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UNIVERSIDAD NACIONAL

FEDERICO VILLAREAL

ANLISIS
MICROBIOLGIC
O DEL AGUA
ALUMNAS:
- HUAMAN COBARRUBIAS MOLLY
- SILVA VEG VERNICA
- VILLANUEVA VALLES XIOMARA

Vero

0
[ANLISIS MICROBIOLGICO DEL AGUA] 30 de octubre de 2016

Practica N9

ANLISIS MICROBIOLGICO DEL AGUA

I. Introduccin
El agua es un recurso natural necesario para el desarrollo de un gran nmero de
actividades humanas. Su creciente degradacin por disminucin de su calidad
implica la reduccin del nmero de usos que se le da; es por ello, lo que se hace
necesario la realizacin de estudios que permitan determinar la calidad de esa
agua. Los anlisis que se pueden realizar al agua para controlar su calidad son:
fsicos, qumicos y microbiolgicos, en esta ocasin se har una determinacin
microbiolgica. Todos los organismos que se encuentran en el agua son
importantes en el momento de establecer el control de la calidad de la misma
sin considerar si tienen su medio natural de vida en el agua o pertenecen a
poblaciones transitorias introducidas por el ser humano; si su crecimiento lo
propician los nutrientes presentes en el escurrimiento natural y en aguas
residuales municipales o lo frenan los venenos procedentes de la actividad
agrcola o industrial; y si tienen capacidad para intoxicar a las personas y a los
animales superiores. Se debe conocer la forma de los patgenos hdricos y
determinar su presencia y origen, la magnitud y oscilacin de su nmero, el curso
de su ciclo vital y el ndice de su supervivencia. Los parmetros biolgicos en las
aguas potables son de mucho inters, los microorganismos que puede haber en
el agua son virus, bacterias, hongos, algas y protozoos. Aquellos que son inocuos
para el hombre no tienen significacin sanitaria, por lo que el control
microbiolgico del agua se va a centrar en las especies patgenas para el
hombre. Dado que buscar todo tipo de microorganismos patgenos, por su
diversidad, es costoso y complicado y como la relacin patgenos/no patgenos
es muy pequea, se realiza un control del agua a travs de indicadores
microbiolgicos de contaminacin. Hay muchos seres vivos que se emplean
como indicadores de la calidad de un agua. As, segn predominen unos
organismos u otros, podremos saber el estado de un agua.

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II. Objetivos
OBJETIVO GENERAL
- Determinar la calidad microbiana de la muestra de agua del ro Mala

OBJETIVOS ESPECFICOS

- Determinar la presencia de coliformes fecales en la muestra a analizar


- Determinar microorganismos coliformes totales por el mtodo NMP

III. Marco terico

3.1. Localizacin del rea de muestra


El distrito de Calango es uno de los 16 que conforman la provincia de Caete,
ubicada en el Departamento de Lima, perteneciente a la Regin Lima, en el
Per.
Limita al norte con el Distrito de Chilca, al este con la provincia de Huarochir, al
sur con el distrito de Coayllo y al oeste con el distrito de Mala y el distrito de
Santa Cruz de Flores.
Altitud: 305 m.s.n.m
Extensin de: 530.84 Km2

Ilustracin 1: Mapa satelital de Calango

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3.2. Toma de muestra.


Se realiz la recoleccin de la muestra el da 30 de octubre del 2016 a las 15
horas 12 minutos.

Ilustracin 2: Cuenca baja del rio de Mala en Calango

Fuente: Propia

Ilustracin 3: Recoleccin de la muestra

Fuente: Propia

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3.2. Metodologa

Determinacin de microorganismos coliformes totales por el


MTODO NMP
La determinacin de microorganismos coliformes totales por el mtodo
del Nmero ms Probable (NMP), se fundamenta en la capacidad de este
grupo microbiano de fermentar la lactosa con produccin de cido y gas
al incubarlos a 35C 1C durante 48 h., utilizando un medio de cultivo
que contenga sales biliares. Esta determinacin consta de dos fases, la
fase presuntiva y la fase confirmativa. En la fase presuntiva el medio de
cultivo que se utiliza es el caldo lauril sulfato de sodio el cual permite la
recuperacin de los microorganismos daados que se encuentren
presentes en la muestra y que sean capaces de utilizar a la lactosa como
fuente de carbono. Durante la fase confirmativa se emplea como medio
de cultivo caldo lactosado bilis verde brillante el cual es selectivo y solo
permite el desarrollo de aquellos microorganismos capaces de tolerar
tanto las sales biliares como el verde brillante. La determinacin del
nmero ms probable de microorganismos coliformes fecales se realiza
a partir de los tubos positivos de la prueba presuntiva y se fundamenta
en la capacidad de las bacterias para fermentar la lactosa y producir gas
cuando son incubados a una temperatura de 44.5 0.1C por un periodo
de 24 a 48 h. La bsqueda de Escherichia coli se realiza a partir de los
tubos positivos de caldo EC, los cuales se siembran por agotamiento en
medios selectivos y diferenciales (Agar Mac Conkey, Agar eosina azul de
metileno) y posteriormente realizando las pruebas bioqumicas bsicas
(IMViC) a las colonias tpicas.

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Ilustracin 4. NMP(Nmero ms probable)

IV. Situacin experimental.

4.1. Materiales

Cantidad Materiales Cantidad Reactivos


12 1. Campana de durhan 30 ml 7.. Muestra de agua
unidades
12 2. Tubos de ensayo 9 tubos de ensayos 8. Caldo lauril Triptosa
unidades con
1 unidad 3. gradilla 1 placa petri 9. Agar XLD
2 unidades 4. Asita de siembre 1 placa petri 10.Agar MB
1 unidad 5.Mechero de Bunsen 90 mililitros 11.Agua pectonada
4 unidades 6.Pipeta esterilizadas 3 tubos de ensayo 12.Caldo EC

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Ilustracin 5: Se observa la Campana de Durhan

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Ilustracin 6: Gradilla y Tubos de ensayo

4.2 Procedimiento

1. se diluye la muestra 10 ml de la muestra en agua pectonada

Etapa presuntiva

Con la micro
Se diluye 10
pipeta 10-1
ml en 90ml
cojo 1 ml e
de agua
incorporo en
pectonada.
otro tubo de
Con esta
ensayo que
misma pipeta
contenga
de 10-1 cojo
caldo de
1 ml de esta
lactosa
dilucin y
repitiendo
incorporo en
dos veces
otro tubo de
mas. Y por
ensayo
ultimo coger
siendo esta
1 ml y diluir
una dilucon
en caldo EC
de 10-2

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Siembra de la dilucin 10-1 en el Agar MB y Agar XLD

Etapa presuntiva para 10 -2

Como ya se tiene con esta misma


10-2, se descarta micropipeta se
10 -1 luego de diluye de 10-2
esto se coge 1 ml se coge 1ml y se
de 10-2 para diluye en caldo
diluirlo en 9ml de de lactosa ( se
agua pectona rpiten 2 veces
tienen como ms). Por ltimo
resultado, una se coje 1 mly se
dilucin de 10-3 diluye en caldo
EC.

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Este mismo procedimiento se realiza para la concentracin 10-3

12 Tubos de ensayos con caldo lauril triptosa de concentraciones 10-1 (3 unidades) ,


10-2 (3 unidades), 10-3 (3 unidades)
3 Tubos de ensayo con caldo EC de concentraciones 10-1 , 10-2, 10-3

IV. Bibliografa
- Municipalidad de Calango. (..). Ubicacin de Calango. .., de .. Sitio web:
http://www.municalango.gob.pe/historia.htm

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