Pruebas de función tubular.

Acidosis tubular renal. Estudio de la capacidad de acidificación urinaria

La acidosis tubular renal (ATR) representa un síndrome clínico de acidosis metabólica hiperclorémica causado

por un defecto en la reabsorción tubular renal de bicarbonato y/o en la excreción urinaria de H +. En este

síndrome, a diferencia de lo que ocurre en la acidosis urémica normoclorémica, la función glomerular es normal

o está comparativamente menos afectada que la función tubular. En general, puede sospecharse una ATR

cuando la acidosis metabólica se acompaña de hipercloremia (> 110 mEq/l), hipercalciuria, hipocitraturia y de

un anión innominado (anión gap) plasmático normal. En la se representa un algoritmo orientativo del enfoque

diagnóstico de las acidosis metabólicas a partir de los niveles plasmáticos de cloro (anión gap). En los últimos

años, las técnicas de biología molecular han permitido conocer las bases genéticas de los distintos subtipos de

ATR

En el niño, la ATR distal tipo I se manifiesta casi siempre de manera primaria con carácter hereditario

permanente. En algunas ocasiones, puede ser transitoria (síndrome de Lightwood) o secundaria, especialmente,

a síndrome de Sjögren [2]. El fundamento de este tipo de ATR es una incapacidad para secretar hidrogeniones

(H+) por parte de las células α-intercaladas del túbulo colector. Puede ser de herencia autosómica dominante

(gen SLC4A1 que codifica el intercambiador de aniones AE1) o recesiva (gen ATP6V0A4 que codifica una

subunidad accesoria no catalítica de la H+-ATPasa vacuolar y gen ATP6V1B1 que codifica la subnidad B1 de la

H+-ATPasa). En la ATR distal, el pH urinario es inapropiadamente elevado, es decir, superior a 5,5, a pesar de

coexistir una acidosis metabólica sistémica. Tras una sobrecarga ácida, el pH urinario se mantiene elevado y la

excreción renal de acidez titulable y de amonio están disminuidas. La acidosis metabólica es hiperclorémica

(anión gap normal) y normo o hipopotasemica. La coexistencia de hipercalciuria e hipocitraturia determina la

precipitación cálcica en el tejido renal y en las vías urinarias.

En la forma primaria, la sintomatología está presente desde las primeras semanas de vida en forma de vómitos,

poliuria, deshidratación y falta de ganancia ponderal. Más adelante, se hace más evidente el retraso de
crecimiento, la poliuria y el estreñimiento. Como consecuencia de la hipopotasemia pueden aparecer debilidad

muscular o, incluso, episodios de parálisis flácida.

La ATR proximal o tipo II puede ser observada como una entidad primaria no relacionada con otras anomalías

tubulares (la forma transitoria fue descrita por Juan Rodríguez Soriano), aunque es más frecuente que se

presente asociada a una disfunción tubular múltiple, en el contexto de lo que se ha denominado síndrome

de de Toni-Debré-Fanconi. Se caracteriza por un defecto en la reabsorción tubular proximal de CO 3H-. La ATR

proximal autosómica recesiva, asociada a retraso mental y anomalías oculares, está causada por mutaciones

homocigotas en el gen SLC4A4que codifica el transportador NBC-1. La ATR mixta (ATR renal combinada

proximal y distal o tipo III) se observa en la osteopetrosis autosómica recesiva. Es causada por mutaciones en

el gen CA2 codificante de la anhidrasa carbónica tipo II, enzima que está presente en ambos segmentos

tubulares.

La ATR hiperpotasémica (tipo IV) se caracteriza por un defecto conjunto en la secreción tubular distal tanto de

H+ como de K+, por lo que los pacientes afectos tienen acidosis e hiperpotasemia. No se ha descrito una forma

primaria. Este tipo de ATR ha sido identificado en pacientes con hiperpotasemia de diverso origen, incluyendo

pacientes con hipoaldosteronismo, tanto primario como asociado a hiporreninemia en pacientes con

insuficiencia renal crónica o en los casos de pseudohipoaldosteronismo. Ciertos fármacos (sales de litio,

amiloride, trimetoprim, pentamidina, tacrolimus, ciclosporina A) o situaciones patológicas (uropatía

obstructiva, drepanocitosis, hiperplasia suprarrenal congénita con pérdida salina) afectan a la reabsorción de

sodio, lo que repercute desfavorablemente en la secreción de H+ y K+.

