1

Rosa I. Colina Cifuentes

Fátima Caiza
 2

INDICE ---------------------------------------------------------------------------- 2

INTRODUCCION ---------------------------------------------------------------- 3

NORMAS GENERALES DE LABORATORIO ----------------------------------- 4

LABORATORIO 1 ----------------------------------------------------------------- 6
Características y función del microscopio.

LABORATORIO 2 ----------------------------------------------------------------- 14
La célula.

LABORATORIO 3 ----------------------------------------------------------------- 22
Macromoléculas.

LABORATORIO 4 ----------------------------------------------------------------- 31
Membranas biológicas y procesos de transporte.

LABORATORIO 5 ----------------------------------------------------------------- 38
Acción enzimática.

LABORATORIO 6 ------------------------------------------------------------------ 44
División celular: Mitosis.

LABORATORIO 7 ------------------------------------------------------------------ 49
División celular: Meiosis.

BIBLIOGRAFÍA -------------------------------------------------------------------- 55
 3

INTRODUCCION

Este manual de laboratorio fue realizado con el propósito de recopilar prácticas

relacionadas al área de biología que ayuden a los estudiantes de primer
semestre de medicina a clarificar los conceptos más básicos y fundamentales.

Las prácticas escogidas poseen técnicas experimentales usadas para enseñar

biología en varias partes del mundo.

Este documento pretende, también, ayudar en el desarrollo de habilidades y

destrezas de los estudiantes, factor indispensable para la enseñanza-
aprendizaje no solo en los primeros niveles, sino durante todo el proceso de
formación y desempeño profesional.

M.Sc. Rosa Inés Colina C.

 4

INFORME DE RIESGOS

Los riesgos que se podrían tener en éstas prácticas de laboratorio son:

Riesgos Químicos.- aunque los reactivos y colorantes usados en las prácticas

están diluidos, podría presentar quemaduras leves y alergias.

Riesgos Biológicos.- podría presentarse en las prácticas en los que se trabaja

con organismos o sustancias derivadas de un organismo como sangre.

Para prevenir cualquiera de estos riesgos se recomienda observar y poner en

práctica las normas que se detallan a continuación.

NORMAS GENERALES DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO

1. CONSEJOS GENERALES

 Estudie detenidamente cada ejercicio de la práctica (remitiéndose al

syllabus), antes de llegar a clase.
 Use una libreta para sus anotaciones, observaciones y resultados.
 Jamás saque del laboratorio, equipos, materiales o cultivos.
 Sea cuidadoso. Recuerde que usted es responsable del equipo y
materiales con los que trabajará. Si rompe o pierde tendrá que
devolverlos.
 El uso de teléfonos celulares es permitido solo con fines pedagógicos,
previa autorización de su profesor. Durante las prácticas debe existir
disciplina para realizar un trabajo organizado y con buenos resultados.

2. Limpieza

 Todo el lugar de trabajo debe estar limpio y ordenado antes, durante y

después de cada actividad en el laboratorio.
 Los desechos contaminados deben dejarse en los lugares previamente
establecidos al igual que los no contaminados.
 Si se ha roto algún material de vidrio o se ha regado alguna sustancia
sobre la superficie de trabajo o el piso hay que recogerlos
inmediatamente.
 Al final de la práctica limpiar los lentes de los microscopios si los ha
usado.

3. Las personas

 Debe usar mandil blanco de manga larga, limpio y correctamente

abotonado.
 Los guantes son indispensables en las prácticas con material biológico.
 5

 Lave sus manos con agua y jabón antes y después de cada sesión de
laboratorio.
 No se permite comer, beber, fumar en el laboratorio.
 No se lleve a la boca material que ha sido usado en el laboratorio.
 No usar zapatos abiertos dentro del laboratorio
 Al terminar cada laboratorio se procederá a limpiar cuidadosamente los
equipos, los materiales y las mesas de trabajo que se ha utilizado
 En caso de incendio, tenga presente la ubicación del extintor

4. Las sustancias.

 Considere toda sustancia como tóxica por lo tanto maneje con cuidado.
 No olfatee ninguna de las sustancias a menos que se lo pida su profesor
 Cuando use pipeta manual, no pipetee con la boca para evitar
aspiraciones innecesarias. Utilice una pera de succión
 Cuando prepare soluciones, deben colocar una etiqueta en donde conste
la fecha de preparación, concentración y responsable
 No devolver nunca a los frascos de origen los sobrantes de las sustancias
utilizadas sin consultar con el profesor

5. En caso de accidentes.

 Notifique inmediatamente al profesor si ocurre algún accidente.

 Si existe derramamiento de alguna sustancia sobre su persona o ropa
hay que lavar inmediatamente con abundante agua.
 En caso de heridas lavar desinfectar y cubrir el área.
 Si el accidente es muy grave acudir al centro de salud.
 En caso de incendio usar el extintor que existe siempre en un laboratorio
y pedir ayuda.
 6

LABORATORIO N° 1

CARACTERISTICAS Y FUNCION DEL MICROSCOPIO

INTRODUCCIÓN

EL microscopio ha cumplido un papel muy importante en el avance de la ciencia

a partir del conocimiento profundo de todo aquello que el ojo humano no
puede mirar.
No se sabe con exactitud cuando el ser humano descubrió por primera vez que
un espejo curvo y las esferas con agua aumentaban las imágenes, pero es a
partir de esto que se van inventando los lentes de aumento. En las primeras
décadas del siglo XVII se inician las experiencias con lentes e instrumentos
para aumentar la visión y su uso se hace progresivo.
Los primeros microscopios fueron sencillos estaban formados por un lente
montado, posteriormente se fueron complicando por que combinaron lentes, el
primero de estos fue inventado por Zacharias Jansen en 1590 en Holanda
(Figura 1.1).
El microscopio se fue perfeccionando con gran lentitud, más sin embargo el
avance realizado hasta nuestros días ha sido enorme, el microscopio cuántico
de efecto túnel es uno de ellos. (Figura 1.2)

Figura1.1 Microscopio compuesto de Zacharias Janssen. 1590, Midelburg,

HOLANDA.

Imagen tomada d http://www.revista.unam.mx/vol.6/num7/art70/art70-1.htm

Figura 1.2 Microscopio efecto Tunel, inventado en 1982 por Binning y Rohrer.

Imagen tomada de http://200.33.120.206:8080/mod/resource/view.php?id=284.

 7

En esta práctica vamos a usar microscopios compuestos binoculares (figura 1.

3), llamados así porque poseen dos lentes oculares, esto presenta ventajas
tales como mejor percepción de la imagen, más cómoda la observación y se
perciben con mayor nitidez los detalles.

Figura 1.3 Microscopio óptico compuesto con sus partes

Imagen tomada de http://www.flickr.com/photos/reparacionesbiomecanicas/

Las partes de un microscopio compuesto son:

a) Sistema mecánico:
BASE: Soporta todo el peso del aparato, asegurando la estabilidad del mismo.
BRAZO: Este elemento relaciona el cabezal del microscopio con el pie y sostiene
la platina y el condensador. De esta parte se sostiene el microscopio cuando se
lo traslada de un lugar a otro.
CABEZAL: Contiene los sistemas de lentes oculares. Puede ser monocular o
binocular.
REVÓLVER: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite, al girar, cambiar
los objetivos.
PLATINA: Lugar donde se deposita la preparación se halla sujeta al brazo y
posee además una abertura para el paso de luz.
Las platinas tienen dos pinzas sujetadoras, dos tornillos que permiten
desplazar las placas y unas “reglillas” llamadas Escalas de Vernier, que
sirven para tomar las coordenadas sobre la localización de células o estructuras
de interés.
TORNILLOS DE ENFOQUE: son dos, macrométrico que permite acercar la
muestra hacia el lente objetivo y micrométrico, de mayor precisión que es el
que define la imagen.

b) Sistema óptico:
OCULAR: Lente que se encuentra próximo al ojo, amplifica la imagen producida
por el objetivo y su aumento es de 10X.
 8

OBJETIVO: Lente situada cerca de la preparación su función es ampliar la

imagen. En un microscopio están insertados en una pieza llamada revolver en
un número de 4 generalmente. Los lentes objetivos
más comunes son los de 4X o 5X, 10X, 40X y 100X. El lente de 100X se usa
únicamente con aceite de inmersión por lo que es llamado lente de inmersión
y los demás se llaman lentes en seco.
La amplificación total o magnificación total resulta de la acción combinada del
ocular y objetivo, se calcula multiplicando estos dos valores. Ej.: ocular 10X,
objetivo 10X, amplificación total 100X.
A medida que el poder de amplificación o la magnificación del microscopio
aumentan, el espacio observado bajo el campo óptico disminuye.
Lo más importante de un microscopio no es el aumento en sí mismo, sino el
poder separador también llamado a veces poder de resolución. El poder de
resolución es una cualidad del microscopio, y se define como la capacidad de
distinguir como imágenes distintas dos cercanas. El ojo normal no puede ver
separados dos puntos cuando su distancia es menor a una décima de milímetro.

c) Sistema de iluminación:
CONDENSADOR: contiene varias lentes que concentran la luz en el objeto a
estudiarse.
DIAFRAGMA: Esta junto al condensador y regula la cantidad de luz que entra
en el condensador.
FOCO o FUENTE DE LUZ: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador,
usualmente posee también un regulador de intensidad.

