UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS - “ESPE”

Microbiología I
Nombre: Andrés Acosta NRC: 3310
Título: Tinción de esporas y cápsulas bacteriana
Palabras clave: Bacillus subtilis, nigrosina, verde malaquita, safranina.
Resumen: Se realizó dos frotis de Staphylococcus aureus en distintos portaobjetos.
Luego se llevó cada placa a diferente tinción (simple y diferenciada) para distinguir las
diferencias entre estas técnicas. Una vez teñidas las placas se las observo al microscopio
con en el lente 100X con aceite de inmersión.
Introducción
Antecedentes: Las llamadas tinciones especiales son aquellas que se utilizan para
teñir y aislar partes específicas de algunos microorganismos, tales como, endosporas
(esporas) y flagelos. Además, son usadas para detectar la presencia de cápsulas (Tortora,
Funke, & Case, 2007).
Justificación: Algunas estructuras como las esporas, cápsulas bacterianas o
flagelos no se logran teñir con las técnicas habituales de tinción, es por esto que se hace
uso de tinciones especiales.
Marco Teórico: Algunos microorganismos contiene una cubierta gelatinosa
denominada cápsula. La tinción de esta estructura es más difícil que otros tipos de
tinciones ya que los materiales capsulares son hidrosolubles, es decir, que se puede perder
con un lavado riguroso. Por este motivo se usa una solución con suspensión coloidal fina
de partículas coloreadas (como nigrosina) para otorgar un fondo de contrastes y luego
teñirlas con colorantes simples (como safranina).
Las endosporas (esporas) son estructuras especiales y resistentes que se forman dentro de
una célula, estas no se tiñen con los métodos comunes porque los colorantes que se usan
no pueden atravesar sus paredes. Es por esto que se usa la tinción Schaeffer Fulton para
endosporas (Tortora, Funke, & Case, 2007).
Objetivos
General: Observar las esporas y cápsulas bacterianas de Bacillus subtilis.
Específicos
- Aplicar tinciones especiales para observar esporas y cápsulas bacterianas
de Bacillus subtilis.
Hipótesis: El bacilo se teñirá de rojo y la espero de verde.
Materiales y métodos: En el laboratorio de microbiología se realizó la práctica de tinción
de esporas y cápsulas bacteriana el 16 de noviembre de 2017, a cargo de la Lic. Alma
Koch y Andrés Acosta.
Se realizó frotis de Bacillus subtilis con la técnica aprendida, se procedió a la tinción de
esporas, para ello se colocó verde de malaquita sobre la placa y papel toalla sobre el
colorante, se sometió a calor con ayuda de una pinza de madera, trípode, mechero Bunsen
y malla metálica, cuidado evitar que se seque el colorante por 5 minutos. Se espero a que
se enfríe la placa y retiramos el exceso de verde malaquita con agua, teñimos con
safranina por 1 minutos, enjuagamos y secamos a presión. Observamos la placa en el
microscopio en el lente objetico 100X con aceite de inmersión.
Para la tinción de cápsulas bacterianas se colocó una gota de nigrosina en un portaobjetos,
después tomamos muestra de Bacillus subtilis con un asa bacteriana y mezclamos sin
esparcir con la nigrosina en el portaobjetos, con ayuda de otro portaobjetos se hizo un
barrido. Se secó el exceso de colorante y fijó la muestra. Se llevó la placa al microscopio
y se observó en el lente objetico 100X con aceite de inmersión (Tortora, Funke, & Case,
2007).
Resultados: En mi placa se observó las esporas teñidas de color verde; en otra placa
observé los bacilos teñidos de color rojo sin tinción de las esporas como se observa en la
figura 1.
En la placa con nigrosina se observó un campo óptico de color negro y puntos
transparentes que son las células con sus cápsulas bacterianas reflejando la luz como se
observaba en la figura 2.

Figura 1 Bacillus subtilis teñidos de

color rojo sin tinción de esporas
observada a 100X.

Figura 2 Bacillus subtilis con tinción

negativa (colorante nigrosina)
mostrando sus cápsulas bacterias
transparente observada a 100X.

Discusión: Las esporas y cápsulas bacterianas son estructuras difícilmente teñibles, ya

que poseen características que lo impiden o dificultan este proceso, por ello se hace uso
de las llamadas tinciones especiales que facilita su tinción para poder ser observadas y
estudiadas (Tortora, Funke, & Case, 2007).
Conclusiones
- El Bacillus subtilis presenta cápsula bacteriana y esporas que se pueden observar
en el microscopio haciendo uso de la tinción adecuada.
- Existen algunas estructuras bacterianas como la cápsula bacteriana o esporas que
no se pueden teñir mediante métodos comunes de tinción.

Bibliografía
Tortora, G., Funke, B., & Case, C. (2007). Introducción a la microbiología. Ed. Médica
Panamericana: México.