Practica 3

1. Investigar componentes y funciones de agar papa dextrosa

USO: Para cultivo y recuento de hongos y levaduras en productos lcteos, bebidas

embotelladas y alimentos. Como medio preparado. (Catlogo 1059-P) para la cuenta de
hongos y levaduras en lquidos.

PRINCIPIO: La infusin de papa como fuente de almidones y la dextrosa son la base para el
crecimiento de hongos y levaduras. El bajo pH (3.5) evita el crecimiento de las bacterias.

Cuando se va a usar para el recuento de hongos y levaduras, agregar al medio de cultivo una
vez esterilizado y enfriado aproximadamente a 45C, 14 ml de una solucin estril de cido
tartrico al 10% para obtener un pH aproximado de 3.5.

Sembrar el medio de cultivo por estra en la superficie o adicionar la muestra para la tcnica de
vaciado en placa. Incubar hasta 7 das a temperatura ambiente.

FORMULA EN GRAMOS POR LITRO DE AGUA DESTILADA

Agar 15.0

Dextrosa 20.0

Infusin de papa 4.0

pH 5.6 0.2

2. Cules son las variantes del mtodo de micro cultivo?

El microcultivo es el procedimiento idneo para la identificacin de estructuras fngicas.

A. El microcultivo es el procedimiento idneo para la identificacin de estructuras

fngicas, pues te permite visualizar al microscopio el micelio en su conjunto no solo
una parte del mismo, como ocurre con el mtodo de disociacin.
B. Cortar de la placa con medio de Sabouraud con hoja de bistur, cuadraditos de agar de
0,5 centmetros. Con la esptula o la hoja de bistur colocar un cuadradito en el
portaobjetos que est en la placa con el equipo de microcultivo. Sembrar el hongo con
la esptula en las cuatro esquinas y en el centro del bloque de agar. Colocar el
cubreobjetos sobre el bloque de agar Sabouraud.
C. Verter solucin de glicerina por el borde de la placa de Petri, mojando el papel de
filtro, para proporcionar una adecuada humedad evitando que se deseque el medio de
cultivo debido a lo prolongado de la incubacin.
D. Tras varios das de observacin, cuando el crecimiento sobre el bloque sea evidente, se
recoge el cubreobjetos con una pinza estril y se coloca sobre un portaobjetos donde
previamente se ha colocado una gota de azul de lactofenol. Si se desea, se sella la
preparacin para su mejor conservacin y se observa al microscopio como se detalla
 en el mtodo de disociacin.

3. elaborar dibujos de los hongos que se obtuvieron en el microcultivo, describir e

identificar cada una de las partes del hongo, anotando gnero y especie?

BIBLIOGRAFIA

Standard Methods for the Examination of Dairy Products.

http://www.probiotek.com/wp-content/uploads/2014/01/1059-E_AGAR-DEXTROSA-
Y-PAPA.pdf DIBICO S.A. DE C.V. MEXICO, D.F.
UNIDAD 2 - ESTUDIO MICROSCPICO.Cultivo sobre cuadrado de Agar: Microcultivo
http://www.um.es/micologia/unidad_2/u2_etapa_2/index.html. Universidad de
Murcia

Conclusin

La tcnica de microcultivo es un mtodo lento pero eficaz para determinar con exactitud
gnero y especie de diferentes tipos de hongos aunque en esta prctica no se pudo determinar
la especie, por lo menos fueron se determin que los diferentes hongos encontrados a pesar
del mismo gnero presentaban diferencias notables entre ellos, lamentablemente no se
encontr con exactitud la especie de la que se hablaba por lo que se decidi omitirlo. Aun as
este mtodo representa varias ventajas en el estudio de los hongos filamentosos en especial
que se mantengan intactas sus estructuras.

Practica 4

1. -
2. -
3. Investigar los componentes y funciones del KOH 15% gliceraldehido.

Es el medio de montaje de las muestras clnicas ms universalmente aceptado. Permite

clarificar todo tipo de muestras clnicas con abundantes clulas y restos celulares y
observar la morfologa y la pigmentacin fngica.

-El KOH disuelve ms rpidamente los elementos celulares que los hongos (protegidos por
la pared celular). El efecto clarificador del KOH puede demorar desde 10 min hasta horas,
 en el caso de las muestras de uas, y puede reducirse calentando ligeramente la
preparacin.

-Glicerol: La adicin del glicerol previene la degradacin de los elementos fngicos, evita la
formacin de cristales y evita la deshidratacin de la preparacin entre porta y cubre,
convirtindola en semipermanente. La solucin de KOH glicerol es la ms comnmente
utilizada.

Reactivos

Solucin de KOH al 15 % (aadir 15g de KOH a 40 ml de agua destilada y disolver

completamente, luego aadir 20 ml de glicerol y, por ltimo, aadir agua destilada hasta
completar 100 ml). Mezclar por agitacin. La solucin no debe almacenarse en un
recipiente de vidrio, pues se pueden formar precipitados.

4. Qu es el mosaico fngico y cuando se presenta?

5. Investigar los componentes y funciones del agar Micosel, tambin llamado dermasel o
agar selectivo para hongos patgenos.
6. Describir los aspectos ms importantes para el diagnstico de pitiriasis versicolor.

Conclusin:

Bibliografa: