Professional Documents
Culture Documents
Aprobado: 27-dic-2016
ARTÍCULO ORIGINAL
Las aguas termales no son estériles, poseen una microbiota reflejo de sus características fisicoquímicas extremas. Existen evidencias que esta
microbiota puede ser el reservorio de genes de resistencia a los antibióticos, denominados resistomas ambientales. Por ello, el objetivo del presente
trabajo fue estudiar la microbiota bacteriana del agua del Balneario Termas la Merced, ubicado cerca de la Ciudad de Quito, Ecuador, con el fin de
aislar e identificar las bacterias presentes y determinar sus patrones de resistencia a los antibióticos. Se recolectaron muestras de agua termal, tanto 33
de la zona de emergencia, como de las piscinas utilizadas por los bañistas durante los meses de julio a diciembre del 2015. Se realizó el aislamiento
bacteriano, utilizando las placas de PetrifilmTM, para bacterias aerobias mesófilas La identificación de las colonias bacterianas se realizó de acuerdo
a las pruebas sugeridas por MacFaddin (2003) y Barrow y Feltham (1993), suplementadas con las pruebas de identificación bacteriano MicrogenTM.
Los perfiles de susceptibilidad a antibióticos se realizaron utilizando el método de Kirby Bauer. Se identificaron 13 clones bacterianos,
correspondientes a las especies Brevundimonas diminuta, Aeromonas schubertii, Budvicia aquatica, Acinetobacter haemolyticus, Bacillus spp,
Citrobacter amalonaticus, Pseudomonas stutzeri y Xenorhabdus beddingii. Todos los aislados mostraron resistencia al menos a un antibiótico. El
mayor número de resistencias (4 antibióticos) lo exhibieron cepas de la especie Brevundimonas diminuta. Todos los aislados mostraron resistencia a
la Cefalotina. Se demuestra que estas aguas poseen una microbiota bacteriana característica y la presencia de resistomas ambientales.
Abstract
The thermal waters are not sterile they possess a microbiota reflecting their physicochemical extreme characteristics. There is evidence that this
microbiota may be the reservoir of antibiotic resistance genes, termed environmental resistomas. Therefore, the objective of the present work was to
study the water bacterial microbiota of the Termas la Merced Spa, located near the City of Quito, Ecuador, to isolate the bacteria and determine the
resistance patterns to antibiotics. Thermal water samples were collected from both the emergency area and the swimming pools used by bathers for
a period of 6 months between July and December 2015. The isolate of the mesophilic aerobic bacteria using the Petrifilm ™ plates. Identification
of bacterial colonies was performed according to the tests suggested by MacFaddin (2003) and Barrow and Feltham (1993), supplemented with
MicrogenTM bacterial identification tests. Antibiotic susceptibility profiles were performed using the Kirby Bauer method. A total of 13 bacterial
clones corresponding to Brevundimonas diminuta, Aeromonas schubertii, Budvicia aquatica, Acinetobacter haemolyticus, Bacillus spp, Citrobacter
amalonaticus, Pseudomonas stutzeri and Xenorhabdus beddingii were identified. All isolates showed resistance to at least one antibiotic.
The highest number of resistance (4 antibiotics) was exhibited by Brevundimonas diminuta strains. All isolates showed resistance to Cephalothin.
It is demonstrated that these waters possess a characteristic microbiota and the presence of environmental resistomas.
Keywords: Hot springs. microbiota. resistomas
FIGEMPA: Investigación y Desarrollo, ISSN 1390-7042/ Año V / Volumen 2 / Número 7 / Quito, Enero 2017 / Periodicidad semestral
En atención a lo mencionado, y al hecho de que a De las bacterias crecidas en las placas Petrifilm,
pesar que Ecuador posee una gran cantidad y variedad de se seleccionaron al menos un representante de cada
fuentes termales, que son utilizadas con fines terapéuticos uno de los tipos de colonias obtenidas, de acuerdo a las
características macroscópicas exhibidas, y se inocularon pudo aislar e identificar un total de 13 clones bacterianos
en cajas Petri con agar Mueller Hinton, incubando durante (Tabla 1) de los cuales el mayor número correspondió a
24 horas a 35 °C. El proceso de repique se repitió al la especie bacteriana Brevundimonas diminuta con cuatro
menos tres veces para obtener un aislado bacteriano aislados identificados, seguida por las especies Aeromonas
estable, posteriormente estos aislados fueron sometidos a schubertii y Budvicia aquatica, con dos aislados cada una,
un re-aislamiento para obtener clones puros, aplicando la seguidas por las especies Acinetobacter haemolyticus,
técnica de siembra por agotamiento [6]. Bacillus spp, Citrobacter amalonaticus, Pseudomonas
stutzeri y Xenorhabdus beddingii, con un aislado.
