Co

ng
re
so
Na
cio
CITOLOGA naDE SANGRE PERIFRICA Y
AUTOMATIZACIN l d EN EL DIAGNSTICO DE
el
LAS ENFERMEDADES La HEMATOLGICAS
MALIGNAS bo
ra
tor
io
Cl
ni
8 de Octubre del 2015
Anna Merino, Cristian Morales-Indiano y Santiago Alfrez
c o2
01
5
Co OBJETIVOS DEL WORKSHOP
ng
re
so
1.Cmo la citologa de sangre perifrica nos ayuda en el

Na
diagnstico?
cio
n al
2. Cmo los modernos analizadores nos ayudan a clasificar las
de
lL
poblaciones celulares de sangre perifrica de manera precisa?
ab
or ofrecen para la deteccin
3. Qu tipo de alarmas cualitativas nosato
de clulas anormales presentes en sangrerperifrica?
io
Cl
ni
co de
4. Es posible detectar las neoplasias linfoides leucemizadas
20 y
forma automtica a travs de las caractersticas morfolgicas
otros parmetros cuantitativos de clulas linfoides de SP?
1 5
Co
ng
re
so
Na
cio
n
al DE SANGRE PERIFRICA Y
CITOLOGA
d
AUTOMATIZACIN el EN EL DIAGNSTICO DE
La HEMATOLGICAS
LAS ENFERMEDADES bo
ra
MALIGNAS
tor
io
Cl
nico
8 de Octubre del 2015
Anna Merino 20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
 CDIAGNSTICO
on INTEGRADO DE LAS ENFERMEDADES HEMATOLGICAS

gr
es
oN Fenotipo
MUESTRA ac
Morfologa Citogentica DIAGNSTICO
ion Estudios moleculares
al
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
ni
co
INFORMACIN 20
CLNICA 15
PRONSTICO
TRATAMIENTO
Co
ng
re Clula

so
Na
tamao cio
relacin N/C
contorno
nuclear
cromatina citoplasma

n al
de
lL madura
grande
moderado
elevada
moderada ab
redondeado
irregular
condensada
laxa
bajo baja
or
bilobulado inmadura

ato nucleolo si/no

rio
Cl
escaso
moderado
n ico
grado de
basofilia
abundante

20
15 vacuolas
granulacin
inclusiones
Co AUTOMATIZACIN:
ng
re
so N para la realizacin de la frmula
Criterios
ac manual
ionnumricos
1.-Por valores
al
d el
2.-Por alarmas del autoanalizador
La
b
3.-Cuando los valores seanomuy
r a
anteriores to
diferentes a los

rio
4.-Cuando haya sospecha de parsitos Cl
ni
co
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
Signosnade alarma en el
ld
hemograma:
el
La
Deteccinbode una
ra
tor a
leucocitosis junto
io
linfocitosis Cl
ni
co
201
5
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng NEOPLASIAS LINFOIDES CON EXPRESIN EN
re SANGRE PERIFRICA
so
Na
cio Bajo grado:
naLeucemia Linftica Crnica
ld
Leucemia Prolinfoctica B
el
Tricoleucemia/T. variante
La de la zona marginal
Linfoma esplnico
bo folicular
Linfoma ra
tor
2. Alto grado:io
Linfoma de clulas del C ln
manto
ico
3. Muy alto grado: 20
Linfoma/leucemia de Burkitt 15
Co Leucemia linftica crnica
ng
re
so
Na
Expansin c ion de linfocitos B de aspecto maduro
clonal
al (antgenos B, CD23+, CD5+, Igs +)
Fenotipo caracterstico
d
Origen: zona marginalede los folculos linfoides secundarios
lL
ab G ciclo celular)
Bajo ndice proliferativo (fase
or
0

ato (apoptosis)
Defecto en la muerte celular programada
Curso clnico indolente rio
Supervivencia prolongada Cl
ni
co
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co PROLINFOCITO
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng TRICOLEUCEMIA
re
oNs
ac
ion
al
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co Tricoleucemia variante
ng
re
so
Na
cio
na
Linfocitosis
ld
Negatividad efosfatasa
lL cida
ab
tartrato-R or
ato
Ausencia de expresin rCD11c,
io
Cl
CD25, CD103 ni
co2
Mala respuesta al tratamiento 01
5
 Linfoma esplnico de la zona marginal
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co Linfoma folicular
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng
re
so
Na
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de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
a B DE ALTO GRADO
NEOPLASIAS LINFOIDES
bo
rato
rio
Cl
nico
20
15
Co Linfoma de clulas del manto
ng
re
so
Proliferacin de linfocitos B maduros

N ac B de la zona del manto

Origen en clulas
ion
al
Formas de LCM:
de
l
Histologa: ZONA DEL MANTO
La
/ NODULAR / DIFUSO
Citologa: TIPICO O POLIMRFICO / BLASTOIDE
bo
ra
tor
io
Cl
ni
co
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab B DE MUY ALTO GRADO:
NEOPLASIAS LINFOIDES
or de Burkitt
Leucemia/Linfoma
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
 Co Neoplasias Linfoides B:
ng
re Diagnstico diferencial
so
CD5 N
ac
IgS CD20 CD22 CD23 CD79b CD10 CD11c FMC7 CD25 CD103

ion-/+ ++ -/+ - -/+ -/+ - -

LLC + ++ +
al
PLL ++ -/+ + ++ d-/+e + - -/+ ++ - -
l
- L ++
HCL ++ - ++ ++
ab - ++ ++ ++ ++
++ or -
MCL ++ ++ ++ ++ -
ato - - - -

