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GUÍA DE PRÁCTICAS
Smallanthus sonchifolius
LIMA, 2014
La farmacobotánica es la ciencia que estudia las plantas desde diversos enfoques, ya sea de la
botánica pura o aplicada. La botánica pura estudia las plantas desde un enfoque teórico, desde los
aspectos de taxonomía y también de la fisiología y la citogenética de los vegetales. La botánica
aplicada está basada en lo anterior y también considera los usos prácticos que se le pueden dar a
las plantas para lograr su adecuada utilización, que pueden ser disciplinas como la forestal la
agrícola, la farmacéutica y la naturista.
La Farmacognosia es una ciencia que tiene por objeto el estudio científico de las drogas naturales
de origen vegetal y animal, de sus constituyentes químicos, principios activos y productos
relacionados.
Como objeto específico se tiene en primer lugar que el estudiante desarrolle habilidades y destrezas
en el conocimiento de las estructuras internas y externas de las plantas que contribuyan a la
identificación de las mismas y en el manejo y utilización de los diferentes Métodos y Técnicas
Analíticas para la extracción, aislamiento, identificación y cuantificación de los principios activos
responsables de las acciones farmacológicas que se encuentran en las drogas; y en segundo
término motivar el interés del estudiante al estudio e investigación de las especies vegetales.
Con esta guía se pretende contribuir a un mejor desarrollo de las prácticas.
Las autoras.
MARCO TEÓRICO:
El estudio de la estructura interna de las plantas requiere de adecuadas preparaciones
microscópicas de muestras que nos permitan la observación detallada de los diferentes tejidos y
estructuras vegetales; éstas se elaboran preparando láminas histológicas de diferentes tipos de
cortes hechos en plantas.
La célula vegetal presenta entre sus principales características una estructura celulósica compleja
(pared celular) y diferentes componentes no protoplasmáticos primarios (substancias que se
producen como consecuencia del metabolismo primario) y comprenden a los polisacáridos
(almidones) así como a los lípidos y proteínas de reserva (aleurona), mientras que los denominadas
inclusiones celulares (diversas formas drusas, rafidios, maclas, arenilla cristalífera) constituyen las
formaciones cristalinas de oxalatos(diversas formas drusas, rafidios, maclas, arenilla
cristalífera);todas estas sustancias tienen su importancia farmacognóstica en la identidad de la
droga vegetal.
MATERIAL VEGETAL:
OTROS MATERIALES:
Microscopios
Cámara Fotográfica
Preparación de cortes: Los cortes se realizan a mano alzada, con una hoja de afeitar
a) Cortes que comúnmente se hacen en
hojas:
I. Corte superficial: Se secciona
paralelamente a la superficie de la
hoja.
II. Corte transversal: Se secciona
perpendicularmente a la vena
media.
Drusas Rafidios
TÉCNICA:
- Clarificar los cortes con hipoclorito de sodio al 50% hasta que se observen blancos o casi
transparentes (según el material).
- Lavar varias veces con agua destilada (5-6 veces).
- Pasar por alcohol 70º
- Colocar con safranina diluida al 15% durante 2-5 minutos según el material
- Lavar con agua destilada
- Montar en gelatina-glicerina
Las paredes secundarias lignificadas se tiñen de color rojo intenso y también la cutícula. Los
parénquimas toman color rosado.
3. CITOLOGÍA e INCLUSIONES CITOPLASMÁTICAS
A. Realizar cortes transversales muy delgados de la parte carnosa del membrillo o ají. Observe a
menor aumento las células pétreas. A mayor aumento, reconocer lapared secundaria lignificada,
el lumen y los canalículos porales.
B. Realizar un raspado del tubérculo de papa, semilla de frejol y depositarlo en una lámina con una
gota de agua, cubrir con la laminilla y observar con el objetivo de mayor aumento. Identifique los
diferentes tipos de granos de almidón: simples y compuestos, con sus estratificaciones e hilio
excéntrico. A mayor aumento dentro de las células algo redondeadas. Se identifican
amiloplastos de formas peculiarmente características luego añadir lugol y señalar lo ocurrido.
C. Realizar corte transversal de hoja de sábila y colocar en un portaobjeto, realizar el montaje con
una gota de agua.Observe: los rafidios.
D. Realice un corte transversal del tallo modificado de tuna o en corte transversal de peciolo de
begonia, realice el montaje con una gota de agua.Observe: células isodiamétricas conteniendo un
agregado cristalino de aspecto asteroideo: la drusa.
E. Realice el corte transversal de la raíz de “zanahoria” y montar con una gota de agua. Observar
células de contorno redondeado en cuyo interior presenta pequeños corpúsculos tubulares e
irregulares refringentes de color anaranjado (cromoplastos con predominio de carotenoides).
F. Corte superficial del envés de las hojas de “oreja de gato” y hacer el montaje respectivo. Observe
células de contorno poligonal, unos incoloros y otros de color morado púrpura; dicho color se
debe a que el contenido vacuolar (vacuoma) está conformado por antocianinas.
RESULTADOS:
Hacer esquemas de sus observaciones en la HOJA DE OBSERVACIONES y elaborar el informe de su
práctica mediante un PROTOCOLO DE ANÁLISIS BOTÁNICO según Formato.
ACTIVIDAD BIBLIOGRÁFICA:
1. ¿En qué consiste la Herborización de muestras vegetales? Desarrolle un mapa conceptual con
gráficos o dibujos.
2. Mencione mediante un cuadro 10 plantas medicinales endémicas o nativas del Perú, con los
siguientes datos:
Nombre Común Nombre Científico Familia Usos Medicinales Título, Autor y año de
publicación.
1.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
Libros
1. Pérez, E. 1999. Introducción a la Biología Vegetal. Impresiones David, Lima
2. Strasburger. 1994. Botánica. Ediciones Omega S.A. Barcelona.
3. Gola G.; Negri G.; Cappelletti C. 1965.Tratado de Botánica Barcelona,
6. Mostacero, J. Taxonomía de las Fanerógamas. 2002. Útiles del Perú. 1ra. Edición. Lima.
7. Greulach V.; Adams A. 1990. Las plantas: introducción a la botánica moderna. México
9. Reynaud, J. 2002. La flora del farmacéutico. España.
Revistas
1. Fieldmuseum: http://fm1.fieldmuseum.org/vrrc/
2. Flora de China: http://flora.huh.harvard.edu/china/
3. Raintree's Tropical Plant Database: http://www.rain-tree.com/plistbot.htm#.Ux9nDD95NPI
4. Revista peruana de biología: http://revistasinvestigacion.unmsm.edu.pe/index.php/rpb
5. The Plant List: www.theplantlist.org
6. Trópicos, Missouri Botanical Garden: www.tropicos.org
HOJA DE OBSERVACIONES DE PRÁCTICA N ° 1
CARACTERIZACIÓN MICROSCÓPICA DE LAS DROGAS VEGETALES.
CITOLOGÍA: CÉLULA VEGETAL, PARED CELULAR, NÚCLEO Y COMPONENTES
PROTOPLASMÁTICOS.
Dibuje o esquematice sus observaciones FECHA:......./.........../........
Nombre científico:
Familia:
Tipo de corte
Lugar de Origen:
Coloración
Habitad:
Aumento
Lugar de recolección:
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
PRÁCTICA N° 2
MARCO TEÓRICO:
Los tejidos vegetales encargados de la protección de la planta se caracterizan especialmente por carecer
de espacios intercelulares y conformar una capa uni o pluricelular en la parte externa del órgano vegetal,
se diferencian en su origen primario (Epidermis) o secundario (Peridermis). El tejido mecánico está
conformado por elcolénquima,de células vivas y paredes primarias desigualmente engrosadas y el
esclerénquima, conformado por célulasmuertas y paredes secundarias lignificadas, uniformemente
engrosadas. El xilema es un tejido vascular conformado por células muertas y de paredes secundarias
lignificadas con unaserie de engrosamientos característicos.Los diferentes subproductos del metabolismo
celular secundario que se producen en las plantas generalmente se encuentran localizados en células y
estructuras secretoras en los distintos órganos vegetales, por ejemplo los laticíferos y las cavidades
secretoras. Los diferentes órganos vegetales presentan una serie de tejidos vegetales que conforman
una estructura interna propia del desarrollo en las plantas, los cuales se describen como parte de la
caracterización botánica de las drogas vegetales.
TIPOS DE COLÉNQUIMA
A Colénquima angular
TEJIDO MERISTEMÁTICO B Colénquima laminar
CAMBIUM MODELO DE CRECIMIENTO SECUNDARIO C Colénquima anular
D Colénquima lagunar
HACES CONDUCTORES
TEJIDO SECRETOR A Haz conductor colateral cerrado
A Bolsa oleífera esquizógena B Haz conductor colateral abierto
B Bolsa oleífera lisígena
C Canal secretor
D Tubo laticífero no articulado ramificado
E Tubo laticífero articulado no ramificado
TIPOS DE
TRICOMAS
A Pluricelular
B Cónico unicelular
C Glandular largo
D Glandular corto
E Glandular pluricelular
F Mixto
G Estrellado
H Urticante
MATERIALES:
Material Vegetal
- Raíz fresca de Allium cepa “cebolla”
- Yemas del tallo de Ricinuscomunis “higuerilla”
- Pelargoniumhortorum “geranio” (hoja)
- Cucurbita pepo “zapallo” (tallo)o C. maxima “calabaza”
- Citrus aurantium “naranja” (fruto)
- Ficus elastica “caucho” (pecíolo)
- Sambucus peruviana “Saúco” (tallo)
- Tallo de Helianthus annus “girasol”
- Tallo de Zea mays “maíz”
- Tallo de Phoeniculum vulgare “hinojo”
- Fruto de Pyrus sp. “pera”
- Hojas de Iris florentina “lirio”
- Hojas de Nicotina sp. “tabaco”, Malva sp. “malva”, Olea europea “olivo”, Urtica urens “ortiga”.
