UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL

INGENIERA QUMICA
Laboratorio de Ingeniera Qumica
Alumno: Hernndez Asencio Andrs Ivn
andres.hernandeza@ug.edu.ec
Prctica No.3 Paralelo No.5-2
TEMA: ESTERILIZACION

RESUMEN
Los microrganismos pueden ser eliminados. Inhibidos o muertos por agentes fsicos o
qumicos. Se dispone actualmente de una gran variedad de tcnicas y agentes que
actan de manera diferente y cada uno tiene sus propios lmites de aplicacin de
prctica. Entre los agentes fsicos mas utilizados estn el calor, la presin, la radiacin,
los filtros y el ultrasonido. Entre los agentes qumicos se encuentran los compuestos
de cloro, yodo, flor y bromo, metales pesados como el mercurio: as mismo alcoholes,
fenoles, aldehdos y cetonas entre otros. Se denomina esterilizacin al proceso
validado por medio del cual se obtiene unos productos libres de microorganismos
viables. El proceso de esterilizacin debe ser diseado, validado y llevado a cabo de
modo de asegurar que es capaz de eliminar la carga microbiana del producto o un
desafo ms resistente.

MARCO TERICO

Esterilizacin significa la eliminacin de toda forma de vida de un medio o material, lo

que se lleva a cabo generalmente por medios fsicos, por ejemplo, filtracin, o por
muerte de los organismos por calor, productos qumicos u otra va. Esta definicin
excluye por lo tanto cualquier tcnica que resulte solamente en un dao a los
microorganismos o atenuacin de la actividad de cualquier tipo.

METODOS DE ESTERILIZACION
A) AGENTES FSICOS
1. El calor: Probablemente este mtodo es comnmente empleado para destruir
los microorganismos. Los medios de cultivo, material de vidrio e instrumentos
mdicos son esterilizados normalmente por calor.

El calor no slo es el agente de esterilizacin ms ampliamente utilizado y el ms

eficaz sino tambin el ms econmico y el ms fcil de controlar. En la esterilizacin
por calor cabe tenerse en cuenta el grado de resistencia de las bacterias a la
temperatura. La resistencia al calor vara entre los diferentes microorganismos; estas
diferencias pueden expresarse a travs del concepto de punto trmico de muerte.
a) Accin directa: flameado es el quemado directo.
b) Calor seco: aire caliente es el horno.
c) Calor hmedo: ebullicin, vapor fluente, vapor discontinuo o
tindalizacin y vapor saturado a presin.

a. Accin directa: Es cuando el material se somete a la accin directa de la

llama de un mechero, sin que se altere o sufra deterioro. Se esterilizan
mediante este mtodo: las asas de siembra, material de diseccin (previo a un
bao de alcohol), las bocas de los tubos, matraces, frascos, etc.
El calor por este mtodo se transmite por conduccin. Las asas o agujas deben ser
esterilizadas antes o despus de su uso, para ello se ponen en la flama de un
mechero bunsen hasta que se torne rojo y luego se deja enfriar unos 10 a15
segundos.
b. Calor seco: Este mtodo se utiliza muchas veces en el laboratorio de
microbiologa para esterilizar asas de siembra; todo lo que hay que hacer es
calentar el alambre al rojo y la eficacia es de 100%.
Los objetos a esterilizar por este mtodo se colocan en un horno, donde una
temperatura, generalmente de unos 170C, mantenida durante cerca de dos horas
asegura la esterilizacin. Se requiere un perodo de tiempo mayor y una temperatura
ms alta en comparacin con el calor hmedo, ya que el calor del agua se transfiere
ms rpidamente a un cuerpo fro que el calor del aire.

c. Calor hmedo: Es la ebullicin (100C al nivel del mar), que mata a las formas
vegetativas de las bacterias patgenas, muchos virus y hongos. Para esterilizar
en forma eficaz mediante calor hmedo se necesitan temperaturas superiores
a la ebullicin del agua. Estas altas temperaturas se consiguen normalmente
mediante vapor a presin en una autoclave.

Este es el mtodo preferido de esterilizacin y se utiliza a menos que el material a

esterilizar pueda resultar daado por el calor o la humedad. En una autoclave el vapor
a una atmsfera de sobre presin (121C) matar a todos los microorganismos y a sus
endosporas en unos 15 minutos o un poco ms, dependiendo del tipo y volumen del
material que est siendo esterilizado.

La autoclave se utiliza para esterilizar medios de cultivo, instrumentos,

soluciones, jeringas, equipos de transfusin y muchos otros artculos que
pueden soportar alta temperatura y presin.

2. Filtracin: Se usan membranas filtrantes con poros de un tamao

determinado. El tamao del poro depender del uso al que se va a someter la
muestra. Los filtros que se utilizan no retienen virus ni mycoplasmas.
 3. Centrifugacin: Es otro mtodo utilizado en el laboratorio de microbiologa.

4. Radiacin: Encontramos corpsculos ionizantes y longitud luz ultravioleta y

su accin depende del tiempo de radiacin, tiempo de exposicin y la dosis
tenemos a los rayos ultravioletas, rayos gamma, rayos x.

B) POR AGENTES QUMICOS

Utilizando sustancias antispticas que varan en frmula y concentracin, segn su
accin bactericida. Los antibiticos y quimioterpicos no cumplen siempre con un rol
de completa esterilizacin, por que frenan o atenan el desarrollo microbiano. Estos
agentes dependen de las condiciones bajo las que actan:
Concentracin: Vara con el tipo de agente y de microorganismo, pues
una misma concentracin del agente puede producir un efecto diferente en
distintos microorganismos.
Tiempo: Los microorganismos no son susceptibles a un agente en la
misma forma, por lo que no todos los microorganismos mueren al mismo
tiempo.
pH: Afecta tanto a los microorganismos como a los agentes qumicos. El
aumento de pH por encima de 7 incrementa la carga negativa de los
microorganismos afectando la concentracin del agente sobre la clula. El
pH determina el grado de disociacin y la efectividad del agente qumico,
pues a menor disociacin mayor permeabilidad y mayor efectividad.

Alcoholes

Iodo

Antispticos Agentes catinicos, aninicos y

anfteros
rgano Mercuriales
Colorantes

Cloro y Compuestos clorados

Aldehdos
Desinfectantes y/o
Esterilizantes xido de Etileno
Compuestos Fenlicos
cidos y lcalis
 C) EL CALOR SE PROPAGA POR TRES MTODOS:

Por conduccin, cuando el calor se transmite a travs de la materia sin

movimiento aparente de la misma, estando en contacto el cuerpo ms
caliente con el ms fro (el calor se propaga de molcula a molcula).

Por conveccin, cuando el calor se propaga a travs de la materia, con

movimiento apreciable de la misma como sucede en masas liquidas o
corrientes areas al ser sometidas a calentamiento (ejemplo: gases
propagan el calor por este fenmeno).

Por radiacin, cuando el calor se transmite sin necesidad de material

intermedio y en forma de ondas. Ejemplo: foco de la luz, que por estar al
vaco permite el paso de la radiacin que va siempre en lnea recta, a la
misma velocidad de la luz.

1. ESTERILIZACIN POR FLAMEADO

Es cuando el material se somete a la accin directa de la llama de un mechero, sin

que se altere o sufra deterioro.

Se esterilizan mediante este mtodo: las asas de siembra, material de diseccin

(previo a un bao de alcohol), las bocas de los tubos, matraces, frascos, etc. el calor
por este mtodo se transmite por conduccin.

Las asas o agujas deben ser esterilizadas antes o despus de su uso, para ello se
ponen en la flama de un mechero bunsen hasta que se torne rojo y luego se deja
enfriar unos 10-15 segundos.

2. ESTERILIZACIN POR CALOR SECO

Se hace actuar al aire caliente sobre el material a esterilizar. Mediante este mtodo se
pueden esterilizar material de vidrio y metlico. El tiempo de esterilizacin depende de
la temperatura que se emplea: 160C, por hora y media a dos horas, 170C, por dos
horas, 180C por medio hora o tres cuartos de hora.

El calor se inicia por conduccin y se propaga por conveccin. Los aparatos ms

usados son: el horno de Pasteur y estufas de aire caliente, se conocen varios modelos
modernos elctricos con funcionamiento automtico.

3. ESTERILIZACIN POR CALOR HMEDO

Acta coagulando las protenas del protoplasma microbiano, en tiempo menor a la

esterilizacin por aire caliente. El calor se propaga por conveccin. Puede ser:

a) Ebullicin.- cuando el material es sometido a la accin directa del agua

hirviendo a 100C de temperatura, esta puede elevarse por adicin de
ciertas sustancias qumicas. Por este mtodo se pueden esterilizar:
jeringas, guantes de jebe, sondas, ropa, etc. Por 40 a 60 minutos.
 b) Vapor fluente.- Es cuando se hace actuar sobre el material a esterilizar
un chorro continuo de vapor de agua por 30 minutos a 1 hora. El vapor
debe calentar a 100C los objetos (es la temperatura que se consigue
cuando el vapor no contiene aire y es correcta la circulacin del vapor).
Se esterilizan por este mtodo, sustancias que se desnaturalizan a
mayor temperatura, ejemplo: gelatina, bilis, leche. El aparato que se
usa es el aparato de Arnold.

c) Vapor discontinuo o tindalizacin.- es cuando acta el calor en forma

fraccionada por tres das sucesivos a 100C durante 30-40 minutos. En
el primer da se destruirn las formas vegetativas, en el segundo da las
formas mas activas germinadas de las esporas y en el tercer da las
formas esporuladas. Mediante este mtodo se esterilizan: sustancias
orgnicas que sufren descomposicin a altas temperaturas. Los
aparatos de Arnold y de Coch, son muy recomendados.

d) Vapor de agua saturada a presin.- Es uno de los mtodos ms

seguros y efectivos. Permite una esterilizacin completa de la mayora
de los medios de cultivo y soluciones que no contienen sustancias de
fcil desnaturalizacin. Se emplea en este mtodo las autoclaves, las
comunes son: modelo de Chamberland, las actuales son elctricas y el
funcionamiento es automtico.

En la autoclave se logran temperaturas superiores a la temperatura de ebullicin, del

agua mediante aumento de presin. La autoclave funciona a 10-15 libras de presin,
por encima de la temperatura atmosfrica normal, a esta presin el agua hierve a
121C en lugar de 100C (a la presin atmosfrica normal). Manteniendo la
temperatura de 121C a una presin de 15 libras de presin durante 15 minutos,
posible la destruccin de toda forma viva en el material a esterilizar.

OBJETIVO GENERAL

Eliminar todos los microorganismos que contiene un objeto o sustancia y que se

encuentra acondicionados de tal forma que no pueden contaminarse nuevamente.

OBJETIVOS ESPECFICOS

- Proporcionar al estudiante conocimientos bsicos sobre los principales

mtodos empleados en la esterilizacin, tanto para la eliminacin o destruccin
completa de microorganismos contenidos en objetos, productos, etc.

- Impartir conocimiento de cmo prevenir el ingreso de los microorganismos en

un ambiente determinado estril.

MATERIALES

Frascos o Erlenmeyer conteniendo caldo nutritivo.

Dos tubos de prueba.

 Algodn para taponar.

Gradillas metlicas.

Papel kraf.

Plumn indeleble o lpiz de cera.

Autoclave / incubadora.

PROCEDIMIENTO

Distribuir el medio de cultivo (caldo nutritivo) en 2 tubos de prueba.

Poner uno de los tubos en la autoclave para esterilizar el medio de cultivo.

Despus del tiempo determinado sacar el tubo de la autoclave.

Los dos tubos poner en la estufa o incubadora (uno de ellos sin autoclavar),
donde permanecern hasta el da siguiente, en que sern observados.

Describir los resultados

CONCLUSIONES

Comprendimos los mtodos de esterilizacin, ya sean fsicos o qumicos,

tambin llegamos a saber la importancia del auoclavado en las dos
muestras.

Logramos como prevenir el ingreso de microorganismos en los materiales

esterilizados

RECOMENDACIONES

Usar guantes y mascarillas para la interaccin con las bacterias y evitar

contactos con ellas.

Gracias a estas tcnicas de esterilizacin e desinfeccin, tanto bilogos,

como qumicos y cientficos en general han podido identificar, clasificar,
para luego estudiar detalladamente, a la inmensa variedad de
microorganismos existentes en todos los lugares inimaginables que se
puedan encontrar (desiertos, salares, casquetes polares, profundidades
marinas, medios muy cidos, aguas termales, etc.).

BILIOGRAFIA

MANRIQUE RUBEN M. Manual de Laboratorio de Microbiologa

General. Universidad Nacional Agraria de la Selva.
 Informacin de la separata de prcticas de la profesora Blga M.
Sc Margarita Alcedo Romero.
http://www.monografias.com/trabajos10/meste/meste.shtml#fi.

ANEXOS