Metabolismo del HEMO

Porfirinas y Pigmentos Biliares

Prof. Dra. Susana González

Departamento de Bioquímica Humana
Facultad de Medicina
2017

¿Por qué estudiar la bioquímica del HEMO?

Importancia biomédica:

• Forma parte de las Hemoproteínas (Hemoglobina: transporte de

oxígeno en la sangre; Mioglobina: almacenamiento de oxígeno en el
músculo; citocromo c: participación en la cadena de electrones;
citocromo P450: metabolismo de fármacos, etc)

• Para comprender un grupo de enfermedades conocidas como

PORFIRIAS, que son producidas por anomalías en la biosíntesis de
Porfirinas.

• Para comprender los trastornos asociados a alteraciones en la

producción o excreción de pigmentos biliares (como la bilirrubina). La
ictericia, debida al aumento en la bilirrubina plasmática es la
manifestación clínica más prevalente y se presenta en numerosas
enfermedades (anemias hemolíticas, hepatitis viral, cáncer de
páncreas)

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 Porfirinas y Hierro

Síntesis

Degradación

Pigmentos
Biliares y Hierro

HEMO
15% sintetizado por el hígado (para el citocromo P450 y otras hemoproteínas)

85% sintetizado por células eritroides de la médula ósea (para la Hemoglobina)

HEMO: es el ejemplo de una porfirina con

hierro, grupo prostético de la hemoglobina

• Compuesto cíclico, formado por el

enlace de 4 anillos pirrol a través de
puentes metenilo (-HC=)

• Forma complejo con un ión metálico

(Fe2+) enlazado a los átomos de N de
los anillos pirrol

• Presenta cadenas laterales

sustituyentes en el núcleo de porfirina
(Metilo, Propionato, Vinilo; sustitución
asimétrica, serie III)

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 Síntesis del HEMO

ALA sintasa
Matriz mitocondrial

Fosfato ALA sintasa

de
piridoxal
(Punto de fuga de Krebs)
Α-amino-β-
cetoadípico
Paso más lento, limitante de la velocidad
de síntesis de porfirinas en hígado

Acido δ aminolevulínico
(ALA)

ALA sintetasa: paso limitante en la velocidad de síntesis de HEMO

Requerimiento absoluto de Fosfato de piridoxal (vitamina B6) y Mg+2.

También necesita otra vitamina, ácido pantoténico que se encuentra en la
Coenzima A

Se reprime la expresión de la enzima por Hemo (en hígado) y se

activa su síntesis por Hierro (via proteínas regulatorias IRP)

ALA-S 1 ubicua (hepática, otras células)

ALA-S 2 células eritroides (médula ósea)

Importación mitocondrial, participan chaperonas, en la mitocondria se

escinde el péptido señal y se pliega utilizando ATP

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 ALA sintasa

Se sintetiza en
Importación el citoplasma
mitocondrial con la
participación de
chaperonas, en la
mitocondria se escinde
el péptido señal y se
pliega utilizando ATP

Actúa en la
mitocondria

Devlin

Síntesis del HEMO

ALA dehidratasa
(o PBG sintasa)
2 Anillo pirrólico
Citoplasma
+ 2 H2O

ALA Porfobilinógeno (PBG)

Enzima sulfhidrílica, requiere de Zn+2 y se inhibe por Pb

Enzima muy sensible

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 Síntesis del HEMO
Ac : acético
Pr : propiónico Hidroximetilbilano
Tetrapirrol lineal

Porfobilinógeno (PBG)
Ac Pr
A B
espontánea
Pr

D C
Uroporfirinógeno III
PBG deaminasa (PBG-D)
co- sintasa

PBG deaminasa (PBG-D)

(o Uroporfirinógeno I sintasa
o hidroximetilbilano sintasa)
(citoplasma)

La PBG-D se asocia a la proteína

Uroporfirinógeno III cosintasa (URO-CoS) la Uroporfirinógeno III
cual dirige la síntesis hacia el isómero III Incoloro
(no tiene anillos conjugados)

Unidos por puentes CH2 (metilenos)

Hidroximetilbilano
Porfirinógenos espontánea
Uroporfirinógeno III
Uroporfirinógeno I
Co- sintasa

oxidación Oxidación
Uroporfirina III Luz
Excretada Uroporfirina I
CO2 Excretada

Uroporfirinógeno III
Coproporfirinógeno I
Uroporfirinógeno
descarboxilasa (Uro-D) Oxidación
Luz
citosólica
Coproporfirina I