PROCEDIMIENTO:
TEJIDO EPIDÉRMICO:
1. Realizar cortes superficiales o paradermal de la hoja de geranio y de lirio, y en cortes paradermal de
hoja de olivo, ortiga, malva, geranio, tabaco hacer el montaje en una gota de agua.Observar células
de contorno sinuoso y la posición desordenada de los estomas: Además diferenciar los pelos o
Tricomas pluricelularescónicos y los: glandulares en geranio y células ordenadas en lirio, con
estomas ordenados.
TEJIDO MECÁNICO
2. Realizar cortes transversales del tallo de zapallo o calabaza o hinojo o sauco, hacer el montaje con
una gota de safranina y observe: debajo de la epidermis, reconocer células de forma poliédrica, con
engrosamiento en los ángulos y débilmente teñidas: Colénquima angular. En las mismas muestras,
por debajo del parénquima se presentan células con paredes engrosadas y teñidas intensamente,
fibras de Esclerénquima.
TEJIDO SECRETOR
4. Realizar cortes longitudinales del pecíolo de la hoja de caucho, preparar el montaje con una gota de
agua y observar: amayor aumento células alargadas conteniendo látex: LATICÍFERO NO
ARTICULADO, reconocidos por su contenido de color gris. Y en corte paradermal de cáscara de
naranja se observará las cavidades lisígenas, y en pétalo de rosa las células papilosas.
RESULTADOS:
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
MARCO TEÓRICO:
La morfología estudia los órganos de la planta y las partes que los forman. Estos órganos son la raíz, el
tallo y las hojas que llamamos órganos vegetativos y la flor y el fruto, que son los órganos reproductivos.
Las raíces se pueden clasificar de acuerdo a su origen, al medio en que viven por su forma, por su
duración y por su consistencia.A diferencia de las raíces, el tallo presenta geotropismo negativo, tiene
nudos (lugares donde se originan las hojas) y entrenudos (regiones entre dos nudos consecutivos),
yemas (áreas del tallo situadas justo por encima del punto de inserción de la hoja apical y axilares) y por
lo común hojas bien desarrolladas.Sus funciones básicas son de soporte, de conexión de hojas y yemas
entre sí y con la raíz y de conducción de la savia.
Las funciones primordiales de las hojas son la fotosíntesis (cloroplastos) y el intercambio gaseoso
(estomas), también asume las de protección, defensa, reserva y reproductora. Las hojas se clasifican por
el borde de la hoja, la forma del limbo, peciolo, vaina y nervadura.
La flor es un brote de crecimiento definido con hojas que producen órganos reproductores. De estas
hojas, las más apicales o internas son esporófilos y las más inferiores o externas son antófilos.Se llama
inflorescencia a una ramificación terminada en flores. Cada una de las ramitas del eje primario o caquis,
que sostiene una flor, se llama pedicelo. Cuando solo existe una flor en el ápice del tallo o en la axila de
una hoja, no hay inflorescencia y entonces se dice que la flor es solitaria, el tipo de inflorescencia tiene
importancia para la taxonomía botánica; es característico de cada familia.
El fruto es el conjunto de las piezas florales que persisten después de la fecundación y acompañan a la
semilla generalmente se dice que es el ovario desarrollado y maduro ya que este se engruesa
acumulando materias nutritivas y se transforman en fruto y contiene la semilla.
La semilla es el medio principal para perpetuar de generación en generación la mayoría de las plantas
(ya que algunas se regeneran vegetativamente) y gran parte de las especies leñosas.
COMPETENCIAS: Reconocer y caracterizar los principales órganos de la planta (Raíz, Tallo, Hojas,
Flor, Fruto y semilla)
MATERIALES:
Diferentes tipos de (Raíz, Tallo, Hojas, Flor, Fruto y Semilla)
Lupas
Hoja de afeitar
Reglas
Placas Petri
PROCEDIMIENTO:
Identificar según las características morfológicas los tipos de raíz, tallo, hoja, flor, fruto y semilla.
TALLO
RAÍZ
TIPOS DE RAÍZ
TIPOS DE RAÍZ
HOJAS
FLOR
INFLORESCENCIA
FRUTO
SEMILLA
RESULTADOS:
Hacer esquemas de sus observaciones en la Hoja de Observaciones y elaborar el informe de su práctica
mediante un Protocolo de análisis botánico según Formato PROTOCÓLO BOTÁNICO.
Referencias Bibliográficas
MARCO TEÓRICO:
Las plantas constituyen un recurso valioso en los sistemas de salud de los países en desarrollo. La
Organización Mundial de la Salud (OMS) ha estimado que más del 80% de la población mundial utiliza,
rutinariamente, la medicina tradicional para satisfacer sus necesidades de atención primaria de salud y
que gran parte de los tratamientos tradicionales implica el uso de extractos de plantas o sus principios
activos (Akerele, 1993; Sheldon et al., 1997; Shrestha y Dhillion, 2003; Katewa et al., 2004). De acuerdo
a la OMS (1979) una planta medicinal es definida como cualquier especie vegetal que contiene
sustancias que pueden ser empleadas para propósitos terapéuticos o cuyos principios activos pueden
servir de precursores para la síntesis de nuevos fármacos.
Estas plantas también tienen importantes aplicaciones en la medicina moderna. Entre otras, son fuente
directa de agentes terapéuticos, se emplean como materia prima para la fabricación de medicamentos
semisintéticos más complejos, la estructura química de sus principios activos puede servir de modelo
para la elaboración de drogas sintéticas y tales principios se pueden utilizar como marcadores
taxonómicos en la búsqueda de nuevos medicamentos (Akerele, 1993).
La investigación sobre el uso de plantas medicinales forma parte de la etnobotánica, que ha sido definida
como el estudio de las interrelaciones entre los grupos humanos y las plantas (Ford, 1978; Martin, 2001;
Gómez-Veloz, 2002). Por su naturaleza interdisciplinaria abarca muchas áreas, incluyendo: botánica,
química, medicina, farmacología, toxicología, nutrición, agronomía, ecología, sociología, antropología,
lingüística, historia y arqueología, entre otras; lo cual permite un amplio rango de enfoques y aplicaciones
(Alexiades, 1996a; Martin, 2001)
A pesar de todas estas innovaciones, Zent (1999) plantea que la filosofía de la etnobotánica no ha
cambiado mucho, pues en la mayoría de las investigaciones sobre plantas medicinales se sigue
enfatizando la documentación científica de las plantas y sus usos para beneficio casi exclusivo de
grandes transnacionales, con poco interés en la dinámica de los sistemas de conocimiento local y en la
compensación a las comunidades nativas. Se requiere entonces de más trabajo interdisciplinario, de una
mayor preocupación por los aspectos éticos de la comercialización de medicamentos desarrollados a
partir del conocimiento tradicional de ciertos grupos humanos (Prance, 1991) y por el retorno de los
resultados obtenidos, en ensayos biológicos de plantas tropicales, a los países y grupos humanos que
han colaborado en la colección de las plantas evaluadas (Ritcher y Carlson, 1998).
MATERIALES:
Especie vegetal a investigar conlosórganos de Láminas y laminillas, gotero, estiletes
laespecie a investigar . Hoja de afeitar nueva, papel lente.
Lupas Safranina. Lugol, Fast Green, verde Janus, Rojo
Hoja de afeitar de metilo, azul de toluidina, hipoclorito de Sodio,
Reglas Etanol al 50% y agua destilada.
Placas Petri Microscopio
Cámara Fotográfica
PROCEDIMIENTO:
1. Realizar el Análisis Macroscópico, organoléptico (olor, sabor, color, textura) de los diferentes órganos
de la especie.
Carácter
Organoléptico
Órgano Color Olor Sabor Textura Otras
de la especie Observaciones
Raíz
Tallo
Hoja
Flor
Fruto
Semilla
1. Desarrolle un Flujograma de las etapas para realizar un estudio Botánico en especies vegetales con
uso medicinal.
Referencias Bibliográficas
1. SORIA, R., CARHUAPOMA, M. 2005. Manual de prácticas de Botánica General y Sistemática. Lima
2. SOUKUP, J. 1971. Vocabulario de Nombres Vulgares de Plantas Peruanas, Ed. Salesiana, Lima.
3. STRASBURGER, E. NOLL, F. 2004. Tratado de Botánica. 35ª ed. Ediciones Omega. Barcelona.
4. THOMAS-DOMÉNECH, J.M. 1997. Atlas Temático de Botánica. Barcelona.
5. TOSCO U. 1993 Atlas de Botánica. Edit. Barcelona.
6. VALDIZAN H.; MALDONADO A. 1922. La Medicina Popular Peruana Imp. Torres Aguirre, Lima.
7. VALLA, J. 2011. Botánica. Morfología de las plantas superiores. Primera Edición. Editorial Hemisferio Sur.
8. VENTURA, O. 2010. Las Plantas Aromáticas y Medicinales. Primera Edición. Lima
9. VILLAR, U. 2004. Fitoterapia. Primera Edición. Editorial Acribia. Zaragoza
10. WEBERBAUER A. 1945. El Mundo Vegetal de los Andes Peruanos. Ministerio de Agricultura. Lima.
11. Flora de China: http://flora.huh.harvard.edu/china/
12. Journal of Natural Products: http://www.journalofnaturalproducts.com/
13. Nature Medicine: http://www.nature.com/nm/index.html
14. Phytochemistry: http://www.journals.elsevier.com/phytochemistry/
15. Raintree's Tropical Plant Database: http://www.rain-tree.com/plistbot.htm#.Ux9nDD95NPI
16. Revista peruana de biología: http://revistasinvestigacion.unmsm.edu.pe/index.php/rpb
17. Revistas de investigación UNMSM: http://revistasinvestigacion.unmsm.edu.pe/
OBSERVACIONES DE LA PRÁCTICA N° 4
CONTROL BOTÁNICO DE LA ESPECIE VEGETAL MEDICINAL
MORGOLOGÍA VEGETAL CITOLOGÍA e HISTOLOGÍA, (Raíz, Tallo, Hojas, Flor, Fruto y Semilla),
MARCO TEÓRICO:
Las plantas a nivel mundial ocupan un lugar importante en el comercio de medicamentos y en los
preparados fitoterapéuticos y por ende es necesario garantizar su control de calidad con aplicaciones de
técnicas modernas y el uso de patrones adecuados que den seguridad y eficacia al utilizarlas.
