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Índice
4. Clasificación de Células 6
4.1. Célula Eucarionte . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 7
4.2. Célula Procarionte . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 7
4.2.1. Componentes moleculares de la célula . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 7
6. Azúcares 8
6.1. Monosacáridos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 8
6.2. Disacáridos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 8
10.Clasificación de proteı́nas 11
10.1. Separación de Proteı́nas por Cromatografı́a . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 11
10.2. Separación de Proteı́nas por Electroforesis . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 12
11.Fraccionamiento Subcelular 13
11.1. Los organelos y las macromoléculas pueden separarse por ultracentrifugación . . . . . . . . . . . . . . . . 13
11.2. Comparación entre los métodos de velocidad de sedimentación y equilibrio de sedimentación . . . . . . . . 13
14.Proteı́nas de Membrana 15
14.1. Ejemplo de Proteı́na Transmembrana . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 15
14.2. Reconstitución funcional de una proteı́na de Membrana . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 16
14.3. Migración de proteı́nas a través de la membrana . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 16
14.4. Glucocáliz . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 17
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16.Transducción de señales (ligandos) 19
16.1. Velocidad de respuesta celular . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 19
16.2. Regulación de la sensibilidad a una señal . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 19
22.Microtúbulos 34
22.1. Funciones: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 34
22.2. Estructura: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 34
22.2.1. Regulación de la dinámica de los MT’s: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 35
22.2.2. Proteı́nas Motoras que se mueven a lo largo de los microtúbulos: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 36
23.Filamentos Intermedios 36
23.1. Organización Estructural: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37
23.2. Comparación deformación/tensión entre los componentes del citoesqueleto: . . . . . . . . . . . . . . . . . 37
23.3. Tipos de filamentos intermedios: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37
23.3.1. Tipo I: Queratinas - Quinasas. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37
23.3.2. Tipo II: Familia de las vimentinas. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 38
23.3.3. Tipo III: Neurofilamentos. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 38
23.3.4. Tipo IV: Láminas nucleares. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 38
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28.Transcripción: 44
28.1. Reconocimiento de la hebra molde: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 44
28.1.1. Promotor: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 45
28.1.2. Inicio de la Transcripción . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 45
28.2. Fase de elongación: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 46
28.3. Término de la sı́ntesis de RNA en procariontes: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 46
28.3.1. Término independiente de la proteı́na ρ: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 46
28.3.2. Término dependiente de la proteı́na ρ: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 46
28.4. Detalles de la transcripción en Eucariontes (Maduración del mRNA): . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 47
IX Retı́culo Endoplasmático: 51
30.Generalidades de la expresión génica: 51
X Aparato de Golgi: 58
34.Organización de las funciones de las Cisternas del Golgi: 58
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41.Fusión de vesı́culas con el organelo o membrana diana: 65
49.Telofase Vegetal: 83
XIV Meiosis 84
51.Etapas de la Meiosis: 85
51.1. Meiosis 1: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 85
51.1.1. Profase I: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 85
51.1.2. Metafase I . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 87
51.1.3. Anafase I y Telofase I . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 87
52.Ovogénesis y Espermatogénesis 88
52.1. Ovogénesis: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 88
52.2. Espermatogénesis: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 88
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53.Cromosomas 89
53.1. Cromosomas Politénicos: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 89
53.2. Cromosomas Plumulados: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 89
53.3. Cariotipo Humano: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 89
53.3.1. Preparación de un Cariotipo de Sangre: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 90
53.4. Clasificación de modelos de cromosomas: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 90
53.4.1. Nomenclatura en citogénetica de cromosomas bandeados . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 90
54.Sı́ndrome de Down. 91
56.Teorı́a Endosimbiótica: 93
58.Sı́ntesis de ATP: 94
58.1. Fosforilación oxidativa y cadena transportadora de electrones . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 94
58.2. Detalles de la cadena transportadora y el acoplamiento quimiosmótico . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 95
58.2.1. Potencial Redox asociado a la cadena transportadora de electrones: . . . . . . . . . . . . . . . . . 96
58.2.2. La ATP Sintasa: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 96
XVII Tarea 1: ¿Por qué el ADN contiene Timina en vez de Uracilo? 105
A. Desaminación de la Citosina y corrección en el ADN mediante enzimas 105
B. ¿Por qué el ADN utiliza una base metilada (timina) y no lo hace en el ARN? 106
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Parte I
La célula como unidad Funcional
1. La célula es la unidad fundamental de la vida
La célula es la unidad estructural, funcional y de herencia de la vida.
Una célula es capaz de:
Procesar información y responder a estı́mulos.
Realizar reacciones quı́micas complejas.
Crecer y reproducirse.
Cambiar/adaptarse
Imagen que muestra la relación entre los tamaños de distintas estructuras celulares
4. Clasificación de Células
Según el tamaño y la complejidad celular estas se pueden clasificar en:
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4.1. Célula Eucarionte
tamaño entre 10-100µm
Caracterizada por su envoltura nuclear definida
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5. Interacciones atómicas y Macromoléculas
5.1. Fuerzas de interacción
Existen cuatro tipo de fuerzas interatómicas que permiten la unión entre las estrcuturas moleculares de la célula:
Enlace covalente
• Longitud de 0.15 nm
• Corresponde a la interacción más potente entre dos átomos en donde estos comparten electrones para estabili-
zarse. No es casualidad que el carbono sea la estructura central de la célula pues sus enlaces C-C
tienen una energia cercana a los 100 Kcal/mol
• Fuerza en agua : 90 Kcal/mol
Enlace Iónico
• Longitud de 0.25 nm
• Atracción electrostática producida por dos átomos completamente cargados.
• Fuerza en agua : 3 Kcal/mol
Puentes de hidrógeno
• Longitud de 0.30 nm (medido desdé el centro del átomo central. medido desde el principio de la interacción la
longitud no supera los 0.17 nm)
• Para producirse es necesaria la presencia de moléculas con algún area polar y que la interacción sea estricta-
mente entre H-F, H-O y H-N.
• Fuerza: 1 Kcal/mol
• No es una interacción estática, constantemente se están formando y deshaciendo enlaces por puentes de H
Fuerzas de van del Walls (Atracción natural entre átomos)
• Longitud de 0.35 nm
• Atracción natural entre átomos, es mas fuerte a medida que aumenta la cantidad de átomos que interactuan
• Fuerza: 0.1 Kcal/mol
Enlaces débiles participan en el reconocimiento entre Macromoléculas(i.e : subunidades proteicas)
6. Azúcares
Las macromoléculas se forman a partir de unidades individuales identificables llamads monómeros. En esta sección se
estudiaran las macromoléculas compuestas por uniones de monosacáridos.
6.1. Monosacáridos
Los monosacáridos presentan una fórmula general de Cn H2n On donde n varı́a entre 3 y 7.
Los monosacáridos más comunes son las hexosas y existen 3 tipos principales:
1. Glucosa
2. Galactosa
3. Fructosa (Manosa)
6.2. Disacáridos
El carbono que lleva el grupo aldehı́do o cetona puede reaccionar con cualquier grupo OH de otra molécula, formando
un enlace glucosı́dico. En cada unión por condensación se libera una molécula de agua.
1. Maltosa = Glucosa + Glucosa
2. Lactosa = Galactosa + Glucosa
3. Sacarosa = Glucosa + Fructosa
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Repetitivas uniones forman oligosacáridos y posteriormente polisacáridos.
Una de las muchas importancias de los Oligosacáridos para nuestro organismo se ejemplifica en que
nuestro grupo sanguı́neo está determinado por el tipo de estos azúcares en la membrana celular de los
glóbulos rojos.
Parte II
Estructura de Las proteı́nas
Las proteinas constituyen alrededor de la mitad de las estructuras celulares y desempeñan la mayorı́a de funciones
para mantener la actividad celular.
Aminoácidos: Constituyen la unidad básica de las proteinas, son anfóteros: Neutralizan tanto ácidos como bases
Esta cualidad está intimamente relacionada a la estructura quı́mica de los aminoácidos. El grupo amino libera protones
en un medio básico y el grupo carboxilo es capaz de aceptar protones en presencia de un medio ácido.
Proteı́nas: Las Proteı́nas se pueden definir como polı́meros formados por la unión mediante Enlaces peptı́dicos de
aminoácidos.
Las proteı́nas con macromoléculas
Compuestos más abundantes de la materia viva
Son áltamente especı́ficas
A través de ellas se expresa la información genética.( Dogma central de la biologı́a molecular )
Enlace peptı́dico
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Cisteina: Este aminoácido posee en su estructura un radical tipo CH2 − SH que permite la unión con otras cisteı́nas
dentro de la misma estructura proteica o con otras subunidades, facilitando el plegamiento molecular de la proteı́na. El
complejo Cisteina-Cisteina se denomina Cistina.
Existe otro aminoácido que también presenta ’S’ en su estructura pero no forma puentes disulfuro, hablamos de la
Metionina
Proteı́nas de membrana: las proteı́nas de la superficie celular a menudo forman enlaces covalentes adicionales intra-
catenarios. Sin embargo rara vez forman enlaces de tipo disulfuro, pues el plegamiento de las proteı́nas normalmente tiene
lugar en presencia de agentes reductores que impiden la formación de enlaces S-S
Urea y β − M ercaptoetanol : Estos dos compuestos actuan como agentes denaturantes de la estructura terciaria de la
proteı́na pues afectan los enlaces disulfuro, actuan como agentes reductores (que oxidan) devolviendoles su estructura SH
individual a cada Cisteı́na. Sin embargo, las proteı́nas pueden renaturalizarse mediante la diálisis.
Es importante aclarar que existen proteinas funcionales tanto en estructura terciaria (i.e : mioglobina) como en estructura
cuaternaria (i.e : insulina)
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10. Clasificación de proteı́nas
I. Según presencia o no de un grupo prostético:
Proteı́nas simples: Solo están formadas por proteı́na
Proteı́nas conjugadas :Están formadas por la proteı́na mas un grupo no proteico llamado grupo prostético
Cromatografı́a de intercambio iónico: La matriz insoluble presenta cargas iónicas que retardan las moléculas de
carga opuesta. Las más utilizadas son las de dietilaminoetilcelulosa (DEAE-Celulosa), de carga positiva y la fosfocelulosa,
de carga negativa. La fuerza de unión entre las moléculas disueltas y la matriz depende de la fuerza iónica y del pH de la
solución que atraviesa la columna. Estos dos parámetros pueden variarse para obtener una separación más efectiva.
Cromatografı́a de Filtración en Gel: La matriz es inerte pero porosa. Las moléculas suficientemente pequeñas para
penetrar en el interior de la matriz se retrasan y viajan más lentamente a través de la columna. Las esferas porosas más
comunes son polisacáridos como el dextrano o agarosa.
Cromatografı́a de afinidad: utiliza una matriz insoluble que está unida covalentemente a un ligando especı́fico (i.e
substrato enzimático), que se unirá a una proteı́na determinada de la muestra. Las moléculas de enzima que se han unido
a los substratos inmovilizados en columnas de este tipo se pueden liberar con una solución concentrada del substrato en
forma libre, mientras que moléculas que se han unido a anticuerpos inmovilizados pueden eluirse disociando el complejo
antı́geno-anticuerpo con soluciones concentradas de sales o soluciones con pH alto o bajo. Suelen ser las más efectivas al
poder conseguir un alto grado de pureza en solo una pasada por estas columnas.
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10.2. Separación de Proteı́nas por Electroforesis
Las proteı́nas suelen tener una carga neta positiva o negativa, que refleja la de los aminoácidos cargados que contiene.
Al aplicar un campo eléctrico a una solución que contenga una molécula proteica, la proteı́na migrará a una velocidad
dependiente de su carga, tamaño y forma. Esta técnica se conoce como electroforesis.
Actualmente este tipo de separación se realiza en conjunto con SDS, β − mercaptoetanol y gel de poliacrilamida.
distintas cadenas polipeptı́dicas forman un complejo con las moléculas cargadas negativamente de
SDS (Dodecil sulfato sódico), para luego migrar hacia el ánodo (polo positivo) a través de la
solución porosa de poliacrilamida. A través de esta técnica se puede determinar de forma
aproximada el peso molecular de la proteı́na asi como también de la composición de subunidades de
la proteı́na. Sin embargo, si la proteı́na presenta variados grupos prostéticos de carbohidratos, su
desplazamiento será anómalo, de forma que su peso molecular estimado será erroneo.
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11. Fraccionamiento Subcelular
De la misma forma que un tejido puede ser disgregado en sus diferentes tipos celulares vivos, la célula puede ser
fraccionada en sus organelos y macromoléculas funcionales.
Equilibrio de Sedimentación: Cuando los componentes subcelulares se centrifugan en un gradiente, pueden despla-
zarse hacia arriba o abajo hasta que alcanzan una zona en que su densidad está comprendida entre las densidades vecinas
del gradiente. En este Equilibrio se utiliza un gradiente discontinuo de sacarosa (20-70 %). Sin embargo, para la separación
de proteı́nas y de ácidos nucleicos se utilizan gradientes preparados con cloruro de cesio. Cada organelo posee estructuras
propias, por lo que existen enzimas marcadoras para marcar distintos organelos. Por ejemplo:
RER: Glucosa-6-Fosfatasa
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Parte III
Estructura y clasificación de Fosfolı́pidos y
Membranas
Los fosfolı́pidos son estructuras que presentan una cabeza polar y una cola formada por cadenas de ácidos grasos
altamente hidrofóbicas. La cabeza polar está formada por un grupo colina con carga positiva, un grupo fosfato P O4 con
carga negativa, y una molécula de glicerol.
3. Fosfatidilcolina
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13. Distribución y movimientos de los fosfolı́pidos a través de la membrana
plasmática
La distribución de fosfolı́pidos y glucolı́pidos a través de la membrana plasmática es asimétrica. Generalmente, los
fosfolı́pidos con carga neta negativa quedan mirando hacia el interior de la célula.
La membrana plasmática se caracteriza por ser una bicapa fosfolipı́dica donde las cabezas polares miran hacia el
exterior y el interior celular, mientras que las colas hidrofóbicas quedan mirandose entre si al interior de la membrana.
