Facultad de Ciencias Biológicas

Departamento de Ciencias Biológicas

BIOL150-2017

Introducción a la Microbiología
Filogenia y Taxonomía
Morfología y Agrupaciones

Dr. Nicolás Villagra nicolas.villagra@unab.cl

 Facultad de Ciencias Biológicas
Departamento de Ciencias Biológicas
BIOL150-2017

Introducción a la Microbiología
 Antecedentes Históricos de la Microbiología
3.000.000.000 Primera bacteria
3.000.000 Primer humano

20.000 Desarrollo agricultura

Desarrollo de
2.000
restricciones de dietas
A.C
0
D.C

1.000 Botulismo
1.500 Micotoxicosis
-Ingeniería y química en alimentos 1.800-1.900
-Establecimiento de la etiología bacteriana
-Appert inventa el
en la contaminación de alimentos
“canning”
-Desarrollo de la radiación de alimentos
-Pasteur asocia la
-Genética Molecular para el entendimiento
descomposición a las
de las bacterias relacionadas con alimentos
bacterias
-Desarrollo de los
postulados de Koch
 Definición de Microbiología

“Ciencia que se dedica al estudio de los

microorganismos”
(microorganismos: organismos microscópicos)

Deriva de 3 palabras griegas:

mikros (pequeño), bios (vida) y logos (ciencia)
Disciplina científica: Estudio sistemático y metódico que
genera conocimiento básico y aplicado

Tipos de microorganismos: Bacterias

Arqueas
Algas
Virus
Hongos
Parásitos
 Principales ramas de la Microbiología
Bacteriología Virología

E.  coli   Virus  Influenza  

Micología Parasitología

Penicillium   Trypanosoma  cruzi  

Antecedentes históricos de la Microbiología
Microscopio

Anton van Leeuwenhoek (1684):

Padre de la microbiología.
Realizó la primera observación de m.o. libres
(“animáculos”).
Creador del microscopio primitivo.
 Antecedentes históricos de la Microbiología.
Microscopio.

Microscopio de Leeuwenhoek

Dibujo  original  de  los  “animáculos”  

observados  por  Leeuwenhoek  
Antecedentes históricos de la Microbiología.
Microscopio.

Robert Hooke (1635 - 1702)

Perfeccionó el microscopio de Anton van
Leeuwenhoek. Observó un hongo azul.
 Antecedentes Históricos de la Microbiología
Francesco Redi (1668)

Realizaron experimentos que permitieron

rechazar la Teoría de la Generación Lazzaro Spallanzani (1729 - 1799)
Espontánea
Redi: Experimento del frasco con carne.
Spallanzani: Esterilización de líquidos por
ebullición.
Antecedentes históricos de la Microbiología
Enfermedad

Louis Pasteur
Identificó a los microorganismos como agentes causales de
enfermedad.
Generó la vacuna para la rabia.
Antecedentes históricos de la Microbiología
Enfermedad

Robert Koch (1876)

Definió los postulados sobre la identificación de
microorganismos patógenos (Actualmente vigentes).
Trabajos sobre la etiología del carbunco (Bacillus
anthracis)
Antecedentes históricos de la Microbiología.
Enfermedad.

Postulados de Koch

•  El microorganismo debe estar presente en

todos los individuos con la misma
enfermedad.

•  El microorganismo debe ser recuperado del

individuo enfermo y poder ser aislado en
medio de cultivo.

•  El microorganismo proveniente de ese

cultivo debe causar la misma enfermedad
cuando se lo inocula a otro hospedero.

•  El individuo experimentalmente infectado

debe contener el micoorganismo.
 Microbiología Actual.

La microbiología actual es una de las disciplinas con mayor

impacto y futuro. Puede dividirse en dos áreas de trabajo:

· Microbiología básica. Estudia la naturaleza y propiedades de

los microorganismos: morfología, fisiología, bioquímica,
genética, ecología y taxonomía.

· Microbiología aplicada. Utiliza los conocimientos generados

por la Microbiología básica para resolver problemas

- Microbiología Clínica.
- Microbiología de los alimentos.
- Microbiología ambiental.
- Industrial y Biotecnología
Microbiología Clínica
Los seres vivos que pueden causar enfermedad al Hombre actuando como patógenos
(relación simbiótica de parasitismo) son:

•  Bacterias
•  Virus
•  Hongos
•  Protozoos

•  Helmintos
•  Artrópodos

Las enfermedades causadas por estos agentes se denominan

ENFERMEDADES INFECCIOSAS, que son de carácter
transmisible.
•  Estructura
•  Mecanismos de Patogenicidad
PATÓGENOS •  Reacciones Defensivas del organismo humano
•  Reservorio y mecanismos de transmisión
•  Diagnóstico
•  Tratamiento antimicrobiano
 Bacterias

Son microorganismos
unicelulares procariontes,
cubiertos de una pared celular
de peptidoglicán
 Virus

Es una Entidad sub-microscópica que consiste de un ácido

nucleico, DNA o RNA, rodeado de una capa proteica, que es capaz de
replicar sólo al interior de células vivas.