Identificación de los aislados bacterianos
Tabla 1.
Sobre las colonias bacterianas aisladas y purificadas,
se procedió a realizar la tinción de Gram, la prueba de Identificación de los aislados bacterianos
la oxidasa, catalasa, así como una serie de pruebas
fisiológicas y bioquímicas para cada tipo de bacterias NÚMERO DE
ESPECIE
aisladas [7,8] para identificarlas, de ser posible, hasta CLONES
el nivel de especie y en los casos en que fue necesario 4 Brevundimonas diminuta
se realizó su identificación utilizando el sistema de
1 Citrobacter amalonaticus
identificación bacteriano MicrogenTM GN-ID [6,7,8]
1 Bacillus spp.
Determinación del perfil de susceptibilidad a diversos
antibióticos 2 Aeromonas schubertii
1. Introducción
Todos los aislados fueron sensibles a los antibióticos Brevundimonas
ese coeficiente al 112%y en especial
equivale a reducirPseudomonas,
aproximadamentecomo en un
Trimetoprim/sulfametoxazol, microbiota común en estos ambientes acuáticos
mismo porcentaje el tamaño y las inversiones anuales de las obras [13, 14,
El suministro de agua por parte Gentamicina y Ceftriaxona,
del Sistema Papallacta-Bellavista 15], resultados coincidentes conqueloslos
resultados
mientras que requiere la ciudad. Es evidente beneficiosobtenidos en
aquí descritos
al Centro que antedelaQuito
y Norte Cefalotina todos los
ha alcanzado aislados bacterianos
un promedio anual de 2,4 el presente trabajo.
mostraron resistencia. serán mucho mayores si los pronósticos de la demanda de agua
m /s, lo cual implica que en cerca de 2 o 3 años más, la ciudad
3
potable
La se aplican en otras
evaluación de laciudades y lugares
resistencia del país; por lo
a antibióticos detanto,
los
estará utilizando permanentemente toda la capacidad instalada de
TABLA 2 asilados bacterianos
esta investigación mostró
aplicada, pioneraunen comportamiento variadoa
nuestro medio, contribuirá
conducción de agua cruda y potabilización en la Planta de Tratamiento
(Tablas
la gestión2 eficiente
y 3). Todos los aislados mostraron resistencia al
del agua.
deAntibiograma
Bellavista [3; de
12].los
Enaislados
estas condiciones se producirán
bacterianos horas y/o
Gram negativos menos a un antibiótico y se evidenció la presencia de cepas
días con déficit en el suministro, razón por la cual la EPMAPS, a más bacterianas multiresistentes al menos a 2 antibióticos, lo
de construir nuevas tuberías de conducción y de ampliar la planta Por loconstituye
cual expuesto, esta propuesta
un riesgo de la
para investigación
salud de lasplantea aplicar que
personas a las
de tratamiento, ha previsto gestionar la demanda de agua mediante condiciones
acuden de Quito
a estos la teoría depor
manantiales loslamodelos de predicción
posibilidad de de-
de infectarse
el uso de un “Sistema de Pronóstico de Demanda de Agua Potable” manda
con máxima
estas cepas. de agua potable con horizontes de cortísimo, corto,
que permita conocer con anticipación los requerimientos de agua y mediano y largo plazos, para lo cual se aprovecharán las medicio-
Resultados
nes realizadas porsimilares
la EPMAPSa durante
los encontrados en el años
los últimos cuatro presente
en la
programar la forma más eficiente de satisfacerlos. trabajo, sobre todo en el caso de las bacterias de los géneros
Planta de Bellavista.
Aeromonas, Brevundimonas y Pseudomonas, han sido
Los pronósticos sobre la demanda de agua que requiere el suministro reportados por autores en diversos manantiales de aguas
de agua potable de Quito abarcan el corto, mediano y largo plazos. La investigación
termales del mundoaplicada
[4, para
16, 17,desarrollar
18, 19,el20].