Coproporfirinógeno III

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 Síntesis del HEMO

Grupo vinilo

Decarboxilación oxidativa

2 CO2 + 2H2O

Coproporfirinógeno
oxidasa
(Mitocondria; espacio
intermembrana)
Coproporfirinógeno III
Ingresa a mitocondria Protoporfirinógeno III o IX
(Producto no coloreado)

Descarboxilación oxidativa

Requerimiento absoluto de O2 y específica para isómeros tipo III

Síntesis del HEMO

Grupo vinilo Protoporfirinógeno

oxidasa

(Membrana
mitocondrial interna)

Grupo metileno

Protoporfirina IX o III
Protoporfirinógeno IX o III

Los pirroles se unen por puentes metenilo

En el hígado de mamíferos requiere de O2

Forman estructuras de resonancia que las hacen más estables

Tienen la capacidad de absorber luz visible y UV estado electrónico excitado

Radicales libres daños a lípidos, RNA, DNA y proteínas

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 Síntesis del HEMO: paso final
Ferroquelatasa

(Membrana mitocondrial
interna)

Fe2+

Protoporfirina IX o III

El O2 inhibe la enzima y sólo puede usar Fe+2

Enzima sulfhidrílica que se inhibe por metales pesados, especialmente Pb
(intoxicación por plomo: los eritroblastos presentan siderosomas. El Zn2+ puede
incorporarse de forma no-enzimática a la Protoporfirina IX, y forma compuesto
fluorescente bajo luz apropiada; herramienta de detección de la contaminación)

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 Regulación de la síntesis del HEMO
Hígado
a) ALA sintasa, enzima reguladora clave en biosíntesis del Hemo
Inducción – represión: reprimida por el grupo hemo
La regulación de la ALA-S en el hígado es muy sensible a los niveles de
Hemo (para mantener los citocromos P450 involucrados en la síntesis de
sales biliares, colesterol, detoxificación de fármacos, etc)

Ciertas drogas liposolubles como barbitúricos, insecticidas, esteroides, se

metabolizan por un sistema hepático que utiliza la hemoproteína citocromo
P450: usar Hemo en este citocromo, disminuyen el pool de Hemo libre, por lo
tanto resultan inductoras de la ALA-S
Pool de
Apoproteína + Hemo
Hemo libre
celular

Represión de la expresión génica de ALA-S

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 Regulación de la síntesis del HEMO
Hígado
a) Inhibición de la expresión de ALA-S
El hemo unido a una proteína (apo-rrepresor) actuaría reprimiendo la
expresión del gen de ALA-S

b) Transferencia de la enzima desde el citosol a la mitocondria

El hemo (hemina) en altas concentraciones impediría la transferencia de la
ALA-S que se sintetiza en los poliribosomas hacia la mitocondria

d) Disminuye la estabilidad y la vida media del ARNm de la ALA-S

(hemina inhibe la traducción)

e) Control alostérico por hemina: inhibición por retroalimentación

f) Otras: Control por glucosa

Inhibe la síntesis por un mecanismo no definido. Algunos pacientes
desencadenan la porfiria luego de dietas hipocalóricas

Inducen citocromo
P450 que usa Hemo:
al disminuir cantidad
de Hemo, se
estimula ALA-S

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 Regulación de la síntesis del HEMO

Células eritroides (precursoras de los eritrocitos en médula ósea)

El control es diferente al hepático

Poseen la isoforma ALA-S2

No es regulado por la fluctuación de los niveles de Hemo

El hemo controla la síntesis de la globinas para formar Hb en GR inmaduros

(si Hemo está disminuído, se fosforila el factor elF2 que restringe la producción de
globina)

Las enzimas limitantes son la ferroquelatasa y la PBG-D (hidroximetilbilano

sintetasa)

Porfirias
Grupo de enfermedades metabólicas provocadas por alteraciones
en el camino de la biosíntesis del Hemo

Enfermedades autosómicas dominantes, salvo la porfiria eritropoyética

congénita (recesiva)
Porfiria aguda intermitente
Coproporfiria hereditaria
Hepática
Porfiria jaspeada o variegata

Porfirias Porfiria cutánea tardía

Porfiria eritropoyética congénita

Eritropoyética
Protoporfiria eritropoyética

Verdes: más frecuentes Porfiria adquirida: Plumbismo intoxicación por plomo

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Porfiria aguda intermitente (PAI)

Autosómica dominante, mutación en PBG-D

Se acumula ALA y PBG en la orina por falla de la PBG-D, y desrepresión
de la ALA-S al no sintetizarse Hemo