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En esta figura observamos una de las estructuras más comunes en las proteı́nas integrales, la
α-helice. No es un detalle menor que los aminoácidos expuestos a las colas apolares de los
fosfolı́pidos corresponden a aminoácidos estrictamente apolares como por ejemplo: Leucina,
Alanina, Triptofano.
Del mismo modo existe en menor medida presencia de aminoácidos polares pero sin carga neta como
la Glicina
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14.4. Glucocáliz
El término cubierta celular o glucocáliz se utiliza a menudo para describir la zona de la superficie celular rica en
carbohidratos.
En principio la diversidad y la posición expuesta de estos polisacáridos en la superficie celular les hace especialmente
indicados para participar en procesos de reconocimiento celular.
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Parte IV
Comunicación Celular y Receptores
Señales Externas inducen respuestas a nivel celular que permiten la adaptación y supervivencia del organismo. Las
células constantemente están censando el medio.
Derivados de aminoácidos
Lı́pidos
Luz
Gases
Movimientos mecánicos
1. Señalizaciones Paracrinas: La célula productora de la señal, afecta solamente a las células en una vecindad a
ella
2. Señalizaciones Autocrinas: La misma célula produce una señal que es captada por receptores de ella misma
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3. Señalización dependiente de contacto: La célula productora, exocita una señal que va a parar directamente
a un receptor de membrana de otra célula que está en contacto directo con la primera.
4. Señalización Endocrina: Células endocrinas liberan su contenido al torrente sanguineo, distribución a todo el
cuerpo, pero solamente las células que posean en sus membranas receptoras de esta señal, responderán al estı́mulo.
Además, un tipo de estı́mulo no asegura que la respuesta en las células receptoras sea la misma.
El tiempo de respuesta de la señalización endocrina es lento comparada con la sináptica pero afecta a una gran
cantidad de células
Misma señal (Adrenalina) produce respuestas diferentes entre las células cardiacas y las células hepáticas
5. Señalización Sinaptica: Señales eléctricas y liberación de neurotransmisores lejos del cuerpo célular (Dendrita-
Axón). El tiempo de respuesta de este tipo de señal es más rápido pero a la vez más especı́fico.
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17. Ligandos Lipofı́licos se unen a receptores intracelulares
El ligando (hidrofóbico) viaja unido en una proteı́na carrier para atravesar directamente la membrana plasmática y
alterar la expresión génica.
Receptores nucleares: En la mayorı́a de los casos donde el ligando posee caracterı́sticas lipı́dicas la respuesta está re-
lacionada a la expresión génica de nuevas proteı́nas. Los receptores nucleares corresponden a proteı́nas que regulan esta
expresión moduladas por la interacción con el ligando. No requiere necesariamente de la acción de segundos
mensajeros.
El receptor nuclear en ausencia de ligando se encuentra a unido a una proteı́na inhibitoria para mantenerlo en su estado
inactivo. En presencia del ligando la proteı́na inhibitoria deja cede su lugar para comenzar la transcripción de genes. Es
importante destacar que el receptor nuclear posee en su estructura un sitio de unión al DNA para la codificación precisa
de la proteı́na necesitada.
Existen dos tipos de respuesta para a esta señal:
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18. Receptores de Superficie Celular para Moléculas Hidrofilicas
Ası́ como existen ligandos hidrofóbicos, también se encuentran en el medio extracelular señales de tipo hidrofı́licas. La
forma de transducción de estas señales pueden ser de dos formas:
1. Receptores asociados a Proteı́nas G
2. Receptores asociados a Enzimas.
Paralelo a estos dos procesos existe un tipo de señalización que caracteriza el ’Encendido y apagado’ de proteı́nas a lo
largo de la transducción y amplifiación de la señal. Este switch está relacionado a la acción de tres proteı́nas enzimáticas:
1. Proteı́na Quinasa: Cuya función es Transformar ATP en ADP para fosforilar y ’encender’ una proteı́na
2. Proteı́na Fosfatasa: Remueve el fosfato de la proteı́na activa para apagarla.
3. Adenilato Ciclasa: Transforma el ATP a AMPc Liberando 2 grupos fosfatos.
Una proteı́na receptora activada por una señal extracelular genera un cambio conformacional de las subunidades α, β, γ
de la Proteı́na G. Mediante una molécula de GTP se activa y se separa la unidad α, tras esta activación también se
genera un complejo βγ activo que permite la transducción de la señal a receptores intracelulares
Posterior a la transducción interna de la señal extracelular, mediante la acción de enzimas especı́ficas se deben liberar
los segundos mensajeros que funcionan como Amplificadores de la señal. Existen dos tipos de segundos mensajeros
Via del AMPc
Via del Ca2+
Existen distintos tipos de proteı́nas G que activan distintas enzimas para favorecer la acción de los segundos mensa-
jeros. Las familia más relevante sin embargo, es la de las Proteı́nas Gs : activa los canales de Ca y la adenilato Ciclasa
y las Proteı́nas Gq : activan la fosfolipasa C que participa en la liberación del Ca2+ como segundo mensajero.
Activación de Proteı́na Gs
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Proteı́na G activa a la adenilato ciclasa para formar AMPc (Segundos mensajeros) + 2 grupos fosfatos que activan la
PKA(Proteı́na quinasa dependiente de AMPc).
PKA o proteı́nas quinasas dependientes del AMPc : El PKA puede regular tanto la expresión génica alterada
en respuesta a una señal, como estimular funciones metabólicas y homeostáticas de la célula. La regulación del metabo-
lismo por PKA es un proceso rápido comparado con la acción de la misma proteı́na de relevo sobre la expresión génica
(Principalmente porque la respuesta genética suele ser más lenta, además que existe una mayor cantidad de relevos en la
propagación de la señal).
Activación de Proteı́na Gq
Proteı́na G activa a la Fosfolipasa C para liberar IP3 que abre los canales de Ca2+ (Segundos mensajeros) que activan la
PKC(Proteı́na quinasa dependiente de Calcio).
Un descubrimiento importante a partir del uso del Cálcio como Segundo Mensajero es su inmediata actividad en el ovocito
tras fertilización. Con el paso del tiempo se observa como este ión se libera a la célula y la recorre en un tiempo cercano
a los 3 minutos.
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La presencia del ligando en los receptores celulares RTK, activa este complejo produciendo una autofosforilación cruzada
entre los dominios Tirosina Quinasas
Proteı́na Ras: Una proteı́na RAS es una proteı́na G monomérica, especı́ficamente es una pequeña GTPasa que alterna
dos conformaciones estructurales:
Una forma activada, donde la proteı́na RAS está unida al guanosı́n trifosfato (GTP), llamada RAS-GTP.
Otra forma inactivada, donde la proteı́na RAS está unida al guanosı́n difosfato (GDP), llamada RAS-GDP
Las proteı́nas Ras son activadas por los receptores TirosinaQuinasas
En su forma inactiva la proteina Ras se encuentra asociada a una molécula de GDP, Tras la activación de las RTK’s y
el encendido de las proteı́nas señalizadoras, la proteı́na Activadora Ras Cambiar el GDP por GTP dejando a la proteı́na
Ras en su forma activa
La Activación de las proteı́nas Ras Permite realizar el relevo de la señal a otros módulos de señalización. Por ejemplo
MAPK’s
Relevo a MAPK’s
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Parte V
Transporte a través de la membrana plasmática
En esta sección se revisan dos tipos de transporte asociado a proteı́nas:
1. Transporte de solutos mediados por proteı́nas de membrana:
Transporte Activo
Transporte Pasivo
2. Canales iónicos y propiedades eléctricas de la membrana plasmática.
Conceptos básicos:
Difusión por gradiente de concentración: Principio básico de la membranas permeables de soluto. Las molécu-
las se mueven de lugares de mayor concentración a zonas de menor concentración. En el equilibrio no cesa el
movimiento, sin embargo el movimiento neto de partı́culas es 0.
Osmosis: Membrana no permeable al soluto, pero si permeable al solvente: Sea la concentración de soluto A mayor
que la concentración en B,A y B unidos por la membrana, el agua trata de moverse desde B a A para diluir el soluto
concentrado. En el equilibrio ambas soluciones tienen igual concentración Molar de soluto.
Osmoralidad: Cantidad de soluto presente en la solución, sin importar su naturaleza. La osmoralidad varı́a si es
que el compuesto se disocia o se asocia en el medio acuoso. Una mayor osmoralidad provoca un desplzamiento de
agua hacia esta concentración.
Presión osmótica: Fuerza que empuja el flujo de agua desde zonas de menor osmolaridad hacia zonas de mayor
osmolaridad.
La célula es eléctricamente neutra, debe poseer igual cantidad de cargas positivas y negativas. Sin embargo, la con-
centración iónica y eléctrica presente en la célula presenta diferencias. Recordemos además, que la membrana plasmática
suele estar cargada negativamente en su cara interna y ser positiva en su cara mirando al medio extracelular.
Importante es recalcar las concentraciones de los iones N a+ y K + . El primero se encuentra presente en mayor medida
en el medio extracelular (generando un gradiente de concentración hacia el interior, y el potasio genera un gradiente de
concentración hacia el medio extracelular.
La bicapa lipı́dica de la membrana plasmática presenta permeabilidad a los siguientes compuestos:
Gases: como el CO2 , O2 , N2
Moléculas pequeñas no polares: Etanol.
Sin embargo, moléculas neutras, pequeñas pero con polaridad definida(agua, urea) presentan una baja permeabilidad a
la membrana, siendo proteı́nas transportadoras el principal medio de ingreso hacia el medio intracelular.
Moléculas grandes,iones, o moléculas polares (de tamaño considerable) son impermeables a la membrana celular.
24
19. Paso de moléculas hidrosolubles a través de la membrana
El paso de moléculas hidrosolubles depende de proteı́nas especializadas en transporte a través de la membrana.
El 15-30 % de las proteı́nas asociadas a la membrana tienen como función el transporte de solutos.
Distintas proteı́nas transportan tipos de solutos especı́ficos.
En el transporte pasivo los solutos se mueven a favor del gradiente de concentración. En el transporte activo, los solutos
se desplazan en contra tanto de su gradiente de concentración como su gradiente electroquı́mico, este tipo de transporte
requiere ATP o de la energı́a potencial del gradiente electroquı́mico.
Como la concentración de glucosa es mayor en el medio extracelular, se genera un gradiente de concentración para este
soluto. Como la glucosa es una molécula ”Grande” necesita de una proteı́na transportadora de tipo uniporte
Es importante evidenciar que la difusión facilitada alcanza una velocidad mayor que la difusión simple en el paso de solutos
a través de la membrana. La velocidad máxima de transporte en proteı́nas viene dada por las siguientes condiciones:
1. Nivel de saturación de la proteı́na transportadora
2. Velocidad del cambio conformacional del transportador (lı́mite de velocidad)
25
19.2. Transporte Activo:
Existen 3 estrategias básicas para medir el transporte activo de un soluto:
Transporte Activo Simporte: los gradientes de concentración de los solutos apuntan en direcciones opuestas. la
partı́cula cargada de este sistema ingresa a favor de su gradiente electroquı́mico para generar la energı́a necesaria para
ingresar un soluto en contra de su gradiente de concentración.
Transporte Activo Antiporte: Los gradientes de concentración de los solutos apuntan en la misma dirección. La
partı́cula cargada del sistema ingresa a favor de su gradiente electroquı́mico para generar la energı́a necesaria para sacar
el soluto en la dirección opuesta.
Casi un tercio del ATP de una célula se utiliza en bombas de tipo Sodio-Potasio ATPasa
La bomba sodio-potasio permite regular la osmolaridad intracelular maneniendo el gradiente de N a+
26
20. Canales iónicos y propiedades eléctricas de la membrana:
En el caso de un canal, se habla de una proteı́na que tiene un poro donde pasan los iones. Una proteı́na canal
siempre transporta solo iones, a excepción de las aquaporinas. Estas proteı́na siempre transportan a favor del gradiente
de concentración. Es mucho más rápido y eficiente que el paso de soluto mediado por proteı́nas transportadoras.
Caracterı́sticas de los canales:
Los canales iónicos, además pueden clasificarse de acuerdo al estı́mulo que gatilla su apertura.
Apertura de canales iónicos por los 3 posibles caminos
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20.1. Potencial de Membrana asociado a canales iónicos:
Un potencial de membrana se logra cuando existe una diferencia de cargas en ambos lados de la membrana. En
condiciones de equilibrio, el potencial base de la célula bordea los -80mv.
Durante el impulso nervioso, los canales que se encontraban cerrados se abren por la diferencia de voltaje asociado y el
sodio ingresa a la célula. Posteriormente en el periodo refractario, los canales de sodio se cierran y quedan inactivados.
Es responsabilidad de una proteı́na de Transporte activo (bomba Sodio-Potasio) restituir las concentraciones iniciales de
la célula neuronal para volver a recibir un impulso nervioso
Canales asociados a ligando convierten señales quı́micas en electricas: En la sinápsis quı́mica, una célula
presinaptica mediante la liberación de neutransmisores transfiere el impulso nervioso gracias a la acción de canales
asociados a ligando
Neurotransmisores en la sinápsis quı́mica.
28
Parte VI
Citoesqueleto y movimiento Celular:
La capacidad de las células eucariontes de adoptar una gran variedad de formas y llevar a cabo movimientos direcciona-
les y coordinados depende de una red compleja de filamentos proteicos llamada citoesqueleto. A diferencia del esqueleto
óseo, el citoesqueleto es una estructura sumamente dinámica. Las diversas actividades del citoesqueleto dependen de tres
tipos de filamentos proteicos:
1. Filamentos de actina.
2. Microtúbulos.
3. Filamentos intermedios.
Estos filamentos deben ser sólidos para mantener la forma celular, pero además deben ser dinámicos e
inestables para responder a señales como nutrientes o señales quı́micas.
Estructura de la Actina
Aunque los filamentos de actina están dispersos por el citoplasma de la célula, están altamente concentrados en el córtex,
justo por debajo de la membrana plasmática.
Filamentos de actina asociados a una red de proteı́nas para formar el córtex celular.
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21.1. Funciones de los microfilamentos:
Da fuerza mecánica a la superficie celular.
Permite el cambio de forma celular.
Movimiento.
