UNIVERSIDAD AUTONOMA DE

NUEVO LEON

FACULTAD DE CIENCIAS
BIOLOGICAS

Métodos básicos en Microbiología

POE’s – Preparación de agar sangre

M.C. Francisco Javier Sánchez Velázquez

Equipo 2 – Grupo 241

Torres Veliz Yessica 1728799

Ojeda Martínez Vivian Berenice 1742697
Rojas Rangel Max Emilio 1658336
Ponce Sánchez Obed 1734474
Introducción
Un medio de cultivo es una mezcla de determinadas sustancias, normalmente sales
orgánicas, una fuente de carbono y nutrientes que permiten el crecimiento de
microorganismos. Muchas de las veces estos medios de cultivos contienen un
agente solidificante, entre ellos el agar. El primer agar que se utilizo en bacteriología
fue la gelatina, pero muchos microorganismos la hidrolizaban y a la temperatura de
incubación optima de un buen numero de bacterias (35°C) se licua. (Cavallini, Sin
fecha). El segundo agente que se ha empleado y que hasta el día de hoy sigue
siendo utilizado es el agar. Existen varios tipos de agar, entre ellos está el agar
sangre, que entra dentro de la categoría de medios de enriquecimiento, los cuales
son medios líquidos que permiten la multiplicación de la bacteria buscada e inhiben
las otras. (Bailey, 2009) Para preparar este tipo de agar, prácticamente se puede
utilizar cualquier “medio base”. En los tipos de medios con sangre se puede
observar si alrededor de la colonia se ha producido un halo de hemolisis por acción
de las hemolisinas liberadas por las bacterias (hemolisis Beta) o una hemolisis
parcial formándose un halo verdoso alrededor de la colonia (hemolisis alfa). Todas
estas características (tamaño, forma, hemolisis…) permiten detectar la presencia
de diversos tipos de colonias y orientar sobre el microorganismo que las forma.
(Cavallini, sin fecha).
Objetivos
- Dar a conocer la definición básica de medio de cultivo y agar sangre
- Presentar los materiales, reactivos y equipo necesarios para preparar el agar
sangre
- Mostrar la metodología específica, escrita y en diagrama, necesaria para
preparar este tipo de agar
- Describir el correcto uso del material, reactivos y equipo en el laboratorio,
para evitar la contaminación del medio.
- Incentivar por medio de la información proporcionada a un proceso correcto
y eficiente para evitar cualquier tipo de accidente o cualquier tipo de
contaminación.
Material:
-Matraz Erlenmeyer con torunda
-Cajas Petri
Equipo:
-Balanza granataria o digital
-Autoclave
Reactivos:
-Agar nutritivo (Sangre Agar Base)
-Sangre desfibrinada 5%

Metodología:
1.-Pesar en la balanza 40 gramos de agar base, suspenderlo en un litro de agua
destilada.
2.-Depositarlo en un matraz Erlenmeyer, dejar reposar por 5 minutos y mezclar
perfectamente hasta obtener una suspensión homogénea.
3.-Calentar con agitación frecuente y hervir 1 minuto.
4.-El matraz deben taparse y colocarse directamente en autoclaves
5.-Esterilizar 20 minutos a 121 C.
6.-Enfriar a 45-50 C, agregar sangre desfibrinada al 5% inmediatamente
homogeneizar y finalmente vaciar en Caja Petri estéril.
Diagrama de flujo:

Interpretación de resultado Agar Sangre:

Observar las características de las colonias.

Para el medio de cultivo conteniendo sangre, observar las reacciones de hemólisis:

Hemólisis alfa: Lisis parcial de los glóbulos rojos. Se observa un halo de color
verdoso alrededor de la colonia en estudio. Es debido a la oxidación de la
hemoglobina a metahemoglobina (compuesto de color verdoso) por el peróxido de
hidrógeno generado por microorganismos.

Hemólisis beta: lisis total de los glóbulos rojos. Se observa un halo claro, brillante
alrededor de la colonia en estudio.

Hemólisis gamma: Ausencia de lisis de los glóbulos rojos. El medio de cultivo no

presenta modificaciones de color y aspecto alrededor de la colonia en estudio.
Referencias:

- Bailey, et. al., 2009. “Diagnostico microbiológico”. 12ª Edición. Editorial

Medica Panamericana. Madrid, España. Pp 98 – 99.
- Cavallini, E. Sin fecha de publicación. “Bacteriología general: Principios y
practicas de laboratorio”. Editorial Universidad de Costa Rica. Costa Rica.
Pp. 117, 121-122.
- Laboratorios Britania (2015). Ficha técnica Sangre Agar Base REF
B01414984. Argentina. Disponible en: www.britanialab.com (Consultado:
04/02/2018).