El anión gap plasmático (ver Trastornos del metabolismo ácido-base)

El cálculo del anión innominado (AI) (anión gap) en el plasma ayuda a estudiar el origen de la acidosis

metabólica:

AI = [PNa+] – ([PCl-] + [PHCO3-])

Los valores normales oscilan entre 8 y 16 mEq/l. Así, un anión gap plasmático situado entre esos valores refleja

pérdida de bicarbonato del espacio extracelular, ya sea a través de la vía digestiva o debido a una acidosis

tubular renal hiperclorémica. Los valores de anión gap están elevados en diversos trastornos que cursan con

incremento en la producción de ácidos (cetoacidosis, acidosis láctica, insuficiencia renal, etc.)

Exploración funcional de la acidificación urinaria distal. Prueba de acidificación con diversos

estímulos

La existencia de un defecto de acidificación distal debe sospecharse si la concentración plasmática de CO3H- está

disminuida (< 20 mEq/l en el niño y < 18 mEq/l en el lactante) y el pH urinario es superior a 5.5. Por lo

contrario, si el pH urinario es inferior a 5.3, la existencia de dicho defecto es poco probable. La prueba de

acidificación realizada con estímulo de cloruro amónico (ClNH4) es la ideal para estudiar la secreción distal de

H+ pero se tolera muy mal por lo que su uso es limitado

Otra forma de estimular la capacidad de acidificación es logrando que en la luz del tubulo colector exista una

elevada concentración de un anión como cloro. Esto se consigue tras la administración de cloruro cálcico o
furosemida. La prueba con estímulo de furosemida es sencilla de realizar. Su empleo es especialmente útil para

descartar un defecto de acidificación renal distal. Tras vaciar la vejiga, se administra 1 mg/kg de furosemida

por vía oral. Se recogen por separado las orinas emitidas en las cuatro horas siguientes en las que se mide el

pH y, preferiblemente, la acidez titulable y la excreción de NH4+. El pH más bajo se suele observar en la tercera

o la cuarta orinas. En algunos casos, los pacientes pueden tener mareos por descenso de la tensión arterial. Si

el pH urinario es menor de 5.35, prácticamente se descarta la existencia de una acidosis tubular distal, aunque

se debería confirmar que la prueba de la pCO 2 urinaria también es normal. La excreción normal de NH4+ debe

ser superior a 30 µEq/min/1,73m2. Nosotros, hemos demostrado que algunos pacientes con prelitiasis

(hipercalciuria idiopática) no acidifican adecuadamente con este estímulo sin ser portadores de una ATR

Exploración funcional de la acidificación urinaria distal. Determinación de la pCO 2 urinaria máxima

Entre todas las pruebas destinadas a estudiar la capacidad de acidificación tubular distal, la prueba de la

pCO2 urinaria máxima es la más sensible y la más sencilla. Cuando la orina es muy alcalina, como ocurre

después de administración de CO3HNa, la pCO2 urinaria se eleva si existe una adecuada secreción distal de H+.

Este ión reacciona con el CO3H-presente en la luz tubular distal, dando origen a la formación de ácido carbónico

(CO3H2). Dado que en la nefrona distal no existe acción luminal del enzima anhidrasa carbónica, CO 3H2 se

disocia lentamente y la presión de CO2 formado puede medirse en la orina en aparato estándar de gasometrías.

Se puede realizar administrando por vía oral CO3HNa (4 g/1,73m2) o un inhibidor de la anhidrasa carbónica

como la acetazolamida (1 g/1,73m2). Puesto que con esas dosis pueden existir efectos secundarios, nosotros

realizamos la prueba administrando al mismo tiempo ambas sustancias a la mitad de las dosis mencionadas. Un

requisito absolutamente necesario para que la prueba sea válida es que la concentración urinaria de CO 3H- sea

superior a 80 mEq/l. lo que suele coincidir con un pH urinario superior a 7,6. Los niños normales pueden

establecer un gradiente de pCO2 entre orina y sangre por lo menos de 30 mmHg, es decir, la pCO2 urinaria debe

ser superior a 70 mmHg. Cuando este gradiente es bajo, los pacientes están afectos de ATR distal. Los

pacientes con ATR proximal se distinguen porque son portadores de acidosis metabólica hiperclorémica, pero la

prueba de la pCO2 es normal

Síndrome de bartter y otras tubulopatías que cursan con pérdida salina y alcalosis metabólic

En 1962, Bartter et al. comunicaron los datos observados en dos pacientes varones afectos de una nueva

enfermedad caracterizada por retraso del crecimiento, hiperplasia del aparato yuxtaglomerular,

hiperaldosteronismo, presión arterial normal, alcalosis metabólica hipopotasémica e hipoclorémica y defecto en

la capacidad de concentración resistente a la acción de la pitresina [8]. En ambos sujetos, se demostró un

incremento de los niveles circulantes de angiotensina. Además, la infusión de angiotensina II produjo un

aumento de la tensión arterial considerablemente menor que el inducido por dosis similares en controles. Con el

paso del tiempo, se establecieron dos patrones clínicos que permitieron distinguir entre una forma grave de

presentación antenatal (Bartter neonatal) y una forma de aparición más tardía, durante los primeros años de la

vida (Bartter clásico) [9]. La variante neonatal se caracteriza por un marcado polihidramnios (poliuria

intrauterina), parto prematuro, episodios de deshidratación graves, hipercalciuria y nefrocalcinosis de comienzo

precoz. Algunos pacientes tienen un aspecto característico. Son delgados y con una facies peculiar. El retraso

en el crecimiento es la norma. Otras manifestaciones sistémicas pueden ser convulsiones, incremento de la

susceptibilidad a las infecciones, diarrea secretora y osteopenia. En la variante clásica puede estar presente la

historia de hidramnios materno y de parto prematuro. Los síntomas se inician durante los dos primeros años de

la vida e incluyen poliuria, polidipsia, vómitos, estreñimiento, apetencia excesiva por la sal y retraso tanto del

crecimiento como del desarrollo intelectual. La nefrocalcinosis es rara y la hipercalciuria menos intensa que en

la forma neonatal.

Gracias a la aplicación de las técnicas propias de la biología molecular, se sabe que el síndrome de Bartter no

representa una entidad única sino que se trata de un trastorno heterogéneo en el transporte renal de sodio,

potasio y cloro localizado en la rama ascendente del asa de Henle. En condiciones fisiológicas, la reabsorción de

estos iones en la rama ascendente del asa de Henle libre de agua, es muy compleja. Un error en la función de

cualquiera de las proteínas implicadas en este proceso, causa esta tubulopatía. Se han caracterizado cinco

subtipos por mutaciones en los genes que codifican el cotransportador sensible a furosemida Na-K-2Cl, el canal

de potasio ROMK, el canal de cloro ClC-Kb, la subunidad barttina y el receptor sensible a calcio,

respectivamente.

En 1966 Gitelman, Graham y Welt publicaron tres pacientes adultos afectos de hipopotasemia,

hipomagnesemia y alcalosis metabólica . Durante muchos años, los pacientes con estas características fueron

diagnosticados erróneamente de síndrome de Bartter. La presencia de hiperreninismo e hiperaldosteronismo,

contribuyó a la confusión con dicho cuadro. Suele debutar en la adolescencia con síntomas neuromusculares

leves o más graves (tetania, convulsiones). La hipomagnesemia y la hipopotasemia predisponen a que surjan

arritmias graves. La avidez por la sal es frecuente y los valores de presión arterial son más bajos que en la

población general. El crecimiento no suele verse afectado. La enfermedad de Gitelman o Hipomagnesemia-

Hipopotasemia Familiar es producida por un defecto en la función del cotransportador de ClNa sensible a

tiazidas que se localiza en el túbulo distal . El síndrome EAST (epilepsia, ataxia, sordera sensorineural y

tubulopatía) que cursa con un síndrome Gitelman-like, se produce por mutaciones en el gen que codifica el

canal de potasio Kir4.1 que está presente en la membrana basolateral del túbulo distal y en otros tejidos .

Manejo renal de agua. estudio de la capacidad de concentración urinaria

Osmolalidad urinaria máxima

La prueba más utilizada es la que se realiza con estímulo de desmopresina (DDAVP). Previo vaciado de la

vejiga, se administran por vía nasal 20 µg o un comprimido de 0,2 mg (200 µg) por via oral o un comprimido

de 0,12 mg (120 µg) del liofilizado oral (Minurin Flas 120 µgÒ) el cual se disuelve casi instantáneamente en la

boca. Se recogen las tres orinas siguientes separadas por intervalos de 90 minutos y se da como resultado de
la prueba el valor mayor de osmolalidad entre las tres muestras estudiadas. Durante la prueba se pueden

ingerir alimentos y una ingesta moderada de líquidos (no superior a la diuresis). En lactantes por debajo de un

año, la dosis de desmopresina es de 10 µg y se restringen las tomas a la mitad por existir riesgo de intoxicación

acuosa. Con estas precauciones se pueden hacer estas pruebas incluso en recién nacidos prematuros. En niños

por encima de un año de edad y en adultos, el límite inferior de la normalidad es 800 mOsm/Kg. Los valores en

controles sanos de nuestro hospital fueron 1.034,2 ± 115,9 mOsm/Kg. Los pacientes con ERC muestran un

defecto de concentración importante. A la inversa, una capacidad de concentración normal se acompaña,

siempre, de tasas de GFR normales

Volumen urinario correspondiente a 100 ml. de GFR (V/GFR)

Representa los ml. de orina que se forman por cada 100 ml. de GFR. Es una forma muy simple de sospechar

poliuria cuando está elevado. Para su cálculo sólo se necesita conocer las concentraciones plasmáticas y

urinarias de creatinina (Cr). La fórmula es la siguiente: V/GFR = ([PCr] x 100) / [UCr]. El valor normal en

adultos es de 0,73 ± 0,26% y en niños mayores de un año es de 0,59 ± 0,22%

Los porcentajes de excreción o reabsorción fraccionada (EF) son unos parámetros frecuentemente usados para

valorar la reabsorción de solutos a lo largo del túbulo renal. La EF estudia mejor el manejo renal de la sustancia

(S) a estudiar al relacionar sus concentraciones urinarias con las plasmáticas. El porcentaje de excreción

fraccionada (EF) expresa la proporción de la cantidad filtrada de S que se elimina en la orina. Dicho de otro

modo, la EF expresa el volumen de sangre (ml) que queda desprovisto de S por cada 100 ml de GFR. Equivale

al cociente entre los aclaramientos de S y el de creatinina. Por eso los resultados aparecen como ml/100 ml

GFR (aclaramiento) o, simplemente, como porcentaje (%) (excreción fraccional). Al igual que los cocientes

urinarios, el empleo de la EF obvia los errores que pudieran existir con la recogida de orina horaria. Para su

cálculo, es necesario conocer las concentraciones plasmáticas y urinarias de creatinina y de S. La fórmula es:

EFS = ([US] x [PCr] x 100)/([PS] x [UCr]). Las concentraciones de la sustancia en sangre y orina deben figurar

en la misma unidad (lo mismo para la creatinina). Tradicionalmente, para el fosfato (PO 4), el resultado suele

expresarse en términos de “fosfato reabsorbido” o tasa de reabsorción de fosfato (TRP). TRP = 100 -

EFPO4 [16]. Obviamente, la EF de cualquier otro soluto podría expresarse a la inversa, es decir, como tasa de

reabsorción.

En la Tabla 2 se citan los valores de referencia más habituales en la práctica diaria. Obsérvese que no aparecen

los valores de referencia de las EF de calcio y magnesio; la razón es que para su cálculo es preciso conocer los

valores del calcio y magnesio iónicos que son los que realmente aparecen en el ultrafiltrado glomerular. De una

forma aproximada, si se quieren calcular las EF de ambos, podrían multiplicarse las concentraciones

plasmáticas totales de calcio y de magnesio por 0,6 y 0,8, respectivamente. Los valores de EF se elevan

exponencialmente a medida que disminuye el GFR por lo que la interpretación de sus valores es incierta en

presencia de insuficiencia renal.

Aplicación de los porcentajes de excreción o reabsorción fraccionada en la orientación diagnóstica

de las anomalías de la concentración plasmática de algunos solutos

Aunque es válido para otras sustancias, en la Tabla 3 y Tabla 4 se citan los ejemplos aplicados al metabolismo

del ácido úrico y del fosfato.

Marcadores específicos de lesión tubular proximal

La N-Acetil-Glucosaminidasa (NAG) es una enzima lisosomal del grupo de las hidrolasas que es metabolizada en

el hígado y se considera un marcador sensible de agresión tubular renal proximal [17]. La excreción urinaria de

NAG corregida para la de creatinina en sujetos adultos normales en nuestro laboratorio es de 2,32 ± 1,24 U/g.

En los niños menores de 2 años es de 7,2 ± 5,2 U/g, en los de 2 a 6 años 4,4 ± 2,7 U/g y en los mayores de 6

años de 3,1 ± 1,6 U/g.

La excreción urinaria de proteínas de bajo peso molecular como la b-2-microglobulina es también un buen

marcador de daño tubular proximal (defecto de reabsorción). La b-2-microglobulina es un polipéptido de 11.800

daltons que se origina a partir del fragmento Fc del sistema HLA. Se excreta por vía renal. En el túbulo proximal

se reabsorbe hasta el 99,9%. Los valores normales en el adulto en nuestro laboratorio son de 62,9 ± 30,3

mg/g creatinina.