Las Farmacopeas describen métodos de ensayos generales para evaluar o valorar las drogas oficiales.
Materia prima
(Fórmula magistral)
CONTROL
Seguridad y eficacia
Identidad Calidad
Ensayos Botánicos:
Control de identidad:
Determinación de sus características macroscópicas y microscópicas.
Determinación cualitativa de sus principios activos (histoquímico).
Control de calidad:
Determinación cualitativa de sus principios activos.
Cuantificación de sus principios activos.
Otras determinaciones cuantitativas
Determinación de su actividad farmacológica.
MATERIALES:
PROCEDIMIENTO:
1. Realizar el Análisis macroscópico, organoléptico (olor, sabor, color, textura) de los diferentes órganos
de la especie.
Raíz
Tallo
Hoja
Flor
Fruto
Semilla
Preparación del extracto acuoso y etanólico de la especie a investigar para hacer los análisis cualitativos
correspondientes:
TAMIZAJE FITOQUÍMICO
EXTRACTO ACUOSO:
CARBOHIDRATOS:
- Reacción de Molisch
Gotas de muestra problema + gotas de S. R. de Molisch “A” (alfa naftol 2% en alcohol), agitar + H2SO4
conc. por las paredes del tubo…anillo color violeta. (+) para carbohidratos (azúcares).
- Reacción de Antrona
Gotas de muestra problema + gotas de S.R. de Antrona (antrona en H2SO4 conc. al 2%) …anillo verde.
(+) para carbohidratos (azúcares).
-Reacción de Fehling
Gotas de muestra problema + gotas de S.R. Fehling A + gotas S. R. Felhing B+ calor por 5-7 minutos en
baño maría…pp color rojo ladrillo. (+) para carbohidratos (azúcares reductores).
-Reacción de Benedict
Gotas de muestra problema + gotas de S.R. de Benedict + calor por 5-7 minutos en baño maría…pp
color rojo ladrillo. (+) para carbohidratos (azúcares reductores).
-Reacción de Brown
Gotas de muestra problema + gotas de S.R. Hidróxido de sodio al 10% + calor hasta obtener coloración
amarilla, luego agregar 1 gota de + ácido pícrico 2%, se obtendrá una coloración parda por formación de
ácido picrámico. (+) para carbohidratos (azúcares reductores).
Compuestos fenólicos:
Gotas de muestra problema + gotas de FeCl3 (Sol. al 1% en agua o alcohol) …color verde o azul.
(+) presencia de compuestos fenólicos, taninos.
TANINOS:
-Reacción de Gelatina
Gotas de muestra problema + gotas de S.R. gelatina…pp blanco (+) Taninos
AMINOÁCIDOS Y PROTEINAS
-Reacción de Ninhidrina
Gotas de muestra problema + S.R. de Ninhidrina (Ninhidrina al 1% en etanol) + calor BM 10
minutos…color violáceo. (+) Para aminoácidos libres y amino grupos (calentar en algunos casos).
FLAVONOIDES
-Reacción de Shinoda
Gotas de muestra problema + S.R. Shinoda (Mg metálico + gotas de HClconc). … color rojo.
(+) presencia de flavonoides, chalconas, auronas; catequina e isoflavona no dan color.
QUINONAS
-Reacción de Borntrager
Gotas de muestra problema + S.R. Borntrager (gotas de hidróxido de sodio 5%)…color rojo. (+)
quinonas
ALCALOIDES
-Reacción de Dragendorff
Gotas de muestra problema + gotas de S.R. Dragendorff… pp naranja o rojo naranja (+) alcaloides
(medio ligeramente ácido).
-Reacción de Bertrand Gotas de muestra problema + gotas de S.R. Bertrand… pp blanco (+) alcaloides
ANTOCIANINAS
-Reacción de Rosenheim Gotas de muestra problema + gotas de S.R. Rosenheim (S.R. Yodo
Yodurada)…rojo oscuro. (+) antocianinas y flavonoides catéquicos.
GRUPO CARBONILO
-Reacción de Hidroxilamina
Gotas de muestra problema + gotas de S.R. hidroxilamina…pp coloreado (+) presencia de grupo
carbonilo.
SAPONINAS
-Reacción para Saponinas
1 g de muestra problema + 10 mL de agua destilada. Agitar fuertemente por 1 minuto…producción de
espuma por 15 minutos de 0.5 a 1 cm (+) presencia de saponinas.
GLICÓSIDOS
.-Reacción de Vainillín sulfúrico
Gotas de muestra problema + gotas de S.R. Vainillín sulfúrico…color rojizo violáceo en anillo de
interfase. (+) Glicósidos.
**Los resultados de los tamizajes fitoquímicos nos dan una referencia de la composición química de
un planta que se está investigando (no es determinante), lo cual nos ayudará a profundizar en la
investigación al realizar el fraccionamiento y el aislamiento de los constituyentes químicos.
1. Que análisis según las Farmacopeas se realizan para el Control de Calidad de Productos
Fitoterapeúticos.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
Libros:
1. Bruneton, J. Farmacognosia – Fitoquímica – Plantas Medicinales. 3ra. Ed. Acribia, Zaragoza,
España 2001.
2. Treasse, G., Evans, W. Pharmacognosy. Ed. BailliereTindall, Londres 1994.
3. Reynaud, Joël. La flora del farmacéutico. España, 2002.
4. Lock de Ugaz O. Colorantes naturales. 1ra Edición. Lima, 1997.
5. USP, Pharmacopeia, National Formulary (USP NF).XVII, XIX, XX, XXI, XXII, XXIII, XXIX, XXX.
Revistas
Journal of Natural Products – USA
Lloydia – Asoc. Americana de Farmacognosia de USA.
Pharmacognosy Titles – Londres – Inglaterra
Phytochemistry – Londres - Inglaterra
Biblioteca virtual EBSCO HOST ResearchDatabases(http://search.ebscohost.com/)
Journal of Analytical Chemistry
Chemical Biology & Drug Desig
RESULTADOS DE LA PRÁCTICA Nro. 5
LEYENDA: (-) Nulo (-) poco (+) Leve (++) moderado (+++) abundante
PRÁCTICA N° 6
MARCO TEÓRICO:
La Extracción obtiene porciones medicinalmente activas a partir de los tejidos de las plantas y animales,
de los componentes inertes de los mismos, mediante el uso de solventes selectivos, utilizando
procedimientos establecidos y correctamente estandarizados.
Para poder realizar el aislamiento de un principio natural en condiciones óptimas, se debe tener en
cuenta una serie de dificultades, inherentes a la propia planta o materia prima como al tipo de compuesto
a extraer.
Por esta razón la planta se somete a una serie de operaciones previas que facilitan y mejoran el
rendimiento de la extracción.
Existen una serie de métodos que han sido desarrollados y aplicados para una detección de los
diferentes constituyentes químicos en las plantas, basadas en la extracción de éstos con solventes
apropiados y en la aplicación de pruebas de coloración o precipitación llamado Tamizaje Fitoquímico.
MATERIALES:
Extracto etanólico de la Especie vegetal a investigar.
Reactivos para el análisis cualitativo (Tamizaje Fitoquímico)
Reactivos para el análisis cualitativo (Cromatografía en Capa Fina)
PROCEDIMIENTO:
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Villar del Fresno, A. Farmacognosia General. Ed. Síntesis, SA. Madrid, España 1999.
2. Treasse, G., Evans, W. Pharmacognosy. Ed. BailliereTindall, Londres 1994.
3. Gattuso, Gattuso. Manual de Procedimientos para el Análisis de Drogas en Polvo. 1ra ed. Argentina:
Editorial Universidad Nacional de Rosario Urquiza.1999.
4. Bruneton, J. Farmacognosia, Fitoquímica, Plantas medicinales 2ª Ed. Acribia, Zaragoza, España.
2001.
5. Kuklinski, C. Farmacognosia, Estudio de las drogas y sustancias medicamentosas de origen natural.
Ed. Omega, Barcelona, España 2003.
6. Sharapin N. Fundamentos de Tecnología de Productos Fitoterapéuticos Santa fe Bogota Colombia
2000.
7. Miranda M. Métodos de Análisis de Drogas y Extractos, Habana Cuba 2002.
8. Lock de Ugaz. Investigación Fitoquímica, Métodos en el estudio de productos naturales [en línea].
Perú: Editorial Pontificia Universidad Católica del Perú; 1994. [Fecha de acceso 27 de junio de 2013].
URL disponible en:
http://books.google.com.pe/books?id=N36g2QOccXkC&pg=PA287&dq=prueba+con+dragendorff&hl=
es&sa=X&ei=d7bNUazRHsjX4AS9oYBQ&ved=0CEAQ6AEwBA#v=onepage&q=prueba%20con%20d
ragendorff&f=false.
PROTOCOLO
RESULTADOS DE LA PRÁCTICA Nro. 6
Prueba de solubilidad
Agua destilada
Etanol
Metanol
n-butanol
Acetato de etilo
Diclorometano
Cloroformo
Eter de petróleo
LEYENDA: (-) Insoluble (+) ligeramente soluble (+++) Soluble (+++) Muy soluble
Tamizaje fitoquímico
CAMBIOS RESULTADOS
METABOLITO REACCIÓN
OBSERVADOS
CARBOHIDRATOS
Fehling
O AZUCARES
COMPUESTOS FeCl3
FENÓLICOS
TANINOS Gelatina
FLAVONOIDES Shinoda
AMINOÁCIDOS
LIBRES Y GRUPOS Ninhidrina
AMINO
Dragendorff
ALCALOIDES Mayer
Bertrand
NAFTAQUINONAS,
ANTRAQUINONAS Y Borntrager
ANTRANONAS
TRITERPENOIDES Y
Lieberman-Burchard
ESTEROIDES
LEYENDA: (-) Nulo (-) poco (+) Leve (++) moderado (+++) abundante
Huella Cromatográfica
Fase móvil:
Detección
O Revelador:
Esquema de resultado
Calculo de Rf
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:
PRÁCTICA N° 7
MARCO TEÓRICO:
Glúcidos o azúcares, son compuestos orgánicos constituidos por carbono, hidrógeno y oxígeno.
Constituyen la clase de compuestos que se encuentran en las plantas en mayor cantidad. Son
aldehídos o cetonas polihidroxilados; bajo peso molecular, tienen muchas propiedades en común:
son alifáticos, ópticamente activos, de sabor dulce, muy solubles en agua. Difíciles de cristalizar aún
cuando estén puros. Son importantes en el metabolismo vegetal, son fuente de energía en forma de
almidones, sirven para el transporte de energía en forma de sacarosa, intervienen en la formación de
paredes celulares (celulosa) y destacan en el aspecto ecológico por medio de la relación planta –
animal.
Se pueden detectar en cantidades muy pequeñas, por medio de reactivos cromógenos. Detectados
por cromatografía CCF, usando reactivos que contienen fenoles o aminas, como el resorcinol con
ácido sulfúrico o el ftalato de anilina.La CCF y CP, son sustituidos de preferencia por otras técnicas
de separación, la CC de baja presión, HPLC, cromatografía de gases o electroforesis.
Los azúcares no reductores no funcionan con estos reactivos y generalmente se detectan por su
rápida oxidación con per yodato o tetra acetato de plomo.
MONOSACÁRIDOS
osas simples
OLIGOSACÁRIDOS
menos de 10 osas
HOLÓSIDOS
HOMOGÉNEOS
varias osas osas iguales
POLISACÁRIDOS
más de 10 osas
HETEROGÉNEOS
osas diferentes
HETERÓSIDOS
osa + aglicón
Clasificación de Carbohidratos
MATERIALES y REACTIVOS:
Extracto etanólico de la Especie vegetal a investigar.
Reactivos para el análisis cualitativo (Tamizaje Fitoquímico:Molish, Antrona, Fehling, Benedict,
Tollens, Selivanoff, NaOH, Fenilhidrazina, Yodo 2.5%, H2SO4 cc, KOH 5%, Etanol absoluto,
Ba(OH)2 10%, HCl diluido, Acetato de plomo neutro y básico, lugol)
Otros materiales necesarios (Tubos de ensayo, gradillas, embudo, cocinilla, beackers grande y
chicos, baguetas, goteros, pipetas, papel filtro, capsula de porcelana, mechero y balanza)
Miel de abeja, Azúcar, Papa, Algodón, Manzana, Linaza
PROCEDIMIENTO:
2.1 Especie a Investigar: Filtrar el extracto hidroalcohólico al 10 o 20% P/V macerado de 7 días de
hojas, tallos o semillas de la especie a investigar. Si es muy concentrado diluir 1:10 ml con el solvente
donde es soluble el extracto.
Papa (ALMIDON) Rallar el tubérculo en un beacker conteniendo agua, luego exprimir a través de la
gasa, recogiendo el líquido en un beacker, dejar sedimentar y lavar por decantación
varias veces. Utilizar la solución de almidón de papa para las reacciones.
Manzana (PECTINAS) Pesar 2 g de manzana trozada o rallada, secar en estufa x 15 min a 150 C, luego lavar
la muestra con 10 mL alcohol 3 veces, Al residuo agregar 10 mL HCl al 10% x 15
minutos. Filtrar y trabajar con la solución.
Linaza (MUCÍLAGOS) Pesar 10 gramos de semillas de linaza, agregar 50 mL de agua destilada y someter a
ebullición x 15 minutos, decantar y trabajar con los mucílagos de linaza.
REACCIÓN DE AZUCARES
REDUCTORES
Fehling X gotas de MP + X gotas de solución de Precipitado rojo ladrillo
(A: CuSO4; B: tartrato mixto de potasio Fehling+ calentar en B.M
y sodio (KNaC4H4O6·4H2O)
Benedict
(Citrato de Na + CuSO4 + X gotas de MP + X gotas de Benedict+ Precipitado amarillo-verdoso
NaCO3) calentar en B.M
REACCIONES DE
ALDOSAS Y CETOSAS Precipitado rojo (CETOSA)
X gotas de MP + III gotas de Selivanoff
Selivanoff
+ calentar en B.M
(Resorcina + HCl)
REACCIONES DE
SACAROSA X gotas de MP + X gotas de solución
Herail Herail Color violeta -azulada
(1 ml Nitrato cobaltoso + 1 ml
NaOH 50%)
X gotas de MP + X gotas de Reactivo+
Pozzi-scott
H2SO4 cc en zona Formación anillo azul
(Molibdato de Amonio 15%)
X gotas de MP + X gotas NaOH 10% +
Pelouze
calentar Color amarillo
(NaOH 10%)
POLISACÁRIDOS
HOMOGÉNEOS Complejo azul desaparece por
X gotas de MP (ALMIDON DE PAPA)
Solución de yodo 2.5% calor y reaparece por
+ V gotas de Yodo 2.5%
enfriamiento.
Fibras de ALGODÓN + V gotas lugol,
Yodo en ácido sulfúrico Observar color azul
secar + gotas de H2SO4 cc
Fibras de ALGODÓN + V gotas de
Solubilidad en H2SO4 Soluble
H2SO4 cc
Fibras de ALGODÓN + V gotas de Insoluble
Solubilidad en KOH 5%
KOH 5%
POLISACÁRIDOS
HETEROGÉNEOS
Precipitado amarillo gelatinoso
NaOH 3N X gotas de MP (PECTINAS) + X gotas
NaOH 3N
X gotas de MP (MUCÍLAGOS) + V
Acetato de Plomo básico gotas de reactivo Precipitado gelatinoso blanco
X gotas de MP (MUCÍLAGOS) + V
Presencia de almidones (azul) y
Lugol gotas de reactivo
dextrinas (rojo)
2. Mediante una Tabla mencione 8 especies medicinales endémicas o nativas del Perù, que
contengan Carbohidratos
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
LEYENDA: (-) Nulo (-) poco (+) Leve (++) moderado (+++) abundante
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:
PRÁCTICA N° 8
MARCO TEÓRICO:
Salicina
Droga : hojas Arbutina
Droga : hojas
Compuestos antraquinónicos
Poseen una molécula de azúcar unida a un derivado del antraceno. El constituyente químico
representativo es la antraquinona o 9,10-dioxoantraceno. Se encuentra en especies como el ruibarbo,
sen, cáscara sagrada, etc. Las antraquinonasse utilizan para la fabricación de colorantes, plaguicidas y
aditivos para procesos químicos de la industria del papel y pulpa. Los extractos de plantas que contienen
antraquinonas, son utilizados para cosméticos, alimentos y productos farmacéuticos debido a sus
propiedades terapéuticas y farmacológicas.
Drogas con Compuestos antraquinónicos
Ruibarbo Sen Cáscara Sagrada
(Rheumpalmatum) (Cassia angustifolia) (Rhamnuspurshiana)
Planta herbácea perenne con Arbusto Árbol de 6-12 m, con ramas
hojas basales, palmeado-partidas redondas y pubescentes.
Aloínas
Aloe-emodina
Droga: hojas
COMPETENCIAS: Capacitar al estudiante para que adquiera habilidad de realizar el análisis cualitativo y
el Tamizaje Fitoquímico en drogas vegetales para determinar la presencia decompuestos fenólicos y
antraquinónicos
MATERIALES y REACTIVOS:
Extracto etanólico de la Especie vegetal a investigar.
Reactivos para el análisis cualitativo (Tamizaje Fitoquímico)
Otros materiales necesarios (Tubos de ensayo, gradillas, embudo, morteros, cocinilla, beackers
grande y chicos, Baguetas, goteros, pipetas, papel filtro, capsula de porcelana, mechero y
balanza)
PARTE EXPERIMENTAL
I. Análisis cualitativo
Fenoles simples
Sauce (Salix alba)
OBTENCIÓN DE SALICINA
Extracción: Pesar 1 g de corteza pulverizada, agregar 20 mL de agua y someter a decocción por 30
min. Filtrar y concentrar.