++ r -
LF ++ - ++ ++ - ++
io - - -
-/+ C -/+
LLP ++ - ++ ++ - ++ -
ln -/+ -

-/+ic -/+
SLVL ++ -/+ ++ ++ - ++ - -/+
o 2 -/+
01
5
Co
ng
CLASIFICACIN DE LAS NEOPLASIAS LINFOIDES T
r
es SEGN LA OMS
oN
a1.c Expresividad leucmica:
ioLeucemia
na prolinfoctica T
ld
Leucemia/linfoma T del adulto
el grandes granulares T
Leucemia de linfocitos
Lade clulas NK
Leucemia/linfoma
Leucemia/linfoma b
or
NK blstico
ato
rio
2. Presentacin ganglionar

3. Presentacin extraganglionar:Cl
ni
Sndrome de Szary
co2
01
5
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
nDIAGNSTICO
gr DIFERENCIAL ENTRE LPL-B Y LPL-T
es
oN
ac diferencias morfolgicas principales
Las ientre
on los prolinfocitos B y T son:
al
de citoplasmtica es superior
l
1. El grado de basofilia
en losLprolinfocitos T.
ab
or ms irregular
ato
2. El perfil nuclear es
rio
en los prolinfocitos T.

Cl
ni
co
20
15
Co CLULA DE SZARY
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
CoLeucemia linfocitos grandes granulares T
ng
re
Curso soclnico indolente:
Na
cio
- 60% asintomticos
na
- Esplenomegalia
ld
el
Citopenias autoinmunes (neutropenia,
anemia) L ab
or
-Contexto autoinmune at
or
Linfocitosis moderada (>2io x 109/L)
-Fenotipo: CD3+, TCR CD8+ ln
C
- ico
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng CLULA PLASMTICA
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co Linfocitosis B Policlonal
ng
re Persistente (LBPP)
s oN
ac
ion
Mayor incidencia en mujeres fumadoras
al
de
l L B policlonal mantenida
Linfocitosis absoluta
ab
asociada a un aumento ode ra IgM en suero
tor
y al haplotipo HLADR7 io
Cl
ni
co
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
Signosnade alarma en el
ld
hemograma:
el
La
b
Deteccin deoruna
ato
leucocitosis junto rai
oC
plaquetopenia y anemia l
nic
o2
01
5
Co
ng LAM: definicin
re
so
Na
Expansin c
ion
clonal por >20% de clulas blsticas mieloides
al mdula sea u otros tejidos.
en sangre perifrica,
de
lL
ab normal de maduracin.
Mutacin somtica en precursor mieloide con prdida de

or
la capacidad de seguir su proceso
ato
rio y sustituyen a la
Las clulas blsticas mieloides proliferan
Cl disminucin de
ni
celularidad normal de medula sea, con una

co
las 3 series hematopoyticas en sangre perifrica:
ANEMIA + NEUTROPENIA + PLAQUETOPENIA 20
15
 I. LMA con anomalas genticas recurrentes
Co LMA con t(8;21)(q22;q22); (AML1/ETO)
ng
LMA con eosinfilos medulares anmalos [inv(16)(p13q22)/t(16;16)(p13;q11);
re (CBF/MYH11)]
so
Leucemia aguda promieloctica [LAM amb t(15;17)(q22;q11-12); (PML/RAR-)]

Na LMA con anomalas 11q23 (MLL)

II. LMA con displasia multilnea
cio
Con sndrome mielodisplsico previo
n
Sin sndrome mielodisplsico previo
al
III. LMA y sndromes mielodisplsicos relacionados con agentes teraputicos
de
En relacin a agentes alquilantes
lL
En relacin a inhibidores de la topoisomerasa II
ab
Otros
or
IV. LMA no categorizada previamente
ato
LMA mnimamente diferenciada (M0)

rio
LMA sin maduracin (M1)
LMA con maduracin (M2)
LMA mielomonoctica (M4) Cl
LA monoblstica (M5a) o monoctica (M5b) n ico
Leucemia eritroide aguda (M6)
Leucemia megacarioctica aguda (M7)
20
Leucemia basoflica aguda
Panmielosis aguda con mielofibrosis 2009
15
OMS, 2001-
Sarcoma mieloide (sarcoma granuloctico)
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
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de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng
re
LAM3
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co Leucemia Aguda Promieloctica
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
nLAM
gr y mutacin gen nucleofosmina
es
oN (NFM)
ac
ion
al
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
ni
co
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
dePRECURSORES LINFOIDES
LEUCEMIAS DE
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15
 Co
Ag
ng expresados por los blastos
re
so
N
de las LAL
ac
ion monoclonales positivos
a y/o CD19
Tipo de LAL Anticuerpos
LAL-B pro B CD79a y/o lCD22
de
CD79a y/o CD22l y/o CD19, CD10 (CALLA)
LAL-B comn
La
LAL-B pre B bo cadena citoplasmtica
CD79a y/o CD22 y/o CD19,
raInmunoglobulina de superficie
LAL-B madura CD79a y/o CD22 y/o CD19,
tor
LAL-T pro-T CD7 y CD3 citoplasmtico io
CD7 y CD3 citoplasmtico y CD2 y/o C
LAL pre-T
ln
CD5 y/o CD8
LAL-T tmico-cortical CD1a ico
LAL-T madura CD3 de superficie en ausencia de CD1a 20
15
Co
ng CONCLUSIN
re
so
Na
cio
na modernos han experimentado
Aunque los analizadores
l d muy importantes, el recuento
avances tecnolgicos el
La imprescindible para el
diferencial manual sigue siendo
bo
diagnstico de enfermedadesr hematolgicas y no
ato
hematolgicas ri
oC
ln
ico
20
15
Co
ng
re
so
Na
cio
nal
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
nico
20
15