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Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria - ANVISA

RESOLUO DA DIRETORIA COLEGIADA - RDC N 166, DE 24 DE JULHO DE 2017

(Publicada no DOU n141, de 25 de julho de 2017)

Dispe sobre a validao de mtodos
analticos e d outras providncias.
A Diretoria Colegiada da Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria, no uso da
atribuio que lhe confere o art. 15, III e IV aliado ao art. 7, III, e IV, da Lei n 9.782,
de 26 de janeiro de 1999, e ao art. 53, V, 1 e 3 do Regimento Interno aprovado nos
termos do Anexo I da Resoluo da Diretoria Colegiada RDC n 61, de 3 de fevereiro
de 2016, resolve adotar a seguinte Resoluo da Diretoria Colegiada, conforme
deliberado em reunio realizada em 11 de julho de 2017, e eu, Diretor-Presidente,
determino a sua publicao.

CAPTULO I
DAS DISPOSIES INICIAIS
Seo I
Objetivo
Art. 1 Esta Resoluo estabelece critrios para a validao de mtodos analticos.
Pargrafo nico. O no atendimento a qualquer critrio disposto nesta Resoluo
deve ser tecnicamente justificado e ser objeto de anlise pela Anvisa.

Seo II
Abrangncia
Art. 2 Esta Resoluo aplicvel a mtodos analticos empregados em insumos
farmacuticos, medicamentos e produtos biolgicos em todas as suas fases de produo.
1 Os parmetros de validao e seus respectivos critrios de aceitao devem
ser definidos de acordo com as caractersticas do analito e da natureza do mtodo.
2 Mtodos analticos aplicados aos produtos sob investigao utilizados em
ensaios clnicos devem ter sua adequabilidade demonstrada de acordo com esta
Resoluo, conforme aplicvel para cada fase de desenvolvimento clnico.
I - A utilizao de abordagem alternativa deve ser tecnicamente justificada
baseada em referncias cientficas reconhecidas.
3 Ser admitida a utilizao de abordagens alternativas para a validao de
mtodos analticos aplicados aos produtos biolgicos, como ensaios biolgicos e
imunolgicos

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4 Esto excludos desta Resoluo os mtodos microbiolgicos, para os quais

deve ser apresentada justificativa tcnica para a abordagem escolhida, baseada na
Farmacopeia Brasileira ou em outros compndios oficiais reconhecidos pela Anvisa.

Seo III
Definies
Art. 3 Para efeitos desta Resoluo, so adotadas as seguintes definies:
I.- amostra: quantidade representativa de insumo farmacutico, produto
intermedirio ou produto terminado, devidamente identificada, dentro do prazo de
validade estabelecido;
II.- analito: substncia ou conjunto de substncias de interesse que se pretende
identificar ou quantificar;
III.- caracterizao de substncia qumica: o conjunto de ensaios que garante
inequivocamente a autenticidade e qualidade da substncia, no que se refere a sua
identidade, pureza, teor e potncia, devendo incluir dados obtidos a partir de tcnicas
aplicveis caracterizao de cada substncia como, por exemplo, termogravimetria,
ponto de fuso, calorimetria exploratria diferencial, espectroscopia no infravermelho,
espectrometria de massas, ressonncia magntica nuclear, anlise elementar
(carbono/hidrognio/nitrognio), difrao de raio X, rotao ptica, ensaios
cromatogrficos, entre outras;
IV.- corrida analtica: conjunto de medies efetuadas em um grupo de amostras
em intervalo de tempo pr-determinado, sob as mesmas condies de repetibilidade, tais
como mtodo, analista, instrumentao, local e condies de utilizao;
V.- efeito matriz: efeito dos componentes da matriz na resposta analtica;
VI.- ensaio: operao tcnica que consiste na determinao de uma ou mais
caractersticas de um dado insumo ou produto, de acordo com um mtodo especificado;
VII.- ensaio limite: ensaios que permitem verificar se a quantidade do analito est
acima ou abaixo de um nvel previamente estabelecido, sem o quantificar com exatido;
VIII.- fator resposta: razo entre sinal analtico e concentrao do analito;
IX.- fator resposta relativo: razo entre dois fatores resposta, que usada como
correo no clculo da concentrao de uma substncia quando essa medida por meio
da resposta analtica de outra;
X.- gerenciamento da qualidade: o que determina a implementao da "Poltica
da Qualidade", ou seja, as intenes e diretrizes globais relativas qualidade,
formalmente expressa e autorizada pela administrao superior da empresa;

