Verde Brillante Agar.

Medio de enriquecimiento altamente selectivo para el aislamiento de Salmonella spp., excepto S. typhi y S. paratyphi, a
partir de muestras clnicas, alimentos, y otros materiales de importancia sanitaria. No se recomienda para el aislamiento de
Shigella spp.
Es de un valor excepcional cuando se investiga un gran nmero de muestras de heces o alimentos, por su alta capacidad de
diferenciacin de las colonias sospechosas.

Fundamento
En el medio de cultivo, la pluripeptona y el extracto de levadura, constituyen la fuente de nitrgeno, vitaminas y minerales.
La lactosa y la sacarosa son los hidratos de carbono fermentables, el rojo fenol es el indicador de pH, que vira al amarillo
cuando hay produccin de cido a partir de la fermentacin de azcares, el cloruro de sodio mantiene el balance osmtico, y
el verde brillante acta como agente selectivo.

Frmula (en gramos por litro) Instrucciones

Pluripeptona 10.0
Extracto de levadura 3.0
Cloruro de sodio 5.0 Suspender 58 g de polvo por litro de agua destilada.
Reposar 5 minutos y mezclar calentando a ebullicin
Lactosa 10.0
durante 2 o 3 minutos. Distribuir y esterilizar en
Sacarosa 10.0
autoclave a 118-121C durante 15 minutos. Secar la
Rojo fenol 0.08 superficie del medio por unos minutos en la estufa.
Verde brillante 0.0125
Agar 20.0
pH final: 6.9 0.2

Siembra
Sembrar en superficie por estriado a partir de una dilucin del material a investigar o de un cultivo previo en un medio de
enriquecimiento selectivo, como Selenito caldo (B02-120-05) o Tetrationato caldo (B02-145-05).
Para el tratamiento de materia fecal se recomienda hacer cultivo primario en medios menos selectivos, como Salmonella
Shigella agar (B02-138-05), o Mac Conkey agar (B02-114-05).

Incubacin
Incubar 24 horas a 35-37C.

Resultados

Microorganismos Caractersticas de las colonias

Escherichia coli ATCC 25922
Salmonella enteritidis ATCC 13076
Salmonella typhi
Salmonella typhimurium ATCC 14028
Shigella flexneri. ATCC 12022
Staphylococcus aureus ATCC 25923
Amarillo-verdosas sobre fondo amarillento
Rosas, blancas o transparentes sobre fondo rojo
Crecimiento inhibido
Rosas, blancas o transparentes sobre fondo rojo
Crecimiento inhibido
Crecimiento inhibido

Caractersticas del medio

Medio preparado: verde.

Almacenamiento:
Medio deshidratado: a 10-35 C.
Medio preparado: a 2-8 C.

Presentacin
x 100g :Cdigo: B02-124-05 x 500g :Cdigo: B02-124-06
Salmonella Shigella Agar.
Medio de cultivo utilizado para el aislamiento de Salmonella spp. y de algunas especies de Shigella spp. a partir de heces,
alimentos y otros materiales en los cuales se sospeche su presencia.

Fundamento
Es un medio de cultivo selectivo y diferencial.
La selectividad, esta dada por la sales biliares y el verde brillante, que inhiben el desarrollo de bacterias Gram positivas, de
la mayora de los coliformes y el desarrollo invasor del Proteus spp.
Es diferencial debido a la fermentacin de la lactosa, y a la formacin de cido sulfhdrico a partir del tiosulfato de sodio.
Los pocos microorganismos fermentadores de lactosa capaces de desarrollar, acidifican el medio haciendo virar al rojo el
indicador de pH, obtenindose colonias rosadas o rojas sobre un fondo rojizo.
Salmonella, Shigella y otros microorganismos no fermentadores de lactosa, crecen bien en el medio de cultivo, y producen
colonias transparentes.
La produccin de cido sulfhdrico se evidencia como colonias con centro negro debido a la formacin de sulfuro de hierro.
Para aumentar la selectividad, se recomienda incubar previamente la muestra en Selenito caldo (B02-120-05).

Frmula (en gramos por litro) Instrucciones

Pluripeptona 5.0
Extracto de carne 5.0
Lactosa 10.0
Suspender 60 g del polvo por litro de agua destilada.
Mezcla de sales biliares 8.5 Reposar 5 minutos y mezclar hasta homogeneizar.
Citrato de sodio 8.5 Calentar a ebullicin durante 2 o 3 minutos. NO
Tiosulfato de sodio 8.5 ESTERILIZAR EN AUTOCLAVE. Enfriar a 45-50C y
Citrato frrico 1.0 distribuir unos 20 ml por placa. Secar la superficie
del medio unos minutos en la estufa.
Agar 13.5
Verde brillante 0.00033
Rojo neutro 0.025
pH final: 7.0 0.2

Siembra
Sembrar por estriado la superficie del medio de cultivo.
Recomendaciones, se aconseja sembrar en forma conjunta una placa de agar E.M.B. (B02-101-05) o de agar Mac Conkey
(B02-114-05).

Incubacin
Durante24-48 horas a 35-37 C, en aerobiosis.

Resultados

Microorganismos Colonias
Salmonella typhimurium ATCC 14028 Transparentes, centro negro
Shigella flexneri Incoloras
Shigella sonnei Incoloras
Proteus mirabilis ATCC 43071 Transparentes, centro negro
Escherichia coli ATCC 25922 Rosadas a rojas
Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 Rosadas cremosas y mucosas
Enterococcus faecalis ATCC 29212 Incoloras, de muy escaso crecimiento

Caractersticas del medio

Medio preparado: rojo naranja.

Almacenamiento:
Medio deshidratado: a 10-35 C.