modelo de pronóstico
Así, la operación de las plantas de tratamiento exige pronósticos a se apoyará en métodos clásicos (análisis de Fourier, modelos esto-
nivel horario, diario y semanal [14; 19]; mientras que la operación De yigual
cásticos) forma, otras
posiblemente los resultados muestran (redes
propuestas matemáticas una gran neu-
prevalencia en estas aguas de bacterias multiresistentes
ronales, análisis fuzzy, etc.) para prever la demanda de agua potable a
y manejo de los embalses demandan pronósticos semanales, antibióticos de uso cotidiano, tanto en medicina humana,
mensuales, estacionales y anuales [9; 18]. Esta contribución de en el corto, mediano y largo plazos en Quito. Para la calibración y
como en la medicina veterinaria. Esto indicaría un uso
los modelos predictivos a la operación y gestión es particularmente validación de los
inadecuado de modelos se cuenta
antibióticos en laconzonacuatrodeaños de medicio-
estudio o la
importante cuando la capacidad de producción de agua está en nes, realizadas cada 15 minutos en Bellavista,
posibilidad de una trasferencia horizontal de genes la mayor planta de
entre
su punto límite, por cuanto al prever con suficiente antelación tratamientopatógenas
bacterias de agua potable de Quito,en
que ingresan asíestos
como ecosistemas
mediciones com- por
las demandas (máximas, medias y mínimas), se puede: reducir medio de lasenpersonas
plementarias otras plantas enfermas
menores.que acuden a ellas para
restablecer su salud, y las bacterias autóctonas propias de
los fallos en el suministro, programar las entregas de agua por los
estas aguas [4]
Se estudiarán y cuantificarán las relaciones de la demanda de agua
embalses, optimizar el bombeo y el consumo de energía, planificar
potable
En los últimosmeteorológicos
con factores años se ha(temperatura
acuñado del el aire,
términoradiación
de
la adquisición de químicos y otros insumos, reducir las pérdidas y
solar, número de
Resistomas paradíasdesignar
consecutivos secos, etc.)
aquellos y aspectos sociales,
ecosistemas donde
fugas, evitar riesgos, etc.
como
se halosgenerado
patrones deporconducta
presiónde la poblaciónun
selectiva, durante las festivi-
acumulo de
Los pronósticos de largo plazoTabla
encuentran
3 especial aplicación en la genes
dades. deLosresistencia
resultados deantimicrobiana; no está claro
la investigación contribuirán aún sila
a optimizar
planificación y diseño de las obras ya que la capacidad de los futuros estos Resistomas
operación y costos de sonla producción
el productodede un potable,
agua procesoa la evolutivo
vez que
Antibiograma
proyectos debedel aislado bacteriano
seleccionarse Bacillus
considerando spp.
las demandas reales y bacteriano,
coadyuvarán ao elevarresultado
la eficaciadelenuso indiscriminado
la gestión de las aguas de los
urbanas
40
36 antibióticos por parte de la humanidad, o de ambos procesos
otras condiciones que se producirán durante su vida útil. La magnitud en el País. Particular atención se brindará al estudio de los caudales
ANTIBIÓTICOS [21].
de los beneficios,
Nombre que tales pronósticos pueden proporcionar, puede máximos diarios y su real proporción respecto a los caudales me-
superar varios millones
OX de dólares
E CN al añoPparaKF
el casoAM
de Quito.
CIP En todo ya
dios anuales, caso,
queelenpresente
base a esatrabajo evidencia
proporción la existencia
se definen importan-
de
tes Resistomas
dimensiones y,enporlos manantiales
ende, los costos de deconducciones,
aguas termales, que
estaciones
EstaBacillus
estimación R
spp.se sustenta S S R
en las mediciones deRlos últimos
R años S que debería tenerse en cuenta al momento de indicar estas aguas
de bombeo, plantas de tratamiento, equipos y otros componentes
laResistente:
EPMAPS realiza cada 15 minutos de los caudales entregados por a pacientes con problemas inmunológicos o en tratamiento
R; Sensible: S; No determinado: ND de la infraestructura de agua potable. Esta investigación creará la
la Planta de Tratamiento de Bellavista; esas mediciones demuestran con drogas supresoras inmunológicas y que, además, estaría
base para launa
indicando formación de jóvenes
contaminación investigadores
moderada de estasen laaguas.
Universidad
Por
que el caudal máximo diario de la demanda supera sólo en el 12%, Central en gestión de los recursos hídricos.
otra parte, se encuentra que en estos ecosistemas habita una
al caudal medio anual. Este porcentaje es significativamente inferior microbiota bacteriana extremofila escasa, aunque específica,
4.
al Discusión
25% que establecen diversas normas de diseño e inclusive el 2. Marco
que se haTeórico
adaptado a las condiciones fisicoquímicas extremas
Plan Las
Maestro de Agua
muestras de Potable
agua del de balneario
Quito [10; Termas
11; 12; 13; 16; 17].
la Merced, prevalente en estas aguas [21].