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XI.- impurezas: qualquer componente presente no insumo farmacutico ou no

produto terminado que no seja o insumo farmacutico ativo nem o(s) excipiente(s);
XII.- insumo farmacutico: qualquer substncia que compe a formulao de uma
forma farmacutica;
XIII.- insumo farmacutico ativo (IFA): insumo farmacutico que, quando
administrado a um paciente, atua como componente ativo, podendo exercer atividade
farmacolgica ou efeito direto no diagnstico, cura, tratamento ou preveno de uma
doena ou ainda afetar a estrutura e funcionamento do organismo humano;
XIV.- matriz complexa: aquela que contm um nmero indefinido de substncias
no monitoradas, que no podem ser obtidas sem a presena do analito;
XV.- matriz: composio que mimetiza a amostra sem a presena do analito;
XVI.- produtos sob investigao: medicamento experimental, placebo,
comparador ativo ou qualquer outro produto a ser utilizado no ensaio clnico;
XVII.- pureza cromatogrfica: ausncia de interferncia no sinal cromatogrfico
do analito;
XVIII.- pureza de pico: homogeneidade espectral de um pico cromatogrfico,
indicativa de sua pureza cromatogrfica, sendo que os critrios para concluir se existe
homogeneidade espectral e os parmetros adotados para o clculo da pureza so
definidos conforme previamente estabelecido para o software utilizado ou por meio de
avaliao tcnica cientificamente embasada;
XIX.- relatrio de validao: documento no qual os procedimentos, registros,
resultados e avaliao da validao so consolidados e sumarizados;
XX.- revalidao de mtodo analtico: repetio parcial ou total da validao de
um mtodo analtico para assegurar que esse continua cumprindo com os requisitos
estabelecidos;
XXI.- substncia qumica de referncia (SQR): substncia ou mistura de
substncias qumicas ou biolgicas com alto grau de pureza, cuidadosamente
caracterizada para assegurar sua identidade, qualidade, teor e potncia incluindo-se
substncia qumica de referncia caracterizada e substncia qumica de referncia
farmacopeica;
XXII.- substncia qumica de referncia caracterizada (SQC): substncia ou
mistura de substncias qumicas ou biolgicas em que a identidade, a qualidade, a
pureza, o teor e a potncia tenham sido assegurados por um processo de caracterizao;
XXIII.- substncia qumica de referncia farmacopeica (SQF): substncia ou
mistura de substncias qumicas ou biolgicas estabelecida e distribuda por
compndios oficiais reconhecidos pela Anvisa;

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XXIV.- substncia qumica de trabalho (SQT): substncia ou mistura de

substncias qumicas ou biolgicas utilizada na rotina laboratorial, padronizada a partir
de uma substncia qumica de referncia farmacopeica ou, na ausncia dessa, a partir de
uma substncia qumica de referncia caracterizada, sendo rastrevel SQR utilizada
para a sua padronizao;
XXV.- transferncia de mtodo: processo documentado que qualifica um
laboratrio (unidade receptora) para o uso de um mtodo analtico proveniente de outro
laboratrio (unidade de transferncia), assegurando que a unidade receptora possui
conhecimento e est apta para executar o mtodo analtico de acordo com a finalidade
pretendida;
XXVI.- validao analtica: a avaliao sistemtica de um mtodo por meio de
ensaios experimentais de modo a confirmar e fornecer evidncias objetivas de que os
requisitos especficos para seu uso pretendido so atendidos;
XXVII.- validao parcial: demonstrao, por meio de alguns parmetros de
validao, que o mtodo analtico previamente validado tem as caractersticas
necessrias para obteno de resultados com a qualidade exigida, nas condies em que
praticado; e
XXVIII.- verificao de sistema (system suitability): procedimento a ser realizado
previamente a uma corrida analtica para demonstrar que o sistema est apto para o uso
pretendido, sendo que os parmetros desse procedimento devem ser definidos durante o
desenvolvimento e validao do mtodo.

CAPTULO II
DAS DISPOSIES GERAIS
Art. 4 A validao deve demonstrar que o mtodo analtico produz resultados
confiveis e adequado finalidade a que se destina, de forma documentada e mediante
critrios objetivos.
Art. 5 A utilizao de mtodo analtico no descrito em compndio oficial
reconhecido pela Anvisa requer a realizao de uma validao analtica, conforme
parmetros estabelecidos nesta resoluo, levando-se em considerao as condies
tcnico-operacionais.
Art. 6 Os parmetros tpicos a serem considerados para a validao dependem do
ensaio a ser realizado e esto dispostos no Quadro 1 do anexo I.
Art. 7 Os mtodos analticos compendiais devem ter sua adequabilidade
demonstrada ao uso pretendido, nas condies operacionais do laboratrio, por meio da
apresentao de um estudo de validao parcial.

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Pargrafo nico. O disposto no caput exclui mtodos gerais compendiais bsicos

como medida de pH, perda por secagem, cinzas sulfatadas, umidade, desintegrao,
entre outros, e os mtodos analticos descritos em monografias individuais compendiais
de insumos farmacuticos no ativos.
Art. 8 A validao parcial deve avaliar, pelo menos, os parmetros de preciso,
exatido e seletividade.
1 No caso de mtodos analticos destinados quantificao de impurezas, a
validao parcial deve incluir o limite de quantificao.
2 No caso de ensaio limite, em substituio aos parmetros do caput, devem ser
avaliados os parmetros de seletividade e de limite de deteco.
Art. 9 No caso de transferncia de mtodo entre laboratrios, esse ser
considerado validado, desde que seja realizado um estudo de validao parcial nas
dependncias do laboratrio receptor.
1 A transferncia de mtodo entre laboratrios com o mesmo sistema de
gerenciamento da qualidade pode ser realizada por meio de um estudo de validao
parcial, nos termos do art. 8, ou pela avaliao da reprodutibilidade.
2 Outra abordagem poder ser aceita, mediante justificativa e apresentao de
protocolo e relatrio de transferncia, baseada em anlise de risco e considerando a
experincia prvia, o conhecimento da unidade receptora, a complexidade do produto e
do mtodo e as especificaes, alm de outros aspectos relevantes aplicveis.
3 Caso a transferncia tambm utilize testes comparativos, a semelhana nos
resultados dever ser comprovada por meio de ferramenta estatstica.
4 A documentao de transferncia do mtodo deve ser apresentada contendo a
cpia do relatrio de validao do mtodo transferido, como prova de que esse foi
originalmente validado em conformidade com normas e regulamentos especficos
aprovados/referendados pela Anvisa.
5 No caso de transferncia de mtodos j aprovados pela Anvisa, dever ser
enviada cpia do relatrio de validao aprovado ou indicao do nmero de expediente
da petio na qual foi protocolada a verso final do referido relatrio.
Art. 10. Uma revalidao de mtodo analtico pode considerar as seguintes
circunstncias:
I.- alteraes na sntese ou obteno do IFA;
II.- alteraes na composio do produto;
III.- alteraes no mtodo analtico; e

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IV.- outras alteraes que possam impactar significativamente no mtodo

validado.
Pargrafo nico. Os parmetros de validao a serem avaliados dependem da
natureza das alteraes realizadas.
Art. 11 Deve ser realizada a verificao de sistema a cada corrida analtica.
Art. 12 Os documentos da validao e da validao parcial apresentados devem
descrever os procedimentos, os parmetros analticos, os critrios de aceitao e os
resultados, com detalhamento suficiente para possibilitar sua reproduo e, quando
aplicvel, sua avaliao estatstica.
Art. 13 O relatrio de validao a ser protocolado, conforme resolues de
registro e ps-registro, deve conter os dados e clculos obtidos durante a conduo da
validao analtica, bem como a abordagem estatstica utilizada para a avaliao dos
dados.
1 Os dados brutos relacionados ao parmetro de seletividade devem fazer parte
do relatrio mencionado no caput.
2 Os dados brutos relacionados aos demais parmetros devem estar disponveis
na empresa para avaliao mediante solicitao da Anvisa.

CAPTULO III
DAS SUBSTNCIAS QUMICAS DE REFERNCIA
Art. 14 Na validao de mtodos analticos, dever ser utilizada Substncia
Qumica de Referncia Farmacopeica (SQF) oficializada pela Farmacopeia Brasileira,
preferencialmente, ou por outros compndios oficialmente reconhecidos pela Anvisa.
1. Ser admitido o uso de Substncia Qumica de Referncia Caracterizada
(SQC), mediante a apresentao de relatrio de caracterizao conclusivo para o lote em
estudo, incluindo as razes tcnicas para escolha dos ensaios utilizados e os dados
brutos pertinentes.
2. A Anvisa e os integrantes do Sistema Nacional de Vigilncia Sanitria
podero requerer amostras da SQC para fins de avaliao do processo de caracterizao
nas hipteses do pargrafo anterior e, quando da necessidade de realizao de anlise
fiscal, dever ser fornecida amostra da SQC para fins de realizao dos testes
necessrios.
Art. 15 O relatrio de caracterizao, a depender do analito, deve conter os dados
obtidos a partir de tcnicas aplicveis caracterizao de cada substncia qumica
como, por exemplo, termogravimetria, ponto de fuso, calorimetria exploratria
diferencial, espectroscopia no infravermelho, espectrometria de massas, ressonncia

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magntica nuclear, anlise elementar (carbono/hidrognio/nitrognio), difrao de raio