La unidad básica de longitud que se utiliza con el microscopio de luz es el

micrómetro o micra (m).
1 mm = 1000 m
1m = 1000 nm
1m = 10000 Aº

MANEJO Y USO DEL MICROSCOPIO

Para manejar el microscopio de una manera correcta debe seguir ciertas

recomendaciones:

1. Antes de empezar su trabajo verifique que el objetivo de menor aumento

este en posición de empleo y la platina completamente abajo.
2. Conecte el microscopio y enciéndalo.
3. Coloque la preparación sobre la platina sujetándola con las pinzas
metálicas y ubique la muestra en el haz de luz que sale a través de la
platina.
4. Subir la platina, con la ayuda del tornillo macrométrico, hasta que la
muestra este lo más cerca del lente objetivo. Esto debe hacerse mirando
directamente y no a través del lente ocular.
5. Regule la apertura de los lentes oculares según la apertura de sus ojos,
para su mayor comodidad.
 9

6. Mirando a través de los lentes oculares regule la cantidad de luz y defina

la imagen con la ayuda del micrométrico. La imagen debe quedar nítida.
7. Gire el revolver para seguir pasando a los otros lentes objetivos. No
necesita bajar la platina en ningún momento si es que consiguió un buen
enfoque al inicio. Si al cambiar de objetivo se perdió por completo la
imagen, es preferible volver a enfocar con el objetivo anterior.
8. Una vez finalizada la observación se baja la platina y se coloca el objetivo
de menor aumento girando el revólver. En este momento ya se puede
retirar la preparación de la platina.
9. Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el lente objetivo de menor
aumento en posición de observación.
10. Cubrir el microscopio y dejarlo en su lugar

ENFOQUE CON LENTE INMERSION

Antes de poner el aceite de inmersión debe haberse enfocado en un lente de

menor aumento.

1. Girar el revólver hacia el objetivo de inmersión dejándolo a medio

camino.
2. Colocar una gota mínima de aceite de inmersión sobre la muestra
enfocada. Una vez se haya puesto aceite de inmersión sobre la
preparación ya no se puede volver a usar el objetivo 40x sobre esa zona,
pues se mancharía de aceite. Por tanto, si desea enfocar otro campo se
debería regresar al de menor aumento.
3. Terminar de girar suavemente el revólver hasta la posición del objetivo
de inmersión.
4. Enfocar cuidadosamente con el micrométrico.
5. Una vez finalizada la observación de la preparación se baja la platina y
se limpia el objetivo de inmersión con cuidado empleando un papel
especial.

Preparación de muestras para microscopia óptica

Las muestras en el microscopio óptico se dividen en dos categorías

amplias: monturas completas y cortes. Una montura completa es un
objeto intacto, ya sea vivo o muerto, y puede consistir en un
microorganismo entero como un protozoario o en una pequeña parte de
un organismo más grande.

La mayoría de los tejidos de plantas y animales son demasiado opacos

para su análisis microscópico, a menos que estos se examinen como una
rebanada muy delgada, o corte. Para preparar un corte, primero se
matan las células mediante inmersión del tejido en alguna solución
química llamada fijador. Un buen fijador penetra pronto en la membrana
celular e inmoviliza todo su material macromolecular, de modo que la
estructura de la célula se mantiene lo más similar posible a la de la célula
 10

viva. Los fijadores más usuales para la microscopia óptica son soluciones
de formaldehido, alcohol o ácido acético y calor. (Karp,G. 2010)

RECOMENDACIONES GENERALES

1. Cuando traslade el microscopio hágalo siempre con las dos manos. Tome
el brazo del microscopio con una mano y coloque la otra mano debajo de
la base para sostenerlo. Manténgalo en posición vertical.
2. Colóquelo sobre una superficie plana y sólida, por lo menos a 10 cm del
borde de la mesa.
3. Antes de comenzar a usarlo revise el estado del microscopio (le explicará
su profesor).
4. Limpie los lentes del microscopio antes y después de usarlo con papel
especial para lentes o con un pedazo de tela sin pelusa de uso exclusivo
para esto. Nunca toque el lente con los dedos.
5. Mientras realiza la observación mantenga los dos ojos abiertos.
6. Los lentes y la platina deben ser protegidos de materiales que pueden
ser corrosivos.

1.1 OBJETIVOS.
 Valorar la importancia del microscopio en el estudio y la
investigación.
 Conocer las partes principales de un microscopio compuesto
 Aprender el uso correcto del microscopio compuesto.
1.2 PRÁCTICA

1.2.1 Ejercicio N° 1 USO DEL MICROSCOPIO

Materiales
 Microscopio óptico
 Portaobjetos y cubreobjetos
 Papel para lentes
 Pipeta Pasteur
 Hojas de elodea
 Pinzas
 Agua destilada
Procedimiento
a) Fijarse que el portaobjetos y el cubreobjetos estén limpios antes de
usarlos.
b) Añadir una gota de agua destilada sobre el portaobjetos, y luego colocar
la muestra (hoja de elodea) y tapar la muestra con el cubreobjetos. Este
tipo de preparación, se llama preparación húmeda porque se usa un
líquido junto con la muestra. Y se llama montura de corte porque
estamos tomando una parte de la estructura viva.
c) Observar al microscopio bajo los tres lentes objetivos en seco siguiendo el
método de enfoque descrito en la Introducción de esta práctica.
d) Dibujar lo observado con los tres lentes objetivos en seco.
e) Al terminar, asegurarse de limpiar bien los lentes, dejar apagado el
microscopio, enrollar el alambre y dejar el microscopio en su lugar
 11

1.2.2 Ejercicio Nº 2 OBSERVACION CON LENTE INMERSIÓN.

Materiales
 Microscopio óptico
 Aceite de inmersión
 Papel para lentes
 Dos Portaobjetos
 Lancetas
 Alcohol antiséptico
 Algodón
 Azul de metileno
 Cronómetro
 Lápiz rotulador

Procedimiento
a) Colocar en posición el frotis sanguíneo sobre la platina del microscopio.
b) Observar al microscopio siguiendo, en su totalidad, el método de
enfoque hecho en el ejercicio anterior, para cuando vaya a colocar el
lente de inmersión su profesor le indicará o en caso contrario siga lo
descrito en la introducción de esta práctica.
c) Identificar y dibujar un campo representativo del frotis sanguíneo.
Asegurándose de aprender a manejar el lente de inmersión.
d) Rotular toda célula o estructura observada.
e) Al terminar, asegurarse de limpiar bien los lentes, dejar apagado el
microscopio, enrollar el alambre y dejar el microscopio en su lugar.

1.3 ENLACES
 http://www.youtube.com/watch?v=sROLbj701ns se presentan videos
con partes del microscopio.
 http://www.itg.uiuc.edu/technology/atlas Página con atlas de imágenes
obtenidas en diferentes tipos de microscopios.
 www.biologia.edu.ar/microscopia/microscopia1.htm es un hipertexto de
biología, se da información sobre microscopios y óptica.
 http://micro.magnet.fsu.edu/primer/ind .html: Una de las mejores
páginas sobre microscopía, con amplios textos sobre los diversos tipos
de microscopios y su funcionamiento. Numerosos tutoriales en java
sobre el manejo de distintos microscopios. Se puede descargar un
completo manual sobre microscopía en formato Acrobat.
 http://www.linkpublishing.com/video-transport.htm Tiene buenos de
videos de microscopio, células, organismos de agua, transporte
 12

GALERIA DE IMÁGENES
Partes del Microscopio

Revólver y lentes objetivos Platina, objetivos y revólver

Imagen tomada de Imagen tomada de

http://www.flickr.com/photos/thaismaciel/ http://www.flickr.com/places/Mexico/Puebla/Puebla
Lentes oculares Botones macrométrico y micrométrico

Imagen tomada de Imagen tomada de

http://www.flickr.com/photos/8782449@N06/ http://www.flickr.com/photos/27690919@N04

CELULAS SANGUINEAS
 13

Imagen tomada de: http://www.etitudela.com/profesores/rma/celula/images/frotissanguineo.jpg

 14

LABORATORIO N° 2

LA CÉLULA

INTRODUCCIÓN
El nombre de célula (del griego micros, pequeño, y skopein, ver) fue usado por
primera vez por Robert Hooke en 1665 (Robertis, 2005) cuando con la ayuda
de un microscopio miro un trozo de corcho y encontró una especie de
“celdillas de panal de abejas” a las que llamo células (Karp, 2008).
La célula es la unidad morfológica y funcional presente en todo ser vivo. Según
el número de células que posean los organismos estos pueden ser:
unicelulares como por ejemplo: las bacterias y protistas o pluricelulares
como los vegetales, animales y hongos.

