UNIVERSIDAD NACIONAL

SAN LUIS GONZAGA DE ICA

FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y

ZOOTECNIA

TALLER DE PREPARADOS
HISTOPATOLOGICOS

DRA. FRIEDA SANGUINETTI MEDRANO

LOAYZA ASTO ELIZABETH ABIGAIL

IV CICLO
INTRODUCCION:
PREPARACION DE LAMINAS HISTOPATOLOGICAS
El corte histológico es una delgada rebanada de tejido cuyo grosor varía
entre 0.5 y 10 micrómetros (um).
El tejido (muestra) es cortado en piezas de 1cm3, y sumergidas en un
fijador como el formol que en condiciones ideales preservan y mantienen
su morfología inicial y facilitan el proceso.

PASOS PARA EL PREPARADO DE LAMINAS

HISTOPATOLOGICAS

1-FIJACION.- Conseguir que los tejidos conserven las

características que tenían durante la vida.

2-DESHIDRATACION.- Eliminar todos los líquidos que se

encuentren dentro de los tejidos

3-DIAFANIZACION- conseguir dar claridad y transparencia a los

tejidos, los tejidos pueden ser atravesados por los rayos
luminosos y poder ver u observar las estructuras que
conforman este tejido.

4-INCLUSION EN PARAFINA- los tejidos son penetrados por la

parafina.

5-CORTE Y EXTENSION- cortar la muestra en 5 um con

instrumento especial (micrótomo) después someterlo a baño maría
para su extensión.

6-COLORACION- utilizar colorante hematoxilina eosina (H-E).

La HEMATOXILINA teñirá el nucleó y la EOSINA teñirá el citoplasma.

PARAFINA: La cera de parafina se encuentra por lo general como un
sólido ceroso, blanco, inodoro, carente de sabor, con un punto de fusión típico
entre 47 °C y 64 °C. Es insoluble en agua, aunque sí es soluble en éter, benceno,
y algunos ésteres. La parafina no es afectada por los reactivos químicos más
comunes, pero se quema fácilmente.

XILOL: Los xilenos son buenos disolventes y se usan como tales. Además
forman parte de muchas formulaciones de combustibles de gasolina donde
destacan por su elevado índice octano.
En histología se emplea en los pasos iniciales como
solvente de la parafina en los cortes (desparafinización)
y en los últimos pasos de preparado de muestras
(tinción y montaje) como líquido intermediario o
"aclarante", esto debido a que las proteínas fijadas y
deshidratadas tienen igual índice de refracción que el
xileno, por ello las muestras aparecen transparentes o
"aclaradas". También permite el uso de medios de
montaje hidrófobos (resinas sintéticas) para la
preservación de la muestra teñida.
MATERIALES
 Trozo de hígado de pollo
 Formol 36%
 Frasco de vidrio
1-PASO
Dejar un trozo de hígado de 1cm3 en formol por el lapso de 24 horas.
Luego en alcohol el tiempo de 24 horas.
Remojar en xilol.
Realizar 3 baños de 1/2 hora cada uno.

Someter a la muestra a la acción de alcoholes de graduación creciente de 70° a 100°

CONVERSION DEL ALCOHOL
De 96° a alcohol de 70°: es el siguiente paso con una pipeta sacar 70 cmᶾ del alcohol de
96° más 26 cmᶾ de agua, combinarla y tenemos un alcohol de 70°.
De 96° a alcohol de 80°: es el siguiente paso con una pipeta sacar 80 cmᶾ del alcohol de
96° más 16 cmᶾ de agua, combinarla y tenemos un alcohol de 80°.
2-PASO
INCLUSION EN PARAFINA
Es el paso previo al corte del tejido y consiste en
colocar el tejido o muestra en parafina liquida para
que el tejido se logre filtrar por complete para luego
dejar que se solidifique a temperatura ambiente.
Para que tenga dureza y firmeza el tejido.
El siguiente paso es la formación del molde de
cartón, echar la parafina y el hígado dentro del cubo
de cartón con la finalidad de poderlo llevar al
micrótomo, como esta en la foto.
3-PASO
Corte del bloque de parafina con el micrótomo

Se utiliza principalmente para material incluido en parafina, se obtienen

secciones de 3 a 20 μm de grosor.
4-PASO
EXTENSION DE LA MUESTRA
Consiste en llevar la muestra del corte realizado con el MICROTOMO a un
baño María (40-45°)

Con mucho cuidado y en posición inclinada retirar la muestra que se

encuentra a flote, para mayor seguridad y de fijar la muestra a la lámina
porta objetos untar un poco de clara de huevo a la lámina.

5-PASO
HIDRATACION
1-Sumerguir en XILOL I por 3 minutos
2-Sumerguir en XILOL II por 3 minutos
3-sumerguir en alcohol absoluto por 2 minutos
4-Sumerguir en alcohol 95° por 2 minutos
 5-Sumerguir en alcohol 70° por 2 minutos
6-Sumerguir en agua corriente por 5 minutos
7-Sumerguir en agua destilada por 2 minutos
8-Sumerguir en HEMATOXILINA por 2 minutos
9-Lavar por 3 minutos
10-Sumerguir en EOSINA por 1 minuto
11- sumergir en agua y lavar

6-PASO
DESHIDRATACION
1-Sumerguir en alcohol 95° por 1 minuto
2-Sumerguir en alcohol absoluto por 2 minutos
3-Sumergir en XILOL I por 2 minutos
4-Sumerguir en XILOL II por 2 minutos
5-Untar bálsamo de Canadá
6-Cubrir con lámina cubre objetos
FINALIZANDO CON LA LÁMINA CUBRE
OBJETOS