PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

I.- BACILOS GRAM NEGATIVOS FERMENTADORES. GRUPO

ENTEROBACTERIAS

1.1. En el agar mac conckey

Realizamos la siembra con las siguientes cepas: salmonella, klibsiella,
Pseudomona y E.coli. donde realizamos los siguientes :

1. En el primer dia

1. Siembra la cepa proporcionada por el

mtodo de dispersin agotamiento la
placa con agar Mc Conkey

2. Luego se incuba a 37c por 24

horas

1
 2. En el segundo da

3. luego de la incubacin se
puede observar la degradacin
de la lactosa a cidos se
manifiesta por el viraje de color
a rojo del indicador de pH rojo
neutro; siendo estas colonias,
lactosa positivas.

- Las colonias que son lactosa

negativas son incoloras.

rosado tenue.

Pseudomona:

Klibsiella:
Salmonella:

Fundamento
Es un medio de cultivo selectivo y diferencial.La selectividad, est dada
por la sales biliares y el verde brillante, que inhiben el desarrollo de
bacterias Gram positivas, de la mayora de los coliformes y el desarrollo
invasor del Proteus spp. Es diferencial debido a la fermentacin de la
lactosa, y a la formacin de cido sulfhdrico a partir del tiosulfato de
sodio.Los pocos microorganismos fermentadores de lactosa capaces de
desarrollar, acidifican el medio haciendo virar al rojo el indicador de pH,
obtenindose colonias rosadas o rojas sobre un fondo rojizo.

Salmonella, Shigella y otros microorganismos no fermentadores de

lactosa, crecen bien en el medio de cultivo, y producen colonias E.coli:
transparentes.

La produccin de cido sulfhdrico se evidencia como

colonias con centro negro debido a la formacin de
sulfuro de hierro.

2
AGAR MCCONKEY

Fundamento: Es un medio selectivo diferencial que permite determinar si las

bacterias Gramnegativas fermenta o no la lactosa. Las sales biliares y el cristal
violeta inhiben el crecimiento de los Grampositivos. Las colonias de bacterias
que fermentan la lactosa son rosadas y pueden estar rodeadas de una zona de
precipitados de sales biliares, el cual es debido a una cada en el pH por la
fermentacin de la lactosa. Las colonias que no fermentan la lactosa
permanecen incoloras.

Lectura e interpretacin: Las bacterias fermentadoras de lactosas se observan

de color rosado con o sin zona de precipitado alrededor, mientras que las no
fermentadoras de lactosa se observan incoloras o transparentes

CONCLUSIONES

Se logr aislar la cepa de pseudomonas tanto en Agar nutritivo como Agar cetrimide.
En Agar nutritivo, solo se observa la forma de las colonias caractersticas, mientras
queen el Agar cetrimide se observa la coloracin.
En Agar cetrimide se logr identificar las pseudomonas aeruginosas, tornando un
colorazul verdoso, y Pseudomonas fluoescens,debido a la coloracin verde
fluorescente.

1.2. Inoculacin en agar EMB (Eosina Azul de Metileno)

Realizamos la siembra con las siguientes cepas: salmonella, klibsiella,

Pseudomona y E.coli. donde realizamos los siguientes :

1. En el primer dia

1. Siembra la cepa proporcionada

por el mtodo de dispersin
agotamiento la placa con agar
EMB

3
 2. Luego se incuba a 37c por 24
horas

2. En el segundo da
3. despus de la incubacin se
puede observar colonias
negruzcas con brillo metlico
verdoso, cuando metabolizan la
lactosa o sacarosa y
translcidas o de color mbar si
son lactosa negativas.

4
 fundamento

Es una agar selectivo para el aislamiento de Enterobacterias

patgenas. Los colorantes de anilina (Eosina y azul de
metileno) inhiben las bacterias Gram positivas y las Gram
negativas exigentes nutricionalmente. Tambin se combinan
precipitndose a pH acido actuando como indicadores de
produccin de cidos de los carbohidratos presentes en el
medio (Lactosa y Sacarosa)
E. coli
Las colonias fermentadoras son de color rosado.
Escherichiae coli fermenta los azucares y forma colonias
verdes con brillo metlico. Las colonias no fermentadoras
son incoloras,

Salmonella

Pseudomona

Klibsiella

1.3. Inoculacin en agar SS (Salmonella Shigella)

Realizamos la siembra con las siguientes cepas: salmonella, klibsiella,

Pseudomona y E.coli. donde realizamos los siguientes :

1. En el primer dia

1. Siembra la cepa proporcionada por el

mtodo de dispersin agotamiento la
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placa con agar EMB
 2. Luego se incuba a 37c por 24
horas

2. En el segundo da

3. luego se la incubacin se
puede detectar colonias negras
de sulfuro de hidrogeno cuando
6
es positivo
Pseudomona

E. coli
Salmonella

fundamento
El agar SS es un medio altamente selectivo que inhibe el
desarrollo de la mayoria de coniformes y permite el desarrollo
de las especies de Salmonella y Shigella. La alta concentracin
de sales biliares y citrato se sodio inhibe a todas la bacterias
Gram positivas y a algunas Gram negativas. La Lactosa es el
nico hidrato de carbono y el Rojo neutro detecta la produccin
de acido. El tiosulfato de sodio es una fuente se azufre y las
bacterias que producen H2S se detectan por la presencia de un
precipitado negro por el citrato ferrico.

las cepas de Shigella y la mayoria de Salmonella presentan

colonias incoloras. Colonias trasparentes con centro negro:
Proteus y algunas Salmonellas. Las bacterias fermentadoras de
Lactosa presentan colonias rojas a rosadas.

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 Klibsiella

Salmonella, no fermenta la lactosa, sus colonias aparecen incoloras, transparentes,

con o sin centro negro debido a la produccin de sulfuro de hidrgeno. Shigella,
aparece con colonias incoloras. Los coliformes que hayan conseguido crecer,
formarn colonias rojas o rosadas.

El usuario final es el nico responsable de la destruccin de los organismos que se

hayan desarrollado, segn la legislacin medioambiental vigente.

Si desea ms informacin sobre nuestros SALMONELLA-SHIGELLA AGAR (SS

AGAR) rellene nuestro formulario de contacto http://www.medioscultivo.com/contacto.