IDENTIFICACIÓN
Reacción Procedimiento Resultado
Ácido sulfúrico 5 mg de salicina + V gotas de H2SO4 Coloración roja
FeCl3 5 mLde extracto + V gotas de FeCl3 Coloración azul-verde
Rx. Fehling 5 mL de extracto + V gotas de Fehling A y B+ Precipitado rojo ladrillo
calor
Uva ursi (Arctostaphylos uva ursi)
OBTENCIÓN DE ARBUTINA
Extracción: Pesar 1 g de corteza pulverizada, agregar 10 mL de agua y someter a decocción por 30
min. Filtrar y concentrar.
IDENTIFICACIÓN
Reacción Procedimiento Resultado
Microsublimación Colocar en cápsula, 5 mg de droga en polvo.
Cubrir con luna de reloj y calentar hasta
desprendimiento gaseoso.
Al residuo enfriado agregar:
II gotas de NH4OH Coloración pardo rojiza
Compuestos antraquinónicos
Identificación
cáscara
Procedimiento ruibarbo sen sábila
sagrada
Microsublimación Coloración Coloración Coloración -
Colocar en cápsula, 5 mg de droga roja intensa roja pardo naranja
en polvo. Cubrir con luna de reloj y
calentar hasta desprendimiento
gaseoso. Al residuo enfriado agregar
II gotas de NH4OH.
R. Schonteten - - - Fluorescen
mL del ensayo anterior (Sol. cia a luz
alcohólica amoniacal )+ borato de UV
sodio saturado.
R. Klunge - - - Coloración
0.5 g MP+ 5 mL de agua + BM a 40° rojo
C x 15 min.+ mg de talco. Filtrar.Al grosella
filtrado añadir II gotas de CuSO4 + II
gotas de NaCl + 5 mL etanol.
Iridoides
Muestras Problemas:
* Filtrado del extracto de la especie a investigar 10-20% P/V
* Macerado alcohólico de Plantagomajor L. (llantén).- pesar 10 g de hojas de llantén. Colocar en un
matraz y agregar 50 mL de alcohol de 70°. Macerar 48 h.
* Decocción por 10 minutos (Extracto acuoso) de la droga vegetal con Iridoides.
CUESTIONARIO
2. Mediante una Tabla mencione 10 especies nativas del Perú, que presenten compuestos fenólicos
y antraquinónicos.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
FECHA……………………………….
RESULTADOS
1 Ácido sulfúrico
2 FeCl3
3 NH4OH conc.
4 Vainillín clorhídrico
5 Rx. Fehling
6 Microsublimación
7 R. Borntrager
8 Alcohólica
amoniacal
9 R. Schonteten
10 R. Klunge
LEYENDA: (-) Nulo (-) poco (+) Leve (++) moderado (+++) abundante
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:
PRÁCTICA N° 9
MARCO TEÓRICO:
FLAVONOIDES
Extracción de flavonoides
Los flavonoides (en particular heterósidos) pueden ser degradados por la acción de enzimas, siendo
necesario utilizar muestras secas, liofilizadas o congeladas. Para la extracción, el disolvente se elige en
función del tipo de flavonoide a extraer. La polaridad es un factor muy importante. Flavonoides de baja
polaridad (por ejemplo, las isoflavonas, flavanonas, flavonas metiladas, y flavonoles) se extraen con
cloroformo, diclorometano, éter dietílico, o acetato de etilo, mientras que los heterósidos flavonoides y
agliconas más polares se extraen con alcoholes o mezclas de alcohol-agua. En el caso de los
heterósidos la presencia de la porción de azúcar incrementa la solubilidad en agua y alcohol, por lo que
soluciones hidroalcohólicas son las más adecuadas.
La mayor parte de las extracciones de especies que contiene flavonoides se realizan por extracción
directa con solventes y también pueden ser extraídos en Soxhlet, primero con hexano, para eliminar
lípidos seguido de acetato de etilo o etanol para extraer compuestos fenólicos, sin embargo este método
no es adecuado para compuestos sensibles al calor.
TANINOS
Los taninos son compuestos polifenólicos de peso molecular alto que se encuentran en las plantas
superiores, incluyendo muchas plantas utilizadas como alimentos, el peso molecular oscila entre 500 y
3 000, de estructura amorfa, sabor astringente y débilmente ácidos. La mayoría de ellos solubles en
agua; pueden ser amarillos, rojos o marrones, y se localizan en el citoplasma o en las vacuolas de las
células; conformados principalmente por restos de ácido gálico unidos a glucosa a través de enlaces
glucosídicos.
Los taninos ingeridos en la dieta pueden afectar la asimilación de proteínas y hierro, al formar complejos
insolubles. En las especies vegetales los taninos actúan como defensas químicas que reducen el daño
por insectos y mamíferos. En medicina, especialmente en Asia (Japón y China), los extractos de especies
vegetales que contienen taninos se utilizan como astringentes, diuréticos, antiinflamatorios y antisépticos.
Por su capacidad de precipitar metales pesados y alcaloides (excepto morfina), los taninos se pueden
utilizar como antídotos de estas sustancias. Los taninos se utilizan en la industria de colorantes como
colorantes catiónicos (tanino), y en la producción de tintas (galato de hierro). En la industria alimentaria
los taninos se utilizan para clarificar el vino, la cerveza y jugos de frutas.
Actualmente, los taninos han atraído el interés científico, debido a la mayor incidencia de enfermedades
como el VIH y varios tipos de cáncer. La búsqueda de nuevos compuestos prometedores para el
desarrollo de nuevos productos farmacéuticos es cada vez más importante, especialmente por la acción
biológica que se les atribuye.
COMPETENCIAS
Conoce la importancia de flavonoides y Taninos en Farmacognosia
Identifica flavonoides y Taninos cualitativamente
Cuantificar taninos en muestras de tara (Caesalpinia spinosa)
METODOLOGÍA
Cromatografía en capa fina
Método volumétrico : Yodometría
Reacciones de precipitación
Reacciones de coloración
MATERIAL Y EQUIPOS
Material de vidrio
Reactivos de coloración
Material de vidrio
Estufa
Mortero pilón
PARTE EXPERIMENTAL
I. Análisis cualitativo de FLAVONOIDES
Heterósidos flavonoides DROGA REACCIÓN PROCEDIMIENTO REACCIÓN
POSITIVA
Hesperidósido Naranja H2SO4 cc mg de hesperidina+ gotas Coloración
Citrus sinensis de H2SO4 cc naranja
Fam. HCl cc mg de hesperidina+ gotas Precipitado
Rutaceae de HCl cc blanco
HNO3 mg de hesperidina+ gotas Coloración
de HNO3 pardo rojizo
NaOH 30% mg de hesperidina+ gotas Coloración
de NaOH 30% amarillo naranja
Rutinósido Ruda Wilson 0.5mLWilson A + Coloración
Ruta (Ác.borico+citrato 0.5mLWilson B+0.5mL de amarilla.
graveolens de sodio) extracto (30 min. en Observación en
Fam. oscuridad) UV:
Rutaceae Fluorescencia
verde
Shinoda 0.5mL de extracto+ virutas Coloración
de Mg +gotas HCl cc rosada
FeCl3 0.5mL de extracto +gotas Coloración
FeCl3 verde
Pesar 5 g de droga vegetal, agregar 50 mL de agua destilada y llevar a decocción x 10 minutos, filtrar.
Con el extracto de la droga vegetal que presenta Flavonoides según bibliografía realizar el Análisis
Cualitativo de Flavonoides y con el extracto de Tara realizar el análisis cualitativo de Taninos.
a) Reacción de diferenciación
Reactivo Procedimiento Reacción positiva
FeCl3 10% 0.5 ml MP + gotas deFeCl3 10% T. hidrolizables: azul
T. condensados: verde
b) Reacciones de identificación
REACTIVO PROCEDIMIENTO REACCIÓN POSITIVA
FeCl3 0.5 mL MP+ gotas de FeCl3 coloración azul/verde
K2Cr2O7 5% 0.5 mL MP+ gotas de K2Cr2O7 5% pp. pardo
Pb(CH3COO)2 0.5 mL MP+ gotas de Pb(CH3COO)2 pp. blanco lechoso
Agua de cal 0.5 mL MP+ gotas de agua de cal pp. amarillo pálido
KCN 5% 0.5 mL MP+ gotas de KCN 5% pp. amarillo
Hipoclorito de sodio 0.5 mL MP+ gotas de hipoclorito de sodio coloración naranja
K4[Fe(CN)6] + NH4OH 0.5 mL MP+ gotas de K4[Fe(CN)6] + gotas de NH4OH coloración rojiza
Gelatina 0.5 mL MP+ gotas de gelatina pp. blanco
KMnO4 0.5 mL MP+ gotas de KMnO4 pp. pardo
Alcaloide 0.5 mL MP+ gotas de alcaloide pp. lechoso blanco
III. Análisis cuantitativo
Preparación de la muestra
GASTO: “C”
Yodo 2.5%
10 mL solución nuestra
problema+ 2mL de
NaHCO3+c.s.p para 20 mL con
agua destilada
Nota: El punto final de la valoración se determina con tiras de papel almidonado (indicador externo),
vira a violeta intenso en el punto de equivalencia.
a) Cálculos
A-B 0.1 g
C-B X
CUESTIONARIO
1. Khanbabaee K, Van Ree T. Tannins: Classification and Definition. Nat. Prod. Rep., 2001; 18. p.
641–649. Disponible en: http://siba.unipv.it/farmacia/art/Marrubini/Nat%20Prod%20Rep%202001.pdf
[citado 22 de marzo 2013]
2. Chung KT, Wong TY, Wei CI, Huang YW, Lin Y. Tannins and human health: a review.Crit Rev
Food Sci Nutr. 1998 Aug;38(6):421-64.
