UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA

LABORATORIO DE PATOLOGIA CLINICA

Av. Circunvalacin Cda. 29 San Borja
Telf. 435-3348 Anexo 237

Evaluacin de la Residualidad en Leche de una Infusin Antibitica

Intrauterina sobre la base de Cefalexina, Neomicina, Cloxacilina y
Vitamina A (Metricef 3) en vacas lecheras del distrito de
Pachacamac, departamento de Lima.

Alvarado A., Tang J., Ruiz, F., Rodriguez, L.

Laboratorio de Patologa Clnica Facultad de Medicina Veterinaria - UNMSM
rea de Investigacin en Salud Animal Laboratorio Agrovet Market Animal Health

INTRODUCCION

El uso de antibiticos es sin lugar a dudas una de las principales herramientas en el control y erradicacin
de numerosas enfermedades infecciosas de origen bacteriano en animales de produccin y compaa.
Una vez producido el diagnostico de una afeccin y establecido el tratamiento, adems de seguir el curso
clnico de los animales afectados se debe prestar especial atencin a los periodos de descarte de leche
para poder enviar al mercado la leche con niveles de inhibidores por debajo de los mximos residuales
permitidos.

El trmino residuos, se refiere a pequeas concentraciones de estos frmacos que quedan en leche o
carne despus de finalizado un tratamiento, independiente de la va de administracin del producto
(parenteral, intrauterina o intramamaria).

Los riesgos de estos frmacos en la poblacin humana se centran fundamentalmente en los siguientes
aspectos: reacciones de hipersensibilidad, efectos txicos especficos, aparicin de cepas resistentes y
susceptibles de ser transmitidas al hombre y alteraciones de la flora intestinal.
Actualmente, con el gran incremento.

En el caso particular de la leche, al riesgo toxicolgico se suma el riesgo tecnolgico, es decir el efecto
que las concentraciones de antibiticos pueden tener sobre los procesos fermentativos dirigidos a la
obtencin de productos de alto valor agregado. Es importante destacar, que estos residuos causan
graves daos en la industria lechera, ya que la elaboracin de derivados lcteos como queso y yogurt
necesitan el desarrollo de la flora cido lctico. Esta flora, es inhibida por la presencia de concentraciones
pequeas de antibiticos, razn por la cual las industrias realizan rutinariamente un control interno, para
separar la leche ausente de estos residuos y destinarla a la elaboracin de estos productos.

Por ello en la actualidad se debe conocer las concentraciones mximas permitidas, y como herramienta
para su deteccin existen diversos mtodos para estimar las concentraciones mximas permitidas en la
leche. Ahora se encuentran tcnicas como la de tipo ensayo de receptor de Beta s.t.a.r. (UCB-
Bioproducts, Blgica), la tcnica de ensayo de unin a receptor ligado a enzima de Snap (IDEXX
Laboratories INC.,EEUU), tcnicas microbiolgicas como la de CH ATK Single Test P&S (Copan Italia) ,
Charm Farm Test Vial (Charm Sciences Inc., EEUU) y el Test cuali o Delvotest SP NT.

El mtodo Test cuali o Delvotest SP - NT es una prueba de difusin estndar para la deteccin de los
residuos de sustancias antibacterianas (tales como antibiticos y sulfonamidas). La prueba consiste de

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ampolletas que contienen al medio slido agar sembrado de un nmero estandarizado de las esporas de
Bacillus stearothermophilus var. Calidolactis, junto con nutrientes requeridos para el crecimiento y un
antifolate trimethoprim. El medio es coloreado en prpura por el indicador de pH prpura de bromocresol.

La sensibilidad de Delvotest SP-NT dada en la hoja de especificacin de este producto, aparte de las
sensibilidades especificadas para la Penicilina G y Sulfadiazina, muestra los rangos de sensibilidad para
otros antibiticos y sustancias inhibitorias que pueden ser detectados, tales como aquellos definidos por
el Nivel Mximo de Residuo (MRL). La tabla 1, da una visin de los niveles de deteccin de Delvotest
SP-NT para residuos de diferentes antibiticos y sulfonamidas. El Nivel de deteccin se refiere a la
concentracin ms baja en la cual una droga es todava detectada por la prueba, al tiempo control o al
tiempo de lectura fijo de 3 horas.

Tabla 1: Datos indicativos sobre el nivel de deteccin con Delvotest SP - NT en ppb (partes por billn o
ng/ml) en la leche bovina cruda mezclada. Las drogas enlistadas son una seleccin de la muestra del
espectro de deteccin.