Síntomas neuroviscerales: Severos dolores abdominales,

náuseas, vómitos, neuropatías periféricas y disturbios
psiquiátricos
Desbalance en el hepatocito
Excreción de grandes cantidades de PBG y ALA en orina

Se polimeriza para formar porfobilina y neurotóxico

porfirina que dan color a la orina

Consumo de medicamentos la exacerba, ya que el cit P450 consume hemo

y se des-reprime la ALA-S

Tratamiento: infusiones de hematina o hemina (derivados del hemo)

inhiben ALA-S y disminuyen los intermediarios que causan ataque agudo. Y
administrar glucosa (inhibe ALA-S)

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Coproporfiria hereditaria

Defecto en la copropofirinógeno oxidasa (se acumula el

coproporfirinógeno III)

Diagnóstico: excreción de coproporfirinas en heces

Síntomas: igual que la PAI (sintomas neurovisceales) junto con
fotosensibilidad debido a la presencia de coproporfirinógeno en exceso

Porfiria jaspeada o variegata

Déficit parcial de protoporfirinógeno oxidasa

Deficiencia de hemo, la des-represión de la ALA-S contribuye a acumular

coproporfirinas u uroporfirinas en heces y orina
El coproporfirinógeno y el protoporfirinógeno inhiben la PBG-D por lo que
se acumula ALA y PBG
Síntomas: igual que la anterior: neuroviscerales y fotosensibilidad

Porfiria cutanea tardía (PCT)

Falla la uroporfirinógeno decarboxilasa ( se acumula uroporfirinógeno)

PCT tipo I: defectos en la actividad de URO-D en hígado (baja 50%, causas

multifactoriales; agente desencadenantes como alcohol o insecticidas)
PCT tipo II: mutaciones en URO-D (hereditaria, autosómica dominante)
Acumulación de plasma y orina de uroporfirina
Fotosensibilidad cutánea, ampollas, fragilidad de la piel
Manifestaciones clínicas se asocian a factores desencadenantes como
hidrocarburos polihalogenados, abuso de alcohol, ingestión de estrógenos,
infecciones virales hepáticas

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 Porfirias
Porfiria eritropoyética congénita
Defecto en la URO-CoS (no se sintetiza uroporfirinógeno III), expresado
predominantemente en tejido eritropoyético

Aumenta la uroporfirina I en GR
Las porfirinas tipo I en exceso producen fotosensibilidad

Síntomas: fotosensibilidad cutánea en áreas expuestas al sol, fragilidad de

la piel, coloración en los dientes (eritrodontia), puede ser fatal

Protoporfiria eritropoyética

Déficit hereditario en la ferroquelatasa, por lo que se acumula

protoporfirina IX en eritrocitos y hepatocitos
Aguda fotosensibilidad, pruritro, edema, lesiones severas en la piel
La protoporfirina de los GR difunde al plasma y en el hígado se forman
cálculos y hepatotoxicidad

Plumboporfiria (intoxicación por Pb o saturnismo) Goya

Se inhiben las enzimas ALA-D, PBG-D y

Ferroquelatasa por intoxicación con metales pesados
como el Pb (la más sensible es ferroquelatasa)
No hay Hemo, aumenta excreción urinaria de ALA; síntomas: anorexia,
dolor abdominal, vómitos, somnolencia, etc. Se acumula Fe en eritroblastos
(sideroblastos), se puede incorporar no enzimáticamente Zn2+ a la protoporfirina IX
(diagnóstico para intoxicación por plomo)
Terapéutica: tratamiento con quelantes como el EDTA, apartar de la fuente
de contaminación

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 Catabolismo del hemo
Hemo de los GR Hemo de las hemoproteínas
(120 días) Catalasa, peroxidasa, citocromos

Macrófago Hígado

El Hemo Sistema multienzimático

se oxida Microsomal

Se abre anillo
tetrapirrólico

Biliverdina: tetrapirrol lineal

Pigmento verde

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 II III IV I

Citoplasma

Se forma un puente metileno entre anillo III y IV

Naranja - amarillenta
No conjugada o indirecta (BI)
Estos cambios catabólicos en la estructura de los
tetrapirroles son responsables por el cambio progresivo
en el color de un hematoma: rojizo—azul—verde
amarillento, finaliza en amarillento, cuando abandona el
tejido afectado (se transporta con albúmina hasta el
hígado)

Catabolismo del hemo

Bilirrubina no conjugada o indirecta
Viaja unida a la albúmina, si se incrementa libre en plasma puede pasar al
SNC y daña el cerebro

