Universidad nacional agraria de la selva

Facultad de ingeniera en industrias alimentarias

Departamento acadmico de ciencias, tecnologa e ingeniera de
alimentos

CURSO: Tecnologa de Productos Amaznicos

PROFESOR: Dr. Pelez Snchez, Pedro
ALUMNO: Mendoza Asencio, Felipe
Practica 02
Determinacin de capacidad antioxidante por mtodo
DPPH de ua de gato (Uncaria tomentosa)

I. INTRODUCCIN

Uncaria tomentosa, llamada popularmente ua de gato, es una

planta trepadora de la familia Rubiceas originaria de Per. Crece en tierras

vrgenes de la selva peruana, y tambin en tierras bien reposadas por un tiempo

prolongado. La planta es usada por los habitantes indgenas como medicina.

Un mtodo sencillo, fcil y rpido de llevar a cabo, desarrollado por

BRAND WILLIAMS.et.al.(1995) para determinar actividad antioxidante de

aliemntos y compuesto secundarios, utiliza al radical estable 2,2,-difenil-1-picril-

hidrzilo (DPPH),

Objetivo:

Presente estudio es determinar el contenido de antioxidante de ua

de gato.
 II. MATERIALES Y MTODOS

.2.1. Materiales

- Espectrofotmetro UV/VIS.

- Cubetas de poliestireno 1 ml

- Micro pipetas ( 1000ml. 200ml,100ml)

- Pipetas , tips

2.2. Reactivos

- 2,2,difenil,1,picrilhidrazil (DPPH)

- 70% etanol

- cido ascrbico

2.3. Procedimiento

Preparar las siguientes soluciones stock en agua destilada

desionizada (ver lista de reactivos y pesos moleculares

Soluciones:

1Mm DPPH en 95% etanol 10ml

1Mm cido ascrbico 10ml

Luego de preparar la solucin de DPPH por 2-3 minutos hasta una

completa solubilizacion del compuesto. Almacenar a 4c protegido en la luz,

una vez preparado la solucin stock se recomienda hacer uso de ello por una

semana, luego descartar.

 A partir de la solucin stock prepara 20ml de 100uM DPPH en 95%

etanol, como concentracin final para medir la capacidad de secuestro de las

muestras experimntameles. Las contracciones finales de DPPH pueden variar

de acuerdo al investigador y a las condiciones del experimento se sugiere

utilizar concentraciones en ( 50-100Um), al mismo tiempo, preparar

concentraciones crecientes de cido ascrbico a partir de la solucin stock la

contraccin final es 40ml de la concentracin inicial .agrregar 25ml de muestra

de 975ml de la solucin de DPPH en una cubeta de poliestireno ( 1cmx 1cmx

4.5cm).

Nota:

- En esta etapa del experimento es crtico mantener un adecuado uso de

micropipetas, especialmente con compuestos que reaccionan

rpidamente con DPPH, como cido ascrbico.

- la inhibicin de los radicales libres DPPH es determinado por la

decoloracin de la solucin de violeta a amarillo, en cual es medido por

espectrofotometra a 515nm.A medida que hay un mayor secuestro de

los radicales libres por un antioxidante, la absorbancia disminuye.

- la disminucin de la absorbancia entre la solucin de DPPH y el

compuesto experimentales es directamente proporcional a la

concentracin del antioxidante y el tiempo de reaccin.

 III. RESULTADOS

3.1. Clculos

Para calcular la capacidad de secuestro de radicales DPPH por

una compuesto desconocido, utilizar la siguiente expresiones.

%,DPPH inhibicin = [(Acontrol-Amuestra(t))/Acontrol]x100

Donde:

Acontrol: Absorbancia del control

Amuestra: Absorbancia del control

% INH=[Absc-Absm/Absc]x100

% INH= [1.138-0.206/1.138]x100

%INH= 81.89

IV. CONCLUSIN

- Se determinar el contenido de antioxidante de ua de gato. Conociendo

los parmetro de clculos para obtener los resultados % de inhibicin de

los antioxidantes.

- se obtuvo por % de inhibicin 81.89 con estoy resultado es bueno

consumer ua de gato por contener alto antioxidante para combatir con

radicales libre que es causado cncer.

 V. BIBLIOGRAFA

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