3. Reed JD. Nutritional Toxicology of Tannins and Related Polyphenols in Forage Legumes. J Anim
Sci 1995, 73:1516-1528. Disponible en: http://www.journalofanimalscience.org/content/73/5/1516.full.pdf
[citado 22 de marzo 2013].
4. Hartzfeld PW, Forkner R, Hunter MD, Hagerman AE. Determination of Hydrolyzable Tannins
(Gallotannins and Ellagitannins) after Reaction with Potassium Iodate. J. Agric. Food Chem. 2002,
50, 1785−1790. Disponible en: http://mdhunter.myweb.uga.edu/publications/HAGERMAN.PDF [citado
22 de marzo 2013].
5. Clinton C. Plant tannins: A novel approach to the treatment of ulcerative colitis. Nat Med J. 2009;
1:(3). p. 1-3. Disponible en: http://naturalmedicinejournal.net/pdf/nmj_nov09to_clinton.pdf [citado 22 de
marzo2013].
6. Tamilselvi N, Krishnamoorthy P, Dhamotharan R, Arumugam P, Sagadevan E. Analysis of total
phenols,total tannins and screening of phytocomponents in Indigofera aspalathoides (Shivanar
Vembu) Vahl EX DC. J. Chem. Pharm. Res., 2012, 4(6):3259-3262. Disponible en:
http://jocpr.com/vol4-iss6-2012/JCPR-2012-4-6-3259-3262.pdf [citado 22 de marzo 2013].
7. Garro G J et al. Analytical Studies on Tara Tannins. Holzforschung. 1997; 51(3). Disponible en:
http://www.fpl.fs.fed.us/documnts/pdf1997/galve97a.pdf [citado 22 de marzo 2013].
8. Cabello LI. Monografía para el cultivo de la tara Caesalpinia spinosa (Molina)
Kuntze.Perúbiodiverso. Lima, Perú.2009
9. U.S. Department of Agriculture. USDA Database for the Flavonoid Content of Selected
Foods.March 2003. Disponible en:http://www.nal.usda.gov/fnic/foodcomp/Data/Flav/flav.pdf [citado 22
de marzo 2013]
PROTOCOLO Nº 09
HORARIO………………………………………….. FECHA……………………………….
MESA DE TRABAJO ……………………………..
RESULTADOS
LEYENDA: (-) Nulo (-) poco (+) Leve (++) moderado (+++) abundante
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:
PRÁCTICA Nº 10
EXTRACCIÓN Y RECONOCIMIENTO DE ACEITES ESENCIALES.
INTRODUCCIÓN
Aceites Esenciales
Los aceites esenciales son compuestos formados por sustancias orgánicas volátiles, como alcoholes,
cetonas, éteres y aldehídos, se producen y almacenan en los canales secretores de las plantas y
normalmente son líquidos a temperatura ambiente, y por su volatilidad, son extraídos por destilación en
corriente de vapor de agua.
Fuentes: Coníferas (pino, abeto), Mirtáceas (eucalipto), Rutáceas (Citrus spp), Asteraceae (manzanilla),
Labiadas (menta, lavanda, tomillo, espliego, romero) y umbelíferas (anís, hinojo).Pueden estar en
diferentes órganos: raíz, rizoma (jengibre), leño (alcanfor), hoja (eucalipto), fruto (anís) y sumidades
floridas (clavo de olor).
Características físicas
Los aceites esenciales son volátiles, líquidos a temperatura ambiente (a excepción del alcanfor y el
mentol), recién destilados son incoloros o ligeramente amarillos, de densidad inferior a la del agua. Son
solubles en alcohol y disolventes orgánicos (éter, cloroformo), poco solubles en agua pero arrastrables
por el vapor de agua. Poseen poder rotatorio e índice de refracción característico.
Características químicas
Los aceites esenciales contienen compuestos:
-No terpenoides: sustancias alifáticas de cadena corta, sustancias aromáticas, sustancias con azufre y
sustancias nitrogenadas.
-Terpenoides: derivan del isopreno (C5) unidas en cadena, principalmente monoterpenos (C10),
sesquiterpenos (C15) y los diterpenos (C20) que pueden ser alifáticos, cíclicos o aromáticos. 1,2
COMPETENCIAS
Conoce la extracción de aceites esenciales
Evalúa las características físico-químicas de los aceites esenciales
METODOLOGÍA
Destilación por arrastre de vapor
Reacciones de coloración
MATERIAL Y EQUIPOS
Equipo de destilación.
Picnómetro
Material de vidrio: matraz, beacker, tubos de ensayo, baguetas.
Reactivos: cloroformo, acido acético, ácido sulfúrico.
Lámpara ultravioleta
Cubas cromatográficas
PARTE EXPERIMENTAL
-Expresión en frío: presenta la ventaja de no someter los aceites esenciales a temperaturas elevadas y se
toma directamente la muestra problema.
-Destilación: colocar la muestra problema sobre la criba ubicada a cierta distancia del fondo del
alambique, el calentamiento se produce con vapor saturado proveniente de una fuente de calor que
componen el equipo, fluye y a presión baja, penetrando a través del material vegetal, los componentes se
volatilizan, y condensan en un refrigerante, se acumulan y se separan el agua del aceite por diferencia de
densidad.
I. ANÁLISIS CUALITATIVO
Análisis organoléptico:
Color
Olor
Sabor
Textura
Peso específico
a) Pesar el picnómetro vacío y seco (P)
b) Llenar el picnómetro con la MP a 20ºC por 15 min., ajustar el volumen si es necesario y pesar
cuidadosamente (P1)
c) Repetir la operación con agua destilada a 20 ºC (P2)
P.E 20 = (P1-P)/(P2-P)
Índice de refracción
a) Calibrar el refractómetro con I gota de agua destilada (inyectable) a 1.333
b) Secar el equipo con papel tissu
c) Colocar I gota de muestra problema sobre el prisma de medición y realice la lectura.
Análisis cromatográfico
Fase estacionaria: Cromatofolios de silica gel 60 F254 de 6.5 cm por 2.5 cm
Fase móvil: Tolueno: acetato de etilo (9 : 1)
Luz UV
Revelador: Vainillina – Ac. Sulfúrico
CUESTIONARIO
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Varro, E., Tyler, L. Farmacognosia. Ed. El Ateneo, Bs. As, Argentina (1993)
2. Kuklinski, C., Farmacognosia., Ed. Omega SA, Barcelona, España (2000)
3. Bruneton, J. Farmacognosia – Fitoquímica – Plantas Medicinales. 3ra. Ed. Acribia, Zaragoza,
España (2001)
4. Bravo Díaz, L. Farmacognosia. Ed. Elsevier SA. Madrid, España. (2003)
5. Marco,J. Alberto. Química de los productos naturales. Aspectos fundamentales del metabolismo
secundario. 1a ed. Madrid ( 2006)
6. Gibaja Oviedo S. Pigmentos naturales. Quinónicos. Lima (1998).
7. Villar Del Fresno, A. Farmacognosia general. Madrid (2010)
8. López MT. Los aceites esenciales: Aplicaciones farmacológicas, cosméticas y alimentarias.
OFFARM.2004; 23: (7).
9. Albaladejo QM. El Aceite Esencial de limón producido en España. Contribución a su evaluación
por Organismos Internacionales. Universidad de Murcia. 1999. Disponible en:
http://www.tdx.cat/bitstream/handle/10803/11059/Albaladejo.pdf;jsessionid=239F1DE9B45434C34798AEEB
F0F07002.tdx2?sequence=1[citado 23 de marzo de 2013]
10. Segovia B. et al. Composición química del aceite esencial de Tagetes elliptica Smith “chincho” y
actividades antioxidante, antibacteriana y antifúngica. Ciencia e Investigación 2010; 13(2): 81-86.
11. UNIDO, FAO. Herbs, spices and essential oils. Austria, 2005.Disponible en
http://www.unido.org/fileadmin/user_media/Publications/Pub_free/Herbs_spices_and_essential_oils.pdf [cita
do 23 de marzo de 2013]
PROTOCOLO Nº 10
HORARIO………………………………………….. FECHA……………………………….
Ensayo Resultado
Análisis organoléptico Olor
Color
Sabor
Textura
Peso especifico
Índice de refracción
REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN
REACCIÓN RESULTADO
Lieberman -Buchard
LEYENDA: (-) Nulo (-) poco (+) Leve (++) moderado (+++) abundante
Descripción Rf
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:
PRÁCTICA N° 11
Los alcaloides son sustancias orgánicas nitrogenadas con carácter básico y mayoritariamente de origen
vegetal. Son compuestos orgánicos. Se forman generalmente a partir de aminoácidos. De origen vegetal.
Sustancias nitrogenadas. Contienen nitrógeno heterocíclico. Tienen estructura compleja. Son tóxicos.
Con actividad fisiológicas incluso a dosis muy bajas. Los alcaloides son un grupo muy heterogéneo de
compuestos con estructuras muy variadas y generalmente complejas, contienen C, H, N.
La mayoría de los alcaloides tienen reacciones que se aprovechan para su detección. Hay reactivos
generales que detectan alcaloides en general y hay otros que detentan un grupo específico. Estas
reacciones se pueden clasificar en reacciones de precipitación, cristalización y de color.
CLASIFICACIÓN DE ALACALOIDES
Alcaloides derivados de ornitina
Alcaloides derivados de lisina
Alcaloides derivados del triptófano
Alcaloides derivados de fenilalanina y tirosina
Alcaloides de núcleo purínico o bases xánticas
COMPETENCIAS
Extrae los alcaloides a partir de un polvo seco pulverizado por medio ácido y alcalino.