El conocimiento de la célula fue avanzando según avanzaba la microscopia y es

así como se va estableciendo La Teoría celular que surge como producto de
estudios realizados por Schwann, Schleiden, Virchow, y tiene como principales
enunciados lo siguiente: 1) Todos los organismos están compuestos de una o
mas células, 2) La célula es la unidad fisiológica de la vida, 3) Las células solo
pueden originarse por división de una célula preexistente.

Las células son de dos tipos: procariotas y eucariotas. Las células

procarióticas (figura 2.1), son estructuralmente mas simples, presentan su
material genético concentrado en una región determinada del citoplasma no
definida por una membrana, esta región se denomina “nucleoide”, la mayoría
no presenta sistema de endomembranas pero si el organelo ribosoma. Un
ejemplo de estas células encontramos en las bacterias.
Las células eucariotas pueden ser vegetales y animales. Sus características
principales son: tener un núcleo rodeado de una membrana nuclear,
citoesqueleto, sistema de endomembranas. Los protistas (Reino protista),
hongos (Reino Fungi), plantas (Reino Vegetal) y animales (Reino Animal) están
formados de células eucariotas (ver figuras 2.2 y 2.3).

Figura 2.1 Esquema de una célula procariota.

Imagen tomada de http://micro-eee.blogspot.com/2008/08/estructura-celular.html

 15

Figura 2.2. Representación de una célula eucariota animal

Imagen tomada de http://matragut.wordpress.com/2008/09/30/celulas-procariotas-y-

eucariotas/

Figura 2.3 Representación de una célula eucariota vegetal.

Imagen tomada de http://matragut.wordpress.com/2008/09/30/celulas-procariotas-y-

eucariotas/

Ninguna célula puede ser considerada típica y dentro de la gran variedad de

células todas comparten la presencia de tres características estructurales: 1) la
membrana plasmática que define el límite del material vivo, 2) la región del
DNA que almacena la información genética y 3) el citoplasma o región
contenida dentro de la célula que no incluye la región del DNA.

2.1 OBJETIVOS.
 Reconocer las estructuras básicas que existen en todas las células.
 Observar al microscopio ejemplos de células eucariotas y procariotas.
 Desarrollar algunas técnicas básicas de preparación de muestras para
observación microscópica.
 16

2.2 PRÁCTICAS
2.2.1 Ejercicio N° 1 CELULAS PROCARIOTAS

Bacterias:

Materiales
 Cultivos de Bacterias
 Portaobjetos
 Azul de metileno
 Asas bacteriológicas
 Papel filtro
 Microscopio óptico
 Aceite inmersión
 Mechero Bunsen

Procedimiento

a) Verificar que el portaobjetos este limpio. Rotular en el extremo

izquierdo del portaobjeto, para saber con qué muestra está
trabajando. Con la pipeta Pasteur colocar una gota pequeña de
agua destilada en el centro de cada portaobjeto.
b) Encender el mechero. Esterilizar el asa bacteriológica en la llama
hasta que la punta se torne roja incandescente. Dejar que se
enfríe retirándola de la llama, pero manteniéndola junto a la
misma (en el aire), sin que toque nada.
c) Con el asa fría y estéril, transferir una cantidad pequeña de cada
cultivo bacteriano al portaobjeto, mezclando bien con la gota de
agua y distribuir sobre el portaobjeto de manera que forme una
película delgada (frotis). Dejar el asa bacteriológica estéril en su
lugar.
d) Pasar el portaobjetos entre 4 y 6 veces por la llama para fijar las
células al vidrio.
e) Cuando esté del todo frío, cubrir completamente el frotis con azul
de metileno. Esperar un minuto y lavar suavemente con agua
corriente.
f) Secar cuidadosamente, mediante presión, con papel filtro.
g) Observar al microscopio bajo el lente de inmersión (100X).
h) Hacer dibujos de lo que observa, destacando la forma de
agrupación y tamaño.

Nota 1. Los portaobjetos con muestras de bacterias deben dejarse

envueltos con papel aluminio para autoclavarse y lavarse.
 17

2.2.2 Ejercicio Nº 2 CELULAS EUCARIOTAS.

REINO PROTISTA.

Materiales
 Agua empozada
 Aceite de inmersión
 Portaobjetos
 Cubreobjetos
 Papel para lentes

Procedimiento

a) Colocar sobre un portaobjetos limpio una gota de agua empozada y

tapar la preparación con un cubreobjetos de manera que no queden
burbujas de aire.
b) No se olvide de seguir el método de enfoque aprendido en la práctica
anterior.
c) Hacer gráficos que indiquen la morfología y las estructuras observadas.
Ver galería de imágenes.

REINO VEGETAL.

Materiales
 Muestra de Elodea y/o epitelio de cebolla
 dH2O (agua destilada)
 Pinzas
 Microscopio óptico
 Portaobjetos
 Cubreobjetos
 Colorante (azul de metileno, gimsa o cristal violeta)

Procedimiento

a) Remover una hoja joven de la punta de una planta de Elodea y/o epitelio
de cebolla, sobre la elodea poner una gota de agua y un cubreobjetos.
Sobre la hoja de cebolla colocar una gota de colorante y el cubreobjetos.
b) Observar al microscopio. Localizar núcleo, citoplasma, pared celular, etc.
c) Dibujar lo observado, y poner nombre a toda estructura observada.

Ver galería de imágenes.

REINO FUNGI. Hongos del Ambiente (Aspergillus sp)

Materiales
 Cultivo de Hongos en el pan
 Azul de metileno
 18

 Asa bacteriológica
 Microscopio óptico
 Porta y cubreobjetos

Procedimiento

a) Colocar un pequeña gota de azul de metileno sobre el portaobjetos

b) Con el asa bacteriológica tomar cuidadosamente una muestra de los
hongos que están sobre el pan
c) Sobre el tiente colocar la muestra y colocar el cubreobjetos
d) Observar al microscopio para conocer la forma

REINO ANIMAL. Epitelio bucal

Materiales
 Portaobjetos
 Cubreobjetos
 Palillos de dientes
 dH2O
 Azul de metileno
 Papel filtro

Procedimiento

a) Poner una gota de azul de metileno en el centro de un portaobjetos

limpio.
b) Con la ayuda de un palillo de dientes, raspar ligeramente el interior de su
mejilla.
c) Colocar esta muestra sobre la gota del colorante. Descartar el palillo.
d) Cubrir con un cubreobjetos y observar al microscopio.
e) Rotular las estructuras que pudieron ser observadas.
f) Al final del trabajo hacer un cuadro en su cuaderno de apuntes
en el que enumere los organelos observados en cada célula,
diferencias entre células procariotas y eucariotas. Esta
información debe salir solamente de sus observaciones.
Ver galería de imágenes.
2.3 ENLACES
 http://www.euita.upv.es/varios/biologia/Temas/tema_1.htm#Objetivos%
20previstos tiene fotos e información resumida sobre todo lo
concerniente a la célula vegetal.
 http://www.euita.upv.es/varios/biologia/Temas/tema_1.htm Temas
varios de biología sobre todo células.
 http://www.biology.arizona.edu/cell_bio/tutorials/pev/main.html
Información sobre células, clasificación, fotografías y esquemas.
 19

GALERIA DE IMÁGENES
CELULAS PROCARIOTAS
TIPOS DE BACTERIAS

Imagen tomada de http://www.dialogica.com.ar/medline/2007/09/la-era-de-las-

bacterias.html

Ejemplos de Bacterias vistas por el microscopio.

E. coli B. subtilis

Imagen izquierda tomada de http://www.flickr.com/photos/22235036@N05/archives/date-

posted/2008/01/18/
Imagen derecha tomada de faculty.mc3.edu/jearl/ML/ml-5-2.htm
 20

CELULAS EUCARIOTAS
Reino protista
Paramecio

Imagen izquierda tomada de http://www.flickr.com/photos/tags/microscope/clusters/

Imagen derecha tomada de www.unad.edu.co/curso_biologia/protozoos.htm
Ameba

Imagen izquierda tomada de www.biologianet.galeon.com/webs/mundo.html Imagen derecha

tomada de: www.aldia-iq.com/.../Autora:Nicole Mitidieri

Ejemplos de protozoarios presentes en agua empozada.