El córtex de actina puede generar y mantener la polaridad celular junto con los microtúbulos.
Determinadas señales extracelulares que afectan a una parte de la superficie pueden provocar reestructuraciones locales del
córtex de actina debajo de la zona correspondiente de la membrana plasmática. De manera recı́proca, la organización del
córtex de actina puede tener una influencia determinada en el comportamiento de la membrana plasmática que está por
encima. Mecanismos basados en los filamentos de actina corticales pueden empujar la membrana plasmática hacia afuera
formando largas y finas microespinas o lamelipodios (filopodios) o pueden invaginar la membrana durante la división
celular.
Fibras de stress se organizan en bandas o haces contráctiles, la actina presente en el córtex forma una red tipo gel
tridimensional, finalmente los filopodios se organizan en pequeños haces paralelos estrechos.
(A): Estructura tridimensional de la molécula de áctina, deducida mediante difracción de rayos X, una molécula de
ATP (en amarillo) está estrechamente unida en una fisura entre los dos dominios de la proteı́na.
(B): Molécula de actina que pone de manifiesto sus dos dominios y el lugar de unión al ATP que se encuentra entre
ellos.
(C): Filamento de actina que muestra como las moléculas de actina interactúan unas con otras formando el polı́mero
helicoidal. A medida que las moléculas de actina se ensamblan en el polı́mero, ocurre hidrólisis del ATP
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21.2.1. Fenómeno de nucleación:
Un trı́mero de actina es estable, al formarse este trı́mero por nucleación, uniones no covalentes (necesarias para
entregarle dinamismo al filamento) comienzan la polimerización de monómeros de actina, generando una cadena doble.
El ensamblaje del lugar de nucleación es relativamente lento, lo cual explica la fase inicial (lag phase) producida
durante la polimerización. La fase lenta puede ser reducida o eliminada del todo si se añaden lugares de nucleación
prefabricados como fragmentos de microtúbulos o filamentos de actina previamente polimerizados. Posterior a la fase
lag comienza la fase de crecimiento o elongación en donde los monómeros se añaden a los extremos expuestos del
polı́mero en crecimiento. Finalmente se llega a la fase de equilibrio en donde el crecimiento del polı́mero está en
equilibrio con el acortamiento del polı́mero debido a la pérdida de monómeros.
Profilina: Proteı́na de unión a la actina involucrada en el equilibrio dinámico de ensamblaje del citoesqueleto de actina.
Controla espacial y temporalmente el crecimiento de microfilamentos.
ARP2/3 : Favorece la nucleación de monómeros de actina a partir de un actı́mero (centro de nucleación). Además
participa en la ramificación de polı́meros de F-Actina.
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21.2.3. Proteı́nas asociadas a la actina:
Organización de F-actina junto con α-actinina generan un haz contractil que permite el paso de la miosina II a través
del haz.
El empaquetamiento con fimbrina impide la entrada de miosina II en el haz, lo que en principio la inhibe como banda
contráctil y le otorga una figura de haz paralelo.
Participación de la Miosina: La miosina es otra de las proteı́nas asociadas al citoesqueleto de la actina, participa
en el movimiento de organelos y la reestructuración de redes durante el movimiento.
Miosina Tipo 1: Proteı́nas que ayudan al transporte de vesı́culas a través del filamento de actina. Permite a las
vesı́culas Caminar sobre el filamento de actina.
Miosina tipo 2: permite la contracción muscular.
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Contracción Muscular: en la contracción muscular, los filamentos de miosina y de actina se deslizan uno sobre otro,
disminuyendo la longitud del sarcómero. El deslizamiento de los filamentos gruesos y los delgados se produce debido a la
fuerza generada de las cabezas de miosina con los filamentos de actina. Este proceso es dependiente del ATP.
Ciclo de los enlaces cruzados
3. Se libera el fosfato (Pi) y produce un cambio de conformación que desplaza el filamento de actina
4. Se libera ADP y queda la cabeza de miosina fijada a actina (rigor)
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22. Microtúbulos
Los microtúbulos son cilindros largos y huecos formados por una proteı́na tubulina. Su diámetro externo es de 25 nm
y son mucho más rı́gidos que los filamentos de actina. Los microtúbulos son largos y rectos y tı́picamente disponen de un
extremo unido a un centro organizado de microtúbulos llamado centrosoma, Los microtúbulos emanan a partir de estos
centros organizadores. Los extremos menos se encuentran en el centro organizador de MTs, los extremos
más,cerca de la membrana plasmática.
22.1. Funciones:
Participan en la Mitosis. Permiten la segregación de los cromosomas durante la división celular.
Son esenciales en mantención de la forma celular y en transporte interno. (carreteras de vesı́culas. i.e: migración de
neurotransmisores por el axón de una neurona hacia el botón sináptico).
Movilidad Cilios y Flagelos. Los cilios están presentes en células que no se mueven, en cambio los flagelos permiten
nadar a una célula.
• Cilios: Movimiento coordinado, mueven el fluido extracelular. I.E : Alveolos y su movimiento de mucosa. Poseen
un diámetro cercano a los 0.25µm
• Flagelos: Representante caracterı́stico: Espermatozoide.
La dineı́na causa que los microtúbulos del axonema se doblen
22.2. Estructura:
Los microtúbulos se forman a partir de uniones de subunidades de α-tubulina y β-tubulina. A este complejo se le
denomina heterodı́mero de tubulina y corresponde a la subunidad básica del microtúbulo.
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También ocurre nucleación con los microtúbulos. Los MT crecen a partir de los anillos de y-tubulina en el centrosoma.
Los microtúbulos son estructuras altamente dinámicas. El extremo más sufre mayores ciclos de crecimiento y acortamiento,
el extremo menos se ubica dentro del centrosoma.
Proceso que muestra las 3 fases similares a las de la nucleación y elongación de la actina.
La inestabilidad dinámica de los MT’s está dada por la hidrólisis de GTP. Las regiones más estables del microtúbulo
contienen GTP y se denominan Casquete o Cap. Tras la unión y la formación de un profilamento corto, la hidrólisis
del GTP cambia la conformación de esta subunidad y debilita el enlace del polı́mero. Posterior a esto ocurre una des-
polimerización para finalmente recambiar el GDP de esta subunidad (α-tubulina y β-tubulina) por GTP y repetir el
proceso.
Crecimiento acelerado debido a la presencia de un área estable como el casquete. Una pérdida repentina de este
casquete se denomina catástrofe y favorece un rápido acortamiento del polı́mero. Si se llega a formar un nuevo cap,
hablamos de que hubo un Rescate y de ahi el ciclo sigue su curso normal.
Proteı́nas MAP: La presencia de estas proteı́nas sobre el CAP provocan un aumento en la tasa de crecimiento y una
disminución de la frecuencia de catástrofes, lo que trae como consecuencia microtúbulos más largos y menos dinámicos.
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Kinesina 13 Aumenta la frecuencia de catástrofes por lo que el efecto observado corresponde a microtúbulos más
cortos pero más dinámicos.
Es importante destacar que proteı́nas en la membrana celular estabilizan estos microtúbulos confiriendo-
les una mayor resistencia y longitud.
Ante un corte, las células del tejido no pueden permanecer juntas pues se rompe la conexión de filamentos intermedios
entre la lámina basal y las celulas epidérmicas en la piel.
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23.1. Organización Estructural:
El monómero de los filamentos intermedios corresponde a una región de tipo α-hélice con un dominio central compuesto
por alrededor de 310 aminoácidos, en esta región existen además repeticiones de 7 aminoácidos. Los dominios carboxilo
y amino terminales de este monómero varı́an en tamaño y en secuencia.
Desmosoma: Los desmosomas son estructuras celulares que mantienen adheridas a las células vecinas. Estructural-
mente está unión está ligada a sus filamentos intermedios de queratina.
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23.3.2. Tipo II: Familia de las vimentinas.
La vimentina es una de las proteı́nas fibrosas que forman los filamentos intermedios del citoesqueleto intracelular de
células embrionarias, ciertas células endoteliales, ası́ como también como en las células sanguı́neas. Desminas participan en
el músculo liso y estriado. La vimentina corresponde a una proteı́na glial acı́dica que participa en células como (astrocitos
y células de Schwann).
Los filamentos intermedios de las células gliales son más lisos y con menos puentes que los neurofilamentos
Parte VII
Núcleo, ADN y replicación.
24. Estructura y organización del núcleo:
El núcleo celular es un organelo compuesto por una doble membrana fosfolipı́dica la cual posteriormente se continua con
el retı́culo endoplasmático, entre las dos membranas que cubren el núcleo celular, existe un espacio llamado perinuclear.
Su volumen es el mayor comparado con cualquier otro organelo dentro de la célula. Inmediatamente bajo la membrana
nuclear se encuentran los filamentos intermedios de Láminas nucleares A,B y C. Dentro del núcleo existe una zona
de mayor densidad llamada nucléolo, que en primera instancia corresponde al lugar de sı́ntesis de rRNA.
38
Representación de la envoltura nuclear
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El transporte nuclear de proteı́nas está impulsado por la hidrólisis del GTP, y la acción de importinas:
Las importinas poseen en su estructura sitios de unión a los aminoácidos señalados anteriormente y tras esta interacción,
la proteı́na destinada al núcleo atraviesa la membrana nuclear. Posteriormente, este complejo debe disociarse para que
la proteı́na pueda llevar a cabo su función, este proceso se realiza gracias a la competencia del ligando con una proteı́na
RAN-GTP que también tiene afinidad por la importina. La RAN-GTP al tener mayor afinidad desplaza de su sitio de
unión al ligando primario y permite la liberación de la proteı́na transportada. La importina unida al RAN-GTP, sale del
núcleo hacia el citosol, y tras una reacción de hidrólisis de GTP, el complejo RAN-GTP-Importina se disocia y permite
el transporte de una nueva proteı́na.
Imagen de la izquierda muestra el proceso de transporte nuclear mediado por proteı́nas, la imagen de la derecha nos
muestra que sustancias son capaces de entrar y salir del núcleo.
Histonas: las histonas son proteı́nas relativamente pequeñas con una proporción muy elevada de aminoácidos cargados
positivamente Lisina y Arginina. La carga positiva ayuda a las histonas a unirse firmemente al DNA, el cual está muy
cargado negativamente, debido a la presencia de grupos fosfatos. Los cinco tipos de histonas de las células se clasifican
en dos grupos principales las histonas nucleosómicas y las histonas H1, las histonas nucleosómicas son responsables del
pregado del DNA en nucleosomas, estas cuatro histonas se denominan H2A, H2B,H3 y H4.
La H1 actúa sobre este complejo y permite que empiezen a interactuar los distintos nucleosomas entre ellos.
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Niveles de empaquetamiento de la cromatina:
El DNA debe desempaquetarse para que ocurra transcripción: es por ello que en la cromátida compactada
existen partes que se encuentran libres que poseen una alta tasa de expresión génica.
Si se utiliza una sonda (secuencia complementaria de nucleótidos, marcada). Los cromosomas tienen ciertas regiones a
utilizar dentro del núcleo, Por lo tanto el DNA no está aleatoriamente organizado en el núcleo.
La unión de nucleótidos se produce por condensación de una molécula de agua entre el grupo fosfato ubicado en el carbono
5’ y el grupo OH presente en el carbono 3’.
1. Adenina.
2. Guanina.
Pirimidinas: Presencia de solo un anillo en la base nitrogenada:
1. Timina
2. Citosina
3. Uracilo (exclusivo del ARN)
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En la molécula de ADN, la Adenina se une a la Timina formando dos puentes de hidrógeno, mientras que la Guanina
y Citosina se unen formando 3 puentes de hidrógeno. Una molécula de ADN con una alta presencia de Guanina
o Citosina presentará una mayor cohesión y se requerirá más fuerza para separar la hebra.
Replicación Semiconservativa de ADN. Watson y Crick mostraron que las dos hebras de la molécula parental se
separan y cada una funciona como un molde para la sı́ntesis de una nueva hebra complementaria. El experimento se
realizó a base de N 14
Inicio de la Replicación: El inicio de la replicación esta dado por la formación de una Horquilla de replicación. En
las células eucariontes existen muchos lugares de inicios de replicación. Las horquillas se extienden hacia las dos direcciones
de la doble hebra. En células procariontes solamente existe una horquilla de replicación. Este proceso está mediado por
la acción de las siguientes enzimas:
1. Helicasas: Separan la doble hebra cortando los puentes de hidrógeno de las bases nitrogenadas.
2. Single-Strand Binding Proteins (SSB): Son proteı́nas que se unen a una hebra simple de DNA y ayudan a
mantener las hebras separadas.
3. Topoisomerasa: A medida que vamos abriendo la molécula de ADN, buscamos que la hélice se relaje lo más
posible para que quede estirada. la Topoisomerasa relaja la molécula de DNA permitiendo una libre rotación de la
simple hebra (desenrrolla).
Iniciación: La horquilla de replicación del ADN es asimétrica, la cadena hija de ADN que se sintetiza de manera
continua recibe el nombre de cadena conductora y se sintetiza antes que la cadena hija, que se sintetiza de forma
discontinua y recibe el nombre de cadena retrasada. La sı́ntesis de la cadena retrasada es más lenta debido que a que
debe esperar a que la cadena conductora exponga la cadena patron sobre la que se sintetizará cada uno de los fragmentos
de Okazaki.
Enzimas que participan en este proceso:
1. RNA Primasa: Enzima que polimeriza el RNA partidor o primer.
2. ADN Polimerasa: Una vez sintetizado el RNA partidor, la ADN polimerasa cataliza la sı́ntesis de la nueva hebra
de ADN siempre en dirección 5’-3’
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26.0.2. Polimerización en la Hebra retardada:
Esta hebra también debe sintetizarse en dirección 5’-3’ pero en forma discontinua en contra de la dirección de la
hebra lider. La principal enzima responsable de la unión de cadenas discontinuas es la DNA Ligasa: que es una enzima
que cataliza la unión covalente de los extremos 3’-5’ de dos hebras de DNA. Participa especialmente en la unión de los
fragmentos de Okazaki.
Revisión y Corrección: El apareamiento inicial de las bases es normalmente corregido por la DNA polimerasa al
terminar la replicación.
