UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS ESPE

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS DE LA VIDA Y DE LA

AGRICULTURA

INGENIERIA EN BIOTECNOLOGA

Integrantes: Lema Ana Prctica N: 3

Fecha: 18/ 05/ 2017
Ledesma Melanie
NRC: 2461
Vanegas Alejandro
Yugcha Michelle

Materia: Fitoqumica

1. TEMA:

Extraccin, separacin e identificacin de carotenoides de una matriz vegetal.

2. OBJETIVOS

2.1. Objetivo General:

Extraer, separar e identificar los carotenoides presentes en pimiento rojo

(Capsicum annuum).

2.2. Objetivos Especficos:

Preparar la muestra secndola, sin la presencia de luz solar.

Extraer carotenoides usando diclorometano como disolvente apolar.
Realizar una cromatografa de capa fina teniendo como solvente Hexano: Acetato
de etilo (4:1), para separar los componentes del extracto de carotenoides e
identificarlos mediante una comparacin bibliogrfica.
Determinar el factor de retardo y la coloracin para cada uno de los componentes
presentes en el gel de slica.

3. RESULTADOS

Reconocimiento de carotenoides por cromatografa de capa fina de pimiento rojo

(Capsicum annuum)
Frmula para el clculo del Factor de retardo (Rf):

=

 Donde:
(a): distancia recorrida por la mancha de un compuesto desde la lnea de partida.
(b): distancia recorrida por el frente del solvente desde la lnea de partida.
A continuacin, se muestran los datos obtenidos:
Solvente orgnico: Hexano: Acetato de etilo (4:1)
Distancia (b): 6.7 cm

Distancia recorrida (cm)

(a)
1 0.2
2 0.6
3 1.1
4 1.7
5 2.5
6 3.4
7 5.0
8 6.0
9 6.5

Color Factor de retardo (Rf) Resultado

Componente Terico Experimental Terico Experimental

1 - - Naranja - 0.03

2 - - Marfil - 0.08

3 - - Naranja tenue - 0.16

4 Capsorubeno Rojo-caf Rojo tenue 0,21-0,30 0.25

Rojo
5 Capsanteno Rojo plido 0.37 0.37
intenso
6 - - Marfil - 0.51

7 Zeaxanteno Amarillo Rosado 0,65-0,75 0.75

8 Criptoxanteno Amarillo Rojo 0,85 0.88

Amarillo -
9 -caroteno Amarillo 0,95-0,98 0.96
naranja

Elaborado por: Ledesma M., Lema A., Vanegas A. Yugcha M., (2017).

Figura 1: Cromatografa en capa fina

de pimiento rojo.
4. DISCUSIN

Los carotenoides son insolubles en agua y solubles en solventes orgnicos. Para la

extraccin de carotenoides se puede utilizar como fase estacionaria una placa de slice y
como fase mvil no polar diversos disolventes orgnicos, por ejemplo acetona, n-hexano,
pentano, y mezclas de estos disolventes, siendo la empleada en la prctica la mezcla de
hexano con acetato de etilo (4:1) (Zeb.A&Murkovic.M, 2010).

De los resultados obtenidos de la muestra de pimiento rojo (Capsicum annuum), la zona

de coloracin naranja a 0,2 cm y un Rf de 0,03, la zona ubicada a 0,55 cm y un Rf de 0,08
de color marfil y la zona de color naranja tenue a 1,1 cm y un Rf de 0,16 no pudieron ser
especificadas individualmente pero segn Mnguez.M.I.et.al, (1996) las zonas entre Rf
0,25 y 0, pueden estar formadas por numerosas bandas que individualmente tienen escasa
entidad, compuesta por el resto de xantofilas monoesterificadas y desesterificadas, que
por quedar en la zona inferior del cromatograma se le denomina base (B).

La zona ubicada a 1,7 cm, con un Rf de 0,25 cercano al intervalo 0,21-0,30 y con una
tonalidad rojo tenue corresponde al Capsorubeno difiriendo levemente en la tonalidad
rojo plido que menciona (Mnguez.M.I.et.al, 1996).

Adems se puede inferir en comparacin con Mnguez.M.I.et.al, (1996) que la zona de

color rojo tenue a 2,25 cm y un Rf de 0,37 corresponde al Capsanteno, la zona de color
rosado a 5 cm y con un Rf de 0,75 cercano al intervalo de 0,65-0,75 con un color amarillo
corresponde a Zeaxanteno, la zona de color rojo a 5,95 cm y con un Rf de 0,88 cercano a
0,85 representa al Criptoxanteno difiriendo del color amarillo terico que mencionan
Perucka.I&Oleszek.W, (2000), la zona de color amarillo a 6,45 cm y con un Rf de 0,96
cercano al intervalo 0,95-0,98 corresponde a -caroteno que presenta una coloracin
amarillo-naranja.

5. CONCLUSIONES

Se prepar la muestra secndola, sin la presencia de luz solar por 5 das.

Se extrajo los carotenoides del pimiento rojo usando el diclorometano como disolvente
apolar, al entrar en contacto con la muestra se extrajeron al instante.
Se realiz una cromatografa de capa fina teniendo como solvente Hexano: Acetato de
etilo (4:1), para separar los componentes del extracto de carotenoides, encontrndose
capsorubeno, capsanteno, zeaxanteno, criptoxanteno y -caroteno.
Se determin el factor de retardo (Rf) de cada zona coloreada en un rango de 0.03 a
0.96 y la coloracin para cada uno de los componentes presentes en el gel de slica.
6. BIBLIOGRAFA

Mnguez.M.I.et.al. (1996). Carotenoides en el pimentn. Factores responsables de su

degradacin. Journal of Agricultural and Food Chemistry , 1617.

Perucka.I&Oleszek.W. (2000). Extraction and determination of capsaicinoids in fruit

of hot pepper Capsicum annuum L. by spectrophotometry and high-performance liquid
chromatography. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 289.

Zeb.A&Murkovic.M. (April de 2010). Thin-Layer Chromatographic Analysis of

Carotenoids in Plant and Animal Samples. Obtenido de
https://www.researchgate.net/publication/270534079_Thin-
Layer_Chromatographic_Analysis_of_Carotenoids_in_Plant_and_Animal_Samples