 21

Vorticella Diatomeas Paramecio Euglena

Imagen tomada de:http://plantphys.info/organismal/lechtml/images/vorticella.jpg
Reino Vegetal
Elodea
a) Planta de Elodea b) Células de hoja de Elodea

Membrana
celular

Pared celular

Cloroplasto

Citoplasma

Imagen izquierda tomada de www.ppws.vt.edu/scott/weed_id/eldde.htm

Imagen derecha tomada de http://grandpacliff.com/Trees/AutLeaves-8.htm

Reino Animal
Epitelio de la boca
a) Células epiteliales de boca. Trabajo de laboratorio b) Epitelio de boca con tinción

Imagen a: trabajo en el laboratorio. Imagen b: tomada de www.papquick.com/es_galeria.html

Reino Fungi
Aspergillus
a) Hongo b) Hongo trabajo de clase

Esporas

Hifa

a) Imagen tomada de http://mycota-crcc.mnhn.fr/site/espece.php?idE=98

b) Imagen tomada en el trabajo de Laboratorio
 22

LABORATORIO N° 3

MACROMOLÉCULAS

INTRODUCCIÓN

Dentro de la célula existe varios tipos de moléculas, las más abundantes son
las llamadas macromoléculas que están formadas de docenas hasta millones
de carbonos. Su función es formar la estructura de la célula y ejecutar tareas
con gran precisión otorgando a los organismos la propiedad de la vida.
Estas grandes moléculas se pueden dividir en cuatro grupos: carbohidratos,
proteínas, lípidos y ácidos nucleicos (ver figura 3.1).

Figura 3.1 Moléculas existentes en la célula.

Imagentomadadehttp://www.cancerquest.org/printfriendly.cfm?printsub=20&lang=spanis
h
Los carbohidratos, glúcidos, hidratos de carbono o sacáridos, están formados
de carbono, hidrógeno y oxígeno. Son la principal fuente de energía que se
almacena y consume, son solubles en agua y forma parte de ciertas
estructuras biológicas como la pared de las células vegetales.
Se clasifican en monosacáridos, disacáridos, oligosacáridos y polisacáridos. Los
monosacáridos son los más simples, están formados por una sola molécula y
no pueden ser hidrolizados en moléculas más pequeñas, ejemplo la glucosa.
Los disacáridos esta formados por dos monosacáridos unidos por enlaces
covalentes llamado enlace glucosídico, ejemplo la sacarosa. Los
oligosacáridos están formados por tres o hasta nueve moléculas de
monosacáridos, normalmente se une a proteínas formando las glicoproteínas,
ejemplo rafinosa. Los polisacáridos son cadenas ramificadas o no de más de
diez monosacáridos, ejemplo almidón, glucógeno, celulosa y quitina.
 23

Los lípidos, formados por carbono e hidrogeno en menor cantidad oxigeno y

también pueden tener fósforo, azufre y nitrógeno. Cumplen varias funciones
como reserva de energía (triglicéridos), función reguladora (esteroides) y
función estructural (fosfolípidos de bicapa).
La mayoría de lípidos son anfipáticos, tienen una estructura polar o hidrofílica y
una gran parte apolar o hidrofóbica.
Los lípidos importantes en la función celular son: grasas, esteroides y
fosfolípidos.
Las grasas formadas de tres ácidos grasos y glicerol; los esteroides formado de
un esqueleto de cuatro anillos de hidrocarburos, y los fosfolípidos formado de
dos ácidos grasos y un glicerol.

Las proteínas, Son largas cadenas formadas de la unión de aminoácidos,

determinan las actividades estructurales y funcionales de los sistemas celulares,
forman gran parte de la estructura celular en las membranas y organelas y
además, las proteínas actúan como catalizadores biológicos (enzimas), regulan
funciones celulares y tisulares (hormonas), combaten enfermedades infecciosas
(anticuerpos), participan en la contracción de músculos (actina y miosina).
Las proteínas son moléculas gigantes, tremendamente complejas formadas de
carbono, hidrógeno, oxígeno y también contienen nitrógeno. Tienen un rango
amplio de pesos moleculares.

Los ácidos nucleicos, Son macromoléculas formadas por monómeros

llamados nucleótidos unidos entre sí por medio de enlaces fosfodiester.
Cada nucleótido consiste de tres unidades: un azúcar, un fosfato y una base
nitrogenada.
La función principal es transmitir información a otras partes de la célula y son
responsables de la herencia.
Existe dos tipos principales ácidos nucleicos: ADN (localizado en el núcleo y en
el citoplasma de determinadas células) y ARN (localizado en el nucleolo y en el
citoplasma). El ADN es capaz de replicarse por si mismo. El ARN es utilizado por
los organismos para leer la información codificada por el ADN y usarla para
hacer proteínas.
Ver galería de imágenes.

3.1 OBJETIVOS.
 Analizar la importancia de las macromoléculas en la célula.
 Identificar cualitativamente algunas de las macromoléculas existentes en
la célula.

3.2 PRÁCTICAS

3.2.1 Ejercicio N° 1 Carbohidratos

Materiales
 Reactivo de Benedict
 Tubos de ensayo
 24

 Morteros
 Papas
 Bulbos de cebolla
 dH2O
 Baño maría
 Solución de azúcar
 Caja Petri

Procedimiento A
Prueba de Benedict con cebolla
La prueba de Benedict es una prueba para azúcares reductores y permite
probar la presencia o ausencia de los mismos. Se basa en que los
monosacáridos y algunos disacáridos tienen un grupo aldehído libre y reducen
fácilmente los agentes oxidantes. En esta reacción el grupo aldehído del azúcar
se oxida en solución salina y el agente oxidante se reduce.

H O
Benedict + C=O --------- Benedict + R -----C----OH
Forma Azúcar Forma Azúcar
Oxidada reductor reducida ácido

Este ejercicio probará la presencia o ausencia de azúcares reductores en la

cebolla y en la papa.

a) Marcar tres tubos de ensayo a 1 cm y 2 cm desde la base. Identificar

como A, B, C.
b) En un mortero, macerar un pequeño pedazo de cebolla y recoger el
Zumo resultante en el tubo A hasta la marca de 1 cm.
c) Macere una papa y el zumo ponga en el tubo B hasta la marca de 1 cm.
d) En el tubo C poner agua destilada hasta la marca de 1 cm.
e) Agregar a los tres tubos (A, B, C) el reactivo de Benedict hasta llegar a la
marca de 2 cm y mezclar bien.
f) Coloque los tres tubos de ensaño en un baño de agua hirviendo por tres
minutos.
g) Saque los tubos del agua y observe los cambios de color. El cambio de
azul claro a naranja o marrón indica abundancia de azúcares reductores.
Un cambio a verde indica la presencia de una pequeña cantidad d azúcar
reductor.
h) Dibuje sus observaciones.

3.2.2 Ejercicio N° 2 Proteínas

Materiales
 Tubos de ensayo
 Albúmina de huevo 1%
 dH2O
 Solución de azúcar o Almidón 1% (p/v)
 Sulfato de cobre (CuSO4 )
 25

 Hidróxido de sodio (NaOH) 0,5 % (p/v)

Procedimiento
Prueba de Biuret
Esta prueba se fundamenta en la interacción entre los iones de cobre del
reactivo de Biuret y los grupos amino de los enlaces peptídico de los
aminoácidos que forman las proteínas. Cuando es positiva la reacción, el color
cambia de azul a violeta.

a) Marque tres tubos de ensaño A, B, C.

b) Cada tubo marcar a 3 cm y 5 cm desde la base del tubo.
c) Al tubo A, poner la solución de albúmina hasta la marca de 3 cm. En el
tubo B, poner el agua hasta la marca de 3 cm y en el C la solución de
almidón o la solución de azúcar.
d) Añadir NaOH concentrado hasta la segunda marca de cada tubo y
mezcle. El NaOH es peligroso, quema fuertemente, por lo tanto,
manéjelo con cuidado. Si se derrama accidentalmente sobre la piel o
ropa, lave inmediatamente en abundante agua fría.
e) Añadir cinco gotas de sulfato de cobre al 0,5% y mezclar.
f) Poner los tubos sobre una superficie blanca. Observar el cambio de
color. En la presencia de proteína, la solución se volverá violeta.
g) Registre sus observaciones.

3.2.3 Ejercicio Nº 3 Lípidos

Materiales
 Sudán 1-((4-(fenildiazenil)fenil)diazenil) naftaleno-2-ol
 Pinzas
 Papel filtro
 Pipetas o goteros
 Aceite de mesa
 Crema de leche
 Albúmina de huevo 1% (v/v)
 dH2O
 Etanol
 Caja Petri
Procedimiento

Las pruebas con SUDAN III se basan en la detección de grupos

hidrocarbonados libres después de la condensación entre el glicerol y los
ácidos grasos en la formación de un lípido. El tinte coloreado y los grupos
hidrocarbonados son no polares y se pegan fuertemente en su ambiente polar,
llevando a cabo una interacción hidrofóbica.
En presencia de lípidos el SUDAN da una coloración naranja.

a) Tome un círculo de papel filtro

b) Escriba los números del 1 al 5 en los bordes del círculo de
manera que queden distribuidos equitativamente y bajo ellos
dibuje círculos pequeños de 1 cm de diámetro más o menos.
 26

c) Con una pipeta o gotero coloque una gota de los siguientes

elementos: en el círculo 1 aceite, en el 2 crema de leche, en el
3 albúmina, en el 4 agua destilada y en el 5 etanol. Procure
que las gotas no se salgan de los círculos dibujados.
d) Deje secar.
e) Ponga el papel filtro dentro de una caja Petri y vierta sudan
hasta cubrir el papel filtro. Espere tres minutos.
f) Con una pinza tome el papel filtro y enjuague bajo la llave de
agua.
g) Evalúe la intensidad de tinción naranja: 0 no hay color, 1
naranja pálido y 2 naranja definido.
h) Establezca sus resultados y dibuje sus observaciones

3.2.4 Ejercicio Nº 4 Estructura de los Ácidos Nucleicos (maqueta,

exposición grupal)

Materiales

Para este ejercicio cada grupo de trabajo preparará piezas que representen los
monómeros de los ácidos nucleicos. Las piezas deben acoplarse para así crear
cadenas de ADN y ARN y deben respetar las principales reglas químicas de
acoplamiento.

