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ANÁLISIS CLÍNICOS
DETERMINACIÓN DE TIEMPO DE COAGULACIÓN, TIEMPO DE
PROTROMBINA Y TIEMPO DE SANGRÍA O HEMORRAGIA
INTEGRANTES:
PROFESOR:
Q.F. Eduardo Flores Juarez
DÍA DE LABORATORIO: Jueves 10:00-2:00 PM
SEMESTRE: 2016-1
ÍNDICE
Introduccion
Objetivos
Discusiones
Conclusiones
Referencias Bibliográficas
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DETERMINACIÓN DE TIEMPO DE COAGULACIÓN
INTRODUCCIÓN
El sistema hemostático está implicado en el sistema de defensa del organismo que es
esencial para la vida. Por una parte, impide tanto la pérdida de sangre como las
alteraciones del flujo sanguíneo y contribuye a la reparación del daño tisular y vascular.
Además, participa en la formación de nuevo tejido conectivo y en la revascularización.
Está integrado por una serie de reacciones bioquímicas que se llevan a cabo en la
interfase sangre-endotelio. Ante una agresión vascular, se produce una serie de
acontecimientos que tratarán de evitar la pérdida de sangre mediante la
vasoconstricción, la agregación de plaquetas en el lugar de la lesión, la activación de los
factores de la coagulación, que darán lugar a la formación de un coágulo; y
posteriormente, la actuación del sistema fibrinolítico en la disolución del coágulo y
restitución de la integridad del endotelio. Durante este proceso participan diferentes
factores o componentes, necesarios para el mantenimiento de una hemostasia normal,
tales como: el vascular, el plaquetario, los plasmáticos y los fibrinolíticos, con sus
factores e inhibidores.
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DETERMINACIÓN DE TIEMPO DE COAGULACIÓN
OBJETIVOS
Determinar el tiempo de coagulación por el método de Lee White.
Evaluar la vía extrínseca mediante el tiempo de protrombina por el método
de Quick.
Evaluar la vía intrínseca mediante el tiempo de tromboplastina parcial
activada (APTT).
Determinar el tiempo de sangrado por la técnica de Duke
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DETERMINACIÓN DE TIEMPO DE COAGULACIÓN
MARCO TEÓRICO
FISIOLOGIA DE LA HEMOSTASIA Y COAGULACION SANGUINEA
a) Adhesión Plaquetar.
b) Agregación Plaquetar.
3º- Coagulación Plasmática.
4º- Fibrinólisis.
HEMOSTASIA PRIMARIA
Ante una lesión vascular, el estímulo del vaso afectado provoca una vasoconstricción
local refleja, lo que reduce al instante la salida de sangre por la zona rota. Al mismo
tiempo las plaquetas se adhieren al colágeno del subendotelio de la pared vascular
dañada, produciéndose la adhesión plaquetar; necesitándose la Glicoproteína I (GP-I)
de la membrana plaquetar y el Factor von Willebrand (FvW), el cual actuaría como una
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DETERMINACIÓN DE TIEMPO DE COAGULACIÓN
COAGULACIÓN PLASMÁTICA:
La coagulación plasmática consiste en una serie de reacciones que tiene por fin
trasformar una proteína soluble (Fibrinógeno), en otra insoluble (Fibrina) por acción de
la trombina.
En los años sesenta dos grupos (Mc Farlane y Ratnoff) propusieron la llamada
cascada enzimática de la coagulación, que consistía en una secuencia de pasos, donde
la activación de un factor de la coagulación conducía a la activación de otro hasta
entonces inactivo y así sucesivamente hasta llegar a la formación de trombina. Su
velocidad de interacción se acelera enormemente cuando se absorben y concentran en
una superficie. In vivo, son los fosfolípidos plaquetares los principales responsables de
esta función. Algunos de estos factores (Va, VIIIa) actúan como cofactores, acelerando
las reacciones hasta 1.000 veces.