X, rotao ptica, mtodos cromatogrficos, entre outras.
1. Alm dos dados de caracterizao, devem ser includas no relatrio as
seguintes informaes:
I.- nmero e validade do lote da substncia utilizado na caracterizao;
II.- denominao comum brasileira ou denominao comum internacional;
III.- n CAS;
IV.- nome qumico;
V.- sinonmia;
VI.- frmula molecular e estrutural;
VII.- peso molecular;
VIII.- forma fsica;
IX.- propriedades fsico-qumicas;
X.- perfil de impurezas;
XI.- cuidados de manipulao e conservao, e
XII.- laudo analtico comprovando a identidade, teor e validade da SQC.
2. Para produtos biolgicos, a caracterizao do material/padro de referncia
deve ser realizada utilizando mtodos do estado da arte apropriados.
Art. 16 Para gases medicinais, a verificao analtica de instrumentos e as
determinaes analticas devem ser conduzidas utilizando materiais de referncia
rastreveis, distribudos por institutos de metrologia ou por rgos reconhecidos como
produtores de materiais de referncia certificados.
Pargrafo nico. Na ausncia de materiais de referncia, podem ser utilizados
padres internos produzidos de acordo com guias e registros bibliogrficos.
Art. 17 Para produtos biolgicos, os termos material/padro substituem o termo
substncia qumica nas definies de SQR, SQF, SQC e SQT.
Art. 18 No admitida a utilizao de SQT para fins de validao de mtodo
analtico.

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CAPTULO IV
DOS PARMETROS DA VALIDAO ANALTICA
Seo I
Da Seletividade
Art. 19 A seletividade do mtodo analtico deve ser demonstrada por meio da sua
capacidade de identificar ou quantificar o analito de interesse, inequivocamente, na
presena de componentes que podem estar presentes na amostra, como impurezas,
diluentes e componentes da matriz.
Pargrafo nico. No caso de mtodos cromatogrficos, deve ser comprovada a
pureza cromatogrfica do sinal do analito, exceto para produtos biolgicos.
Art. 20 Nos mtodos de identificao, deve ser demonstrada sua capacidade de
obter resultado positivo para amostra contendo o analito e resultado negativo para outras
substncias presentes na amostra.
1 Deve ser utilizada a SQR na comparao com a resposta obtida para o analito
nos termos do Captulo III.
2 Para demonstrar a seletividade dos mtodos de identificao, os ensaios
devem ser aplicados a substncias estruturalmente semelhantes ao analito, sendo o
critrio de aceitao a obteno de resultado negativo.
3 Para insumos farmacuticos ativos de origem vegetal e medicamentos que os
contenham, deve-se demonstrar a capacidade do mtodo de distinguir o material de
interesse de outras espcies vegetais semelhantes, principalmente aquelas que possam
estar presentes como adulterantes ou substituintes.
4 Para atingir o nvel necessrio de seletividade, pode ser necessria a
combinao de dois ou mais mtodos analticos de identificao.
Art. 21 Para mtodos quantitativos e ensaios limite, a seletividade deve ser
demonstrada por meio da comprovao de que a resposta analtica se deve
exclusivamente ao analito, sem interferncia do diluente, da matriz, de impurezas ou de
produtos de degradao.
1 Para demonstrar ausncia de interferncia de produtos de degradao,
necessrio expor a amostra a condies de degradao em ampla faixa de pH, de
oxidao, de calor e de luz.
2 Ficam isentos da demonstrao descrita no 1 os seguintes casos:

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I.- produtos para os quais j foi demonstrada adequao resoluo que

estabelece parmetros para a notificao, identificao e qualificao de produtos de
degradao em medicamentos.
II.- mtodos de desempenho;
III.- mtodos no cromatogrficos.
3 A utilizao de mtodo com limitao tcnica para seletividade, nos termos
do caput, apenas aceita mediante justificativa tcnica e aplicao conjunta de outro
mtodo complementar.
Art. 22 Para gases medicinais, a seletividade deve ser demonstrada comparando-
se o resultado da leitura da amostra com a resposta da leitura da SQR nos termos do
captulo III.
Pargrafo nico. O valor mximo de uma possvel interferncia deve ser
justificado.

