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Desde los albores de la vida, los organismos han competido unos con otros para
sobrevivir, desarrollando así, estrategias para tener una ventaja con respecto a otro ser
1. El Género Aeromonas.
Debido a sus características Bioquímicas, sus integrantes han sido confundidos
las secuencias de los genes 16S rRNA y 5S rRNA. El género Aeromonas se caracteriza
por poseer individuos con forma de bacilos cortos, de una medida de 0.3-1 x 1-3.5 m,
media, son organismos aerobios facultativos, dan positivo para las pruebas de oxidasa
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presentan sensibilidad a vibriosato2, 4-diamino-6,7-diisopropilpteridina.
aumentar su virulencia. (Longa, 2005) Suelen ser patógenos para animales de sangre
caliente y sangre fría. Se han hallado Aeromonas en aguas residuales, tratadas y hasta
potables, lo cual indica un riesgo para la salud humana, los cuales se pueden contagiar
encontrado una mayor población de estos organismos cuando las temperaturas son
2006)
crecimiento varía de 5.5-9. Tiene importancia clínica debido a que puede causar
enterotoxina termolábil que se puede neutralizar con la antitoxina del cólera. También
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tetraciclina (Braude, 1984).
(Dallagasa, 2018; Reina, 1995). Debido al parentesco que presentan con otros
DNA de las subunidades 16S rRNA mediante PCR y posteriormente realizar cortes con
conoce también el metabolismo del organismo, así como las condiciones a las que
3. Factores de virulencia
Los microorganismos patógenos (que pueden producir enfermedades) que se
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desarrollar en los tejidos del organismo vivo y dependiendo su grado de patogenicidad,
Los oportunistas, son aquellos que solo producen enfermedad cuando entran al
tejido del cuerpo, no pueden invadir tejidos de organismos sanos, pero una vez en estos,
pueden producir una infección grave o mortal. En cambio, los patógenos verdaderos
pueden invadir los tejidos de organismos sanos. La virulencia se puede definir como la
relación entre parasito-huésped con producción de lesiones tisulares que llevan a una
capacidad de crecimiento con los nutrientes del medio, o la destrucción de los tejidos
ocasionada por las toxinas. Todo esto se rige por la relación entre el número de
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destruyen a los leucocitos; factores coagulasa que gelifican el plasma sanguíneo
permitiendo una mayor adherencia; estreptoquinasa que activa una proteasa, con lo
con éxito.
llama atenuación, la cual se presenta con mayor facilidad cuando las condiciones de
crecimiento no son las óptimas para la especie. (Brock, 1993; Burdon, 1971)
Aeromonas producen al menos dos tipos de estas hemolisinas: una α-hemolisina que
una α -hemolisina denominada aerolisina debido a que puede lisar completamente los
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3.2 Gen alt y gen ast
Codifican para una enterotoxina citotóxica, la cual produce acumulación de
citotoxinas es que una es termolábil (alt) y la otra es termoestable (ast), pueden actuar
una movilidad más rápida que les permite moverse en superficies sólidas y se ha
asociado a la formación de bio-películas. Existen nueve genes que codifican para estos
se realiza con los iniciadores para cada gen en búsqueda. Por otra parte, se realizan
ensayos sobre medios de cultivo de agar sangre para observar la lectura de los genes
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para hemolisinas, así como la adición de medio de cultivo líquido donde han crecido
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Antecedentes
Factores de virulencia asociados a la enteropatogenicidad en cepas de
las heces de 397 pacientes con diarrea, y se tomaron 121 sin diarrea para conformar el
grupo control, en el estado de Mérida, Venezuela. El estudio fue realizado entre junio
las cepas obtenidas, se observó que todas tenían al menos una cualidad patogénica. Se
observa como entre más contacto tienen los organismos con los humanos, más
presentan factores de virulencia, así como que A. trota es una cepa de poco aislamiento,
pero que resulta patogénica como otros organismos del mismo género (Longa 2005)
alta presencia en el país, el estudio analiza los factores de virulencia de algunas cepas
de Aeromonas, busca que la población sea consciente del peligro debido a estos
patógenos, y por ello el género Aeromonas sea estudiado con mayor frecuencia por los
científicos y no solo clínicamente como es rutinario. Debido a esto detalla los factores
el 0.8 %, además de proporcionar todos los medios necesarios para que sea fácil
identificar a los miembros de este género. También se menciona la relación entre los
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organismos y su ambiente, la importancia tanto para la salud, como la importancia
Aeromonas a partir de materia fecal de aves. El estudio muestra la facilidad con la cual
fuentes naturales, además que se realiza un análisis genético donde se copian los genes
una de las cepas. Por otra parte se observa que de su total de cepas aisladas, A. trota
patógeno, se llegó a que fue una A. trota la causante de la diarrea que lo aquejaba.