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DETERMINACIÓN DE TIEMPO DE COAGULACIÓN
Casi todos los factores de la coagulación se sintetizan en el hígado. De ellos los Factores
II, VII, IX y X son las serinproteasas (contienen el aminoácido serina en la zona activa de
la molécula), así como la Proteína C y su cofactor la proteína S, necesitan para su síntesis
la presencia de vitamina K
La vía intrínseca se inicia con la fase de contacto, al ponerse en contacto el plasma con
una superficie extraña, cargada negativamente, fibras de colágeno, cristal o caolín. El
FXII se activa parcialmente y actúa sobre la precalicreína formando calicreína, está junto
al quininógeno de alto peso molecular, intervendría amplificando la activación del FXII,
el cual actuaría sobre el FXI produciendo FXIa, este activaría el FIX pasando a FIXa, el
cual provocaría la activación del FX.
La vía extrínseca se inicia con la unión del FVIIa con el Factor Tisular (FT), formando el
complejo FT-FVIIa, constituyendo en condiciones fisiológicas el inicio de la coagulación.
Una vez formado el complejo FT-FVIIa, la cascada de la coagulación puede seguir dos
caminos: uno de ellos es la activación del FIX; el otro camino es la activación directa del
FX. El FXa también es capaz de activar al FIX, acelerando el proceso de formación del
FIXa. En condiciones normales, el complejo FT-FVIIa es responsable de inicial la
generación de FXa, el cual proporciona suficiente trombina para inducir la agregación
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DETERMINACIÓN DE TIEMPO DE COAGULACIÓN
local de las plaquetas y activación de los cofactores FV y FVIII. Sin embargo, el FXa
producido por el complejo FT-FVIIa se encuentra amortiguado por el inhibidor del Factor
Tisular (FTI), siendo insuficiente para sostener la hemostasia y debe ser amplificado por
la acción del FIXa y FVIIIa para finalizar y que persista la hemostasia.
El FXa formado por cualquiera de las dos vías mencionadas, forman a su vez un complejo
con el FVa y el FII (Protrombina) trasformándolo a FIIa (Trombina).
FIBRINÓLISIS
Las enzimas del sistema fibrinolítico (como algunos de los factores de la coagulación)
son serinproteasas. La plasmina es la enzima encargada de producir la lisis de la fibrina,
la cual se encuentra en el plasma en forma de precursor inactivo el plasminógeno, que
es activado por el activador del plasminógeno de tipo tisular (t-PA) y el activador del
plasminógeno de tipo urinario (u-PA).
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DETERMINACIÓN DE TIEMPO DE COAGULACIÓN
La lisis del trombo se inicia cuando el t-PA es liberado por el endotelio, fijándose
a la fibrina del trombo. Después el t-PA actuará sobre el plasminógeno convertiendolo
en plasmina, que lisará la fibrina. La alfa-2-antiplasmina, inhibidor de la plasmina y el
inhibidor del activador del plasminógeno tipo-1 (PAI-1), principal inhibidor del t-PA,
juegan un papel importante en la regulación de la fibrinólisis.
INHIBIDORES DE LA COAGULACION
Todas las vías de activación descritas están reguladas por proteínas inhibidoras. Por una
parte están las serpinas (serine-protease-inhibitors) que inhiben las serínproteasas, de
la coagulación (AT-III, Cofactor II de la heparina), de la fibrinólisis (Antiplasmina, PAI-I) o
de otros sistemas (C1-inhibidor, antitripsina) y por otra parte se encuentra el inhibidor
de la Proteina C activada y el inhibidor del Factor Tisular (FTI):
Antitrombina-III (AT-III) inhibe la trombina, FXIIa, FXIa, FXa y FIXa,
el Cofactor II de la heparina, es un inhibidor selectivo de la trombina y al igual que la
AT-III su actividad aumenta considerablemente en presencia de heparina.
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DETERMINACIÓN DE TIEMPO DE COAGULACIÓN
aumenta los niveles de FTI, sugiriendo que una parte de su efecto anticoagulante puede
ser mediado por FTI.
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DETERMINACIÓN DE TIEMPO DE COAGULACIÓN
Determinación
del tiempo de Método de Sabrazés
coagulación
Método de Burker
Para la prueba Lee White la muestra se obtiene por punción venosa, y mide el tiempo
que se demora una muestra de sangre entera sin ningún anticoagulante en coagularse
al ponerse en contacto con el tubo de vidrio. El tiempo varía si se realiza en un tubo de
vidrio o de plástico. En los tubos de plástico se activan los factores XII y XI y se reduce la
acción de los trombocitos, por esto el periodo se alarga. El tiempo de coagulación
aumentado indica un evidente trastorno de del sistema intrínseco o una marcada
trombocitopenia.
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DETERMINACIÓN DE TIEMPO DE COAGULACIÓN
Método de Sabrazés
Para la prueba de Sabrazés la muestra de sangre se obtiene por la punción del dedo y
mide el tiempo que se demora una muestra de sangre entera sin ningún anticoagulante
en coagularse en un tubo capilar de 1 mm de diámetro, ya que se observa la formación
de los hilos de fibrina al romper el tubo capilar.
Método de Burker
Tiempo de
Método de Quick
protrombina
Método de Quick
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DETERMINACIÓN DE TIEMPO DE COAGULACIÓN
Tiempo de sangrado
Método de
Tiempo de Duke
sangrado Método de
Ivy
Esta prueba mide el tiempo que transcurre desde que se realiza con una lanceta una
pequeña incisión en el lóbulo de la oreja hasta que se detiene el sangrado. Este
procedimiento se realiza para diagnosticar ciertos padecimientos hemorrágicos, antes
de realizar operaciones quirúrgicas o antes de efectuar una punción en el hígado o el
bazo.
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DETERMINACIÓN DE TIEMPO DE COAGULACIÓN
Método de Ivy
Valores De Referencia
Significado Clínico
La medida del tiempo de APTT, es la determinación más común junto con la PT, sirve
para determinar trastornos de la coagulación y es particularmente sensible a los
defectos de la coagulación intrínseca (Factores VIII, IX, XI, XII). Se usa normalmente para
la monitorización de las terapias anticoagulantes con heparina. El diagnóstico clínico
debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio. 4
Interferencias
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DETERMINACIÓN DE TIEMPO DE COAGULACIÓN
Papel filtro
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DETERMINACIÓN DE TIEMPO DE COAGULACIÓN
Cloruro de calcio
Asa de Muestra biológica
0.025 mol/L
Cronómetro
(sangre)
laboratorio
4.3 Procedimiento
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La muestra fue tomada del brazo Se le agregó 0.5 ml de Al retirar el tubo se observa la
de un integrante del equipo aprox. anticoagulante (citrato de separación del plasma, se procede a
4.5 mL de sangre, la muestra se sodio) y se lleva a centrifugar colocar 100 ul del sobrenadante
deposito en un tubo vacutainer. a 3500 rpm por 10 minutos (plasma) en un tubo de ensayo,
luego se le agregó 100 ul de reactivo
APTT
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DETERMINACIÓN DE TIEMPO DE COAGULACIÓN
RESULTADOS
Tabla 1: resultados de los diferentes
metodos
Análisis Valores obtenidos Valores referencia
Tiempo de coagulación 7 min y 35 seg 6 -8 min
DISCUSIÓN
Las plaquetas son las células sanguíneas encargadas de participar en la formación del
coagulo, por ello son importantes en la hemostasia, incluso es uno de los cinco factores
que participan en la hemostasia: las cuales son tejido vascular, factores vasculares,
plaquetas, leucocitos y factor fibrinoliticos. Aquí hay que tener en claro que los factores
de la coagulación son diferentes a los factores de la hemostasia.