Identifica cuali-cuantitativamente los alcaloides.
Reconoce el origen biológico de los alcaloides.
MATERIALES
Balón de 250 mL
Pera de separación de 500 mL
Fiola de 500 mL
Tubos de ensayo de 10 mL
Pipetas de 1 mL, 5 mL
Reactivos
Agua destilada Acetona Etanol Etilacetona
Butanol Alcohol amílico Metanol Cloroformo
Éter etílico Éter de petróleo Benceno n-Hexano
Ácido clorhídrico Diclorometano Hidróxido de sodio Hidróxido de amonio
Reactivo Dragendorff Ácido perclórico 0.02 N Ácido acético glacial Cristal violeta
Ácido clorhídrico Agua destilada
Hidróxido de sodio Diclorometano
Metanol Cloroformo
Hidróxido de amonio.
Equipo
PROCEDIMIENTO
1. Sensorial
Se verifica el aspecto, color y olor del polvo fino de acuerdo a las partes de la planta.
2. Fisicoquímico
2.1. Prueba de solubilidad
Se pesan 10 mg del extracto seco y se introduce en un tubo al cual se le adiciona 1 mL de solvente
en orden de polaridad decreciente (agua destilada, metanol, etanol, n-propanol, acetona, acetato de etilo,
cloroformo, tolueno, éter)
La finalidad del ensayo de solubilidad es determinar el comportamiento del extracto en soluciones de
diferente polaridad, permitiendo encontrar el sistema apropiado para el análisis cromatográfico.
3. Extracción y Aislamiento
Muestra en estudio
Drogas vegetales que contienen alta cantidad de alcaloides
Proceso de Extracción
Fundamento
La extracción se realiza previamente en un medio ácido formando sales de clorhidrato, y
posteriormente se alcaliniza con la finalidad de convertir los alcaloides en bases libres y poder
extraerlos con un solvente no polar.
Método alcalino: la droga se humedece con agua y se mezcla con cal y amoniaco. Los
alcaloides se extraen con solventes orgánicos (éter de petróleo, cloroformo, benceno). La fase
orgánica se separa y evapora. El residuo de la droga también se puede agitar con agua
acidulada, se añade solvente orgánico, luego dejar reposar para su separación en capas. Las
sales de alcaloides están en la fase acuosa y en la fase orgánica las impurezas.
Método ácido, la droga se extrae con agua o alcohol, en medio ácido. Se agrega un solvente
orgánico, otros productos indeseables se eliminan en la agitación con cloroformo u otros
solventes orgánicos. Luego los alcaloides libres son precipitados por adición en exceso de
bicarbonato de sódico o amoniaco, separándose por filtración o extracción con disolventes
orgánicos.
Procedimiento:
Pesar 5 g de la droga vegetal en un matraz y añadir 50 mL de HCl 10%, someter a BM por 30’
agitar, enfriar y filtrar. Transvasar a pera de decantación y alcalinizar con NH 4OH, extraer con
cloroformo 3 veces y separar las fases. Concentrar la fase clorofórmica a casi sequedad añadir
HCl 10% y reconocer con reacciones generales y específicas.
Cromatografía en capa fina
I. REACCIONES GENERALES
Realizar las reacciones generales y particulares
BASES XANTICAS
REACCIÓN DE DIFERENCIACIÓN
RESIDUO DE LA REACCIÓN DE Cafeína: azul violeta
MUREXIDA O WEIDEL, someter a completa Teobromina: rojo violeta
Ekkert
evaporación el amoniaco + mg de codeína+ Teofilina: violeta
H2SO4 conc.
CUESTIONARIO
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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5. Butt MS, Sultan MT. Coffee and its consumption: benefits and risks. Crit Rev Food Sci Nutr.
abril de 2011;51(4):363-73.
6. Ferrazzano GF, Amato I, Ingenito A, De Natale A, Pollio A. Anti-cariogenic effects of
polyphenols from plant stimulant beverages (cocoa, coffee, tea). Fitoterapia. julio de
2009;80(5):255-62.
7. Hooper L, Kay C, Abdelhamid A, Kroon PA, Cohn JS, Rimm EB, et al. Effects of chocolate,
cocoa, and flavan-3-ols on cardiovascular health: a systematic review and meta-analysis of
randomized trials. Am J Clin Nutr. marzo de 2012;95(3):740-51.
8. Kuklinski, C. Farmacognosia, 1era edición, Barcelona, 2000
9. Obregón Vilchez L.Uña de Gato "Cat's Claw": género uncaria, estudios botánicos, químicos y
farmacológicos de Uncaria tomentosa y Uncaria guianensis. Ed. Inst. de Fitoterapia
Americano. Lima 1997
10. Selecciones del Reader's Digest. Secretos y virtudes de las plantas medicinales. Madrid,
1982.
11. Varro, E., Tyler, L. Farmacognosia. Ed. El Ateneo, Bs. As, Argentina 1993.
12. Wink M, Meibner C, Witte L. Patterns of quinolizidina alkaloids in 56 species of the genus
Lupinus. Phytochemistry 1995; 38:139-153.
DROGAS CON ALCALOIDES
HORARIO………………………………………….. FECHA……………………………….
REACCIONES GENERALES
REACCIÓN RESULTADO
DRAGENDORFF
BERTRAND
BOUCHARDAT O WAGNER
MAYER
SONNENSCHEIN
POPOFF
TANINOS
REACCIONES PARTICULARES
ATROPINA
REACCIÓN RESULTADO
VITALI
WASICKY
ARNOLD
COCAÍNA
REACCIÓN RESULTADO
CLORURO DE BARIO
REACCIÓN DE YOUNG
NITRATO DE PLATA 10%
KMnO4
REACCIÓN RESULTADO
VAN URK
BASES XÁNTICAS
Reacción Cafeína Teofilina Teobromina
R. Murexida
R. Weidel
R. Gerard
R. Yodo
R. ácido
tánico
ANÁLISIS CROMATOGRÁFICO
Rf:
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:
PRÁCTICA N° 12
Selección
Desecación
Molienda
Parámetros físico-químicos
Propiedad Extracto
Olor
Color Análisis organoléptico
Sabor
pH Papel Indicador
Densidad relativa Picnómetro
Índice de refracción Refractómetro
Prueba de solubilidad
LEYENDA: (-) Insoluble (+) ligeramente soluble (++) soluble (+++) Muy soluble
Huella Cromatográfica
1. Preparación de muestra: Pesar 0.1 g de extracto seco y solubilizar en 5 mL de
solvente.
2. Fase estacionaria: Sílica gel F 254 (cromatofolios)
3. Fase móvil: Solventes polares y apolares
4. Detección: Vapores de yodo / Luz UV
Tamizaje fitoquímico
LEYENDA: (-) Nulo (+) Leve (++) moderado (+++) abundante
METABOLITO REACCIÓN PROCEDIMIENTO REACCIÓN POSITIVA
CARBOHIDRATOS Molish X gotas de MP+ III gotas de Molish
Anillo violeta
(alfa naftol 2% en alcohol) agitar+ III gotas de H2SO4 CC
Antrona
X gotas de MP + III gotas de Antrona Coloración verde
(antrona en H2SO4 cc al 2% )
Fehling
X gotas de MP + III gotas de Fehling
(A: CuSO4; B: tartrato mixto
A+ III gotas de Fehling B + calentar Coloración rojo ladrillo
de potasio y sodio
en B.M
(KNaC4H4O6·4H2O))
COMPUESTOS X gotas de MP + III gotas de FeCl3
FeCl3 Coloración verde o azul
FENÓLICOS 10 %
TANINOS Gelatina X gotas de MP + III gotas de gelatina Precipitado denso blanco
Chalconas, auronas, isoflavanonas:
No hay coloración.
X gotas de MP + 1-2 virutas de Mg Isoflavanonas: Amarillo rojizo.
FLAVONOIDES Shinoda
metálico + III gotas de HCl cc Flavanonoles: Rojo a magenta.
Flavonas y flavonoles: Amarillo a
rojo
ANTOCIANINAS Y
Rosenheim X gotas de MP + III gotas de
FLAVONOIDES Coloraciónrojo oscuro
(Sol. Yodo Yodurada) Rosenheim
CATÉQUICOS
AMINOÁCIDOS
X gotas de MP + III gotas de
LIBRES Y GRUPOS Ninhidrina(0.1% en etanol) Coloración violácea
ninhidrina + calentar en B.M 10 min.
AMINO
X gotas de MP + evaporar el solvente
Dragendorff
B.M + V gotas de HCl 10%+ III Precipitado naranja
(yoduro potásico- bismútico )
gotas de Dragendorff
X gotas de MP + evaporar el solvente
Mayer (yoduro potásico
B.M + V gotas de HCl 10%+ + III Precipitado blanco
mercúrico)
gotas de Mayer
ALCALOIDES
X gotas de MP + evaporar el solvente
Bertrand (ácido silíco- Precipitado blanco
B.M + V gotas de HCl 10%+ + III
túngstico)
gotas de Bertrand
X gotas de MP + evaporar el solvente
Sonnenschein Precipitado amarillo-verdoso
B.M + V gotas de HCl 10%++ III
(ácido fosfomolíbdico)
gotas de Sonnenschein
NAFTAQUINONAS,
Borntrager X gotas de MP + III gotas de
ANTRAQUINONAS Coloración roja
(NaOH 5%) Borntrager
Y ANTRANONAS
X gotas de MP + llevar a sequedad en
B.M + X gotas de cloroformo+ III
TRITERPENOIDES Esteroides: verde-azul
Lieberman - Bourchard gotas de anhídrido acético+ H2SO4 cc
Y ESTEROIDES Triterpenoides: rojo-naranja
en zona (por las paredes de tubo) sin
agitar.