3.3 ENLACES
 www.apinguela.com/enlacesmundo/.../biologia.htm Bioelementos,
biomoléculas, conceptos, clasificación, explicaciones sencillas.
 http://learn.genetics.utah.edu/ Videos de los ácidos nucleicos

GALERIA DE IMÁGENES
CARBOHIDRATOS.

MONOSACARIDOS. Ejemplos:
 27

Imágenes tomadas de
http://www.virtual.unal.edu.co/cursos/ciencias/2000024/lecciones/cap01/01_01_03.htm

ENLACE GLUCOSIDICO.

Imagen tomada de
http://www.virtual.unal.edu.co/cursos/ciencias/2000024/lecciones/cap01/01_01_03.htm

POLISACARIDO. Ejemplo:

Imagen tomada de
http://www.virtual.unal.edu.co/cursos/ciencias/2000024/lecciones/cap01/01_01_03.htm
 28

PROTEÍNAS

ENLACE PEPTIDICO. ESTRUCTURA DE UN AMINOÀCIDO

Imagen izquierda tomada de http://biomodel.uah.es/en/model1/contents.htm Imagen derecha

tomada de : http://preupsubiologia.googlpages.com/2preupsubiologi.

NIVELES DE ORGANIZACIÓN DE PROTEÌNAS.

Imagen tomada de http://biologia-jct.iespana.es/curtis/libro/c3c.htm

LIPIDOS
Carácter anfipático

Imagen tomada de www.apinguela.com/enlacesmundo/.../biologia.htm

 29

Estructura de triglicéridos

Imagen tomada de http://cienciasbiologiafisicaquimica.blogspot.com/2008/01/fotosntesis.html

Esteroides

Imagen tomada de
http://www.virtual.unal.edu.co/cursos/ciencias/2000024/lecciones/cap01/01_01_10.htm

ACIDOS NUCLEICOS
Nucleótido

Imagen tomada de:

http://ciam.ucol.mx/villa/materias/RMV/biologia%20I/apuntes/1a%20paracial/mole%20orga/biomolecula
.htm
 30

Acido desoxirribonucleico (ADN) y Ácido ribonucleico (ARN)

Imagen tomada de http://www.maph49.galeon.com/arn/rnamol.html

 31

LABORATORIO N° 4

MEMBRANAS BIOLÓGICAS Y PROCESOS DE TRANSPORTE.

INTRODUCCIÓN

La presencia de membrana plásmica en la célula permite que se cree dos tipos

de compartimentos; el intracelular y el extracelular. Cada uno tiene
concentraciones moleculares y cargas eléctricas diferentes, lo que lleva al
intercambio de moléculas entre los dos compartimentos.

El paso de las moléculas y de iones se lo hace a través de la membrana celular

que selecciona que entra o sale y esto depende de la carga, el tamaño y la
concentración de moléculas. Por esto se dice que la membrana es selectiva y
semipermeable.
Hay dos tipos de transporte para el paso de moléculas, el transporte activo y el
transporte pasivo.

El transporte pasivo es un proceso que no requiere de energía se hace desde

una zona de concentración de solutos elevada a otra de concentración de
solutos baja, por esto se dice que es a favor de un gradiente de concentración.
Dentro de este tipo tenemos la difusión simple y la facilitada (figura 4.1).

El transporte activo ocurre en contra del gradiente de concentración, y por

lo tanto, necesita energía (ATP). Las proteínas transportadoras que intervienen
se llaman “bombas”. (Figura 4.1).

Figura. 4.1: Diferentes tipos de transporte a través de la membrana plasmática.

Imagen tomada de http://www.educarchile.cl/psu/estudiantes/Contenidos.

 32

Dentro de las moléculas que atraviesan la membrana con facilidad, está el

agua. El agua (solvente universal) es muy importante para la célula, se
transporta a través de la membrana plasmática por un mecanismo llamado
osmosis (mirar galería de imágenes), que es un tipo de difusión hecha solo
por moléculas de agua. Este movimiento esta determinado por la presión
osmótica, que es producida por la diferencia de concentraciones de solutos a
ambos lados de la membrana. Va haber movimiento neto de agua hacia dentro
o fuera de la célula dependiendo si el medio donde se encuentra la célula es
hipotónico o hipertónico.

Se llama hipotónica cuando en un medio, el total de la concentración molar es

menor que otra. O cuando la concentración interna celular es menor. (Figura
4.2)
Se llama hipertónica cuando la concentración molar del medio es mayor que
otro (Figura 4.2)
Se llama Isotónica cuando dos medios tienen la misma concentración de
solutos disueltos. (Figura 4.2)

Figura 4.2. Esquemas representativos de soluciones hipotónicas, isotónicas e

hipertónicas

Imagen tomada de http://www.maph49.galeon.com/memb1/solutions.html

El flujo de agua y de otras substancias puede dar el cambio de morfología

celular presentando diferentes tipos de fenómenos.

Cuando en el interior de la célula hay mayor concentración de solutos

(hipertónica) en comparación al medio donde está inmersa, va a existir el paso
de agua hacia el interior para tratar de igualar la concentración, ejerciendo más
presión del agua sobre la membrana. A esta gran presión dentro de la célula se
lo conoce como Turgencia. El movimiento neto del agua termina cuando se
alcanza el equilibrio o la célula estalla.

En el caso de los vegetales la célula soporta esta presión por la presencia de la

pared celular, además que le permite ser rígida y, por lo tanto, determinar la
forma de la planta.

Cuando la célula no presenta la protección de una pared celular rígida el agua

entra sin control al interior, la célula estalla al no soportar tanta presión. A este
 33

fenómeno se lo conoce como Plasmóptisis, cuando este fenómeno ocurre en

células sanguíneas se llama hemólisis.

Se habla de Plasmólisis cuando una célula vegetal es sometida en un medio

hipertónico, entonces el agua empieza a salir del citoplasma hacia el exterior de
la célula quedando la membrana y el citoplasma encogido, pero la forma
inalterada debido a la protección de la pared. En el caso de células animales,
protistas y bacterias (éstas últimas también protegidas por la pared celular)
cuando son sometidas al mismo medio hipertónico, se habla de crenación
cuando el agua se difunde desde el citoplasma hacia el exterior y se encoge.
Existen varios autores que se refieren únicamente al término plasmólisis para
nombrar al efecto de encogimiento por pérdida excesiva de agua en cualquier
tipo de célula.
Ver galería de imágenes.

4.1 OBJETIVOS.

 Comprobar los transportes a través de la membrana celular.

 Demostrar la importancia que tiene la concentración de las soluciones
sobre las células.
 Diferenciar los fenómenos de difusión, ósmosis, turgencia, plasmólisis,
plasmóptisis y transporte activo.

4.2 PRÁCTICAS

4.2.1 Ejercicio N° 1 Difusión

Materiales
 Vaso de precipitados 100 mL
 Rojo congo 3,3'-([1,1'-bifenil]-4,4'-diil)bis(4-aminonaftalen-1-
sulfonato)de sodio
 dH2O
 Cronómetro
 Pipeta pasteur

Procedimiento
a) Llenar de agua hasta la mitad en el vaso de precipitados. Dejar caer en
su interior de quince a veinte gotas de tinte rojo congo. No mezclar.
b) Observar lo que sucede en el transcurso de media hora.
c) Graficar lo observado.
4.2.2 Ejercicio N° 2 Ósmosis y Diálisis

Materiales
 Membrana de diálisis
 Cuerda o hilo
 Vasos de precipitación
 Solución de almidón
 Solución Lugol
 34

 dH20
 Cronómetro
 Jeringa o pipeta de vidrio
 Tijeras
Hay que tomar en cuenta para este experimento que el lugol detecta la
presencia de almidón coloreándolo de color morado obscuro hasta negro.

Procedimiento
a) Recortar 6 cm de membrana de diálisis.
b) Remojar en agua destilada, antes de usarla, por unos diez minutos.
c) Amarrar fuertemente uno de los extremos.
d) Abrir el otro extremo y colocar solución de almidón.
e) Cerrar el extremo restante fuertemente. Tomará la forma de un
caramelo.
f) Meter este caramelo en un vaso de precipitados que tenga agua con
lugol. Lo suficiente que cubra el caramelo.
g) Dejar 10 minutos y verificar lo que pasa.
h) Dibujar sus resultados.

4.2.3 Ejercicio Nº 3 Turgencia, Plasmólisis y Plasmóptisis.

Materiales
 Lanceta
 Alcohol antiséptico
 Solución de NaCl al 0,9% y al 5% (p/v)
 Portaobjetos
 Cubreobjetos
 Microscopios ópticos
 Agua destilada
Procedimiento A

a) Marque cuatro portaobjetos como: 1, 2, 3,4.

b) Obtener sangre de la yema del dedo, usando una lanceta estéril.
c) Sobre cada portaobjetos en el centro, ponga una gota de sangre.
En el portaobjeto #1 coloque el cubreobjetos sobre la muestra.
En el portaobjeto #2 coloque una gota de NaCl al 0,9% (suero
fisiológico) y el cubreobjetos.
En el portaobjeto #3 añada una gota de NaCl al 5% y un cubreobjeto.
En el portaobjeto #4 añada una gota de agua destilada y cubreobjeto.
d) Observe todas las placas con lente de 100X y compare con las gráficas
de galería de imágenes para identificar los diferentes fenómenos.
e) Dibujar en detalle a los glóbulos rojos con los diferentes cambios.

Procedimiento B (práctica que debe realizarse en casa y presentarlo en el II

parcial)
a) Cinco días antes de la práctica, poner dos huevos de codorniz en jugo
de limón o vinagre como se ve en la figura 4.3. El jugo sacara la cáscara
 35

externa dura dejando la membrana interna. Este proceso demora de 2h.

a 12h.
Figura 4.3 A. Huevo de codorniz en jugo de limón. B. Huevo de codorniz sin
cáscara externa.

A B

Imagen derecha tomada de

http://www.virtual.unal.edu.co/cursos/veterinaria/2006359/lecciones/cap5/16.htm

b) Inmediatamente luego de descalcificar (sacar la cáscara externa), poner

un huevo en un recipiente con miel y al otro en un recipiente con agua.
Mirar figura 4.4

Fig. 4.4 A. huevo en miel. B huevo en agua.

A B

c) Dejarlos por el tiempo restante (más o menos 4 días).

d) Traerlos a clase para discutir sobre los resultados.
e) Dibujar los resultados

4.2.4 Ejercicio Nº 4 Transporte Activo

Materiales
 Matraces o vasos de precipitados
 Levadura 2g
 Carbonato de sodio (Na2CO3) 0,75 %
 Plancha térmica
 Rojo neutro 0,02%
En este ejercicio, se analizará este fenómeno en la levadura, un hongo unicelular. La
sustancia a ser transportada es el ROJO NEUTRO, un tinte que es rojo en solución
ácida y amarillo en solución básica. Se utilizará Carbonato de sodio (Na2CO3) para
 36

hacer básica a la solución inicialmente. Las condiciones en el interior de las células

vivas son relativamente ácidas. Las células en el matraz A son hervidas y por lo tanto
sus membranas son permeables a todas las moléculas. En el matraz B están vivas y
sus membranas pueden ser permeables o impermeables al colorante.

Procedimiento

a) Rotule dos matraces o vasos de precipitados como A y B. Para cada uno

pese 2g de levadura y vierta en los matraces. Añada luego 10 mL de
agua destilada tibia a cada matraz y espere por 10 minutos.
b) En el matraz A ponga 25 mL de Na2CO3 0,75% y mezcle bien. Haga
hervir esta mezcla por 2 minutos y déjela enfriar (las células están
muertas). Añada 20 mL de rojo neutro 0,02%, cuando enfríe.
c) En el matraz B ponga 25 mL de Na2CO3 0, 75% y 5 mL de rojo neutro
0,02%. Agite el frasco y observe la diferencia de color con el matraz A.
d) Dibuje sus observaciones

4.3 ENLACES
 http://preupsubiologia.googlepages.com/celula existe información
escrita y de imágenes con respecto a la célula y su fisiología.
 http://www.linkpublishing.com/video-transport.htm videos sobre osmosis
y los efectos de las concentraciones de sustancias sobre los glóbulos
rojos y elodea.
 http://herb.biol.uregina.ca/liu/bio/idb.shtml Motor de búsqueda de
información relacionada con las plantas en la red. Contiene numerosos
enlaces.
 http://www.biologia.edu.ar/animaciones/temas/ciclos/osmosis.html
Página en español de la Universidad Nacional del Noreste, en Argentina,
que nos muestra una animación sobre los procesos de ósmosis además
de una serie de hipertexto sobre el área de biología.

GALERIA DE IMÁGENES
Difusión, diálisis y osmosis.
 37

Imagen tomada de http://www.h2onew.com

Glóbulos rojos: Plasmólisis (crenación), turgencia, hemólisis (plasmoptisis)

Turgente
Medio Isotónico Medio Hipertónico Medio Hipotónico

Normal Plasmólisis/ Crenación Plasmoptisis/ Hemólisis

 38

Imagen tomada de http//:www.vi.cl

Células vegetales

Imagen tomada de http//:www.vi.cl

LABORATORIO N° 5

ACCION ENZIMÁTICA

INTRODUCCIÓN
Por regla general, todas las reacciones bioquímicas están reguladas por
enzimas, que son catalizadores biológicos. Un catalizador biológico, es una
sustancia que acelera la reacción química sin modificarse o consumirse,
haciendo que pueda actuar en muchas reacciones individuales. Sin embargo sí
se puede ir deteriorando (entropía) y debe ser reemplazada eventualmente. Las
enzimas para participar en una reacción no necesitan estar en grandes
cantidades.
Las enzimas (E) tienen uno o mas lugares denominados sitios activos, los
cuales se une al sustrato (S), o sea la sustancia sobre la que actúa la enzima.
(Ver gráficos en galería de imágenes). Cuando existe el acoplamiento de la
enzima más el sustrato se forma el complejo enzima –sustrato (ES) que es un
paso intermedio necesario para formar y romper enlaces. Como paso final se
dará producto (P) más enzima (E). Este tipo de reacción es generalmente
reversible y podemos expresarla de la siguiente manera:

E+S [ES] E+P

Ver gráficos en galería de imágenes.

En la unión del sustrato al sitio activo de la enzima participan fuerzas químicas

no covalentes (uniones iónicas, puentes de hidrógeno, fuerzas de van der
waals), con un radio de acción muy limitado y es por esto que el complejo (ES)
se da sólo si son complementarios.

Una característica muy importante es que cada enzima es específica para su

sustrato y factores tales como la temperatura y el pH pueden afectar su
actividad.
 39

Aunque la gran mayoría de las enzimas so proteínas algunas contienen

elementos no proteicos (enzimas conjugadas) llamados cofactores, que
pueden ser inorgánicos (metales, como los cationes Fe2+, Cu2+, K+, Mn2+, Mg2+
) u orgánicos (coenzimas).

La presencia de enzimas permite a la célula utilizar eficientemente metabolitos

y sustancias comestibles. Al mismo tiempo, las enzimas pueden limitar las
capacidades de la célula, porque la célula puede llevar a cabo solamente
aquellas reacciones para las que tiene enzimas.

Algunos sistemas enzimáticos son responsables directos del rompimiento de

moléculas para producir energía y productos de desecho. A este tipo de
reacciones se llama exergónico, porque, a pesar de que la mayoría de
reacciones involucradas requieren energía, al final se producen mayor cantidad
de energía de la que fue utilizada por el sistema. Ejemplo:

Rompimiento:
Sistema enzimático-aerobio
Monosacáridos --------------------------------- > CO2 +H2O + energía
Respiración

Por otro lado, otros sistemas enzimáticos son responsables de procesos

biosintéticos en la célula, en estos procesos usan energía. Estos son por entero
procesos endergónicos. Ejemplo:

Síntesis:
Sistema enzimático- polimerasas
Monosacáridos ---------------------------------------> polisacáridos

Sin embargo de esto, es importante anotar que las enzimas no determinan que
sean reacciones exergónicas (termodinámicamente favorables) o endergónicas
(termodinámicamente desfavorables).

5.1 OBJETIVOS.

 Entender los principios básicos de la actividad enzimática.

 Poner de manifiesto la presencia de enzimas en tejidos vegetales y
animales.
 Relacionar la acción enzimática con el tiempo.
 Comprobar la acción de la temperatura sobre la actividad de las enzimas.

5.2 PRÁCTICAS
5.2.1 Ejercicio N° 1 Actividad enzimática y tiempo

Materiales
 Papa
 40

 Tubos de ensayo
 Solución de pyrocatecol al 0,1% y/o 1%, preparada poco minutos antes
del ejercicio.
 Baño María
 Mortero
 Cronómetro

La catecolasa (catecol oxidasa), enzima obtenida de la papa, es una enzima de

tipo oxidasa, cataliza la oxidación del catecol. El catecol es incoloro en solución,
mientras que el ácido cis,cis mucónico es negro. Entre más catecol convertido
a ácido cis,cis mucónico, más oscura se torna la solución. Reacciones de este
tipo son las responsables de pigmentaciones negras en prácticamente todas las
formas de vida. Ver gráficos en galería de imágenes.

