Instituto Politécnico Nacional

Escuela Nacional de Ciencias Biológicas

Departamento de Fisiología
“Dr. Mauricio Russek Berman”

Práctica 7 “Transmisión sináptica”

Introducción.

La sinapsis es una unión característica entre una neurona y otra. La primer neurona es
denominada presináptica y a la segunda, neurona postsináptica. Es imprescindible la
conducción previa del impulso nervioso en la neurona presináptica y particularmente, en los
denominados botones terminales. Tiene distintos tipos de clasificaciónes; según el lugar donde
se establece el contacto: sinapsis axo-dendrítica, sinapsis axo-somática, sinapsis axo-axónica;
según el tipo de transmisión: sinapsis química y sinapsis eléctrica.
Objetivos.
1. Conocer distintas vías de administración de una sustancia o fármaco. Y aprender la aplicación
de las mismas.
2. Determinar el efecto del pentobarbital sódico sobre la temperatura colonal de las ratas a través
del tiempo administrado por distintas vías.
3. Comparar el efecto del pentobarbital sódico sobre la pérdida del reflejo de enderezamiento
respecto al tiempo.
4. Comparar el efecto del pentobarbital sódico sobre la pérdida del reflejo flexor respecto al
tiempo.

Fundamento.
1. El motivo de utilizar ratas es por ser animales endotermos de fácil manejo y que regula su
temperatura por medios internos.
2. Utilizamos el pentobarbital sódico porque es un anestésico que se puede administrar por las
tres vías (intraperitoneal, intragástrica y subcutánea) y ser una excelente alternativa en
procedimientos de corta duración.
3. Tomamos la temperatura colonal debido a que es la que más se asemeja a la temperatura
central.
4. Posteriormente se midió la temperatura basal para garantizar que la variación de la temperatura
no se debía a otro tratamiento, actuando como punto de referencia.
5. Revisamos el reflejo de enderezamiento para registrar el tiempo en el que el pentobarbital
sódico actuó como hipnótico.
6. Comprobamos el reflejo flexor para conocer el tiempo y si el pentobarbital sódico actuó sobre
la medula espinal como anestésico deprimiendo el SNC.
7. Se dosifico por diferentes vías para poder conocer la latencia y la magnitud que causaba cada
vía.
 Practicar

Las técnicas básicas para Ver apéndice

el manejo de la rata

Distribuir

Ver apéndice Aleatoriamente las 18 ratas en

6 equipos

Marcar y pesar a las ratas Ver apéndice

Calcular
Si la concentración de la solución
Para cada rata el volumen de
de pentobarbital es de 63 mg/mL
anestésico (pentobarbital sódico)
y la dosis para estos animales es
que se requiere administrar.
de 35 mg/Kg

Medir
La temperatura colonal

Introducir
Determinar
Por el recto el bulbo del termómetro Para el reflejo flexor Un estímulo doloroso e
La presencia o ausencia de los reflejos flexor
untado con vaselina alguna de las patas de l
y de enderezamiento en las ratas
Aplicar rata

Para el reflejo de enderezamiento

Debe introducirse Colocar
aproximadamente 5 cm La rata “boca arriba” (posición supina dorsal) Se registra como
durante 1 minuto y medio, sobre la mesa de trabajo presente si la rata
para realizar lectura. retira la pata.
Determinar
La vía de administración a utilizar con c/ rata
(intragástrica, intraperitoneal o subcutánea)
Si la rata se endereza y se posa
 Adecuadamente el volumen de
Ver apéndice
pentobarbital calculado

Medir y determinar

Se realizará cada 5 La temperatura colonal y la presencia o ausencia

minutos durante 25 de los reflejos flexor y de enderezamiento en las
minutos. ratas después de realizar la administración de
pentobarbital por las distintas vías.
Resultados.

Fig. 1 Diagrama de flujo de la práctica 1 Aspectos generales del manejo de animales de laboratorio y vías de administración.

