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Valparaíso
Profesora: Carolina Severino
Asignatura: Biología
Guía de Laboratorio
“AISLAMIENTO DE ADN “
INTRODUCCIÓN
MATERIALES
ACTIVIDAD PRÁCTICA
Lavar, cortar y poner en la procesadora toda la muestra vegetal. Agregar 500ml. De agua,
tapar y procesar hasta obtener un preparado cremoso. El objetivo es la ruptura o lisis del
tejido.
En un vaso de 50 ml. separe 30 ml. De la muestra ya procesada.
Prepare en un vaso, solución tampón salina con : 2grs. De NaCl, 1 ml de detergente, 5ml de
agua.
Liceo Santa Teresa
Valparaíso
Profesora: Carolina Severino
Asignatura: Biología
Agregue el tampón a su muestra. Mezcle con la paleta plástica, sin hacer espuma. El tampón
provoca la rotura de las membrana citoplasmatica y nuclear, por acción conjunta de sal y
detergente, que rompen las células y liberan sus componentes y al ADN y proteínas
asociadas (por ejemplo las histonas).
Agregue 2ml. De proteasa. Mezcle bien, cuidando de no producir exceso de espuma. Así
destruye las proteina asociadas al ADN.
Obtenga 10 ml de la solución, Incline un poco este vaso y con una pipeta limpia, deje deslizar
suavemente 5 ml. De alcohol sobre el filtrado. Observe la formación de una interfase entre
el filtrado y el alcohol. El ADN migra hacia el alcohol, aislándose de los otros componentes
celulares, que permanecen en la fase acuosa.
Revuelva suavemente a nivel de interfase.