43
Parte VIII
Transcripción y Traducción:
El dogma central de la biologı́a molecular propuesto por Crick establece que el flujo del a información génica está dada
por la siguiente cadena:
Para entender a cabalidad el proceso de transcripción y traducción primero debemos entender la estructura de la molécula
que transporta esta información:
Enzimas Primitivas, El mundo RNA: Los primeros organismos estuvieron constituidos por RNA en vez de ADN,
El RNA además puede actuar como enzima (RIBOZIMAS).
28. Transcripción:
28.1. Reconocimiento de la hebra molde:
En la transcripción, hebra molde es la cadena que va en dirección 3’-5’, ya que la transcripción también se realiza
en sentido 5’-3’. La hebra 5’-3’ Se conoce como hebra Codificante.
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28.1.1. Promotor:
El promotor es una secuencia del DNA donde se une la RNA Polimerasa y comienza la transcripción. El promotor
es vital para la regulación de expresión génica, en eucariontes los promotores tienen secuencias de nucleótidos definidas
como la caja TATA (Ubicado en la posición -10). El lugar de inicio de la transcripción se denomina +1.
En la posición -10 la RNA polimerasa hace contacto con la hebra molde de ADN.
En la posición -35 se ubica una secuencia de nucleótidos denominada σ. Es importante para la regulación, indica la
posición donde debe sentarse la RNA Polimerasa.
Promotor de ADN
En organismos eucariontes, este proceso es mucho más complejo, pues debemos recordar que el ADN se encuentra
compactado en forma de cromatina:
Histona desacetilasa: Las histonas suelen estar cargadas positivamente debido a los grupos amino presentes en
los residuos de lisina y arginina. Estas cargas positivas ayudan y afianzan la interacción con las cargas negativas de
los grupos fosfato del esqueleto carbonado del ADN. La acetilación, una reacción que se produce corrientemente
en la célula, neutraliza las cargas positivas de las histonas, convirtiendo las aminas en amidas y reduciendo ası́ la
capacidad de las histonas para unirse al ADN. Esta reducción de la afinidad de unión permite la expansión de la
cromatina y ası́ la transcripción genética de esa región cromosómica. Las histona desacetilasas eliminan los grupos
acetilo, reduciendo la carga positiva de las histonas y por tanto la afinidad de éstas por el ADN.
Complejo remodelador de cromatina: El CRM (Chromatin-Remodeling-Machine) tiene afinidad por las lisinas
acetiladas de las histonas y se une a ellas a través del dominio llamado ”Bromodominio”. El CRM desorganiza los
nucleosomas aumentando el grado de exposición y de accesibilidad de los promotores. Finalmente el mediador, la
ARN polimerasa II y los factores de transcripción hacen que se inicie la transcripción.
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Burbuja de ADN y transcripción de la hebra molde
La transcripción adiciona 60 nt/seg. La transcripción es más lenta que la replicación porque el complejo de la RNA
polimerasa debe hacer todo el trabajo (abrir y copiar) y segundo, la RNA polimerasa avanza arrastrando la cola de ARN
sintetizada.
Concretamente (en eucariontes), la formación de la caperuza (cap) metilada ocurre en la fase de iniciación de la
transcripción y normalmente, el proceso de splicing durante la elongación. La poliadenilación comienza en la fase de
terminación de la transcripción y acaba una vez finalizada ésta.
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28.4. Detalles de la transcripción en Eucariontes (Maduración del mRNA):
Capping: El Capping consta de la adición de la adición de 7-metilguanosina, es una interacción 5’-5’ y preserva los
3 fosfatos. Todos los RNA que salen del núcleo sufren capping.
Capping de metilguanosina
Splicing: Secuencias especı́ficas en la unión intrón-exón. Complejos formados por RNA y proteı́nas realizan el Splicing
(Spliciosoma). Este proceso está mediado por un ataque nucleofı́lico de una adenina hacı́a un grupo fosfato de la guanina
del grupo GU, se unen estas 2 estrcuturas formando un lazo y se libera el intrón.
Adición de la cola de Poli-A: Secuencia AAUAAA CA se reconoce por una endonucleasa y rompe una zona rica en
G-U. Posteriormente se comienza la adición de la cola de Poli-A por la Poli-A Polimerasa (entre 10 y 200). Mientras más
adenina tenga, más estable es el mensajero. Tanto el CAP como la cola de Poli A son reconocidos por el ribosoma para
iniciar y terminar la transcripción.
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29. Componentes Fundamentales de la traducción:
1. La maquinaria: Factores proteicos.
mRNA. 2. La información:
Ribosomas. El código genético.
Aminoacil-tRNA Señales de inicio y término.
Aminoacil-tRNA sintasa. Acoplamiento tRNA-Aminoácido.
29.1. Ribosomas:
Cada subunidad de los ribosomas, están numeradas por su coeficiente de sedimentación ”S”. Las subunidades riboso-
males de las células eucariontes son un poco más pesadas que las subunidades ribosomales en organismos procariontes,
lo que habla del éxito evolutivo de los ribosomas como herramienta utilizada en la traducción.
Los ribosomas están compuestos principalmente por rRNA, el cual es sintetizado en el núcleo. Los ribosomas también
funcionan como ribozimas.
En los ribosomas se realiza la traducción. Exsten 3 sitios caracterı́sticos del ribosoma que ayudan en la sı́ntesis de la
proteı́na:
Sitio P o Peptidil: Almacena la proteı́na en traducción.
Sitio A o aminoacil: Caracterizado pues en esta zona ingresan los aminoácidos que siguen la secuencia del mRNA.
sitio E o exit: Salida del tRNA para poder reabastecerse de otro aminoácido.
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29.2. ARN de transferencia y el código genético:
En uno de los extremos de la cadena, todos los tRNA contienen un resto de ácido guanı́licoterminal; al otro extremo,
todos los tRNA contienen la secuencia terminal C-C-A. El grupo 5’-hidroxilo del resto adenı́lico terminal se halla unido
al hidroxilo 3’ del resto citidı́lico mediante un puente fosfodiester.
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29.3.1. Elongación:
Esta fase consiste en un ciclo de 3 pasos en donde en el primer paso se incorpora un tRNA al sitio aminoacil del
ribosoma; posteriormente el aminoácido unido al tRNA, recibe el resto de la proteı́na que está siendo codificada en el
sitio P, trasladandose hacia el sitio A, este proceso está mediado por la Peptidil transferasa:
La enzima peptidil transferasa es una ribozima aminoacil transferasa que realiza la función esencial de los ribosomas.
Se encarga de la formación de enlaces peptı́dicos entre aminoácidos adyacentes durante la traducción de ARN mensajero
y, por tanto, la sı́ntesis proteica.
Finalmente ocurre la translocación proceso dependiente de la hidrólisis de GTP, que traslada los 2 tRNA un lugar
en dirección al sitio E. el tRNA que contiene la proteı́na pasa al sitio peptidil y el tRNA que carece de elementos de unión
se liberta por el sitio E.
29.3.2. Término:
Los codones de término son reconocidos por los factores de liberación, los codones de término no codifican para ningún
aminoácido. Posteriormente las subunidades se desensamblan y el mRNA es degradado por ribonucleasas.
Término de la traducción.
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Las chaperonas ayudan al correcto plegamiento:
Chaperonas unidas a ATP se encuentran libres en el citoplasma o en el lumen del retı́culo endoplasmático rugoso,
para facilitar el plegamiento correcto de la proteı́na, La chaperona hidroliza ATP para unirse a la proteı́na en
formación. Cuando la proteı́na termina de ser traducida, las chaperonas dejan su sitio de unión con el ADP y
vuelven a formar el complejo con el ATP quedando útiles para facilitar un nuevo plegamiento
Polirribosomas: Los polirribosomas son agrupamientos simultáneos de ribosomas a una sola molécula de mRNA que
está siendo traducida.
Parte IX
Retı́culo Endoplasmático:
30. Generalidades de la expresión génica:
En cada célula existen entre 20.000 y 25.000 genes. Cada célula produce para cumplir su función alrededor de 10.000-
20.000 proteı́nas diferentes. Finalmente, la velocidad de sı́ntesis de proteı́nas por célula es de 1.000.000 de moléculas por
minuto.
La membrana del RE es el lugar de producción de todas las proteı́nas de transmembrana y lı́pidos de la mayorı́a
de los organelos celulares La membrana del RE también contribuye a la formación de las membranas mitocondriales
y peroxisomas. Todas las proteı́nas que serán secretadas al exterior y las que se quedarán en el lumen del RE, golgi o
lisosomas, son inicialmente transportadas al lumen del RE.
51
31.1. Proteı́nas y su transporte hacia el RE
El RE extrae determinadas proteı́nas desde el citosol a medida que son sintetizadas. Estas proteı́nas son de dos tipos:
Proteı́nas Transmembrana que son parcialmente translocadas hacia el lumen.
Proteı́na solubles en agua que atraviesan la membrana del RE y quedan liberadas al lumen.
Independiente de su destino posterior, estas proteı́nas son dirigidas a la membrana del RE por el mismo tipo de péptido
señal.
52
32.1. Sı́ntesis Proteica a nivel reticular:
Una partı́cula de reconocimiento de la señal (SRP) reconoce una secuencia especı́fica de la proteı́na creciente y dirige
su dirección hacia la membrana del retı́culo endoplasmático rugoso. El SRP dirige la unión del ribosoma a la
membrana y permite la inserción De la proteı́na naciente al canal de trasmembrana
El péptido señal se compone principalmente de aminoácidos hidrofóbicos. Las proteı́nas que translocan la membrana
del RER lo realizan en un estado desplegado principalmente determinado por una estructura lineal.
Una vez formado el complejo ribosoma-SRP se une a una proteı́na integral llamada receptor del SRP. Posteriormente
la SRP es liberada y comienza la translocación a través de la membrana del polipéptido creciente. Dado que una de las
proteı́nas del SRP y el receptor del SRP tienen sitios de union al GTP; los cambios conformacionales que tienen lugar
durante la translocación estarı́an establecidos mediante la hidrólisis de GTP.
Sı́ntesis de proteı́nas de secreción atraviesan completamente la membrana reticular siendo procesadas en el lumen.
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Proteı́nas de Membrana.
Proteı́nas Tipo 1: Señalizador de translocación ubicado al inicio de la proteı́na.
Proteı́na Tipo 2: Señalizador de transolación ubicado entre la cadena polipeptı́dica.
Proteı́nas Politópicas: Caracterizadas por su presencia de múltiples sitios de término de la translocación.
Las proteı́nas tipo 1 y tipo 2 se subdividen en proteı́nas tipo A y B. Las proteı́nas A tienen el grupo amino terminal
mirando hacia el lumen del RER. Las proteı́nas B poseen el grupo carboxilo terminal orientado hacia esta misma sección.
Casi inmediatamente después que la cadena polipeptı́dica entre en el lumen, se glucosila sobre los residuos de
asparagina diana. El oligosacárido se transfiere al aminoácido a través de la enzima oligosacaril transferasa
(enzima adosada a la membrana). Existe una copia de esta enzima para cada translocador proteico.
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Formación y reordenamiento de puentes disúlfuro.
La enzima PDI o Disulfuro Isomerasa es la enzima encargada de adicionar o restaurar enlaces disúlfuro en las
proteı́nas, favoreciendo un correcto plegamiento para la estructura terciaria de la proteı́na.
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Distintos caminos de procesamiento defectuoso en proteı́nas formadas en el RER.
Los proteosomas representan un importante mecanismo por el cual las células controlan la concentración de
determinadas proteı́nas mediante la degradación de las mismas.
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33.3. El plegamiento defectuoso genera señales UPR(Unfolded Protein Response) hacia
el núcleo
Una proteı́na UPR es activada en respuesta a la acumulación de proteı́nas mal formadas o no formadas en el lumen
del retı́culo endoplasmático. Existen tres proteı́nas que sensan la presencia de proteı́nas mal formadas:
Inicio del UPR: La proteı́na chaperona BIP/Grp78 se asocia a receptores de UPR en la membrana del RER y los
mantiene inactivos (IRE1, PERK y ATF6). Si se acumulan proteı́nas mal plegadas BIP/Grp78 se sueltan de los receptores
( y se dirigen hacia las proteı́nas malformadas) activando a los receptores del UPR los cuales se fosforilan y activan el
UPR. Si la proteı́na activada corresponde a una PERK, el resultado es una inhibición de la traducción proteica, teniendo
como resultado un arresto del ciclo celular. Si la respuesta está asociada a la activación de una proteı́na ATF6, esta se
transloca hacia el golgi para luego generar la respuesta de activación de genes a nivel nuclear de factores reguladores
UPR.
Activación del IRE1 favorece la sı́ntesis de chaperonas en consecuencia a una acumulación de proteı́nas mal plegadas.
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Ditiotreitol (DTT): agente fuertemente reductor que rompe los puentes disúlfuros (S-S), haciendo que las proteı́nas
se desplieguen.
Parte X
Aparato de Golgi:
El Aparato de Golgi constituye el segundo organelo de la ruta exocı́tica de proteı́nas. El transporte posterior de
proteı́nas desde el RER hacia el Golgi y desde este hacia cualquier otro sitio, tiene lugar a través de vesı́culas. La via
que va desde el RE, pasando por el complejo de Golgi, hasta la superficie celular se llama a menudo via por defecto ya
que parece que las proteı́ans no necesitan presentar señales especı́ficas para seguirla.
Estructura del Aparato de Golgi: EL complejo de Golgi se localiza cerca del núcleo celular, y en una célula animal
está a menudo cerca del centrosoma o centro celular. Esta formado por una serie de cisternas limitadas por membrana
y de forma aplanada. Muchas vesı́culas se hallan asociadas a los dictiosomas del Golgi, se cree que estas vesı́culas del
Golgi son vesı́culas de transporte de proteı́nas y de lı́pidos desde y hacia el Golgi y entre las mismas cisternas del
organelo. Durante su paso a través del complejo de Golgi, las moléculas transportadas sufren una serie de
modificaciones covalentes ordenadas.
Los dictiosomas del Golgi tienen dos caras distintas: Una cara cis (o de entrada) y una cara trans (o de salida). Ambas
caras están conectadas por la red Cis y Trans del golgi formadas por estructuras tubulares.
