnamaldehyde.
Warna: Cahaya kuning (Kuning terang)
Siap untuk digunakan sebagai disediakan. Isi: 4.7 ml.

5. Positif Kontrol
Serum sapi dalam larutan natrium klorida yang mengandung HbsAg iklan subtipe yang
dihasilkan oleh garis sel manusia.
Pengawet: 0,1 g / l gentamisin sulfat dan 0,2 ml / l cinnamaldehyde.
Warna: kuning cerah
Siap untuk digunakan sebagai disediakan. Isi: 2.0 ml.

6. Fosfat penyangga konsentrat

Konsentrat (25 x) dapar fosfat dengan 0,05% Tween-20. Encerkan di suling atau deionisasi
air seperti yang dijelaskan di bagian 8.
Isi: 100 ml.

7. Larutan TMB
Tetramethylbenzidine di asam sitrat.
Pengawet: 1 g / l 2-Chloroacetamide.
Kombinasikan dengan larutan urea peroksida seperti yang dijelaskan dalam bagian 8.
Isi: 11 ml.

8. Larutan Urea peroksida

Pengawet: 1 g / l 2-Chloroacetamide.
Kombinasikan dengan solusi TMB seperti yang dijelaskan dalam bagian 8.
Isi: 11 ml

9. penjepit dan batang

Penutupan untuk foil paket.

10. sealers Plat

Berlubang, perekat

11. Lembar label

Protokol, reagen dan bekerja label identifikasi solusi dalam format kode bar.
Protokol, reagen dan larutan kerja dalam format kode bar
Assay Procedure

1. Fit the strip holder with the required number of microelisa strips
2. Pipette 25 µl specimen diluent into the assigned wells. Pipette 100 µl (undiluted) sample or
control into assigned wells. Include three negative controls and one positive control in each
strip holder. Pipette the controls after the samples.
3. Incubate at 37oC for 60 minutes ± 5 minutes .
Optional: Plate can be read at 405 nm and 690 nm as reference (dual wavelength) to check
the addition of controls and samples. For interpretation og the SARAM readings
4. Pipette 50 µl cinjugate solution into each well.
Avoid touching the side of the well or the liquid surface with the pipette tip.
5. Incubate at 37oC for 60 minutes ± 5 minutes.
Optional: Plate can be read at 620 nm dan 690 nm as reference (dual wavelength) to check
the addition of conjugate. For interpretation og the SARAM readings
6. Wash and soak each well six times with phosphate buffer.
Note: When not all strips are placed in the strip holder this may affect the quality of the
washing (spilling of wash fluid). This is instrument dependent.
- Aspirate the well contents completely into a waste flask. Then fill the wells completely
with phosphate buffer avoiding overflow from one well to another and allow to soak for
approximately 60 seconds. Aspirate completely and repeat the wash and soak procedure
five times for a total of six washes.
- It is preferable to wash the wells by filling them with a fluid volume greater than the well
volume while simultaneously aspirating excess volume in order to prevent overflowing.
- Remove any remaining fluid on the top and under the bottom of the microelisa strips
and strip holder after the last aspiration; e.g., by carefully blotting with absorbent tissue.
7. Pipette 100 µl TMB substrate into each well
Do not mix or shake. Discard any TMB substrate that has been stored beyond the indicated
period of use.
8. Incubate the strips at 15 to 30oC for 30 minutes ± 2 minutes in the dark
9. Stop the reaction by adding 100 µl 1 mol/l sulfuric acid to each well (use the same pipetting
sequence and time intervals used for TMB substrate addition).
10. Read plates at 450 nm dan 620 to 700 nm as reference (dual wavelength) within 15
minutes.
Note: If the strip holder is not completely filled with strips, light scattering may affect the
quality of the readings. This is instrument dependent.
Prosedur uji
1. Cocokan pemegang strip dengan jumlah yang diperlukan strip mikroelisa
2. Pipet 25 ml spesimen pengencer ke dalam sumur ditugaskan. Pipet 100 ml (murni) sampel
atau kontrol ke sumur ditugaskan. Meliputi tiga kontrol negatif dan satu kontrol positif di
setiap pegangan strip. Pipet kontrol setelah sampel.
3. Inkubasi pada 37oC selama 60 menit ± 5 menit.
Opsional: Plat dapat dibaca pada 405 nm dan 690 nm sebagai acuan (dual panjang
gelombang) untuk memeriksa penambahan kontrol dan sampel. Untuk interpretasi og
pembacaan saram
4. Pipet 50 ml larutan konjugat ke setiap sumur.
Hindari menyentuh sisi baik atau permukaan cairan dengan ujung pipet.
5. Inkubasi pada 37oC selama 60 menit ± 5 menit.
Opsional: Plat dapat dibaca di 620 nm Dan 690 nm sebagai acuan (dual panjang gelombang)
untuk memeriksa penambahan konjugasi. Untuk interpretasi og pembacaan saram
6. Cuci dan rendam setiap sumur enam kali dengan dapar fosfat.
Catatan: Bila tidak semua strip ditempatkan di pegangan strip ini dapat mempengaruhi
kualitas cuci (pertumpahan cairan cuci). Ini tergantung instrumen.
- Aspirasi isi juga benar-benar ke dalam labu limbah. Kemudian mengisi sumur-benar dengan
dapar fosfat menghindari melimpah dari satu sumur ke yang lain dan memungkinkan untuk
rendam selama sekitar 60 detik. Aspirasi sepenuhnya dan ulangi cuci dan rendam prosedur
lima kali untuk total enam mencuci.
- Adalah lebih baik untuk mencuci sumur dengan mengisi mereka dengan volume cairan
yang lebih besar dari volume juga sekaligus aspirasi volume yang berlebih untuk mencegah
meluap.
- Hapus cairan yang tersisa di atas dan di bawah bagian bawah strip microelisa dan pegangan
strip setelah aspirasi terakhir; misalnya, dengan hati-hati blotting dengan tisu penyerap.
7. Pipet 100 ml TMB substrat dalam setiap sumur
Jangan mencampur atau kocok. Membuang substrat TMB yang telah disimpan di luar periode
ditunjukkan penggunaan.
8. Inkubasi strip di 15 sampai 30oC selama 30 menit ± 2 menit dalam gelap
9. Hentikan reaksi dengan menambahkan 100 ml 1 mol / l asam sulfat ke masing-masing
(menggunakan interval urutan pipetting dan waktu yang sama digunakan untuk TMB substrat
Selain).
10. Baca piring pada 450 nm Dan 620-700 nm sebagai acuan (dual panjang gelombang)
dalam waktu 15 menit.
Catatan: Jika pegangan strip tidak sepenuhnya diisi dengan strip, hamburan cahaya dapat
mempengaruhi kualitas bacaan. Ini tergantung instrumen.