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MATERIALES QUÍMICA
FÍSICA
Desarrollo de terapias
basadas en células,
capaces de inducir la
regeneración del
órgano/tejido,
estimuladas por el
microambiente que las
recibe
Qué es lo que estimula la
regeneración
Construcciones implantables
Dispositivos extracorpóreos
Matrices de soporte
CÉLULAS
Cómo elegir la mejor célula
Disponibilidad
CÓMO ELEGIR LAS CÉLULAS
Según el tipo celular
Células
autólogas Células
homólogas Células
xenogeneicas
Células Stem
Embrionarias
Origen Embrionarias germinales
Adultas o somáticas
Totipotenciales
Potencialidad Pluripotenciales
Multipotenciales
Potencialidad restringida
Líneas Celulares
AISLAMIENTO
Digestión enzimática
Disgregación mecánica
Centrifugación
Gradientes
Pasajes por columnas
Cell sorting
Células primarias diferenciadas
Aisladas y cultivadas
Opción de elección
Células humanas
Procuración limitada
Riesgo de zoonosis
Rechazo hiperagudo
Células animales (Inmunoaislamiento)
>recuperación y
Células cultivadas
reorganización celular
ín t e sis
S
Matriz
Células extracelular
Remode
lación
Regulación
Factores de crecimiento
(locales y sistémicos)
Scaffolds p/
Estructura
Ingeniería de cultivo 3D
tisular
tejidos
La Ingeniería de Tejidos es sólo cultivo de células?
Ausencia de Formación de
organización colonias o
tisular (3D) monocapa
Cuál es la
respuesta???
Desorganización,
Estímulos ausencia de
mecánicos, función, muerte
Implante
eléctricos,
estructurales,
señales
Ingeniería de Tejidos
Naturales
BIOMATERIALES Sintéticos
Híbridos
BIOMATERIALES
Dispositivos permanentes
Dispositivos temporarios (extra o intracorpóreos)
Algunas
características
Fatiga
Fracturas
Toxicidad Biocompatibilidad
Inflamación Biodegradabilidad
No adaptación Porosidad
a cambios Inmunogenicidad
Adhesión celular
SOPORTES IDEALES
Scaffolds (andamios): Estructuras
tridimensionales
Polímeros sintéticos
Polihidroxiácidos: poliláctico (PLA),
poliglicólico (PGA) y copolímeros
Poliacrilatos: poli-HEMA, poli-MMA
Polisacáridos
Quitosan (citoesqueleto de crustáceos)
Ingeniería de
tejidos Medicina
regenerativa
APLICACIONES
Tejido osteoarticular
Heridas
Órganos bioartificiales
Músculo cardíaco,
vasos, válvulas
Inflamación
Tejido de granulación
Remodelación
CUAL ES EL PROBLEMA?
Grandes superficies
Úlceras crónicas
CULTIVO DE EPIDERMIS
CULTIVO DE PIEL
UN POCO DE HISTORIA
EGF Feeder-Layer
No
Se une a receptores proliferativos
de membrana
Metabólicamente
> capacidad activos
formadora de
colonias
CULTIVO DE PIEL
UN POCO DE HISTORIA
OBJETIVOS
1- Inhibir la proliferación de
fibroblastos dérmicos
2- Aumentar la capacidad formadora
de colonias de queratinocitos
3- Subcultivar para amplificar
POR QUÉ FEEDER-LAYER
Factores de
Colágeno
crecimiento
Fibronectina Proteoglicanos
Laminina
Por qué si y por qué no
feeder-layer
Proliferación Diferenciación
Aumento del
Estratificación
número de células
CULTIVO DE QUERATINOCITOS SIN
SUSTRATOS DÉRMICOS
Obtención de cultivos de queratinocitos con
Logros posibilidades terapéuticas
Ingeniería de tejidos
Cultivo de
queratinocitos
Estructuras
compuestas
Cultivo de
fibroblastos Dermis
cadavérica
Matrices
tridimensionales
Láminas para cultivo in vitro de
queratinocitos
Membrana de
ácido hialurónico
Láminas para cultivo in vitro de
fibroblastos
Membrana de
ácido hialurónico
Piel artificial
(Burke y Yannas, 1980)
INTEGRA ®
DERMAGRAFT®
Sembrado con
fibroblastos de
neonatos humanos
(alogeneicos)
Estructura bicapa con células alogeneicas
APLIGRAF®
Fibroblastos Keratinocitos
humanos Colágeno humanos
tipo I
Día 0 Día 6
Resección
tangencial
Resección de
homoepidermis y Cultivo
colocación de
cultivo de piel
OTRAS ALTERNATIVAS
Láminas de colágeno
Hidrogeles: gelatina,
poli-HEMA
Sustratos basados
en quitina
Geles de fibrina
MEDICINA REGENERATIVA E
INGENIERÍA DE TEJIDOS
EN ENFERMEDADES
CARDÍACAS
Qué células?
Cardiomiocitos Fibroblastos
(componente
(proteínas de matriz)
contráctil)
REMODELACIÓN
FIBROSIS
QUÉ CÉLULAS SE ESTÁN
USANDO
Mioblastos esqueléticos
Células stem cardíacas
Células stem extracardíacas
USO DE CÉLULAS STEM DE MÉDULA
ÓSEA
Población de células Lin- ckit+ de
médula ósea implantadas en zonas peri-
infarto
Transdiferenciación a cardiomiocitos,
células endoteliales y músculo liso
Requisitos
Arquitectura del corazón
Constituyentes celulares apropiados
Función de bomba
PEG
Triton X-100
SDS
Resultados de este desarrollo