PRCTICA 6

CULTIVO PUROS EN TUBOS

I. Introduccin.

Un cultivo de microorganismos consiste en proporcionarles las condiciones fsicas, qumicas

y nutritivas adecuadas para que puedan multiplicarse de forma controlada. En general,
podemos distinguir cultivos lquidos y slidos en funcin de las caractersticas del medio y
cultivos discontinuos y continuos en funcin de la disponibilidad de nutrientes en el medio.
(Auqui Jurado, 2014)

El agar, una sustancia similar a la gelatina que se extrae de las algas rojas, es usado
comnmente para cultivar microorganismos. Se le agregan varios nutrientes para favorecer
el crecimiento bacteriano y se coloca tanto en placas planas como en tubos de ensayo.
Cuando se coloca en un tubo de ensayo, el agar est en forma lquida. Estos luego son
colocados en ngulo para que se enfren y solidifiquen, creando una superficie inclinada, o
un agar inclinado (agar slant, en ingls). (Cardenas Del Rio, 2013).

II. Objetivo.
Aprender a sembrar en tubos con Agar inclinado de adentro hacia fuera.
Conocer los principales mtodos de cultivo utilizados para los diferentes tipos de
microorganismos.

I. Marco Terico.
Segn su estado fsico:

-Lquidos

Usualmente se denominan caldos ya que contienen los nutrientes disueltos en agua. Permiten
obtener suspensiones con un elevado nmero de microorganismos. Ejemplo. Caldo nutritivo.

Segn sus propsitos de uso:

-Medios de enriquecimiento

Se llama enriquecimiento a cualquier cultivo en medio lquido que resulte en un incremento en

el nmero de un tipo dado de microorganismo en relacin con el nmero de otros tipos de
microorganismos que puedan estar en el inculo. Un medio de enriquecimiento puede
 contener sustancias que favorezcan el crecimiento del microorganismo que nos interesa o
que inhiban el crecimiento de los otros tipos de microorganismos presentes. La selectividad
de un cultivo de enriquecimiento no est determinada nicamente por la composicin
qumica del medio usado, sino que en un medio dado puede ser variada significativamente
modificando otros factores tales como: temperatura, pH, fuerza inica, iluminacin,
aireacin, etc. Ej. Caldo tetrationato utilizado para el enriquecimiento de las especies del
gnero Salmonella provenientes de muestras de heces, orina, agua o alimentos.

Medios selectivos
Son bsicamente iguales a los de enriquecimiento, se diferencian por ser medios slidos y estn
diseados para el aislamiento de microorganismos especficos. Ej. Agar desoxicolato citrato
utilizado para el aislamiento de patgenos entricos.

-Medios diferenciales

No contienen sustancias inhibidoras, es decir, permiten el crecimiento de muchos tipos de

microorganismos, pero s contienen indicadores de productos derivados de la actividad
metablica de los microorganismos sobre algunos de los componentes del medio. Se utilizan
para la identificacin de los microorganismos. Ej.: Agar base rojo fenol utilizado para
detectar -fermentacin de carbohidratos.

-Medios selectivos diferenciales

A veces se combinan en un mismo medio las caractersticas de ser selectivo y diferencial. Por
ejemplo, el agar Mac Conkey, este medio contiene sales biliares y cristal violeta, que inhiben
el crecimiento de las bacterias Gram positivas. Pero como tambin contiene lactosa y un
indicador de pH permite distinguir entre las bacterias fermentadoras de lactosa y las que no
lo son. (Auqui Jurado, 2014)

I. Metodologa.
4.1. Materiales y reactivos.

4 tubos de ensayo.
Matraz de fondo plano.
Balanza analtica.
Tapn.
Esptula.
 Probeta.
MacKonkey.
Muller-Hinton.
Agua destilada.

4.1. Mtodos.
Primeramente pesamos 0.7 de Muller-Hinton.
Luego 20 ml de agua.
Una vez rotulado ponemos a la autoclave para encubar durante 15 minutos.
Al sacar ponemos a calentar en bao Mara para que diluya.
Luego echamos la solucin de 5ml a cada tubo, ponemos 2 tubos rectos y dos tubos
inclinados.
Esperamos un momento hasta que se solidifique.
Luego metemos a la incubadora.
Seguidamente cogemos coliformes fecales un poco con un asa bacteriolgica. Al concluir la
siembra se flamea la boca y se taponea nuevamente el tubo procediendo a esterilizar el asa
en las llama del mechero.

Una vez hecho eso metemos a la incubadora.

Y tambin asemos con un agar muerto que es de color caf y un agar Mac-konkey color
rojo.
 I. Resultados.

II. Conclusin.

Al realizar una siembra de microorganismos, debemos tener en cuenta que tcnica se va a

utilizar, debido a que estas varan respecto a las caractersticas del microorganismo a tratar.
Tambin debe tenerse en cuenta la forma, espacio y el objetivo al que se quiere llegar, pues
dependiendo de esto la tcnica de siembra es diferente. Un microorganismo se puede
sembrar en un medio lquido o en la superficie de un medio slido de agar .Un cultivo de
bacterias o de hongos es con el fin de aislarlas en el medio para lograr un mejor estudio de
ellos.
III.Bibliografa.

Auqui Jurado, V. (2014). CULTIVO DE MICROORGANISMOS. peru .

Cardenas Del Rio, L. (2013). MEDIOS DE CULTIVO Y SIEMBRAS.