Seo II
Da Linearidade
Art. 23 A linearidade de um mtodo deve ser demonstrada por meio da sua
capacidade de obter respostas analticas diretamente proporcionais concentrao de
um analito em uma amostra.
Art. 24 Uma relao linear deve ser avaliada em toda a faixa estabelecida para o
mtodo.
Art. 25 Para o estabelecimento da linearidade, deve-se utilizar, no mnimo, 5
(cinco) concentraes diferentes da SQR para as solues preparadas em, no mnimo,
triplicata.
Pargrafo nico. As solues utilizadas para avaliao da linearidade devem ser
preparadas de maneira independente, podendo ser utilizadas solues diludas de uma
mesma soluo me da SQR.
Art. 26 Todos os clculos para a avaliao da linearidade devem ser realizados a
partir dos dados de concentraes reais e respostas analticas individuais.
Art. 27 Para avaliao da linearidade, devem ser apresentados os seguintes dados:
I.- representao grfica das respostas em funo da concentrao do analito;
II.- grfico de disperso dos resduos, acompanhado de sua avaliao estatstica;
III.- equao da reta de regresso de y em x, estimada pelo mtodo dos mnimos
quadrados;

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IV.- avaliao da associao linear entre as variveis por meio do coeficientes de

correlao (r) e de determinao (r);
V.- avaliao da significncia do coeficiente angular.
1 A homocedasticidade dos dados deve ser investigada para a utilizao do
modelo adequado.
2 Nos testes estatsticos, deve ser utilizado um nvel de significncia de 5%
(cinco por cento).
3 O coeficiente de correlao deve estar acima de 0,990.
4 O coeficiente angular deve ser significativamente diferente de zero.

Seo III
Do Efeito Matriz
Art. 28 O disposto nesta seo se aplica a matrizes complexas.
Art. 29 O efeito matriz deve ser determinado por meio da comparao entre os
coeficientes angulares das curvas de calibrao construdas com a SQR do analito em
solvente e com a amostra fortificada com a SQR do analito.
Pargrafo nico. As curvas devem ser estabelecidas da mesma forma que na
linearidade para os mesmos nveis de concentrao, utilizando, no mnimo, 5 (cinco)
concentraes diferentes em, no mnimo, triplicata.
Art. 30 O paralelismo das retas indicativo de ausncia de interferncia dos
constituintes da matriz e a sua demonstrao deve ser realizada por meio de avaliao
estatstica adequada.
Pargrafo nico. Deve ser adotado o nvel de significncia de 5% (cinco por
cento) no teste de hipteses.
Seo IV
Da faixa de trabalho
Art. 31 A faixa de trabalho deve ser estabelecida a partir dos estudos de
linearidade, juntamente com os resultados de preciso e exatido, sendo dependente da
aplicao pretendida.
Art. 32 Devem ser consideradas as seguintes faixas de trabalho:
I.- para teor: de 80% (oitenta por cento) a 120% (cento e vinte por cento);

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II.- para uniformidade de contedo: de 70% (setenta por cento) a 130% (centro e
trinta por cento);
III.- para teste de dissoluo: de -20% (menos vinte por cento) da menor
concentrao esperada a +20% (mais vinte por cento) da maior concentrao esperada a
partir do perfil de dissoluo; e
IV.- para determinao de impurezas: do limite de quantificao at 120% (cento
e vinte por cento) da concentrao no limite da especificao de cada impureza
individual;
V.- para determinao simultnea de teor e impurezas pelo procedimento de
normalizao de rea: do limite de quantificao (LQ) at 120% (cento e vinte por
cento) da concentrao esperada da substncia ativa.
1 Faixas de trabalho maiores que as definidas no caput podero ser utilizadas se
justificadas tecnicamente.
2 Para gases medicinais, sero aceitas faixas de trabalho alternativas desde que
a abordagem para a escolha do intervalo seja justificada.

Seo V
Da Preciso
Art. 33 A preciso deve avaliar a proximidade entre os resultados obtidos por
meio de ensaios com amostras preparadas conforme descrito no mtodo analtico a ser
validado.
Art. 34 A preciso deve ser expressa por meio da repetibilidade, da preciso
intermediria ou da reprodutibilidade.
Art. 35 A preciso deve ser demonstrada pela disperso dos resultados,
calculando-se o desvio padro relativo (DPR) da srie de medies conforme a frmula
"DPR=(DP/CMD)X100", em que DP o desvio padro e CMD, a concentrao mdia
determinada.
Art. 36 As amostras para avaliao da preciso devem ser preparadas de maneira
independente desde o incio do procedimento descrito no mtodo.
Pargrafo nico. No caso de amostras slidas e semisslidas, no aceita a
utilizao de solues diludas de uma mesma soluo me.
Art. 37 Quando a avaliao da preciso envolver contaminao da matriz com
substncia em quantidade muito baixa que impossibilite a pesagem direta, pode ser
utilizada uma soluo concentrada da substncia, seguindo-se o procedimento descrito
no mtodo analtico para extrao e diluio da amostra.