El tiempo de sangrado una prueba evaluada con el método de Duke pero no es el único
método; se mide determinando el tiempo necesario para que dejen desangrar los
pequeños vasos subcutáneos que han sido lesionados por una Incisión estandarizada.
El método de Duke, el cual es uno de los más antiguos, consiste en hacer una punción
del lóbulo dela oreja con una lanceta estéril. La desventaja de este método es que es
muy difícil estandarizar la profundidad de la incisión. Además, si el paciente tiene un
serio problema hemorrágico, el sangrado en el tejido celular blando del lóbulo de la
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DETERMINACIÓN DE TIEMPO DE COAGULACIÓN
oreja puede causar un hematoma grande, pero en la práctica fue todo lo contrario a
diferencia de los demás grupos, pues se determinado que el tiempo de sangrado fue
mínima, incluso inferior al valor de regencia, esto es muy bueno es un indicador de la
buena respuesta de la coagulación.
CONCLUSIONES
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DETERMINACIÓN DE TIEMPO DE COAGULACIÓN
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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DETERMINACIÓN DE TIEMPO DE COAGULACIÓN
ANEXOS
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DETERMINACIÓN DE TIEMPO DE COAGULACIÓN
SIGNIFICACIÓN CLÍNICA
El fenómeno de la coagulación puede desencadenarse por una “vía extrínseca” (lesión tisular) o
por una “vía intrínseca” (contacto de la sangre con epitelios distintos del vascular normal). La
determinación del Tiempo de Protrombina o Tiempo de Quick es una prueba global para evaluar
la coagulación extrínseca, siendo sensible a: factor II o protrombina, factor V o proacelerina,
factor VII o proconvertina y factor X o Stuart-Prower. Por lo tanto la determinación se aplica a: -
estudios de rutina en los análisis prequirúrgicos; - detección de alteraciones en los niveles de
uno o más factores involucrados en la vía extrínseca; - control de la terapéutica con
anticoagulantes orales.
Este ensayo se basa en la medida del tiempo que tarda en coagular un plasma descalcificado,
colocado a 37o C y en presencia de un exceso de tromboplastina tisular y calcio. El método no
detecta deficiencias de factores de la vía intrínseca (VIII, IX, XI y XII).
Se extrae sangre del paciente e introduce en un tubo de ensayo, se introduce oxalato o citrato
de sodio para neutralizar el Ca++ y así evitar la coagulación.
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DETERMINACIÓN DE TIEMPO DE COAGULACIÓN
El factor tisular (III) utilizado procede de tejidos humanos y diferentes lotes de este
pueden tener diferente actividad. Esto, junto a los diferentes sistemas analíticos
usados, pueden variar bastante el resultado del Tiempo de Protrombina incluso en
la misma persona. Para normalizar estas medidas se usa el INR (cociente
internacional normalizado).
El INR se calcula haciendo el cociente entre el TPT del paciente y el TPT estándar
normal y eleva al ISI.
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DETERMINACIÓN DE TIEMPO DE COAGULACIÓN
El INR se utiliza para valorar el efecto del tratamiento con acenocumarol (Sintrom)
o warfarina (Aldocumar).Estos fármacos inhiben la formación de factores de la coagulación
vitamina K dependientes (factores II, VII, IX y X).
Como el factor VII es el que se afecta más precozmente, la vía extrínseca es la más útil para
medir su efecto.
El objetivo del tratamiento con acenocumarol o warfarina son valores de INR entre 2 a 3.Si
es mayor (INR 4 ó 5), hay más riesgo de hemorragia y si es menor, nos estamos quedando
cortos con el tratamiento. Si es un INR 0'5, hay más riesgo de producción de coágulos. El
índice de Quick es inversamente proporcional al TPT y al INR, pero el INR es el más utilizado.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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