Las vesı́culas destinadas al complejo de Golgi emergen desde regiones especializadas del ER llamadas Elementos
transicionales cuya membrana no tiene ribosomas adheridos, y se encuentra a menudo entre el RER y el complejo de
Golgi. Se cree que estas vesı́culas no son selectivas, transportarı́an cualquier proteı́na desde el RE hacia el Golgi. Sin
embargo, para que una proteı́na emigre al golgi debe estar correctamente plegada y formada.
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Compartimentalización del Golgi
El procesamiento de oligosacáridos es altamente ordenado, de forma que cada uno de los pasos depende de las reacciones
anteriores. En los dictiosomas del Golgi, la manosidasa I elimina 3 residuos de manosa y la N-acetilglucosamina
transferasa I añade un residuo de GlcNAc, lo que permite que la manosidasa II elimine dos residuos más de manosa.
De esta manera, se obtiene el núcleo final de 3 residuos de manosa que presenta un oligosacárido complejo. En este
estado, el enlace existente entre los residuos del GlcNAc se vuelve resistente al ataque de una endoglucosidasa la Endo-H.
Procesamiento de los oligosacáridos en el RER y el complejo de Golgi para un oligosacárido complejo Proceso que
ocurre entre las caras Cis y Medial del organelo.
procesamiento final donde se añaden dos GlcNAc, tres Gal y tres NANA
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36. Procesamiento Proteolı́tico de proteı́nas:
En el aparato de Golgi también ocurre procesamiento de proteı́nas como en el siguiente ejemplo:
Finalmente, en la cara trans del Golgi ocurre la segregación de proteı́nas hacia los distintos organelos o
al espacio extracelular:
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Parte XI
Mecanismos moleculares del transporte vesicular:
37. Etapas en la formación de vesı́culas:
En todas las etapas de formación de vesı́culas existen tres etapas fundamentales:
Yemación: Aproximación a la formación vesicular:
Fisión: Separación total entre la vesı́cula y la membrana plasmática.
Fusión: Unión de la vesı́cula a la membrana el organelo o estructura diana.
Para que que el proceso de formación vesicular ocurra de manera efectiva necesitamos la presencia de los siguientes
factores:
Proteı́na cargo o péptido señal: que indican señales de exocitosis o de destinación de proteı́nas.
Proteı́nas de coating y adaptadoras: las cuales ayudan a deformar la membrana plasmática.
Receptores de membrana para las proteı́nas cargo.
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38.1.1. Vesı́culas revestidas por COP:
Las vesı́culas revestidas por COP median el transporte vesicular de la ruta por defecto, incluye en transporte desde el
retı́culo endoplasmático al complejo de Golgi COP2 , de una cisterna del Golgi a otra más baja y desde el Golgi hacia
el RER. COP1.
Proteı́nas de cubierta COP2: El transporte mediado por proteı́nas tipo COP2 es principalmente de tipo anterógra-
do. Si tomamos como referencia la ruta exocı́tica, este tipo de transporte es hacia fuera de la membrana celular.
La proteı́na ARF-GDP permanece al principio en un estado soluble e inactivo. Esta se une posteriormente a una
proteı́na liberadora de nucleoótidos de guanina (GNRP) en la membrana dadora, lo cual provoca que el ARF libere su
GDP y se una al GTP. El GTP desencadena un cambio conformacional en el ARF dejando expuesta su cadena de ácido
graso. Entonces, la proteı́na ARF-GTP activa y unida a la membrana comienza a reclutar las subunidades del
coatómero de la membrana.
Proteı́nas de Cubierta COP1: El transporte mediado por proteı́nas COP1 es en su mayorı́a de tipo retrógrado.
El complejo COP1 está formada por la ARF1(GTP-asa monomérica), un coatómero (complejo de 7 proteı́nas)y
proteı́nas de membrana reclutadas por el coatómero. A diferencia de las proteı́nas COP2, la cubierta se adosa
a la membrana una vez activada la ARF1
Vesı́culas revestidas de Clatrina: El principal componente proteico de las vesı́culas recubiertas de clatrina es la
propia proteı́na. Un complejo altamente conservado en la escala evolutiva. Consiste en tres cadenas polipeptidicas grandes
y tres pequeñas que forman una estructura llamada Triquelion. Los trisquelions de clatrina se unen dando lugar a un
esqueleto en forma de cesto. La formación de una yema revestida de clatrina se produce por fuerzas generadas por el
ensamblaje de proteı́nas de la cubierta sobre la superficie citosólica de la 0membrana.
Adosadas en la parte más distal del aparato de Golgi. La podemos encontrar tanto en la parte más distan como en
organelos llamados endosomas y en la membrana plasmática.
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Estructura del Trisquelion
El ensamblaje de la cubierta de vesı́culas revestidas tiene dos funciones como mı́nimo: Proporciona la fuerza mecánica
para estirar hacia el exterior la membrana y ayuda a capturar receptores de membrana especı́ficos junto con las moléculas
a las que están unidos.
Proteı́nas llamadas adaptinas se utilizan para unir el revestimiento de clatrina a la membrana, además de reclutar
diversos receptores proteicos de transmembrana, los cuales capturan moléculas especı́ficas en el interior de la vesı́cula
(proteı́nas cargo)
Finalmente, el proceso de escición se produce por la acción de una proteı́na con una naturaleza similar a la actina,
hablamos de la dinamina y un complejo proteico cuya estructura principal es esta proteı́na.
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39. Células epiteliales como modelo de la destinación de proteı́nas en el
aparato de Golgi:
En esa sección se observará el efecto de la destinación hacia la membrana plasmática de células polares como por
ejemplo las células epiteliales. Donde una cara de la membrana apunta en sentido apical y la otra en sentido basolateral.
Los cambios en la destinación se realizan principalmente en el TGN (trans Golgi Network) en la cara más alejada del
aparato de Golgi.
El estudio contempla la utilización de dos tipos de virus que generan salidas exocı́ticas distintas: Hablamos del virus
HA (o de la gripe) y el VSVG.
En la imagen de la izquierda observamos la liberación del virus de la influenza HA, y por la sección basolateral vemos la
salida del virus de la VSVG (vesicular stomatitis viurs)
La explicación a la destinación de la salida de la HA y VSVG estaba determinada por la región donde se encontraba la
señal de salida. En el caso la salida del HA se encontraba en la región transmembrana de la proteı́na, y la del VSVG se
hallaba en la región citosólica de la proteı́na.
Las señales Apicales son N y O-glicosilaciones y estaban presentes tanto en la membrana, dominio intracelular como la
rodopsina o incluso el emdio extracelular. Las proteı́nas apicales se subian a unas balsas compuestas de glicoesfingolı́pidos
y colesterol llamadas rafts. Todas las señales Basolaterales, en cambio, son peptı́dicas y están en unidas al carboxilo
terminal. Las señales basolaterales dominan sobre las apicales. Las señales se pueden transferir de una proteı́na a otra.
Existe más de un tipo de señal para destinar proteı́nas a diferentes organelos. Mas que la secuencia especı́fica de
aminoácidos de la proteı́na, importan más sus propiedades fı́sicas: (hidrofobicidad, hidofilidad).
Las señales se pueden transferir de una proteı́na a otra. Son necesarias, suficientes e intercambiables entre las
proteı́nas.
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40.1. Proteı́nas de cubierta adaptadoras complejo AP:
El complejo AP tiene cuatro subunidades una de las cuales se une a la señal de destinación que puede ser citosólica o
basolateral, lo importante es que hay un reconocimiento y este adaptador acomoda la clatrina con la señal para formar
la vesı́cula.
Snares vesiculares y de la membrana blanco interactuan para comenzar el proceso de fusión tras la recognición de las dos
partes.
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La interacción entre v-SNARE y t-SNARE provoca la hidrólisis del GTP de la proteı́na RAB para controlar que la
interacción sea correcta, mediante el efecto del Rab.
Rabs funcionan en las vesı́culas de transporte, en las membranas blanco y/o en ambas.
Una proteı́na liberadora de nucleótidos de guanina en la membrana dadora reconoce una proteı́na rab especı́fica y la
induce a intercambiar su GDP por GTP. Este cambio altera la conformación de la proteina Rab, exponiendo su grupo
lipı́dico unido covalentemente, el cual ancla la proteı́na Rab a la membrana que sale. La proteina Rab-GTP permanece
unida a la superficie de la vesı́cula de transporte después de que eésta se separe de la membrana dadora. Una proteı́na
v-SNARE de la superficie de la vesı́cula se une a una t-SNARE inmovilizando parcialmente la vesı́cula. Entonces la
proteı́na Rab hidroliza su GTP anclando la vesı́cula a la membrana diana y liberandose al citosol como Rab-GDP.
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Parte XII
Ciclo Celular:
El ciclo celular se divide tradicionalmente en varias fases, de las cuales la más importante es la mitosis o fase M. En la
mayorı́a de las células, toda la fase M solo dura una hora aproximadamente, lo cual corresponde solo una pequeña fracción
de la duración total del ciclo. El periodo comprendido entre 2 fases M consecutivas se denomina interfase. Este proceso
presenta una alta actividad celular, durante el cual tienen lugar, en una secuencia de eventos ordenados, la duplicación
del material genético y preparación para entrar en la fase M.
Las cuatro fases sucesivas del ciclo de una célula eucariotica tı́pica. Durante la interfase la célula crece continuamente;
durante la fase M se divide. La replicación del DNA se produce únicamente durante la fase S.
Necesariamente antes de que la célula entre en mitosis deben duplicarse los cromosomas. Conociendo el concepto, Mesia
realiza una experimento para saber como logran duplicarse estos cromosomas antes de la mitosis: Antes de hacer un
preparado histológico, se inyecta al animal timidina tritiada (Radiactiva), la gracia del tritio es que si la timidina
tritiada se incorpora en el DNA, en una solución con plata, la timina tritiada reducirá la Ag, y al microscopio óptico se
observan gránulos de plata. (Periodo S). Si no se observan estructuras mitótitcas pero tampoco se observan granos de
plata la célula se puede encontrar en un periodo antes (Gap 1) o después de S (Gap 2).
El ciclo celular dura al entre 17 y 20 horas. En las células de mamı́feros superiores, la fase S demora 7 horas, ya que se
deben copiar 3200 millones de pares de bases. G2 dura alrededor de 3 horas y G1 puede durar entre 5 y 7 horas.
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Sin embargo, este método no es lo suficientemente efectivo debido a que no sabemos si las células estan efectivamente
sincronizadas (todas en G1 por ejemplo). Por lo que Renato Dulbecco (Padre del cultivo celular) descubrió que las
células que están en interfase se encuentran estiradas y las que están en mitosis tienen una forma redondeada, por lo que
si se perturba el cultivo caerán solo las células que están en fase M teniendo un cultivo mucho más sincronizado.
Método del Metotrexato: Lo que hace esta droga es inhibir el metabolismo del ácido fólico que se necesita para
realizar la sı́ntesis de DNA, por lo tanto si se le suministra la droga a un cultivo de células, este se bloquea exactamente
al inicio de S. De esta manera queda sincronizado el cultivo de manera óptima.
Gracias a los cultivos sincronizados con metotrexato se logró determinar el factor promotor de la mitosis (MPF)
Imágen Izquierda: Mediante la fusión de células en distintas fases del ciclo celular con células en la fase M, se logró la
inducción de los cromosomas en células que se encontraban en G1,S y G2 (MPF)
Imágen Derecha: Los citoplasmas en fase S contienen factores que hacen que los núcleos en G1 entren directamente en
proceso de sı́ntesis del DNA. Sin embargo, los núcleos en G2 son refractarios a dichos factores. Nótese que la fusión de
una célula en G2 con una célula en G1 no hace que el núcleo G1 inice la sı́ntesis de su DNA. Por lo tanto los factores
presentes en la fase S desaparecen en la fase G2.
En un experimento realizado con levaduras que se dividı́an por fisión y yemación, se buscó determinar cuales son estos
factores que inducı́an la duplicación del material genético . Para ello cultivaron levaduras que tenı́an una restricción para
dividirse a altas temperaturas obteniendo un resultado como el siguiente:
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Arresto del ciclo celular mediado por variaciones de temperatura
A una temperatura permisiva, las células se dividı́an con normalidad. Si elevamos la temperatura hasta la restrictiva, uno
de los genes dejará de actuar con normalidad y conllevará a un arresto del ciclo. A estos genes se les denomina genes cdc.
44.1. Ciclinas:
EL MPF corresponde a un complejo proteico formado esencialmente por 2 proteı́nas. Una quinasa dependiente de
ciclina Cdk y la ciclina correspondiente.
Ciclinas-G1 : Ayudan a las ciclinas G1/S y su función es llevar a cabo el crecimiento y desarrollo celular para entrar
en S.
Acción de los distintos tipos de ciclinas durante distintas fases del ciclo celular.
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Mecanismo de regulación y activación de la CdK1-M
A medida que el nivel de ciclina-M aumenta, una proteı́na CAK (Proteı́na activadora de CdK) fosforila a la CdK1 en
su sitio activo, mientras que al mismo tiempo una proteı́na Wee1 (Proteı́na inhibitoria de CdK) fosforila a la CdK1
en su sitio inactivo. La activación de la CdK se lleva a cabo por una fosfatasa cdc25 que hidroliza el fosfato inhibitorio
activando el MPF. Se cree que el MPF activo estimula su propia activación por retroalimentación positiva con Cdc25 y
negativa con Wee1.
Es importante recalcar que tanto la quinasa de inicio y el MPF se componen de Cdc2, pero se asocian
con diferentes tipos de ciclina. Esto sugiere que la Cdc2 está presente de forma permanente, pero cambia su estado
de asociación con las ciclinas, lo cual define las fases del ciclo de división mitótica (Inicio y Fin de fase M).
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45. Sitios de Control del ciclo celular:
Cada una de las acciones principales del sistema de control del ciclo celular (La activación del MPF al inicio de la
mitosis, su inactivación en la transición de la metafase a la anafase, la activación de la quinasa de Inicio) desencadenan
un complejo proceso subordinado que requiere un cierto intervalo de tiempo para completarse. Si el sistema de control
inicia la siguiente acción sin que cada uno de estos procesos se haya completado, es probable que las consecuencias sean
fatales o mutagénicas para la célula.