1 mL de MP + 5 mL de agua
Formación de 0.5 a 1 cm de espuma
SAPONINAS Generación de espuma destilada + agitar fuertemente por 1
estable por 15 min.
min.
X gotas de MP + V gotas de ácido
GLICÓSIDOS Baljet pícrico 1 % + V gotas de NaOH al 5 Coloración anaranjada
%.
X gotas de MP + V gotas de de
LACTONAS Legal nitroprusiato de sodio 0.5% + V gotas Coloración rojo oscuro
de KOH 2N.
X gotas de MP + papel humedecido
NH4OH cc ó
CUMARINAS con NH4OH cc ó NaOH 10% en Fluorescencia celeste
NaOH 10%
boca de tubo + calentar por 5 min a
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Villar del Fresno, A. Farmacognosia General. Ed. Síntesis, SA. Madrid, España (1999).
4. Bruneton, J. Farmacognosia – Fitoquímica – Plantas Medicinales. 3ra. Ed. Acribia, Zaragoza, España
2001.
(Diagrama de Flujo)
Parámetros
Propiedad Extracto etanólico
Olor
Color
pH
Densidad relativa
Índice de refracción
Prueba de solubilidad
Solventes Extracto seco (mg)
Agua destilada
Etanol
Metanol
n-butanol
Acetato de etilo
Diclorometano
Cloroformo
Leyenda: (-) Insoluble (+) ligeramente soluble (++) soluble (+++) Muy soluble
Tamizaje fitoquímico
METABOLITO REACCIÓN CAMBIOS OBSERVADOS INTERPRETACIÓN RESULTADOS
CARBOHIDRATO Molish
S Antrona
Fehling
COMPUESTOS FeCl3
FENÓLICOS
TANINOS Gelatina
FLAVONOIDES Shinoda
ANTOCIANINAS
Rosenheim
Y FLAVONOIDES
CATÉQUICOS
AMINOÁCIDOS
Ninhidrina
LIBRES Y
GRUPOS AMINO
Dragendorff
Mayer
ALCALOIDES
Bertrand
Sonnenschein
NAFTAQUINONA
S,
ANTRAQUINONA
SY Borntrager
ANTRANONAS
TRITERPENOIDE
Lieberman-Burchard
S Y ESTEROIDES
GLICÓSIDOS Baljet
LACTONAS Legal
CUMARINAS NH4OH cc ó
NaOH 10%
Fase móvil:
Detección:
Análisis
HPLC
Calculo de Rf
Esquema de resultado
PRÁCTICA N° 13
LÍPIDOS, IDENTIFICACIÓN Y CONTROL DE CALIDAD DE ACEITES
El aceite vegetal es un compuesto orgánico obtenido a partir de semillas u otras partes de las plantas en
cuyos tejidos se acumulan como fuente de energía. Están conformados por lípidos definidos como grupo
heterogéneo de compuestos insolubles en agua, y solubles en solventes apolares como: éter, cloroformo,
benceno o acetona. Las grasas y aceites son ésteres formados por la condensación de ácidos grasos
con glicerol.1-5
Clasificación de aceites
Según el codex alimentarius 2 los aceites vegetales se pueden clasificar como:
Los aceites vegetales comestibles: productos alimenticios constituidos principalmente por glicéridos de
ácidos grasos obtenidos únicamente de fuentes vegetales. Podrán contener pequeñas cantidades de
otros lípidos, tales como fosfátidos, de constituyentes insaponificables y de ácidos grasos libres
naturalmente presentes en la grasa o el aceite.
Los aceites vírgenes: se obtienen, sin modificar el aceite, por procedimientos mecánicos y por aplicar
sólo calor. Se puede purificar por lavado, sedimentación, filtración y centrifugación únicamente.
Los aceites prensados en frío: se obtienen por procedimientos mecánicos únicamente, sin la aplicación
de calor. Podrán haber sido purificados por lavado, sedimentación, filtración y centrifugación únicamente.
COMPETENCIAS
Conoce los métodos de extracción de aceites
Identifica cualitativamente los aceites vegetales
Analiza la calidad de los aceites
METODOLOGÍA
Extracción por prensado en frio
Extracción por solventes orgánicos
Análisis cualitativo
Índice de acidez
MATERIALES Y EQUIPOS
Materiales de vidrio
Solventes orgánicos
Reactivos de precipitación
PARTE EXPERIMENTAL
I. Reacciones generales de caracterización
PARTE EXPERIMENTAL
ACEITE PROCEDIMIENTO RESULTADO POSITIVO
MANÍ Reacción de Blarez o araquidato de Formación de precipitado
potasio: tomar 1.5 mL de aceite de maní en
un matraz de 250 mL, adicionar 15 mL de
potasa alcohólica al 5%, adaptarle un
refrigerante de reflujo, colocar a baño maría
por 20 min, enfriar el matraz.
OLIVA Reacción de Hauchercorne: tomar 1 mL de Luego someter a baño maría
aceite y agregar 1mL de HNO3 y V gotas por 20 min. Observar la
de agua, agitar por 2 minutos y después de coloración: el aceite de oliva
15 minutos en reposo, observar el color. puro permanece inalterable
mientras que los demás aceites
varían del amarillo al pardo.
Reacción de Fluorescencia: tomar V gotas Observar fluorescencia azulada
de aceite y diluir en 1mL de cloroformo
ALMENDRA Reacción de Bieber: mezclar V gotas de Si el aceite de almendras es
H2SO4 concentrado, V gotas de HNO3 puro, se forma una emulsión
concentrado y V gotas de agua con 1 mL de amarilla que al cabo de algún
aceite de almendras. tiempo pasa a color rojizo.
Reactivos
Solvente: cloroformo
Yoduro de potasio al 30%
Reactivo de Hanus: solución reactivo de yodo bromuro
Titulante: tiosulfato de sodio Na2S2O3 0.1N
Indicador: S. R. engrudo de almidón
Técnica operatoria
II =
Definición: mg de hidróxido de potasio necesarios para neutralizar los ácidos grasos libres contenidos en
1.0 gramos de aceite o grasa.
Dónde:
1.27 (V1 -
P: peso de la
muestra
V: volumen en mL
de hidróxido de
sodio gastado
CUESTIONARIO
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
HORARIO………………………………………….. FECHA……………………………….
I. RESULTADOS
MUESTRAS:………………….
REACCIONES GENERALES
REACCIÓN RESULTADOS
R. Heidenreich
R. Hauchercorne
R. Bellier
R. Elaidínica
ÍNDICE DE YODO
CÁLCULOS RESULTADOS
ÍNDICE DE ACIDEZ
CÁLCULOS RESULTADOS
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
IDENTIFICACIÓN DE ACEITES
REACCIÓN OBSERVACIÓN
7. Aceite de bacalao
R. Villavecchia y
Fabris Reacción Observación
R. Behrens cloroformo
R. Baudovin
R. Bellier
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
PRÁCTICA Nº 14
ANÁLISIS DE VITAMINAS
INTRODUCCIÓN
Las vitaminas son compuestos orgánicos que cumplen funciones vitales relacionadas con el metabolismo
y con la fabricación de hormonas, neurotransmisores, células sanguíneas o material genético. Poseen
función enzimática acelerando reacciones químicas.
Vitaminas hidrosolubles.
Vitamina B1
Vitamina B2
Vitamina B3
Vitamina B6
Ácido fólico
Vitamina B12.
Vitamina C.
Ácido pantoténico
Biotina
Vitaminas liposolubles.
Vitamina A
Vitamina D
Vitamina E
Vitamina K
COMPETENCIA
Analiza cualitativamente vitaminas liposolubles e hidrosolubles
METODOLOGÍA
Reacciones de coloración
MATERIALES Y EQUIPOS
Materiales de vidrio
Solventes orgánicos
Reactivos de precipitación
PARTE EXPERIMENTAL
I. Análisis cualitativo
VITAMINA LIPOSOLUBLES
procedimiento Reacción positiva
vitamina A R. de Carr-Price: evaporar 3 mL del Coloración azul fugaz.
extracto etéreo, disolver en cloroformo y
adicionar gotas de S.R SbCl3.
VITAMINAS HIDROSOLUBLES
Vitamina C Tratar V gotas de filtrado con V gotas mL de Precipitado rojo de óxido
S.R Fehling o Benedict, calentar. cuproso
Tratar V gotas del filtrado con S.R. Yodo. Decoloración del reactivo
CUESTIONARIO
1. Mencione especies que presentan vitaminas
2. Describa otros métodos de cuantificación de vitamina C.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Alonso P, Salucci M, Lázaro R, Malani G, Ferro-Luzzi A. Capacidad antioxidante y potencial de
sinergismo entre los principales constituyentes antioxidantes de algunos alimentos. Rev Cubana
Alim Nutric. 1999;13(2):104-11.
2. Flórez J. Vitaminas liposolubles e hidrosolubles. Farmacología humana (3rd ed), Editorial
Masson, SA, Barcelona. 1999;991-1005.
3. Benítez Zequeira DE. Vitaminas y oxidorreductasas antioxidantes: defensa ante el estrés
oxidativo. Revista cubana de investigaciones biomédicas. 2006;25(2):0-0.
PROTOCOLO Nº 14
ANÁLISIS DE VITAMINAS
HORARIO………………………………………….. FECHA……………………………….
I. RESULTADOS
ANÁLISIS CUALITATIVO
REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN