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1.

INTRODUCCIN

Los hongos forman un grupo de organismos talfitos, eucariotas, hetertrofos, desprovistos de


clorofila, y que histricamente han sido estudiados en Botnica en la rama de la Micologa.
Actualmente se define como un grupo heterogneo, polifiltico, donde se reconocen tres lneas
evolutivas independientes, reino Fungi, reino Stramenopila y Protistas. Con los vegetales comparten
la presencia de paredes celulares definidas, en las fases vegetativas y reproductivas o solo en la fase
de reproduccin, la presencia de esporas y la forma de crecimiento pluricelular, filamentosa o
alargada.

Los hongos se originan a partir de esporas, que son clulas especializadas que tienen la misma
funcin que las semillas en las plantas. Cuando las esporas encuentran las condiciones adecuadas de
humedad, temperatura, luz y nutrientes, entre otras, germinan y producen hifas, que son unas
estructuras filamentosas que constituyen la unidad estructural fundamental de la mayora de los
hongos. Las hifas se ramifican y forman una masa algodonosa llamada micelio, que se extiende
sobre el medio o superficie (como tierra o madera, entre otros) y produce los cuerpos fructferos.

Los hongos se dispersan mediante la produccin de esporas. Las esporas fngicas son clulas o
conjunto de clulas, a menudo con una pared gruesa que les permite sobrevivir en condiciones
difciles. Con excepci6n de un grupo, las esporas fngicas no son mviles, es decir, son incapaces
de desplazarse de un sitio a otro. Pueden formarse por mitosis (esporas asexuales) o por meiosis
(esporas sexuales). En gran medida, los cientficos han clasificado tradicionalmente los hongos
basndose en sus estructuras distintivas, en las cuales producen sus esporas sexuales. Los hongos se
dispersan mediante la produccin de esporas.

Cuando se trata de evaluar la resistencia de las plantas a enfermedades o efectuar estudios


especficos (epidemiolgicos) del patgeno, muchas veces es necesario recurrir a la inoculacin
artificial, ya sea en invernadero o en campo. Para esto se utiliza inculo a una concentracin
especfica (es decir, un nmero determinado de esporas por mililitro), segn el patgeno y
hospedero en estudio, con la finalidad de obtener una buena infeccin que permita observar las
diferencias entre los materiales evaluados. Para determinar la concentracin se usa una cmara de
Neubauer, con el cual se hacen conteos de esporas en campos de dimensiones conocidas, que darn
el nmero de esporas por ml de la suspensin inicial. De esta forma, por medio de diluciones se
obtiene el inculo en la concentracin deseada.
2. OBJETIVOS
Realizar un conteo de esporas en la cmara de Neubauer.
Determinar el nmero de esporas, mediante clculos matemticos.
Investigar que son las esporas y su importancia en la reproduccin de los hongos.

3. MATERIALES
Frasco con 90 ml de solucin de tween 80 o Tritn al 0.001 %
Tubos con 9 ml de tween 80 al 2% o Tritn al 0.001%
Muestra de 10 g o 10 ml del bioinsumo a evaluar,
Micropipeta de 100 a 1000 gl.
Puntas esterilizadas.
Cmara de Neubauer.
Microscopio.
4. PROCEDIMIENTO
1. Colocar 90 ml de agua con triton al 0.001% en frascos hermticos.
2. Pesar 10 g/ 10 ml del producto y colocar en el frasco con la solucin del dispersante.
3. Dejar reposar la muestra por 1 minuto.
4. Agitar el vortex por 5 minutos.
5. Realizar diluciones seriadas hasta que la muestra no presente concentracin excesiva.
6. Agitar la mezcla antes de tomar la muestra para las lecturas.
7. Transferir una alcuota de 20 de Neubauer y dejar que se llene por accin capilar. Dejar
reposar la muestra por 1 minuto.
8. Observar en el microscopio con lente de 40x y contar las esporas.
9. Realizar el contaje de esporas en los 5 cuadrantes de cada placa.
10. Calcular la concentracin de la mezcla con los valores que se ajustan al siguiente calculo:

4 105 =

5. RESULTADOS

Cuadrantes Total esporas


1 6
2 6
3 5
4 5
5 3

Frmula de la Cmara de Neubauer

Numero de esporas contadas


Concentracin = 4106
Nmero de Cuadrados observados

25
= 4000000 100 0.3125
80

= 125 105 Esporas/ gr suelo

6. DISCUSIN

Segn, La cuantificacin de la concentracin de esporas permite determinar el nmero de unidades


infectivas por unidad de peso o volumen existentes en una formulacin. Para esto se utiliza la
cmara Neubauer, la consiste en una placa gruesa con forma de porta, cuya porcin central
est dividida en tres bandas longitudinales perpendiculares a su eje longitudinal. De ellas,
las dos laterales se encuentra sobreelevadas con respecto de la central en 0.1 mm, y en la
central hay grabado un retculo cuadrangular.

De esta forma, por medio de diluciones se obtiene el inculo en la concentracin deseada,


esto nos ayud a contar y as poder calcular el nmero de esporas que existe en muestra.

7. CONCLUSIONES

Realizamos un conteo de esporas en la cmara de Neubauer.

Determinamos el nmero de esporas, mediante clculos matemticos.

Investigamos que son las esporas y su importancia en la reproduccin de los hongos. Las
esporas son unidades reproductivas, generalmente haploide y unicelular. La reproduccin
por esporas permite al mismo tiempo la dispersin y la supervivencia por largo tiempo en
condiciones adversas. La espora produce un nuevo organismo al dividirse por mitosis sin
fusin con otra clula, produciendo un gametofito pluricelular. La espora es parte
importante de los ciclos vitales biolgicos de plantas, hongos y algas. El trmino deriva del
Griego Antiguo , semilla. Las esporas se pueden clasificar segn su funcin,
estructura, origen del ciclo vital o por su movilidad.
8. RECOMENDACIONES

Al mezclar la muestra de cultivo en el agua procurar revolverla bien para que esta libere
todas las esporas que se encuentran en ella.
Tener cuidado al colocar el agua en la caja de Neubauer para que esta no se desborde.
Establecer que cuadros se van a contar, preferiblemente los de las esquinas y centro para
que sea al azar

9. BIBLIOGRAFA
Gilchrist. S, L., G; Fuentes. D, C; Martnez, C, R. M; Lpez, A, E; Duveiller, R. P; Singh,
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2007+fitopatologia&source=bl&ots=OPRK-4hH_l&sig=PQbPd5o2HF-
lQeRUwO42Jd3otc8&hl=es-
419&sa=X&ei=FeITU7a6DIajkQeKzYHACA&redir_esc=y#v=onepage&q=Rivera%2020
07%20fitopatologia&f=true
10. ANEXOS

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