40
Temperatura colonal (°C)

Sub
IP
38 IG

36

34
0 10 20 30
Tiempo (min)
Figura 2. Efecto del pentobarbital sódico sobre la temperatura colonal de ratas a través del
tiempo por vía intragástrica (IG), vía intraperitoneal (IP), vía subcutánea (Sub), las medias se
representan con puntos entre las líneas y barras para el error estándar.

Para la figura 2 se observó que la administración de pentobarbital sódico por la vía intraperitoneal presentó
una mayor latencia y magnitud manifestándose con un mayor descenso de temperatura colonal en ratas
en comparación con la vía intragástrica y subcutánea.
 % Pérdida de reflejo enderezamiento
100
IG
80 IP
Sub
60

40

20

0
0 10 20 30
Tiempo (min)

Figura 3. Efecto del pentobarbital administrado por diferentes vías, subcutánea (Sub),
intraperitoneal (IP) e intragástrica (IG) en el porcentaje de pérdida de reflejo de
enderezamiento en ratas.

Se observa para la figura 3 que la administración de pentobarbital sódico por vía intraperitoneal al minuto
10 alcanzó el máximo de efecto sobre el reflejo de enderezamiento en el total de población de ratas. La
administración de pentobarbital por la vía subcutánea presentó un ascenso paulatino en el porcentaje de
la pérdida del reflejo de enderezamiento debido a su tiempo de absorción. La vía intragástrica fue menos
eficaz ya que alcanzó un máximo de 16.6% respecto a la pérdida del reflejo de enderezamiento en
comparación con la vía subcutánea e intraperitoneal.

100
% pérdida de reflejo flexor

IG
80 IP
Sub
60

40

20

0
0 10 20 30
Tiempo (min)

Figura 4. Efecto del pentobarbital administrado por diferentes vías, subcutánea (Sub),
intraperitoneal (IP) e intragástrica (IG) en el porcentaje de pérdida de reflejo flexor en
ratas.
Se observa en la figura 4 una tendencia en la vía intraperitoneal de mayor velocidad de efecto
del pentobarbital en el reflejo flexor, para las vías intragástrica y subcutánea se observa que
llegan a su máximo de efecto sobre el reflejo flexor a los 10 y 15 minutos respectivamente.

Discusión de resultados.

Para la temperatura colonal en ratas anestesiadas según su vía de administración, en la vía

intragástrica el pentobarbital sódico tardó en llegar al hipotálamo y su efecto es menor debido a
que el pH del ácido estomacal puede interferir con algunas moléculas del fármaco al igual que la
comida que pudo estar presente aún en el estómago, posteriormente al pasar al hígado existe
metabolismo de primer paso degradando algunas moléculas del fármaco y con base en esto,
llegan moléculas suficientes de pentobarbital sódico al hipotálamo, pero presenta una menor
magnitud debido a las barreras que atravesó. En la vía intraperitoneal el pentobarbital sódico
atraviesó la membrana de los vasos sanguíneos de manera rápida debido a que la distancia entre
la zona de aplicación y los principales vasos sanguíneos es mínima, por lo que ingresa fácilmente
a torrente sanguíneo llegando al hipotálamo para hacer efecto en un menor tiempo, ya que no
presenta muchas barreras para llegar al sitio blanco. En la vía subcutánea el pentobarbital llegó
al hipotálamo atravesando el tejido adiposo en la rata, el fármaco puede pasar debido a sus
características lipofílicas aunque está poco irrigada esta zona. A pesar de que existe disminución
de temperatura colonal debido al efecto del fármaco sobre el hipotálamo esto no garantiza que la
rata se encuentre anestesiada, por lo que se tomó en cuenta otras variables (observar figura 2).

Se determinó el efecto del pentobarbital sódico administrado por diferentes vías en el porcentaje
de pérdida de reflejos flexor y de enderezamiento. En la vía intragástrica el pentobarbital sódico
cruzó diferentes barreras por lo que el número de moléculas que llegó al mesencéfalo y corteza
cerebral, que es donde se encuentra el centro integrador del reflejo de enderezamiento, fue
mínima por lo que el reflejo de enderezamiento y flexor no se pierde. También se observó poca
magnitud y un periodo de latencia mayor en comparación a las vías intraperitoneal y subcutánea.
En la vía intraperitoneal el pentobarbital sódico llegó de manera directa y rápida a mesencéfalo
y corteza cerebral, por lo que se determinó que las moléculas del fármaco ingresan al centro
integrador haciendo que el efecto se presente en todas las ratas para el reflejo de enderezamiento
y una tendencia a alcanzar el máximo de ratas en cuanto al porcentaje de pérdida de reflejo flexor.
Se observó que la latencia es corta y su magnitud es máxima en comparación a la vía subcutánea
e intragástrica En la vía subcutánea la acción del fármaco es prolongada, debido a que el efecto
del pentobarbital se presenta y afecta a la mayoría de las ratas a pesar de que tiene que cruzar
algunas barreras para llega a mesencéfalo y corteza cerebral. Se observó que su periodo de
latencia es prolongado y con tendencia a un máximo en su magnitud en el porcentaje de pérdida
de reflejo de enderezamiento y magnitud despreciable en pérdida de reflejo flexor (observar
figuras 3 y 4).

Debido a la incongruencia de la figura 3 y 4 comparando las vías de administración intragástrica

y subcutánea, en cuanto a su magnitud, se consideró que cuando se pierde el reflejo flexor se
considera a la rata está anestesiada, este reflejo se da gracias a un estímulo doloroso, en este
caso, se pellizco a la rata. Este experimento estuvo mal realizado ya que, si no se aplica un
estímulo realmente doloroso, la rata no retirará su pata, por lo tanto, no se puede evaluar.
Se comparó los resultados obtenidos determinando como la mejor vía de administración para
pentobarbital sódico la vía intraperitoneal debido a una rápida absorción, periodo de latencia corto
y magnitud máxima.

Conclusiones.
Con base en la experiencia realizada se aprendió la manipulación correcta de animales de
laboratorio iniciando por el marcado hasta la administración de anestésico (pentobarbital) por tres
vías: intragástrica, subcutánea e intraperitoneal.
Se comprobó que de las tres vías de administración utilizadas la intraperitoneal, es la de mayor
absorción en comparación a la intragástrica y subcutánea ya que se administra en una zona muy
vascularizada y con pocas barreras para que el fármaco entre al sistema sanguíneo, además es
conveniente para la administración de pentobarbital debido a que presenta un periodo de latencia
largo y una magnitud mayor en comparación a las vías mencionadas.
El pentobarbital deprimió el sistema nervioso central evitando la termorregulación, la pérdida del
reflejo flexor y de enderezamiento; además de ser eficiente para deprimir el SNC con acción
anestésica a 35mg/Kg administrado por vía intraperitoneal en ratas.

Bibliografía.

1. SAGARPA. (1999). Norma Oficial Mexicana NOM-062-ZOO-1999. [En línea]. Diario Oficial de
la Federación. México. Disponible en: http://www.senasica.gob.mx/?doc=743. Consultado el
29 de agosto 2016.
2. IPN Cinvestav. Programa Institucional para el Cuidado y Uso de los Animales de Laboratorio
del Centro de Investigación y Estudios Avanzados del IPN. (2002). [En línea]. Disponible en:
http://www.administracion.cinvestav.mx/Secretar%C3%ADadePlaneaci%C3%B3n/Coordina
ci%C3%B3ndeServiciosdeApoyo/Coordinaci%C3%B3nGeneraldeServiciosExperimentales/
UPEAL/CICUAL.aspx. Consultado el 29 agosto de 2016.
3. Flores, A. & Dolz, H. 1979. Diferencias dependientes de edad y sexo en el efecto de
Pentobarbital sódico y asociado con Diazepam en ratas. Arch. Med. Vet. Chile. 1:35-38.