Procedimiento A
a) Rotule 3 tubos de ensayo: 1a, 1b y 1c.
b) Marque a 1 cm y 2 cm desde la base del tubo.
c) Llene cada tubo como sigue:
Tubo 1a: 1 cm de catecol oxidasa (catecolasa)
1 cm de solución de catecol al 1%

Tubo 1b: 1 cm de catecol oxidasa (catecolasa)

1 cm de agua destilada

Tubo 1c: 1 cm de agua destilada

1 cm de solución de catecol al 1%

d) Mezcle el contenido de los tubos y anote el color de la solución de cada

tubo en el tiempo “0” en la Tabla 5.2.1 A.
e) Coloque los tubos en Baño María a 38 ºC.
f) Examine el color de los tubos a los 5 min, 10 min y 15 minutos. Registre
los datos en la Tabla 5.2.1 A.
A los 15 minutos, el catecol debe estar totalmente oxidado. Por lo tanto el
color del tubo 1a será considerado como “5” para intensidad de color en
una escala de 0 a 5. Los tubos 1b y 1c, serán considerados “0”.

TABLA 5.2.1 A
Tiempo Tubo 1A Tubo 1B Tubo 1C
0 min
5 min
10 min
15 min

5.2.2 Ejercicio N°2 Efecto de la temperatura en la actividad

enzimática.
Materiales:
 Tubos de ensayo
 41

 Catecol al 1%
 Gradillas
 Hielo
 Baño maría
 Plancha térmica
 Papa
 Vaso de precipitados
 Termómetro
 Mortero
 Cronómetro

Procedimiento A
a) Llene hasta la mitad un vaso de precipitación de 400 mL con agua
corriente y póngalo a calentar hasta que hierva.
b) Llene otro vaso de precipitación de 400 mL con 150 mL de agua
corriente y añada hielo.
c) Llene hasta la mitad un tercer vaso de precipitación de 400 mL,
manténgalo a temperatura ambiente.
d) Caliente un baño maría a 38 °C y coloque un vaso de precitación con
agua
e) Obtenga 4 tubos de ensayo y rotúlelos 3a, 3b, 3c y 3d.
f) Marque a 1cm y 2 cm. desde la base.
g) Llene cada tubo hasta la marca de 1cm con catecol oxidasa.
h) Colóquelos así:
o Tubo3a: en el vaso de precipitación que contiene hielo.
o Tubo3b: en el vaso de precipitación que contiene agua a
temperatura ambiente.
o Tubo 3c: en baño María a 38 ºC
o Tubo3d: en el vaso de precipitación que tiene agua hirviendo.
o Mida las temperaturas y regístralas en la Tabla 5.2.2 B

i) Deje a los tubos 5 minutos en sus respectivas temperaturas.

Retire los tubos y añada catecol al 1% en cada tubo hasta la marca de dos
centímetros. Agítelos anote la hora, este es el tiempo 0. Registre la
intensidad de color en cada tubo en la Tabla 5.2.2B. Regrese
inmediatamente a los tubos a sus respectivas temperaturas.
j) Agite continuamente los tubos por 5 minutos. Registre la intensidad de
color a los 5, 10 y 15 minutos después de añadir el catecol.
k) Una vez concluido el ejercicio deje toda la cristalería limpia y la mesa de
trabajo en orden

Tabla 5.2.2 B

Tiempo Tubo 3ª Tubo 3b Tubo 3c Tubo 3d

(minutos) _____ºC _____ºC ______ºC ______ºC
 42

0 min
5 min
10 min
15 min

5.2.3 Ejercicio Nº 3 Consecuencia de la actividad enzimática

Materiales
 Goteros o Pipetas Pasteur
 Corazón de pollo
 Hígado de pollo
 Mortero
 Peróxido de Hidrógeno al 1%
 Ácido sulfúrico
Procedimiento A. Presencia de enzimas en órganos de animales.
Reconocimiento de catalasa.
La catalasa es una enzima (Ver gráficos en galería de imágenes.) que se
encuentra en las células de los tejidos animales y vegetales.
La función de esta enzima en los tejidos es necesaria porque durante el
metabolismo celular, se forma una molécula tóxica que es el peróxido de
hidrógeno, H2O2 (agua oxigenada) y la catalasa, lo descompone en agua y
oxígeno.
La reacción de la catalasa sobre el H2O2, es la siguiente:

a) Colocar un pedazo pequeño de hígado de pollo en un mortero.

b) Macerar, estas son sus preparaciones de catalasa.
c) Proceder de igual manera con un pedazo de corazón de pollo.
d) Marcar dos tubos de ensayo; uno con CH, de catalasa de hígado y el otro
CC, catalasa de corazón. Además señalar los tubos hasta los 2 cm desde
la base.
e) Colocar en cada tubo las preparaciones correspondientes.
f) Añadir, en cada tubo, 2.5 mL de peróxido de hidrógeno al 1% (agua
oxigenada).
g) Dibuje los resultados observados.

5.3 ENLACES
 http://www.ehu.es/biomoleculas/ENZ/ENZ.htm Reacciones químicas: su
acción
 http://www.ehu.es/zorrilla/juanma/ARMAS/Armamento.pdf tiene
Conceptos, clases, importancia metabólica y más sobre enzimas.
 http://enzimasnelly.blogspot.com/ información de enzimas y tecnología.

GALERIA DE IMÁGENES
 43

Interacción enzima sustrato

Imagen tomada de Comunidad de Madrid personales.ya.com/

Presencia de sitios activos en la célula.

Imagen tomada de www.proteus.1afm.com/biologia/Oligom66

Reacción del catecol y la catecol oxidasa

Imagen tomada de www.adinstruments.com/solutions/images

Acido cis, cis, mucónico es un metabolito del benceno

Imagen tomada de http://it.wikipedia.org/wiki/Acido_muconico

Estructura de la catalasa
 44

Imagen tomada de http://enciclopedia.us.es/index.php/Catalasa

LABORATORIO N° 6

DIVISION CELULAR: MITOSIS

INTRODUCCIÓN

El proceso por el cual se originan nuevas células a partir de otras ya existentes

se llama división celular o reproducción celular. Este es un proceso
necesario para: remplazar las células muertas, para colaborar con el
crecimiento del organismo del que forman parte y es la base para la
reproducción de los organismos a través de la formación de gametos.
Cada célula en etapa de división se denomina célula madre, y sus
descendientes se llaman células hijas. Se les llama así porque la célula madre
transmite copias de su información genética a sus células hijas, posteriormente
las células hijas se convertirán en células madres y volverán a pasar la
información genética.

El crecimiento y división celular se llama CICLO CELULAR. Entonces el ciclo

celular esta formado de dos fases importantes: la fase M y la INTERFASE-

La fase M incluye: 1) mitosis o meiosis y 2) citocinesis que es la división del

citoplasma para dar células hijas. La célula en fase M pasa un corto tiempo de
todo el ciclo.(fig. 6.1)
 45

Figura N°. 6.1 Ciclo celular

INTERFASE: esta formado por tres estadios; G1, generalmente es una etapa
larga del ciclo celular (40% más o menos) durante este momento, la célula
crece, su contenido de ADN es equivalente a 2n, las moléculas y estructuras
citoplasmáticas aumentan en número y hacia el final se aumenta la actividad de
las enzimas que se requerirán para la fase siguiente y alcanza un punto R
(restricción) que es el primer punto de control del ciclo celular, algunas células
dentro de este periodo antes del punto R entran en latencia temporal o
permanente llamado G0. En el estadio S o de síntesis se realiza la duplicación
del ADN (4n) y de histonas, existe aquí un mecanismo de control para que
ocurra una sola vez esta síntesis.
Una vez que se completó el estadio S comienza la G2, y es donde evalúa si la
célula puede entrar en división y existe un aumento en la síntesis de proteínas.
Se ensamblan las estructuras relacionadas con la mitosis y citocinesis. El fin de
G2 es marcado por el comienzo de la fase M. (ver figura 6.1)
Dijimos que en la fase M ocurre el proceso de mitosis o meiosis. En esta
práctica hablaremos de mitosis.

MITOSIS: es un proceso de división celular, que ocurre en todas las células

excepto las germinales y que da como resultado dos células hijas con el mismo
número de cromosomas de la célula madre. La mitosis generalmente se divide
en cinco etapas:
1. Profase: La cromatina se condensa para formar cromosomas. Los
cromosomas están formados de dos cromátidas unidos por un
centrómero con cinetocoro. Empieza a organizarse el huso mitótico. El
citoesqueleto, el nucleolo y la envoltura nuclear desaparecen.
2. Prometafase: Los microtúbulos del huso mitótico se fijan al cinetocoro de
los cromosomas, los cromosomas se desplazan hacia el plano ecuatorial
del huso.
 46

3. Metafase: los cromosomas se alinean en el plano ecuatorial de la célula.

4. Anafase: Separación de las cromátidas hermanas y desde este momento
se les considera a cada una como un cromosoma independiente. Los
cromosomas se mueven hacia los polos opuestos del huso. Este período
termina cuando todos los cromosomas han llegado a los polos. La
citocinesis o división del citoplasma puede comenzar en este período.
5. Telofase: los cromosomas se agrupan en los polos apuestos del huso, se
ensambla la envoltura nuclear alrededor de los grupos de cromosomas,
los nucleolos se vuelven evidentes y desaparecen los microtúbulos del
huso. Al final de esta fase terminara la citocinesis.
En las células animales la citocinesis comienza con un surco que la rodea en
la región ecuatorial, se profundiza y termina por separar al citoplasma en dos
células hijas, cada una con núcleo completo.
En las células vegetales se forma una placa celular en el centro del citoplasma y
finalmente separa a la célula en dos partes iguales.
Ver imágenes de las etapas de mitosis en la galería de imágenes.