Los Virus son Parásitos intracelulares obligados

Hongos

Son organismos eucariontes unicelulares o

pluricelulares, que poseen paredes rígidas
(Paredes quitinosas)
Parásitos

Organismos eucariontes que viven a expensas de

otros de distinta especie y le producen daño. Se
caracterizan por desarrollar ciclos evolutivos
simples y complejos
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Filogenia y Taxonomía
 Taxonomía bacteriana.
CLASIFICACIÓN
Ordenamiento de los
microorganismos en grupos (taxa)
en base a semejanzas o
interrelaciones

TAXONOMÍA

NOMENCLATURA IDENTIFICACIÓN

Nombrar un microorganismo Uso práctico de un esquema de

según sus características clasificación en base a distintas
siguiendo las reglas propiedades del M.O.
internacionales. (ATCC)
 Taxonomía vs. Filogenia.

TAXONOMÍA BACTERIANA FILOGENIA BACTERIANA

FENOTIPO GENOTIPO
GENOTIPO

Análisis fenotípico Análisis genotípico RNA ribosomal

mayor conservación

Clasificación – Identificación
Diagnóstico Relación evolutiva
Árbol Filogenético.
 Los tres dominios de la vida

Propiedad Bacteria Archaea Eukarya

Estructura celular Procarionte Procarionte Eucarionte

DNA circular Sí Sí No

Presencia de histonas No Sí Sí

Plásmidos de DNA Sí No No

Núcleo definido por No No Sí

membrana

Peptidoglicán en pared Normalmente No No

Estructura ribosomal 70s 70s 80s

RNApol un tipo varios tipos tres tipos

 Categorías sistemáticas bacterianas

BACTERIA  
Super-Reino o
Dominio
Ac>nobacteria   Proteobacteria   Cyanobacteria   Phylum

Gammaproteobacteria   Clase

 Enterobacteriales     Orden

Enterobacteriaceae   Familia

Un REY para mantener a su

Salmonella  
Género
FAMILIA contenta compró
GÉNEROS de distintas Salmonella  Typhi  
Especie
ESPECIES…
 Taxonomía bacteriana convencional

Morfología Tinción de Gram

Esporas Pared celular
Pigmentos Uso de sustratos
Inclusiones Tolerancia al O2
Productos de fermentación, pH, etc.

Los criterios van de lo más general a lo más específico

hasta llegar a especie.

Se hace análisis dicotómico hasta llegar a la identificación.

Dicotomía   Análisis MACRO

Análisis MICRO

GRAM NEGATIVO GRAM POSITIVO

FORMA BACILAR FORMA NO BACILAR

AERÓBICO
ESTRICTO

ANAEROBIO
FACULTATIVO subtipificación

NO FERMENTA
LACTOSA
Escherichia coli
FERMENTA
LACTOSA
INDOL POSITIVO
CITRATO Análisis genético –
NEGATIVO moleculares

CITRATO
INDOL NEGATIVO
POSITIVO
 Criterios moleculares y subtipificación

ü Hibridización DNA-DNA ü Biotipificación: Biotipo

ü Sondas de DNA ü Serotipificación: Serotipo
ü Sondas inmunológicas ü Estudio de susceptibilidad
ü % G+C antimicrobiana...
ü Análisis polimorfismos…

•  Reclasificación de algunas especies

•  Muchas especies nuevas
•  Análisis de especies que no han podido ser cultivadas.
•  Importancia epidemiológica: brotes epidémicos.
•  Enfermedades infecciosas de declaración obligatoria...
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Morfología y Agrupaciones
 Eucariontes y Procariontes

Célula eucarionte Bacteria

Los organismos procariontes carecen de sistemas de endomembranas

 ¿Qué tan pequeños son los microorganismos?

Bacilos en la punta de un alfiler

100 µm 20 µm 10 µm

Resolución es la capacidad de detectar dos puntos como

independientes
 Microscopía

Microscopía óptica Microscopía electrónica

Campo claro (luz)
Transmisión (en 2D)
Campo oscuro
Barrido (3D)
Fluorescencia, etc.
Aumento efectivo: 1.200 veces Aumento efectivo: 1.000.000 de veces
Microscopía Óptica. Campo Claro

Cianobacteria Bacterias
(al fresco) (teñidas)

Gram +

Gram -

Es descendiente de los microscopios primitivos

La muestra a observar debe ser fina para que

pueda ser atravesada por la luz

Generalmente se utilizan tinciones porque el

campo claro no produce contraste
Microscopía Óptica. Campo Oscuro

Espermios Treponema pallidum

El objetivo recibe la luz dispersa o refractada

La muestra se ilumina con luz fuerte indirecta

Permite observar células sin teñir y resulta

especialmente útil para células vivas
Microscopía Óptica. Fluorescencia

Células de ratón

Bacterias

Permite marcar estructuras específicas o células

determinadas con fluoróforos (emiten luz cuando
son excitados)
Microscopía Electrónica. Transmisión