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1 No caso de impurezas conhecidas ausentes ou presentes em concentrao

menor que o limite da especificao na amostra, esta deve ser fortificada com
concentraes conhecidas do padro de impurezas.
2 No caso de impurezas desconhecidas, a amostra deve ser avaliada utilizando a
resposta do ativo acrescido matriz na concentrao correspondente ao limite da
especificao estabelecido para a impureza, desde que se considere o mesmo fator
resposta para impureza e para o ativo.
Art. 38 A determinao da repetibilidade deve obedecer aos seguintes critrios:
I - avaliar as amostras sob as mesmas condies de operao, mesmo analista e
mesma instrumentao, em uma nica corrida analtica.
II - utilizar, no mnimo, 9 (nove) determinaes, contemplando o intervalo linear
do mtodo analtico, ou seja, 3 (trs) concentraes: baixa, mdia e alta, com 3 (trs)
rplicas em cada nvel ou 6 (seis) rplicas a 100% (cem por cento) da concentrao do
teste individualmente preparadas.
Art. 39 Os critrios de aceitao devem ser definidos e justificados de acordo com
os seguintes aspectos:
I - objetivo do mtodo;
II - variabilidade intrnseca do mtodo;
III - concentrao de trabalho; e
IV - concentrao do analito na amostra.
Art. 40 A determinao da preciso intermediria deve obedecer aos seguintes
critrios:
I.- expressar a proximidade entre os resultados obtidos da anlise de uma mesma
amostra, no mesmo laboratrio, em pelo menos dois dias diferentes, realizada por
operadores distintos; e
II - contemplar as mesmas concentraes e o mesmo nmero de determinaes
descritas na avaliao da repetibilidade.
Art. 41 A reprodutibilidade deve ser obtida por meio da proximidade dos
resultados obtidos em laboratrios diferentes.
1 A reprodutibilidade aplicvel em estudos colaborativos ou na padronizao
de mtodos analticos para incluso desses em compndios oficiais, mediante testes
estatsticos adequados.
2 O critrio de aceitao para o desvio padro relativo deve ser justificado
conforme preconizado no art. 39.

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Seo VI
Da Exatido
Art. 42 A exatido de um mtodo analtico deve ser obtida por meio do grau de
concordncia entre os resultados individuais do mtodo em estudo em relao a um
valor aceito como verdadeiro.
Art. 43 A exatido deve ser verificada a partir de, no mnimo, 9 (nove)
determinaes, contemplando o intervalo linear do mtodo analtico, ou seja, 3 (trs)
concentraes: baixa, mdia e alta, com 3 (trs) rplicas em cada nvel.
Art. 44 As amostras para avaliao da exatido devem ser preparadas de maneira
independente, podendo ser utilizadas solues diludas de uma mesma soluo me da
SQR.
Art. 45 Para a determinao da exatido, deve ser utilizada a abordagem mais
adequada, de acordo com o mtodo analtico em estudo:
I.- para IFA:
a) aplicar o mtodo proposto utilizando substncia de pureza conhecida (SQR);
b) comparar os resultados obtidos com aqueles resultantes de um segundo mtodo
validado, cuja exatido tenha sido estabelecida; ou
c) no caso de analito em matriz complexa, realizar anlise pelo mtodo de adio
de SQR no qual quantidades conhecidas de SQR so acrescentadas amostra.
II.- para produto terminado:
a) aplicar o mtodo proposto na anlise de uma amostra, na qual quantidade
conhecida de SQR foi adicionada matriz;
b) na indisponibilidade de amostras de todos os componentes do medicamento,
pode ser realizada a anlise pelo mtodo de adio de SQR, no qual quantidades
conhecidas de SQR so acrescidas soluo do produto terminado; ou
c) comparar os resultados obtidos com aqueles resultantes de um segundo mtodo
validado.
III.- para impurezas:
a) aplicar o mtodo de adio de padro, no qual quantidades conhecidas de
impurezas ou produtos de degradao so acrescidas amostra;
b) na indisponibilidade de amostras de certas impurezas ou produtos de
degradao, pode ser realizada a comparao dos resultados obtidos com um segundo
mtodo validado e a utilizao do fator resposta relativo ao IFA;

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c) para impurezas desconhecidas, a exatido deve ser avaliada comparando-se a

resposta da SQR do IFA ou de impureza conhecida, conforme o mtodo proposto, em
uma faixa de concentrao que contemple a faixa de trabalho do mtodo, desde que seja
considerado o mesmo fator resposta.
Pargrafo nico. Em todos os casos, a forma de clculo das concentraes dos
analitos deve ser a mesma descrita no mtodo analtico em questo.
Art. 46 A exatido deve ser expressa pela relao percentual de recuperao do
analito de concentrao conhecida adicionado amostra ou pela relao entre a
concentrao mdia, determinada experimentalmente, e a concentrao terica
correspondente, dada pela frmula 1 do Anexo II.
Pargrafo nico. Quando a exatido determinada a partir de um mtodo
anteriormente validado, deve-se considerar, em substituio ao termo concentrao
terica, a concentrao do analito determinada por meio desse.
Art. 47 Deve ser calculado o desvio padro relativo (DPR) para cada
concentrao.
Art. 48 Os critrios de aceitao para percentuais de recuperao e desvio padro
relativo obtidos devem ser justificados conforme critrios preconizados no art. 39.