Puntos de control:
Transición G2-M: Este punto de control está influenciado por el tamaño celular, daños producidos en el DNA y
la replicación del material genético.
Transición Metafase-Anafase: Influenciado por la posición ecuatorial de los cromosomas.
Punto de restricción G1-S/Go: Influenciado principalmente por la presencia adecuada de factores de crecimiento,
nutrientes, tamaño celular o daños en el DNA.
Es importante afirmar que tras el cumplimiento requerido por los puntos de control, recien comienza la
actividad de las ciclinas y Cdk.
Habitualmente, las células situadas en la superficie de una placa de cultivo proliferan hasta que se tocan unas con otras,
formando una monocapa confluente. El siguiente diagrama muestra lo que ocurre si se rasga la monocapa. Las células que
quedan en los márgenes de la herida se aplanan y empiezan a crecer y a dividirse hasta que se reconstituye la monocapa
confluente.
Es importante recordar que la interacción célula-célula no es suficiente para el cese de la proliferación. El medio también
puede modificar la densidad celular.
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46.1. Efectos Tempranos y Tardı́os de Los oncogénes
Respuesta temprana mediada por Myc: Myc es el producto de un gen myc de respuesta rápida. El gráfico a
continuación muestra los cambios de concentración de Myc tras un incremento repentino de la concentración del factor
de crecimiento hacia un nuevo estado estacionario, lo que provocará la salida de la celula en Go y su proliferación. Los
cambios en la concentración de Myc reflejan cambios en la transcripción del gen myc. La propia proteı́na
Myc inhibe la transcripción del myc y se cree que su retroalimentación negativa explica por qué el nivel de Myc disminuye
desde su valor máximo inicial hacia un valor más bajo pero estable:
Respuesta celular y salida de Go provocado por la presencia repentina del factor de crecimiento adecuado.
Debemos tener en cuenta que las poblaciones célulares en condiciones normales tienen un tiempo de vida determinado,
caracterizado principalmente por la etapa de Senescencia y muerte. Las células tienen una capacidad limitada de
división, tras ciertas divisiones mitóticas, la célula no puede salir de Go y la población muere. Sin embargo, células
transformadas son por definición inmortales:
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Oncogénes activados por virus: El caso más estudiado corresponde al virus del sarcoma de Rous. Los oncogénes
virales provienen de genes celulares que fueron en algún momento secuestrados por el virus y posteriormente mutaron.
Para efectos de notación un oncogén viral se denomina v-src y la forma benigna del mismo (ubicado en los genes celulares)
se denomina c-src.
Secuestro del gen c-src unido al genoma del virus para que este protooncogén se transforme en un oncogén y tenga
efectos malignos.
Proteı́na Rb desfosforolizada mantiene a la célula en Go, y la proteı́na fosforolizada activa la proliferación celular.
La Rb se desfosforila cuando la célula sale de la mitosis y se refosforila al final de G1, cuando la célula se
prepara para superar el inicio.
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El siguiente gráfico demuestra la regulación completa del inicio del ciclo celular tras la recepción de un factor que estimula
la proliferación y el paso a la fase S.
Regulación del Ciclo celular por la proteı́na P53: Resulta esencial para inducir la respuesta de la célula ante el
daño del ADN, deteniendo el ciclo celular en caso de mutación. El gen p53 es un gen supresor tumoral que desempeña
un papel importante en apoptosis y control del ciclo celular. Un p53 defectuoso podrı́a permitir que las células anormales
proliferen dando por resultado cáncer.
Si la activación del P53 se debe por una producción excesiva de MyC (factor proteico que estimula la proliferación),
la P53 activa puede llevar a la célula a un arresto temporal del ciclo celular o a una apoptosis programada.
Si la activación del P53 se debe a un daño explı́cito del DNA, la P53 actúa como proteı́na reguladora que activa la
transcripción de la P21, la cual actúa sobre el complejo activo CdK-S y CdK-G1/S inactivandolos manteniendo a
la célula en el punto de control G1.
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Resumen y progresión molecular del ciclo celular
Parte XIII
Mecanismos de la división celular:
La fase M incluye los diferentes estadios de división nuclear (mitosis) y de la división citoplasmática (citocinesis). En
un periodo breve, los contenidos de la célula madre, que se han duplicado mediante las actividades biosintéticas de la
interfase precedente, se segregan en dos células hijas.
No olvidar que tras una división mitótica en condiciones normales existe conservación del material genético, por lo que
las 2 células hijas son clones.
47.1. Profase:
La transición de G2 a la fase M del ciclo celular no es un proceso estrictamente definido. La cromatina, que en la
interfase se halla difusa, se condensa lentamente formando cromosomas bien definidos. Cada cromosoma se ha duplicado
durante la fase S precedente y ahora consta de 2 cromátidas hermanas, cada una de las cuales contiene una secuencia
de DNA especı́fica conocida como centrómero, necesaria para la correcta segregación del cromosoma. Hacia el final de
la profase los microtúbulos citoplasmáticos que forman parte del citoesqueleto interfásico se despolimerizan y empieza a
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formarse el huso mitótico.
Además de los procesos que ocurren a nivel nuclear, se necesita la duplicación del centrosoma. Los procesos de la
duplicación y separación del centrosoma se conocen como ciclo del centrosoma. Durante la interfase de cada ciclo celular,
los centriolos y los otros componentes del centrosoma se duplican pero permanen juntos como un unico complejo en una
cara de la membrana nuclear. Al iniciarse la mitosis, este complejo se divide en dos y cada pareja de entriolos forma parte
de un centro organizador de microtúbulos.
47.2. Prometafase:
La prometafase se inicia bruscamente con la desintegración de la envoltura nuclear formando vesı́culas que
permanecerán visibles alrededor del huso durante la mitosis. Los microtúbulos del huso, que hasta este momento se
hallaban fuera del núcleo celular, pueden entrar en la región nuclear. En cada centrómero maduran complejos especializados
llamados cinetocoros y que se unen a algunos de los microtúbulos del huso, que recibirán el nombre de microtúbulos
cinetocóricos. Los microtúbulos remanentes del huso se denominan microtúbulos polares, mientras que los que son
exteriores al huso se llaman microtúbulos astrales. Los microtúbulos cinetocóricos o cromosómicos ejercen tensión
sobre los cromosomas, los cuales se ven sometidos a movimientos agitados.
47.3. Metafase:
Los microtúbulos cinetocóricos alinean los cromosomas en un plano situado a medio camino de los polos del huso.
Cada cromosoma se mantiene en tensión en esta placa metafásica por los cinetocoros apareados y por sus microtúbulos
asociados, los cuales están unidos a los polos opuestos del huso.
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Metafase, anafase y telofase en una célula animal.
47.4. Anafase:
Impulsada por una señal especifica (degradación de M-ciclina), la anafase empieza bruscamente cuando los cinetocoros
apareados de cada cromosoma se separan, permitiendo que cada cromátida (que solo ahora se denomina cromosoma) sea
arrastrada lentamente hacia un polo del huso. Se pueden distinguir dos categorı́as de movimiento:
Anafase A: Los microtúbulos cinetocóricos se acortan a medida que los cromosomas se aproximan a los polos.
Anafase B: Los microtúbulos polares se alargan y los polos del huso se separan.
Anafase
47.5. Telofase:
En la Telofase los cromosomas hijos separados llegan a los polos y los microtúbulos cinetocóricos desaparecen. Los
microtúbulos polares se alargan aún más y se vuelve a formar la carioteca. La cromatina condensada se expande de nuevo.
47.6. Citocinesis:
El citoplasma se divide mediante un proceso llamado segmentación, que por lo general empieza en algún momento
de la anafase. Este ejemplo ilustra cómo ocurre este proceso en células animales. La membrana de la zona central de la
célula perpendicular al eje del huso y situada entre los 2 núcleos, genera el surco de segmentación que gradualmente se
vuelve más profundo, hasta que entra en contacto con los estrechos restos del huso mitótico que quedan entre los dos
núcleos. Finalmente este anillo contráctil separa a las células hijas.
Telofase y citodiéresis
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48. Detalles de la división Celular:
48.1. Condensación de los cromosomas:
Todos los cambios que ocurren al comienzo de la mitosis dependen de la activación de la M-Cdk. En esta etapa el MPF
fosforila a las láminas nucleares A,B,C (materia I2). Además, fosforila las proteı́nas del nucleolo y lo desagrega. Finalmente
el MPF participa en la condensación de la cromatina fosforilando a la H1. El cordón formado se llama solenoide o fibra
básica (formado por 6 nucleosomas apilados), mide 30 nm. Proteı́nas Scafoldinas forman el esqueleto cromosómico.
48.1.1. Condensinas:
Las condensinas son complejos proteicos que juegan un rol central en el ensamblado y segregación cromosómica en
las células eucariontes. En las células de los vertebrados hay al menos dos tipos diferentes de complejos de condensinas,
conocidos como condensina I y condensina II. Ambos complejos comparten el mismo par de subunidades centrales, SMC2
y SMC4, con actividad ATP-asa para realizar su función. Las SMC (de Structural Maintenance of Chromosomes)
son proteı́nas encargadas del mantenimiento estructural de los cromosomas.La principal función de las
condensinas es
Condensina II: Está presente dentro del núcleo celular durante la interfase y está involucrada en las etapas más
tempranas de la condensación de cromosomas durante la profase.
Condensina I: Está presente en el citoplasma durante el periodo interfásico, y gana acceso a los cromosomas una
vez que la membrana nuclear se desagrega.
Durante la prometafase y la metafase, tanto la condensina I como la condensina II contribuyen a condensar y ensamblar
los cromosomas.
Las condensinas son proteı́nas encargadas del mantenimiento estructural de los cromosomas.
Condensinas: En azul y celeste se observan los dı́meros del SMC, con su dominio ATP-asa para enrollar la cromatina y
los solenoides. Es importante reafirmar que las condensinas se asocian en grupos de 8 en la formación de la estructura
cromosomal.
48.1.2. Cohesinas:
La cohesina es un complejo de proteı́nas involucrado en la separación de las cromátidas, encargada de mediar la
unión de las cromátidas en la metafase. Es uno de los complejos proteicos responsables de mantener la estructura de los
cromosomas. A diferencia de las condensinas que actuan sobre todo el ADN, las cohesinas son vitales para
mantener unidas a las cromátidas hermanas durante la metafase.
En el momento de la separación de cromátidas en anafase, las cohesinas son destruidas por la separasa que anteriormente
se encontraba inhibida por una proteı́na llamada securina. En la anafase, el APC/C (Complejo Promotor de Anafase)
marca la securina para la degradación. Proceso especı́fico del checkpoint de la fase M.
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Cohesinas, formadas por SMC1 y SMC3, participa en el ensamblaje y el mantenimiento de la unión entre cromátidas
hermanas
Microtúbulos astrales: Parten en todas direcciones desde los centrosomas y se cree que contribuyen a generar las
fuerzas que separan los polos.
Estructura de los centrosomas al microscopio y ilustración de la duplicación de centriolos en forma ortogonal en la fase
S.
79
48.2.1. Cinetocoro:
Los microtúbulos cromosómicos van desde el polo hacia los cromosomas, se dirigen directamente hacia el cinetocoro
(anillo proteico) que es una región del centrómero.
En la capa más externa del cinetocoro se insertan los microtúbulos cromosómicos. Esto se descubrió gracias a pacientes
con enfermedades autoinmunes. Las proteı́nas del cinetocoro reconocen una secuencia de 171 pares de bases. Este DNA
no codifica pero tiene funciones estructurales. Por ingenierı́a genética en células Hila, se introdujo una letra cambiada en
estos pares de bases. Esta mutación resultó en una muerte celular (Entra en apoptosis): Al estar mutada en 1 base, las
proteı́nas del cinetocoro no reconocen la secuencia y no se arma el complejo. Por lo tanto la célula se detiene en metafase.
Detalles de la unión cinetocoro-microtúbulo: Hemos afirmado que el cinetocoro es un complejo proteico externo
del centrosoma, en donde el ADN tiene una secuencia especı́fica de bases ricas en AT. Los microtúbulos cromosómicos
solamente se unen a la estructura externa del cinetocoro. En este punto se pueden llegar a producir las no disyunciones
cromosómicas pues existe la posibilidad de que dos microtúbulos cromosómicos no queden equitativamente distribuidos
en los cinetocoros.
Durante la fase M hasta la metafase una proteı́na separasa que en su forma activa se encarga de degradar las cohesinas
se encuentra unida a una proteı́na securina (que la mantiene en su forma inactiva). La activación del APC/C por medio de
una proteı́na Cdc20 hace que el APC/C actúe sobre la securina ligandole una cadena de poliubiquitina para su posterior
degradación. Similar es el caso para la degradación de M-ciclina.
80
Acción del APC/C sobre las cohesinas y la degradación de la M ciclina que permite el paso de la metafase hacia la
anafase.
2. Anafase B: Elongación de la célula animal y ocurre por acción de microtúbulos interpolares. Estos se empiezan a
separar y permiten la elongación celular.
Si cualquiera de los mecanismos del complejo promotor de la anafase falla, se produce una no disyunción cromosomal que
se traducirá en células hijas con desigual cantidad de cromosomas.
Anafase A por acortamiento de los microtúbulos cinetocóricos y problemas por no disyunción cromosómica
Recordemos también que las funciones de los microtúbulos no están estrı́ctamente limitadas a la separación de cromátidas
hermanas durante la mitosis. En esta misma fase, los organelos deben ser capaces de migrar hacia los 2 polos de la célula
de manera equitativa. Este transporte de organelos está mediada (como vimos en la I2) por la acción de kinesinas y
dineı́nas.
81
48.5. Detalles de la Telofase y citocinesis:
48.5.1. Telofase:
Al final de la anafase los cromosomas se han separado en dos grupos iguales, uno en cada polo del huso. En la telofase,
el estadio final de la mitosis, se recompone una envoltura nuclear alrededor de cada grupo de cromosomas, formando los
dos núcleos hijos de la interfase.