Virus Bacteria en división

Es análogo al microscopio óptico de campo claro

pero utiliza electrones en vez de luz
 Microscopía Electrónica. Barrido

Bacterias creciendo en el estoma Bacilos

Permite tomar imágenes tridimensionales porque

capta los electrones que rebotan en las células
cubiertas con una delgadísima película de un
metal denso
 Microscopía Óptica
Tinciones simples o inespecíficas

Azul de metileno

Levaduras Bacterias

Tinciones diferenciales
TINCIONES

Tinción Gram

Gram positivo Gram negativo

Tinciones específicas o especiales

Cápsulas Esporas
Microscopía Óptica. Tinciones Simples

Levaduras

Bacterias
 Microscopía Óptica. Tinciones Diferenciales
Tinción de Gram

Gram positivo Gram negativo

Creada por el danés Hans Christian Gram en 1884

Es capaz de dividir a la gran mayoría de las bacterias en dos grupos
según sus propiedades de tinción
Corresponde a la tinción más importante en la microbiología
Indicada para la observación de morfología y agrupación bacteriana
Fundamental en la identificación de agentes etiológicos
Tinciones diferenciales. Tinción de Gram

Gram (-)

Gram (+)
Tinción de Gram. La pared diferencia Gram + y Gram -

Gram (-) Gram (+)

 Tinciones diferenciales. Ziehl-Neelsen
También llamada tinción de ácido – alcohol resistencia
Mycobacterium

Se calienta una solución fucsina básica, la cual penetra a la célula con la

ayuda de fenol.
Se descolora con solución con ácido – alcohol y se agrega una tinción de
contraste (azul de metileno).
Sólo las bacterias ácido – alcohol resistentes retienen el color rojo.
Tinciones especiales. Tinción Negativa de Cápsula

Se realiza como tinción negativa con tinta china.

Se tiñe todo menos la cápsula.
 Tinciones especiales. Tinción de esporas

Se realiza con verde malaquita (el cual presenta afinidad

por las esporas) y una tinción de contraste.
Principales morfologías bacterianas
 Principales morfologías bacterianas
Esférica
(Cocos, cocáceas)

Staphylococcus aureus

Microscopía óptica;
Microscopía tinción de Gram
electrónica de barrido
 Principales morfologías bacterianas

Cilíndrica alargada Escherichia coli

(Bacilos)

Bacillus subtilis
Principales morfologías bacterianas

Cilíndrica curva
(Bacilos curvos)

Vibrio cholerae
 Principales morfologías bacterianas

Espiral
(Espirilos, espiroquetas) Alargada
(Filamentosas)

Treponema pallidum Actinomyces israeli

(patógeno oportunista, abcesos)
Principales morfologías y agrupaciones
bacterianas
 Principales Agrupaciones bacterianas
Planos de división celular definen la agrupación bacteriana
Principales Agrupaciones bacterianas

Cadena
(del griego: Strepto)

Streptococcus pyogenes
Principales Agrupaciones bacterianas

Racimo
(del griego: Staphylo)

Staphylococcus aureus
 Principales Agrupaciones bacterianas
Agrupaciones pequeñas y
empacadas
(Tétradas, octetos)
Pares
(Diplo)

Neisseria gonorrhoeae Sarcina lutea

 Identificación

Morfología   Agrupación  
   
Estructura  Involucrada:  Pared  Celular   Proceso  Involucrado:  División  Celular  
   Ejemplos:      Ejemplos:  
     Cocáceas        Cadenas  
     Bacilos        Racimos  
     Vibrios          Duplas  
     Espirilos        Tétradas,  Octetos  

1era  Etapa  en  el  Diagnós9co  Microbiológico  

Iden9ficación  del  agente  e9ológico  

 
Tratamiento  
 Morfología Macroscópica

Siembra y aislamiento:

Tubos. Medio líquido y sólido: Placas. Medio Sólido:

Sólo siembra Siembra y aislamiento
 Morfología Macroscópica

Siembra y aislamiento:
Morfología Macroscópica. Colonia bacteriana

S. aureus

S. aureus S. aureus

Colonias de
S. aureus
 Morfología Macroscópica. Colonia bacteriana

Morfología de colonias:
Morfología Microscópica vs. Macroscópica

Observación Macroscópica

Colonias: Agrupación bacteriana

producida por la división
sucesiva de una bacteria
original. La colonia se observa a
simple vista.

Observación Microscópica

Bacterias teñidas con Tinción

Gram. Se observan
microscópicamente.
 Iden8ficación  Bacteriana  

Cultivo puro

Morfología de colonia y de tinción de Gram

Propiedades Propiedades Características

Bioquímicas Antigénicas de crecimiento

Fermentación de glucosa Reacciones serológicas Temperatura

Utilización de citrato Anticuerpos específicos Aerobiosis
Producción de H2S Anaerobiosis
etc. etc.
 Identificación Bacteriana

Propiedades Propiedades Características

Bioquímicas Antigénicas de crecimiento

Características genéticas o moleculares

Porcentaje Homología en la
de G+C secuencia del genoma

Codones utilizados para codificar

Principalmente aquellos que codifican
los distintos aminoácidos.
para RNA ribosomales
TTA, TTG, CTT, CTC, CTA y CTG
Leucina