Seo VII
Do Limite de Deteco
Art. 49 Limite de deteco deve ser demonstrado pela obteno da menor
quantidade do analito presente em uma amostra que pode ser detectado, porm, no
necessariamente quantificado, sob as condies experimentais estabelecidas.
Art. 50 A determinao do limite de deteco pode ser realizada por meio de
mtodo visual, da razo sinal-rudo, baseado na determinao do branco ou em
parmetros da curva de calibrao, considerando-se as particularidades do mtodo
analtico utilizado.
Art. 51 Para mtodos visuais, o limite de deteco determinado pela menor
concentrao para a qual possvel constatar o efeito visual esperado.
Art. 52 Para mtodos instrumentais, o limite de deteco pode ser determinado
pela razo sinal-rudo.
1 O mtodo utilizado para determinao da razo sinal/rudo deve ser descrito e
justificado.
2 A razo sinal-rudo deve ser maior ou igual a 2:1.

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Art. 53 Para a determinao baseada em parmetros da curva analtica, o limite de

deteco pode ser calculado pela frmula 2 do anexo II.
Art. 54 Nos casos em que um valor estimado para o limite de deteco obtido
por clculo ou extrapolao, essa estimativa deve ser confirmada conforme art. 52.

Seo VIII
Do Limite de Quantificao
Art. 55 O limite de quantificao a menor quantidade do analito em uma
amostra que pode ser determinada com preciso e exatido aceitveis sob as condies
experimentais estabelecidas.
Art. 56 O limite de quantificao deve ser coerente com o limite de especificao
da impureza.
Pargrafo nico. Para produtos adequados resoluo que estabelece parmetros
para a notificao, identificao e qualificao de produtos de degradao em
medicamentos, o limite de quantificao deve ser menor ou igual ao limite de
notificao.
Art. 57 Para a determinao deste parmetro deve ser seguido o mesmo
procedimento descrito no art. 53, sendo que a razo sinal/rudo deve ser no mnimo de
10:1.
Art. 58 Para a determinao baseada em parmetros da curva analtica, o limite de
quantificao pode ser calculado pela frmula 3 do anexo II.
Art. 59 Nos casos em que um valor estimado para o limite de quantificao
obtido por clculo ou extrapolao, essa estimativa deve ser confirmada conforme art.
57.
Art. 60 Devem ser testadas preciso e exatido nas concentraes correspondentes
ao limite de quantificao.

Seo IX
Da Robustez
Art. 61 A robustez um parmetro tipicamente realizado no desenvolvimento do
mtodo analtico que indica a sua capacidade em resistir a pequenas e deliberadas
variaes das condies analticas.
Pargrafo nico. Caso haja susceptibilidade do mtodo a variaes nas condies
analticas, essas devero ser controladas por meio de precaues descritas no mtodo.

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Art. 62 No caso de mtodos quantitativos, o impacto das variaes propostas nos

resultados obtidos dever ser avaliado com os mesmos critrios utilizados para a
exatido.
Art. 63 No caso de mtodos qualitativos, deve ser verificado se as variaes
propostas interferem na resposta analtica.
Art. 64 Deve ser demonstrado o atendimento s caractersticas de verificao do
sistema.
Art. 65 A avaliao dos parmetros descritos na Tabela 1 do anexo III deve ser
contemplada no relatrio de validao.
1 Parmetros que sejam considerados relevantes para o resultado, de acordo
com as caractersticas do mtodo, devem ser avaliados adicionalmente.
2 A ausncia da avaliao de qualquer uma das variaes deve ser justificada.

CAPTULO V
DAS DISPOSIES TRANSITRIAS
Art. 66 Sero aceitas validaes de mtodo analtico em conformidade com a
Resoluo RE n 899/2003, desde que tenham sido finalizadas antes da vigncia desta
resoluo e as peties que as contenham tenham sido protocoladas em at 550
(quinhentos e cinquenta) dias corridos aps a vigncia desta resoluo.
1 Em caso da necessidade de execuo e reapresentao de um ou mais
parmetros da validao, desde que no seja necessria a apresentao de nova
validao, a empresa poder seguir a Resoluo RE n 899, de 29 de maio, de 2003.
2 Em caso da necessidade de execuo e apresentao de uma nova validao, a
empresa dever seguir esta resoluo.
3 Aps o prazo estabelecido no caput, para produtos sob investigao, cuja a
validao do mtodo analtico utilizado no desenvolvimento clnico tenha sido iniciada
antes da vigncia da presente norma, sero aceitas, no momento do registro, as
validaes analticas realizadas de acordo com a Resoluo RE n 899, de 29 de maio,
de 2003.

CAPTULO VI
DAS DISPOSIES FINAIS
Art. 67 Documentao e ensaios adicionais podem ser solicitados a qualquer
momento pela Anvisa.

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Art. 68 Todos os dados relevantes obtidos durante a conduo da validao

analtica, bem como as frmulas utilizadas para clculo, devem ser protocoladas,
juntamente com a petio de interesse, para avaliao da Anvisa.
Art. 69 O descumprimento das disposies contidas nesta resoluo constitui
infrao sanitria, nos termos da Lei n 6.437, de 20 de agosto de 1977, sem prejuzo
das responsabilidades civil e penal cabveis.
Art. 70 Fica revogada a Resoluo RE n 899, de 29 de maio de 2003; o inciso
XXXI do art. 1, o pargrafo nico do art. 11 e o anexo I da Resoluo RDC n 31, de
11 de agosto de 2010.
Art. 71 Esta Resoluo entra em vigor no prazo de 180 (cento e oitenta) dias
corridos contados a partir da data de sua publicao.

JARBAS BARBOSA DA SILVA JR.

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ANEXO I
Quadro 1. Parmetros a serem considerados na validao analtica.

Teste de Doseamento
Impurezas -dissoluo (quantificao)
Parmetro Avaliado Identificao
-uniformidade de contedo
Quantitativo Ensaio Limite
-potncia

Exatido no sim no Sim

Preciso Repetibilidade no sim no Sim

Preciso Intermediria no sim (1) no sim (1)

Seletividade (2) sim sim sim sim

Limite de Deteco no no (3) sim no

Limite de quantificao no sim no no (3)

Linearidade no sim no sim

Intervalo no sim no sim

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(1)
Nos casos em que foi conduzida a reprodutibilidade, no necessrio conduzir a
preciso intermediria.
(2)
Nos casos de ensaios de identificao, pode ser necessria a combinao de dois
ou mais procedimentos analticos para atingir o nvel necessrio de discriminao.
(3)
Pode ser necessrio em alguns casos.

ANEXO II
Frmula 1. Clculo da exatido.
Concentrao mdia experimental
Recuperao = ___________________________________________ x 100
Concentrao terica

ou

CA (amostra adicionada) CA (amostra)

Recuperao = ___________________________________________ x 100
CTA

Em que: CA a concentrao experimental do analito e CTA a concentrao

terica do analito adicionado

LD= 3,3.
IC

Em que: IC a inclinao da curva de calibrao, o desvio padro e pode ser

obtido de 3 formas:
I - a partir do desvio padro do intercepto com o eixo Y de, no mnimo, 3 curvas
de calibrao construdas contendo concentraes do analito prximas ao suposto
limite de deteco;

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II - a partir do desvio padro residual da linha de regresso;

III - a partir da estimativa de rudo proveniente da anlise de um apropriado
nmero de amostras do branco.

Frmula 3. Clculo do limite de quantificao.

LQ = 10.
IC

Em que: IC a inclinao da curva de calibrao, o desvio padro e pode ser

obtido de 3 formas:
I - a partir do desvio padro do intercepto com o eixo Y de, no mnimo, 3 curvas
de calibrao construdas contendo concentraes do analito prximas ao suposto
limite de deteco;
II - a partir do desvio padro residual da linha de regresso;
III - a partir da estimativa de rudo proveniente da anlise de um apropriado
nmero de amostras do branco.

ANEXO III
Tabela 1. Condies para a avaliao da robustez do mtodo.

Estabilidade das solues analticas

Preparo das Amostras Tempo de extrao

Compatibilidade de filtros

Variao do pH da soluo
Espectrofotometria Diferentes lotes ou fabricantes de
solventes

Variao do pH da fase mvel

Variao na composio da fase mvel

Cromatografia Lquida
Diferentes lotes ou fabricantes de
colunas

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Temperatura

Fluxo da fase mvel

Diferentes lotes ou fabricantes de

colunas
Cromatografia Gasosa
Temperatura

Velocidade do gs de arraste

As variaes a serem testadas devero

Outras tcnicas analticas ser avaliadas criticamente e seus
resultados devero ser apresentados

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