48.5.2. Citodiéresis:
Durante la citocinesis el citoplasma se divide mediante un proceso denominado segmentación. Aunque normalmente la
división nuclear y la división citoplasmática están relacionadas, son acontecimientos que se pueden separar. Por ejemplo,
el embrión temprano de Drosophila experimenta 13 divisiones celulares sin división citoplasmática. En una célula normal,
cada mitosis viene acompañada de una citocinesis que comienza en la anafase, continua en la telofase y alcanza su
culminación al comenzar la interfase siguiente.
El anillo contráctil formado en la anafase se realiza sobre los microtúbulos interpolares. Este anillo está compuesto por
microfilamentos de actina y miosina. La activación pertinente para la formación de la esctructura contráctil está mediada
por la activación de una proteı́na Rho.
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Activación de la proteı́na Rho
Formación del fragmoplasto vegetal. Notar la importancia de la presencia de microtúbulos interfásicos en el lugar de la
futura membrana. Estos microtúbulos, junto con bandas de actina, aparecen en G2 y son el primer indicio de la
inminente división celular vegetal.
83
50. Mitosis Carente de G1:
En muchas células embrionarias durante el periodo de implantación, la masa celular no crece, pero continúa dividien-
dose para la posterior diferenciación.
Desarrollo embrionario de los mamı́feros: a. huevo fertilizado, b. Estado de 2 células (1,5 dı́as), c. Estado de 8 células
ó mórula (2,5 dı́as), d. Estado de 16 células (3 dı́as) y e. Estado de blastocisto (4 dı́as).
Comparación actividad de ciclinas en células proliferativas carentes de G1 con células con ciclo celular normal.
Parte XIV
Meiosis
En principio la meiosis(meio = mitad) es el proceso por el cual se generan células haploides a partir de células diploides.
Si la célula progenitora tenı́a una cantidad de cromosomas y material genético 2n=2c. El resultado final serán cuatro
células con dotación haploide n=c.
Meiosis y evolución:
Mantención del genoma en las especies.
Origen de la variabilidad genética (la variabilidad genética produce distintos fenotipos y los más adaptados generan
mayor desendencia.).
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resultados de la meiosis: Cromosomas homólogos no son idénticos, no tienen la misma combinación de genes. Tienen
distintos Alelos (Modificaciones de genes). En la primera división meiotica se dividen los cromosomas homólogos. En la
segunda meiosis ocurre una mitosis común y corriente; sin replicación del material genético.
51.1. Meiosis 1:
51.1.1. Profase I:
Corresponde a la etapa más importante y más larga de este proceso, pues en la profase I ocurre la recombinación
genética que produce variabilidad fenotı́pica y genotı́pica en la descendencia. Dada su importancia la profase I puede
subdividirse de la siguiente manera:
Leptoteno: Etapa durante la cual los cromosomas individuales comienzan a condensar en filamentos largos dentro del
núcleo. Cada cromosoma tiene un elemento axial, un armazón proteico que lo recorre a lo largo, y por el cual se ancla
a la envoltura nuclear. A lo largo de los cromosomas van apareciendo unos pequeños engrosamientos denominados
cromómeros. La masa cromatica es 4c y es diploide 2n.
Zigoteno: Los cromosomas homólogos comienzan a acercarse hasta quedar recombinados en toda su longitud. Esto
se conoce como sinapsis (unión) y el complejo resultante se conoce como bivalente o tétrada. Lugar donde los
cromosomas homólogos (paterno y materno) se aparean, asociándose ası́ cromátidas homólogas. Los cromosomas se
ven atraı́dos por una serie de proteı́nas encargadas de la unión de los cromosomas homólogos llamado complejo
sinaptonémico.
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Estructura del complejo sinaptonémico entre cromosomas homólogos
Paquiteno: Una vez que los cromosomas homólogos están perfectamente apareados formando estructuras que se de-
nominan bivalentes se produce el fenómeno de entrecruzamiento (crossing-over) en el cual las cromatidas homólogas
no hermanas intercambian material genético. La recombinación genética resultante hace aumentar en gran medida
la variación genética entre la descendencia de progenitores que se reproducen por vı́a sexual. La recombinación
genética está mediada por la aparición entre los dos homólogos de una estructura proteica de 90 nm de diámetro
llamada nódulo de recombinación. En él se encuentran las enzimas que medı́an en el proceso de recombinación.
Durante esta fase se produce una pequeña sı́ntesis de ADN, que probablemente está relacionada con fenómenos de
reparación de ADN ligados al proceso de recombinación.
Diploteno: Los cromosomas continúan condensándose hasta que se pueden comenzar a observar las dos cromátidas
de cada cromosoma. Además en este momento se pueden observar los lugares del cromosoma donde se ha producido
la recombinación. Estas estructuras en forma de X reciben el nombre quiasmas. Cada quiasma se origina en un sitio
de entrecruzamiento, lugar en el que anteriormente se rompieron dos cromatidas homólogas que intercambiaron
material genético y se reunieron.
Diploteno
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Diacinesis: El final de la diacinesis y por tanto de la profase I meiótica viene marcado por la rotura de la membrana
nuclear. Durante toda la profase I continuó la sı́ntesis de ARN en el núcleo. Al final de la diacinesis cesa la sı́ntesis
de ARN y desaparece el nucléolo.
51.1.2. Metafase I
En esta sección aparece el huso mitótico desarrollado y en vez de anclarse a cada cinetocoro de cada cromátida
hermana, lo hace sobre los cromosomas homólogos de las tétradas.
La meiosis II es simplemente una mitosis sin duplicación de material genético, por lo que su apunte es
redundante.
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52. Ovogénesis y Espermatogénesis
52.1. Ovogénesis:
Los ovogónios se desarrollan a partir de las células germinales primordiales que al principio de la embriogénesis migran
hacia la gónada en desarrollo. Tras un cierto número de divisiones mitóticas, los ovogónios empiezan la división meiótica I
recibiendo el nombre de ovocitos primarios. En los mamı́feros, los ovocitos primarios se forman muy temprano (entre
los 3 y 8 meses de gestación) y permanecen en la profase de la división meiótica I hasta que la hembra es sexualmente
madura. En este momento y de forma periódica un pequeño número de ovocitos madura bajo la influencia hormonal
completando la división meiótica I y constituyendose los ovocitos secundarios. Cuando comienza la pubertad LA FSH,
provoca que las células en el dictioteno vuelvan a la meiosis y completa la primera división meiótica. Es una citodiéresis
no ecutatorial. Una se convierte en el ovocito 2 y otra en el cuerpo polar. Los ovocitos secundarios, finalmente pasan
por la división meiótica II. En la mayorı́a de los vertebrados la maduración de los ovocitos se encuentra detenida en la
metafase de la meiosis II, y el ovocito secundario solo completa la meiosis II tras la fecundación. Finalmente todos los
cuerpos polares degeneran.
52.2. Espermatogénesis:
Los espermatogonios se desarrollan a partir de las células germinales primordiales que migran hacia los testı́culos
durante las primeras fases de la embriogénesis. Cuando el animal alcanza la madurez sexual, la espermatogonia empieza
a proliferar rápidamente, generando alguna progenie que retiene la capacidad de continuar dividiéndose indefinidamente
(como células madre de espermatogonias) y otra progenie (espermatogonia en maduración) que después de un número
limitado de ciclos de división normal inician la meiosis hacia espermatocitos primarios. Éstos continúan a través de la
división I para transformarse en espermatocitos secundarios. Después de completar la meiosis II, estos espermatocitos
producen espermátidas haploides que se diferencian pasando a ser espermatozoides maduros. Es importante recalcar
que la madurez total del espermatozoide se produce cuando entra en contacto con el tracto femenino.
La espermatogénesis se diferencia de la ovogénesis en varios aspectos: (1) A partir de la pubertad continuamente existen
nuevas células que inician la meiosis, (2) cada célula que empieza la meiosis da lugar a cuatro gametos maduros y no a
uno solo, y (3) los espermatozoides maduros se forman por un proceso elaborado de diferenciación celular que empieza
después que se complete la meiosis.
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53. Cromosomas
53.1. Cromosomas Politénicos:
Los cromosomas gigantes se forman por la repetición del periodo S interfásico, formados por cientos de hebras de
cromátidas. Poseen unas bandas caracterı́sticas que es donde se enrolla la cromatina. Las interbandas son lugares donde
la cromatina se encuentra más laxa. Los puffs cromosómicos son lugares donde se desenrrollan las bandas para la
sı́ntesis de transcriptos. Como está formado por cientos de hebras, los puffs funcionan como zonas amplificadoras de
genes.
Cromosoma plumulado
Cariotipo Humano
89
53.3.1. Preparación de un Cariotipo de Sangre:
La imagen a continuación muestra el proceso para obtener el cariotipo en seres humanos. La importancia de este
párrafo radica en conocer la funcionalidad de la Colchicina. La colchicina es un fármaco antimitótico que detiene o
inhibe la division celular en metafase o en anafase. Es un compuesto que evita el reparto de los cromátidas de un
cromosoma durante la mitosis. Su efecto se debe a su acción sobre las proteı́nas citoesqueléticas del huso mitótico ya
que al desorganizar el huso, éste no puede unirse a los microtúbulos cinetocóricos de las cromátidas y tirar de ellas para
separarlas. Actúa sobre la alfa tubulina, inactivandola e inhibiendo la formación de microtúbulos.
Clasificación cromosómica.
90
54. Sı́ndrome de Down.
El 95 % de los niños con sindrome de Down tiene trisomina en el cromosoma 21. A mayor edad aumenta la probabilidad
de tener un niño Down. el 85 % de las no disyunciones vienen de la madre. el 15 % viene del padre. Es importante recalcar
que las monosomı́as autosómicas son letales en los seres humanos, solamente se acepta monosomı́a sexual (sı́ndrome de
Turner). Es por esta razón que no existe el sı́ndrome de down con carencia de un cromosoma 21.
No disyunción meiótica que produce trisomı́a y monosomı́a; y presencia evidente del aumento la tasa de sı́ndrome de
down conforme avanza la edad materna.
El 4 % de los niños con sı́ndrome de down proviene de una traslocación cromosómica del cromosoma 21 al 14. La
traslocación al cromosoma 14 no es aleatoria, pues durante la condensación cromosómica en la meiosis,
el cromosoma 14 y el 21 están muy cerca. Este porcentaje de los niños con sı́ndrome de Down tiene 2 cromosomas
21. Pero El 21 libre está translocado al 14. Habitualmente el 21 es acrocéntrico, entonces se une al 14 que también es
acrocentrico.
La madre es sana, pero portadora de una translocación del cromosoma 21 al cromosoma 14:
Los padres pueden ser portadores asintomáticos del sı́ndrome de down. El problema es que la madre puede generar niños
con trisomı́a por traslocación. Cuando la madre es portadora el riesgo es 16 %. Cuando el padre es portador es del 8 %.
Dentro de este 4 porciento, hay un porcentaje que no tiene trisomia 21, ni translocación del 14. Sin embargo, la presencia
de la región 21q22.2 es necesaria y suficiente para el Sı́ndrome de Down.
21q22.2
El 1 porciento restante, se produce por mosaicos de Down. Durante la división mitótica, en las células somáticas ocurre
una no disyunción del cromosoma 21. La monosomı́a de cromosomas autosómicos es local. Sobreviven 2 poblaciones
91
celular. 46 y 47 cromosomas. el 1 % tiene mosaico. El grado de compromiso del Sı́ndrome de Down es el Mosaicismo. Sin
embargo, el grado de mosaicismo sanguı́neo no asegura nada.
Parte XV
Estructura y Función de la Mitocondria
La mitocondria ocupa una parte substancial del volumen citoplasmático de las células eucariotas, y han sido esenciales
para la evolución de los animales pluricelulares. Sin las mitocondrias las células animales actuales dependerı́an de la
glucólisis anaeróbica para formar ATP. En las mitocondrias el metabolismo de los azúcares está integrado: el piruvato
(producto de la glicólisis) es importado y oxidado por el oxı́geno molecular.
Las mitocondrias se describen como cilindros alargados y rı́gidos, de un diámetro entre 0,5 y 1 µm parecidos a las
bacterias. Las mitocondrias son organelos claramente móviles y plásticos, que cambian constantemente de forma e incluso
se fusionan y fisionan entre ellos. Cuando las mitocondrias se desplazan por el citoplasma, aparecen asociadas a
microtúbulos, lo que determina la orientación y distribución de las mitocondrias en distintos tipos celulares.
2. Membrana interna: La membrana interna se encuentra replegada en numerosas crestas, que aumentan conside-
rablemente su superficie total. Contiene proteı́nas con tres tipos de funciones:
Aquellas que realizan las reacciones de oxidación de la cadena respiratoria. (Cadena transportadora de elec-
trones)
Un complejo enzimático llamado ATP sintasa que produce ATP en la matriz.
Proteı́nas de transporte especı́ficas que regulan el paso de metabolitos dentro y fuera de la matriz.
Dado que se establece un gradiente electroquı́mico a través de esta membrana por la cadena impulsada por la ATP
sintasa, es importante que la membrana interna sea impermeable a la mayorı́a de iones.
3. Membrana Externa: Gracias a que ésta contiene una gran proteı́na formadora de canales (denominada porina),
la membrana externa es permeable a todas las moléculas con peso molecular inferior a 5000 daltons. Otras proteı́nas
de esta membrana son las enzimas implicadas en la sı́ntesis mitocondrial de lı́pidos y las enzimas que transforman
en la matriz los substratos lipı́dicos en formas metabolizables. Además posee la maquinaria necesaria para la fisión
y fusión mitocondrial.
4. Espacio Intermembrana: Este espacio contiene varias enzimas que utilizan la salida de ATP de la matriz para
fosforilar otro nucleótidos.
92
56. Teorı́a Endosimbiótica:
De acuerdo con la hipótesis endosimbiótica, las células ecuariontes aparecieron en una forma de organismos anaeróbicos
sin mitocondrias ni cloroplastos, y luego establecieron una relación endosimbiótica estable con un tipo de bacterias,
utilizando su sitema de fosforilación oxidativa. El proceso de endocitosis que condujo al desarrollo de las mitocondrias se
produjo cuando el oxı́geno apareció en la atmósfera. Al parecer los cloroplastos de las plantas y de las algas han derivado
posteriormente a partir de un suceso endocı́tico que implicó a una bacteria fotonsitética productora de oxı́geno.