Si la investigación
tomadas en la aquí
zonapropuesta, confirma que
de emergencia delesemanantial,
porcentaje nodel El presente proyecto de investigación se enmarca en la aplicación
mostraron 5.
deConclusiones
modelos estocásticos y de inteligencia artificial al pronóstico de
12% puede ningún
aplicarse crecimiento
en el diseño ybacteriano.
construcción deEstelas tipo
obrasdede
resultado donde no se observa un crecimiento bacteriano
agua potable, ello implicará un ahorro en inversiones de cerca de 4 la demanda
- Se detectó de agua potable quedeconsideran
la presencia la importancia
una microbiota de los
bacteriana
puede
millonesserdedebido
USD al aaño
lasenextremas
Quito. condiciones de temperatura factores que condicionan
extremofila la demanda,
característica, aunqueel horizonte
escasa,dellográndose
pronóstico
y concentración de sales que tienen este tipo de agua y son aislar así
requerido, e identificar 13 clones
como la calidad de los bacterianos.
datos utilizadosLas enespecies
la predic-
similares a otros
Estos beneficios estudiosporde
se explican aguasdetermales,
el hecho donde
que las obras se ha
de captación
señalado crecimiento bacteriano nulo o escaso crecimiento ción.identificadas
La demanda de fueron:
agua Brevundimonas
está influenciada por diminuta,
variablesAeromo-
que son
de agua, conducciones, tuberías, plantas de tratamiento, estaciones
en algunos manantiales de aguas termales [11, 12, 13]. controlables (restricciones físicas del sistema, precio del agua,hae-
nas schubertii, Budvicia aquatica, Acinetobacter etc.)
de bombeo, equipos y otras instalaciones de agua potable se están molyticus, Bacillus spp, Citrobacter amalonaticus, Pseu-
y por factores no controlables (hábitos de la población, desarrollo
Diversos
diseñando autores
con un reportan
coeficiente a los géneros
de mayoración Aeromonas,
igual al 125%. Reducir domonas stutzeri y Xenorhabdus beddingii.
económico, estado del tiempo, vacaciones, etc.), cuya incidencia es
Recibido: 03-oct-2016
- El fenómeno de multiresistencia se observó en las cepas Inglaterra. Cambridge University Press.Aprobado:
1993. p.27-dic-2016
203.
de Brevundimonas diminuta (resistente a 4 antibióticos), ARTÍCULO ORIGINAL
Bacillus spp (resistencia a 3 antibióticos), Aeromonas [9]. BAUER, A.; KIRBY, W.; SHERRY, J.; TURCK, M. (1966).
schubertii (resistencia 3 antibióticos) y Pseudomonas Antibiotic susceptibility testing; by a standardized single
stutzeri (resistencia a 3 antibióticos) y Brevundimonas disk method. Am. J. Clin. Pathol. 45: 493-496.
diminuta (resistencia a 2 antibióticos). Todos los aislados
fueron sensibles a los antibióticos Trimetoprim/sulfame- [10]. FLORES, M.; ZAVALETA, A.; CHAVEZ, E. (2010). “Bacterias
toxazol, Gentamicina y Ceftriaxona. halo tolerantes con actividad lipolíticas aisladas de las
Salinas de Pilluana-San Martín”. Ciencia e Investigación.
- Los resultados obtenidos señalan la necesidad de reali- 13 (2): 88-92.
zar estudios más extensos para determinar a nivel gené-
tico, los mecanismos de resistencia presente en las ce- [11]. DE LA ROSA, M. C., ANDUEZA, F., SÁNCHEZ, M. C.,
pas de las especies bacterianas encontradas, así como RODRÍGUEZ, C., & MOSSO, M. A. (2004). Microbiología
los mecanismos de transferencia genética involucrados. de las aguas mineromedicinales de los Balnearios de
De igual forma, implementar sistemas de vigilancia epi- Jaraba. Anal. Real Acad. Nac. Farm, 70, 521-542.
demiológica y ambiental, a través de la elaboración de
[12]. DE LA ROSA, M.C.; PINTADO GARCÍA, C.; RODRÍGUEZ FER-
mapas de riesgos para disminuir el posible impacto de
MICROBIOTA EXTREMOFILA Y RESISTOMAS
estos Resistomas en el ambiente y por ende en la salud
NÁNDEZ, C. (2015). Microbiología del agua mineral del
balneario Villa de Olmedo. Valladolid. España. Anal. Real
AMBIENTALES DE LA FUENTE TERMAL “TERMAS
humana.
Acad. Nac. Farm 81, Núm. 5.