6.1 OBJETIVOS.
 Analizar la importancia de la división celular en el crecimiento y la
reposición de células en tejidos desgastados.
 Realizar adecuadamente la técnica de laboratorio en la preparación de
placas de mitosis.
 Observar microscópicamente las fases de la mitosis.
 Identificar las fases de mitosis

6.2 PRÁCTICAS
6.2.1 Ejercicio N° 1. Mitosis en raíz de cebolla
Materiales

 Microscopios
 Porta objetos
 Cubre objetos
 Bisturí o cuchilla
 Tijeras
 Pinzas
 Raíces de cebolla
 Solución de carnoy
 Acido clorhídrico al 10%
 Acetocarmín (cualquier colorante)
 Esmalte de uñas
 Cronómetro
 Cajas Petri
 Papel para limpiar lo lentes de los microscopios

Procedimiento
a) Cinco o seis días antes de comenzar el experimento, escoja un bulbo de
cebolla fresca y elimine mediante un raspado con una cuchilla, las raíces
secas que se hallan en la base del bulbo. En un frasco boca ancha o un
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vaso desechable coloque la cebolla como aparece en la figura N° 6.2.

Vierta agua en el frasco, hasta tocar la base de la cebolla. Mantenga la
base de la cebolla húmeda y cambie el agua diariamente.

Figura N° 6.2 Cebolla en recipiente con agua.

Imagen tomada de www.unicartagena.edu.co

b) Cuando las raíces nuevas alcancen 3 cm. Aproximadamente de longitud,

extraiga la cebolla del recipiente y corte el último centímetro de la punta.
c) Deposite estas raíces en la solución fijadora Carnoy (3 metanol: 1 ácido
acético) durante 2 minutos.
d) Traslade las raíces a un recipiente que contiene ácido clorhídrico al 10%
durante 2 minutos. Este tiempo varía según el tipo de célula.
e) Coloque las raíces en un recipiente con agua y lávela por 2 minutos.
f) Traslade las raíces a un recipiente con acetocarmín. Este colorante las
debe cubrir totalmente durante 2 minutos.
g) Saque la raíz del recipiente que contiene acetocarmín y póngala en un
porta objeto.
h) Corte nuevamente la raíz, dejando el extremo inferior (ápice) y deseche
el otro.
i) Coloque en ángulo recto el cubre objeto, bájelo lentamente hasta que se
pose en el preparado, y luego haga una leve presión con el dedo hasta
conseguir una extensión del preparado.
j) Selle los bordes del cubre objeto con esmalte y deje secar.
k) Observe con el objetivo de menor aumento para localizar las figuras
mitóticas, y posteriormente con el objetivo de mayor aumento para
discriminar detalles. Guiándose por las figuras de la galería de imágenes,
identifique las diferentes fases de la mitosis y dibújelas.

6.4 ENLACES
 http://www.whfreeman.com/lodish/ Página del libro "Molecular cell
biology", con buenas imágenes, esquemas y videos.
 http://www.biology.arizona.edu/default.html Curso de biología
incluyendo biología celular, bioquímica, desarrollo y otras áreas afines.
 48

 http://highered.mcgrawhill.com/sites/0070271348/student_view0/chapte
r27/elearning.html Curso sobre Biología con muy buenos documentales
para visualizar con Real Player.

GALERIA DE IMÁGENES

Imagen tomada de www.life.illinois.edu.

 49

LABORATORIO N° 7

DIVISION CELULAR: MEIOSIS

INTRODUCCIÓN

La meiosis es el proceso de división celular por el cual se obtienen células

haploides llamados gametos.
La meiosis comprende dos subdivisiones consecutivas; Meiosis I y Meiosis II
(ver figura N° 7.1).
La Meiosis I separa cromosomas homólogos y está formada de: Profase I,
Metafase I, Anafase I y Telofase I. La Profase I es la más larga en la mayoría
de las especies y consta de subfases: Leptoteno, Cigoteno, Paquiteno,
Diploteno y Diacinesis. En el transcurso de estas subfases ocurre sinapsis entre
los cromosomas homólogos. A los puntos de intercambio se lo conoce como
quiasmas y los cromosomas se hacen visibles en formas de tétradas.
Posteriormente hay el intercambio de material genético. Además en esta
primera fase desaparece la membrana nuclear, los nucleolos y se forma el huso
cromático. En la Metafase I, los cromosomas homólogos duplicados se alinean
en el plano ecuatorial de la célula. En Anafase I, estos homólogos se separan y
se dirigen hacia los polos opuestos de la célula. En Telofase I, los cromosomas
se reúnen en los polos de la célula. Esta fase termina con la formación de dos
células hijas por el proceso de citocinesis.

La Meiosis II, separa a las cromátidas hermanas y consta de Profase II,

Metafase II, Anafase II, Telofase II. En esta segunda división, las cromátidas
hermanas se separan por el centrómero y son llevadas a los polos celulares
generando así, dos células haploides procedentes de las dos células resultantes
de la Meiosis I. El resultado final es, en consecuencia, cuatro células haploides
con la mitad del contenido cromosómico.
En los animales los gametos son óvulos y espermatozoides y se producen en los
ovarios y testículos respectivamente.
Ver imágenes de las etapas de meiosis en la galería de imágenes.

Figura N° 7.1 Esquema proceso meiótico.

 50

7.1 OBJETIVOS.

 Valorar la importancia de la meiosis en la formación de gametos.

 Entender los eventos importantes que ocurren en la meiosis.
 Identificar mediante observación microscópica las diferentes fases de la
meiosis.
 Describir las diferencias entre los procesos mitóticos y meiótico.

7.2 PRÁCTICAS

7.2.1 Ejercicio N°1. Demostración de meiosis usando un modelo.

Los cromosomas contienen genes que son las unidades de la herencia. Los
pares homólogos contienen pares de genes que determinan las mismas
características y reciben el nombre de alelos. La localización física de un alelo
en un cromosoma se llama LOCUS (plural LOCI). Estos codifican para la misma
característica pero no necesariamente para la misma condición.

Materiales
 Mullos de color rojo y blanco
 Pedazos de sorbete
 Piola
 Plastilina o cinta adhesiva
Procedimiento
a) Arme 4 brazos, 2 de cada color, siguiendo el modelo de la figura
7.2.
b) Una por el sorbete las dos cadenas de un mismo color con un
trozo de plastilina o cinta adhesiva.
c) Las diferentes partes tienen las siguientes correspondencias:
1 mullo = 1 gen
Sorbete = centrómero
1 brazo = 1 cromátida
2 brazos unidos = Un cromosoma que se ha duplicado, formado
por dos cromátidas hermanas idénticas.
d) Con un marcador marque con letras dos loci, en cada cromátida
 51

para indicar alelos que codifican una misma característica.

Ejemplo: características color de la piel, A = pigmentación normal,
a = Ausencia de color (albinismo). Característica lóbulos de las
orejas, F = Lóbulos separados, f = lóbulos unidos.
e) Usando sus cromosomas modelo, póngalos dentro de un círculo
de papel que simule el núcleo. Mire un gráfico de meiosis y siga
los estadios que se describen a continuación.

Figura 7.2. Modelo de un par de cromosomas homólogos

7.3 ENLACES

 http://www.whfreeman.com/lodish/ Página del libro "Molecular cell

biology", con buenas imágenes, esquemas y videos.
 http://www.biology.arizona.edu/default.html Curso de biología
incluyendo biología celular, bioquímica, desarrollo y otras áreas afines.
 52

 http://highered.mcgrawhill.com/sites/0070271348/student_view0/chapte
r27/elearning.html Curso sobre Biología con muy buenos documentales
para visualizar con Real Player.

GALERIA DE IMÁGENES

Meiosis: Profase I

Meiosis I
 53

Meiosis II

Imagen tomada de http://www.bionova.org.es/biocast/documentos/tema12.pdf

 54

Imágenes tomada de botit.botany.wisc.edu/.../Meiosis_1, Page rendered: Thursday, June 18,

2009, 15:51:18.

Imágenes tomada de botit.botany.wisc.edu/.../Meiosis_1, Page rendered: Thursday, June 18,

2009, 15:51:18.
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BIBLIOGRAFIA

La actualización de las páginas Web es función de sus representantes por lo

que no me responsabilizo de su actualización.

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