Dado que la mayorı́a de los genes que codifican las proteı́nas actuales se hallan en el núcleo celular, es probable que durante
la evolución eucarionte se produjera una extensa transferencia de genes desde el organelo al DNA nuclear. Esto explicarı́a
por qué algunos de los genes del núcleo que codifican proteı́nas mitocondriales se parecen a los genes bacterianos.
Esquema de la teorı́a endosimbiótica y transferencia nuclear que permite la codificación de proteı́ans mitocondriales.
Orı́genes de las proteı́nas y RNA mitocondriales: Las proteı́nas importadas del citosol desempeñan una impor-
tante función en el sistema genético de la mitocondria y constituyen la mayor parte de las proteı́nas del organelo. La
mitocondria solo contribuye a su sistema genético con los mRNA, los rRNA y los tRNA.
Es importante recalcar que también hay distintos tipos de traslocación de proteı́nas mitocondrialas, unas pueden quedar
en la membrana interna o incluso estar activas en el espacio intermembrana. Se cree que en el espacio intermembrana
también existen chaperonas que ayudan al plegamiento proteico.
93
58. Sı́ntesis de ATP:
El ADN es también precursor de la sı́ntesis de DNA y RNA. Por sı́ misma es la moneda de cambio energético célula.
La mitocondria altera el equilibrio de la reacción de hidrólisis de ATP, hacia la sı́ntesis de ATP por 1010 veces.
Fosforilación oxidativa: La membrana mitocondrial interna actúa como una máquina de interconversión energética,
transformando parte de la energı́a de oxidación del NADH y del FADH2 en energı́a de enlace fosfato del ATP.
94
Hipótesis Quimiosmótica: Según esta hipótesis, los intermediarios quı́micos de alta energı́a son substituidos por una
conexión entre los procesos quı́micos y los procesos de transporte. Cuando los electrones de alta energı́a de los hidrógenos
del NADH y del FADH2 son transferidos a lo largo de la cadena respiratoria de la membrana mitocondrial interna,
la energı́a que se libera cada vez que pasan de una molécula transportadora a la siguiente es utilizada para bombear
protones a través de la membrana interna, desde la matriz mitocondrial hasta el espacio intermembranoso. Esto genera
un gradiente electroquı́mico de protones a través de la membrana mitocondrial interna, y el flujo de H+ a favor de
este gradiente es utilizado mediante una enzima ligada a la membrana, la ATP sintasa, para impulsar la conversión de
ADP en ATP, completando la fosforilación oxidativa.
95
Paso de los electrones a través de los tres complejos enzimáticos respiratorios.
La sı́ntesis de ATP se realiza cuando el rotor cambia conformacionalmente a las unidades beta del complejo
ATP-sintasa
96
Parte XVI
Matriz extracelular y moléculas de ahesión celular
Los tejidos no están formados únicamente por células. Una buena parte de su volumen lo constituye el espacio
extracelular, el cual está ocupado por una intrincada red macromolecular que constituye la Matriz extracelular. Esta
matriz se compone de polisacáridos y proteı́nas muy diversas, secretadas localmente y ensamblados en una red compleja
en ı́ntima asociación con la superficie celular. La matriz está formada por tejido conectivo.
Las variaciones en cuanto a la participación relativa de las distintas macromoléculas de la matriz ası́ como los patrones
de organización dan lugar a una larga diversidad de formas, cada una de las cuales está altamente adaptada a los
requerimientos funcionales de cada tejido en particular. La matriz puede calcificarse y formar estructuras oseas o puede
se transparente como en el caso de la córnea, etc.... Entre el tejido epiteliar y el tejido conjuntivo, la matriz forma una
lámina basal, que juega un papel importante en el control del comportamiento celular (tejidos epiteliares). Podemos,
además, encontrar ECM en el tejido nervioso (que guı́a el comportamiento y largo del axón.
3. Proteoglicanes.
Estructura de una molécula de colágeno: Cada α-hélice está constituida por secuencias de prolina(x) e hidroxiprolina
(y). La glicina es el único aminoácido pequeño que puede ocupar el eje de la triple hélice.
Las fibras de colágeno son sintetizadas por los fibroblastos y se organizan en haces perpendiculares:
97
Organización celular del colágeno en la ECM.
Hasta el momento, se han identificado unas 25 cadenas de α-hélice, cada una codificada por un gen diferente. En los
diferentes tejidos se expresan diversas combinaciones de estos genes. La fibra de colágeno, finalmente, se compone de la
unión 3 cadenas. Hasta el momento se han identificado 15 moléculas distintas de colágeno.
Colágeno tipo IV: Es también denominado colágeno formador de redes. Estas moléculas se unen en una especie de
lámina o red que constituye la mayor parte de la lámina basal madura.
59.1.2. Elastina:
Muchos tejidos de los vertebrados, como la piel o los vasos sanguı́neos han de ser elásticos y resistentes a la tensión
para ser funcionales. Una red de fibras elásticas en la ECM de estos tejidos les confiere la capacidad de recobrar su
conformación inicial después de una deformación transitoria. Intercaladas con las fibras elásticas, se encuentran largas
fibras de colágeno (inelástico), que limitan la capacidad de extensión, evitando el desgarro tisular.
Al contrario del colágeno, la elastina es una estructura hidrófóbica que tiene una forma globular, unida entre sı́ por
puentes disulfuro.
Las moléculas de elastina están unidas entre sı́ mediante enlaces covalentes dando lugar a una red entrecruzada. El
modelo muestra cómo cada molécula de elastina puede expandirse y contraerse como una espiral al azar, de modo que el
conjunto de la red también puede hacerlo.
La elastina está constituida en su mayor parte por dos tipos de segmentos cortos que alternan a lo largo de la cadena
polipeptı́dica:
98
59.2. Proteı́nas no Fibrilares:
59.2.1. Fibronectina:
La ECM contiene varias proteı́nas adhesivas diferentes del colágeno que tı́picamente presentan varios dominios, cada
uno de los cuales tiene lugares especı́ficos de unión para otras macroméculas de la matriz y para receptores de la superficie
celular. De esta forma estas proteı́nas facilitan tanto la organización de la matriz como el anclaje de las células a la
matriz. La fibronectina es una glucoproteı́na organizada en un dı́mero compuesto por dos subunidades muy largas
unidas mediante un par de enlaces disulfuro situados cerca del extremo carboxilo terminal. Cada subunidad está plegada
en una serie de dominios semejantes a un rodillo, funcionalmente distintos, separados por regiones flexibles de la cadena
polipeptı́dica.
modelo, micrografı́a y estructura de la fibronectina. En la segunda imagen se ilusta un sitio de unión a una fibra de
colágeno y la interacción de anclaje con la célula.
Integrinas: Familia de proteı́nas con subunidad alfa y beta .De cada subunidad hay distintos genes que codifican para las
integrinas. Se forma un dı́mero con dominio extracelular que reconoce las moléculas de matriz, y el dominio intracelular
hace contacto con elementos del citoesqueleto como filamentos de actina.
59.2.2. Laminina:
La láminina es un gran complejo flexible formado por tres cadenas polipeptı́dicas, dispuestas en forma de cruz y unidas
mediante enlaces disulfuro. Como muchas otras proteı́nas de la matriz extracelular, también presenta varios dominios
funcionales: uno de unión al colágeno IV, otro al heparán sulfato, otro a la entactina y dos o más a los receptores de la
laminina situados en la superficie celular.
La encactina, se une a cada molécula de laminina en el lugar donde los brazos cortos se unen con los largos. La entactina
también se une al colágeno IV, por lo que se cree que actúa como un puente adicional entre el colágeno IV y la red de
laminina de la lámina basal.
Laminina
59.3. Proteoglicanes:
Están formados por una proteı́na central y de manera covalente de glicosaminoglicanos o GAGs. Se unen de forma
covalente a un proteı́na Core o nuclear. Hay proteoglicanos que son exclusivos de ECM o proteoglicanes cuyo core es una
proteı́na de transmembrana. También hay proteoglicanos con una modificación lipı́dica cuyo core se ancla a la membrana
celular. Aparte de ser una molécula de matriz, son reservorios para factores de crecimiento. (Inducen proliferación celular).
En general, los proteoglicanes se diferencian fácilmente de otras glucoproteı́nas por la naturaleza, cantidad y organi-
zación de sus cadenas laterales de glúcidos: por definición, por lo menos una de las cadenas sencillas de azúcares de un
proteoglicano ha de ser un GAG (glucosaminoglucanos). Normalmente la proteı́na central de los proteoglucanos es una
glucoproteı́na.
99
Estructura de un proteoglicano básico
100
La primera imagen muestra las diversas interacciones entre célula-célula y célula-ECM. La segunda muestra un esquema
de un epitelio que forma una monocapa que está interconectada por plasmodesmos a través filamentos intermedios. Bajo
el epitelio está la lámina basal que separa el epitelio del tejido conectivo.
Sobre la lámina basal, el epitelio sobre ésta, puede organizarse de 5 formas diferentes:
101
61.1. Uniones estrechas:
A pesar de las grandes diferencias estructurales y bioquı́micas entre los tipos de epitelios, todos tienen, como mı́nimo,
una importante función común: constituir barreras selectivas de permeabilidad, separando fluidos de diferente com-
posición. Las uniones estrechas juegan un importante doble papel en el mantenimiento de esta función de barrera
selectiva; el ejemplo más clásico es el epitelio instestinal de los mamı́feros (separando la región apical de la basolateral).
Modelo actual de las uniones estrechas: Se postla que las hebras de sellado que mantienen unidas las membranas
plasmáticas están constituidas por hebras continuas de proteı́nas transmembrana, las cuales establecen contacto a través
del espacio intercelular, dando lugar a su sellado. Esta unión continua está establecida por acción de proteı́nas ocludinas
y claudinas.
Las uniones estrechas forman un cinturón de hebras entrecruzadas que rodea la membrana de cada célula.
En cada célula puede observarse un haz de fibras de actina, contráctil, que se encuentra adyacente a la banda de
adhesión, que corre paralelo a la membrana plasmática. Los haces de actina se encuentran interconectados a través de
las cadherinas y proteı́nas de unión, formando una extensa red transcelular. Se cree que la contracción de esta red, que
depende de proteı́nas motoras como la miosina, puede ser mediadora en la morfogénesis animal:
102
61.2.2. Desmosomas:
Los desmosomas (que ya hicieron su primera aparición en la materia pasada) son contactos intercelulares puntifor-
mes que mantienen unidas a las células. En el interior de las células actúan como lugares de anclaje para filamentos
intermedios, los cuales forman una red estructural en el citoplasma proporcionando una cierta rigidez. Mediante estas
uniones los filamentos intermedios de las células adyacentas están indirectamente conectados formando una red continua
que se extiende a todo el tejido. El tipo especı́fico de filamentos intermedios anclados a los desmosomas depende del tipo
celular. La queratina en la mayorı́a de las células epiteliales y desmina en las fibras musculares cardiacas:
Desmosomas :D
61.2.3. Hemidesmosomas:
Los hemidesmosomas, semejantes morfológicamente a los desmosomas, difieren tanto a nivel funcional como bioquı́mi-
co. En lugar de unir las membranas de células adyacentes, unen el dominio basal de las células y la lámina
basal.
Hemidesmosomas
Las uniones tipo gap están organizadas en base a proteı́nas transmembrana, que forman estructuras denominadas
conexones. Cuando los conexones de las membranas plasmáticas de 2 células están alineados, forman un canal acuoso
continuo que conecta ambos citoplasmas. Los conexones entran en contacto de tal manera que las membranas plasmáticas
implicadas se encuentran separadas por una hendidura. Estos conexones están compuestos por un anillo de 6 subunidades
proteicas denominadas conexinas. Las uniones tipo hendidura permiten el paso de moléculas pequeñas entre
células adyacentes.
103
Gap Junctions. Dos conexonesunidos a través del espacio intercelular dan lugar a la formación de un canal acuoso
continuo entre ambas células.
104
Parte XVII
Tarea 1: ¿Por qué el ADN contiene Timina en vez
de Uracilo?
A. Desaminación de la Citosina y corrección en el ADN mediante enzimas
En la mayorı́a de las especies animales las pirimidinas son degradadas a amoniaco y urea. Pueden ser también utilizadas
como precursores de la biosı́ntesis de β-alanina, y por tanto de la coenzima A. La principal ruta de degradación de la
citosina y del uracilo se muestra de la siguiente manera:
Desaminación de la citosina.
La citosina del DNA a diferencia del nucleótido libre, se desanima espontáneamente para formar uracilo, la desaminación
de la citosina es potencialmente mutagénica porque el uracilo se empareja con la adenina y ası́ una de las hebras hijas
contendrá la pareja AU en vez de la copia original.
Esta mutación puede evitarse por un sistema de reparación que reconoce al uracilo como una base extraña al DNA. En
primer lugar, una uracilo-DNA glicosidasa hidroliza el enlace glicosı́dico entre el uracilo y la desoxirribosa y se genera
un hueco debido a la falta del uracilo denominado lugar AP porque es apurı́nico (libre de A o G) o apirimidico (libre de
C o T). Posteriormente una endonucleasa AP reconoce este defecto y corta una de las hebras justo al lado de la base
que falta.
Posteriormente la DNA polimerasa 1 corta el fragmento de desoxirribosa fosfato residual e inserta citosina. Por último
la hebra reparada se cierra por acción de la DNA ligasa.
105
Reparación debido a la desaminación de la citosina en el ADN
La uracilo-DNA glicosidasa no elimina la timina del DNA. Ası́ pues, el grupo metilo de la timina constituye una
etiqueta que la distingue de la citosina desaminada. Si esta etiqueta faltase, serı́a imposible distinguir el uracilo
real del uracilo formado por desaminación lo que evidentemente generarı́a mutaciones incorregibles. Esta mutacion, se
evita por un sistema reparador que localiza el uracilo y deja solo a la timina. La timina se utiliza en vez del uracilo
en el DNA para asegurar la fidelidad del mensaje genético. Por el contrario, el ARN no se repara y por eso
utiliza uracilo, porque es un componente menos costoso.
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