estos organismos en el mediterráneo y declarando así que este género tiene una
cerebroespinal. Este trabajo fue realizado para encontrar el desarrollo de las cepas de
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Aeromonas trota en fluido cerebroespinal, para que la inmunidad del paciente no se
vea comprometida en el caso de hallarse las cepas en un paciente con meningitis. Las
especifico de las enfermedades infecciosas que causa. La PCR es la técnica con la que
amplificaron la secuencia del gen aerA que posee A. trota. la identificación del
fragmento de 622 pares de bases (bp) fue confirmado por una digestión con la enzima
método sugieren el uso de la PCR para identificar A. trota de manera clínica, ya que
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resultados obtuvieron que el 96% poseía genes de virulencia. También observaron que,
el este de Australia A. hydrophila y A. dhakensis son más virulentas que otras cepas
consumo humano, de las cuales 25 eran Aeromonas trota, una A. dhakensis y una
Aeromonas spp. La alta incidencia de esta especie en las muestras contrasta con los
reportes de la literatura donde es una especie que se aísla con baja frecuencia (Díaz
2017)
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Planteamiento del problema
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Justificación
Algunas especies del género Aeromonas tienen la capacidad de infectar al
A. caviae y A. veronii son los principales agentes causales de diarrea. El resto de las
factores de virulencia.
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Objetivo general
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Objetivos específicos
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Diseño de investigación
Se estudiarán 25 cepas de Aeromonas, en la cuales se llevará a cabo la búsqueda
virulencia
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Materiales
Los normales de un laboratorio, además de Termociclador y cubas para
electroforesis
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Métodos
cultivo agar Luria, se realiza una estría cruzada para obtener colonias aisladas y se
medio de cultivo caldo Luria, se coloca en la estufa a 37°C con una agitación de 200
resuspender en 500µl de regulador Tris 50mM / EDTA 20mM (TE 50/20). Centrifugar
6. Añadir 400µl de fenol saturado con tris pH 7.5, mezclar por inversión y
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7. Transferir la fase acuosa a un tubo limpio y añadir 500µl de cloroformo-alcohol
isoamílico (21:1), mezclar por inversión y centrifugar a 16000 rpm durante 2 min.
decantar.
9. Lavar con 1ml de etanol al 70% y centrifugar nuevamente a 13000 rpm durante
5min.
10. Decantar, dejar secar el botón y disolver con 50µl de agua destilada inyectable.
agarosa al 0.8%
3. PCR
1. En esterilidad, colocar 12.5µl de Master mix (contiene regulador de fosfatos,
alineamiento 30s, 72°C T. extensión (el tiempo varía según el fragmento que desee
10 min.
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Cronograma de trabajo
Actividad Febrero- Agosto- Enero-
Julio 2018 Diciembre 2018 Julio 2019
Revisión
bibliográfica
Diseño de la
investigación
Pruebas de
identificación de los
genes mediante PCR
Pruebas
fenotípicas de
expresión genética a
diferentes
temperaturas
Comprobación
de resultados
Análisis de
resultados
Discusión de
resultados
Entrega de
adelanto de tesis 1
Entrega de
adelanto de tesis 2
Entrega de
adelanto de tesis 3
Entrega de
tesis
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Glosario
Bacteremia: Presencia de bacterias en la sangre
Cepa: Población de organismos de una misma especie, que comparten la mayor parte
célula.
de cadena simple.
elevada.
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Referencias
1. Kimball John (1982) Biología 4ª edición. (7,8) CDMX, México. Addison-
Wesley iberoamericana
Panamericana
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10. Longa, Aurora (2005) Factores de virulencia asociados a la
14. Cardoso, Lemos, Roges (2017) Un detallado de Aeromonas spp. y Vibrio spp.
en aves marinas del sudeste de Brasil: resultados para la salud pública. Journal
of Applied Microbiology
15. Reina, López (1995) gastroenteritis causada por A, trota en un niño. J Clin
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