Bilirrubina conjugada o directa

El hígado capta la bilirrubina indirecta mediante receptores, se transporta al
Ret Endoplásmico y allí se conjuga con ácido glucurónico

UDP-
glucuronil-
transferasa
REL
Diglucurónido de bilirrubina
Soluble
Marrón

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 Catabolismo del hemo
Excreción y absorción de Bilirrubina- circulación entero hepática

En el hígado la BD formada se secreta hacia la

vesícula biliar. En el intestino las bacterias la
desconjugan y la transforman en compuestos
reducidos: estercobilinógenos/urobilinógenos
que se eliminan por las heces

Parte del estercobilinógeno se re-absorbe y

se dirige al hígado donde se regenera
glucurónido de bilirrubina (ciclo
enterohepático), otra parte va a circulación
general y se elimina por orina

urobilinógeno estercobilinógeno
Oxidación Oxidación
por aire Incoloro por aire

urobilina estercobilina
Amarilla Marrón Coloración de
las heces

Ictericias
Ictericia : acumulación de bilirrubina en sangre que difunde a los
tejidos, que adquieren coloración amarilla (piel y mucosas)

El aumento de la bilirrubina sérica puede Clasificación

ocurrir por: aumento en la producción,
disminución de captación hepática, - Pre-hepáticas o Hemolíticas,
disminución en la conjugación, - Hepáticas o Hepotocelulares
disminución en la excreción de la bilis - Post-hepáticas u
(intra o extrahepática).
Obstructivas o colestáticas

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 Fisiológica del recién nacido
Esta hiperbilirrubinemia resulta de un sistema hepático inmaduro para la
captación, conjugación y secreción de la bilirrubina

Está elevada la bilirrubina no conjugada y ésta puede penetrar la barrera

hematoencefálica si la concentración en plasma se incrementa (encefalopatía
tóxica: kernícterus).

Fototerapia: tratamiento con luz para que la bilirrubina se transforme en

producto soluble sin la necesidad de conjugación hepática y se elimina por la
orina (bilirrubina es fotolábil en presencia de oxígeno)

VN en el
recién nacido:
7 mg/dl.

Pre-hepática
Causada por la hemólisis aumentada
El aumento en la destrucción de GR
produce mayor cantidad de bilirrubina
transportada por albúmina (bilirrubina
indirecta) en sangre, que no filtra en riñon
(No hay coluria)

Aumenta la oferta de bilirrubina al

hígado, que la conjuga (BD), la vierte en la
bilis en cantidades mayores a la habitual
(llega más BD al intestino)

Este aumento de BD en el intestino

determina el aumento en la producción de
estercobilinógenos que se reabsorben y
puede pasar a circulación general y se
excreta por orina: aumentan
urobilinógenos/urobilina

Hipercolia

No existe coluria (coloración en orina)

Hay coloración oscura de las heces fecales por acúmulo de estercobilinógeno
(hipercolia).

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 Hepática o mixta
Fallas en la captación, conjugación o excreción de bilirrubina por el hígado.

Producción de BI en SRE es normal

El hígado no es capaz de conjugar

toda la bilirrubina

Parte de la bilirrubina sin conjugar

vuelve a sangre: aumenta BI en plasma

Si hay alteraciones del parénquima

hepático puede aumentar la BD en
plasma, que puede eliminarse por riñón y
dar color oscuro a orina (coluria)

Hay menor eliminación de BD a la bilis,

coluria
lo que determina menor cantidad de
estercobilinógeno/estercobilina en heces
(acolia) y menos urobilinógeno/urobilina

Existe coluria por acumulación de bilirrubina directa

No hay coloración de las heces (acolia)

Post-Hepática
Se debe al fallo para excretar la bilirrubina desde el hepatocito al duodeno
(obstrucción)
Producción de bilirrubina en SER normal,
BI es normal

El hígado es capaz de formar la

bilirrubina conjugada, pero la obtrucción de
las vías biliares no permite su excreción
hacia el intestino

Por el estancamiento de los conductos

biliares auemta pasaje de BD (soluble)
hacia la sangre, que puede filtrar en riñón:
orina caoba, COLURIA

Al no llegar bilis al intestino no hay

estercobilinógeno (acolia, heces con
aspecto masilla, gris claro)

No hay ciclo enterohepático y no se

excreta urobilinógeno/urobilina en orina.

Existe coluria por acumulación de bilirrubina conjugada

No hay coloración de las heces (acolia)

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