Nivel de deteccin Nivel de deteccin

Droga a tiempo de control Lectura a 3 horas
(ppb) (ppb)
-lactams
penicilina 12 23
ampicilina 4 67
amoxicilina 23 35
ceftiofur 25 50 50 100
cefapirina 46 68
cloxacilina 20 20 30
dicloxacilina 10 10 20
oxacilina 10 10
Sulfonamidas
sulfadiazina 25 50 100 150
sulfametazina 25 100 100 250
Tetraciclinas
tetraciclina 250 500 800
oxytetraciclina 250 500 800
Macrolidas
Tilosina 30 50
Spiramicina 400 -600 800 1000
Eritromicina 40 80 200
Otras
Trimetoprim 50 -100 200 300
Dapsona 0.5 1 1 2.5
Aminoglicosidos
Gentamicina 50 200
Neomicina 100 200 300 - 600

Las muestras de leche que estn libres de sustancias antibacterianas o las que contienen por debajo de
niveles especificados, cuando se les hace la prueba aadiendo 0,1 mL de leche e incubadas a 64C

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permite la germinacin y el crecimiento de la bacteria. Esto conducir a un cambio en color del indicador
de prpura a amarillo. Cuando la muestra de leche contiene sustancias antibacterianas por encima de la
sensibilidad de la prueba, el crecimiento es inhibido y como resultado el color del agar permanece
prpura.

Esta tcnica detecta al antimicrobiano por debajo del lmite de tolerancia fijada por FDA, USDA. Los
niveles de deteccin para Cloxacilina, Neomicina y Cefalosporinas son 20, 100 200 y 25 - 50 partes
por billon (ppb) respectivamente.

Metri-Cef 3 est indicado para el tratamiento y la prevencin de las metritis (clnica y subclnica) y
piometra de bovinos, causadas por grmenes sensibles a alguno de los antibiticos de la frmula. La
asociacin de sus tres antibiticos le otorga una efectividad completa contra las bacterias causantes de
problemas infecciosos en el tero:

Cefalexina: su efectividad es inmediata, ejerciendo su accin durante las primeras 24 horas de aplicado el
producto. Elimina la primera barrera bacteriana. Es activo contra la mayora de las bacterias Gram
positivas (entre ellas los estafilococos) y algunas Gram negativas, incluyendo E.coli, Proteus; Klebsiella,
salmonella, Shigella y Enterobacter, adems de los estafilococos penicilinasa positivos, sin embargo no
posee actividad contra Enterobacter spp., P.aeruginosa y Serratia spp, entre otros. La resistencia
adquirida se presenta en bacterias gramnegativas y es de particular importancia en las Enterobacterias.

Neomicina Sulfato: Asociada al excipiente de larga duracin presente en la frmula, extiende su accin
hasta por 3 semanas. La neomicina es el antibitico ms utilizado en combinaciones de drogas debido a
su amplio espectro antibacteriano. Su actividad bactericida abarca un gran nmero de bacterias
Gramnegativas, incluyendo E.coli, Klebsiella pneumoniae, Haemophilus sp., Enterobacter sp.,
Pasteurella, Serratia sp., Neisseria sp., Proteus sp. Salmonella spp, Shigella spp, y Pseudomona
aeruginosa y su espectro abarca tambin un nmero reducido de bacterias Gram positivas como el
Staphylococcus aureus. La resistencia mediada por plsmidos ocurre mediante una variedad de enzimas.
Tal resistencia, la cual a menudo es mltiple, es relativamente comn en los comensales y patgenos
entricos pero menos frecuente entre otros patgenos oportunistas. La resistencia por mutacin
cromosomal carece de importancia.

Cloxacilina Benzatnica: Su estructura qumica la hace estable, impidiendo el acceso de enzimas de

ncleo B-Lactmico. Su accin es contra bacterias Gram positivas (tales como Estreptococos,
Estafilococos, algunas Corynebacterias, Enrysipelothrix rhusiopathiae, Clostridium spp, Bacillus
anthracis), pero tambin contra algunos cocos Gramnegativos, Leptospira canicola, Campylobacter foetus
y Actinomyces.

Adems, Metri-Cef 3 contiene Vitamina A, que funciona como regenerador epitelial. La adicin de
Vitamina A, reduce las consecuencias del proceso infeccioso y participa manteniendo la integridad del
tejido.

Metri-Cef 3, se administra mediante infusin intrauterina. La dosis utilizada es una jeringa de 30 mL por
animal, la cual debe ser introducida en el tero utilizando la pipeta anexa. En casos severos el tratamiento
puede ser repetido despus de 48 horas. Para vacas repetidoras administre una jeringa 24 horas
despus de la inseminacin artificial.

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Antes de la administracin intrauterina de Metri-Cef 3 las personas que efecten el tratamiento deben
lavarse y secarse las manos previamente. Dada la naturaleza del empaque y la no-reabsorcin del
principio activo, Metri-Cef 3 presenta un amplio margen de seguridad, imposibilitando una sobredosis.

En la presente evaluacin se tuvo como objetivo demostrar la inexistencia de residuos o trazas de

antibiticos en la leche despus del uso de Metri-Cef 3 en dosis teraputicas.

OBJETIVO

Determinar el tiempo de residualidad en leche de una Infusin Antibitica Intrauterina sobre la

base de Cefalexina, Neomicina, Cloxacilina y Vitamina A (Metri-Cef 3) en vacas lecheras en
lactacin.

MATERIALES Y METODOS
Lugar de Ejecucin:

Establo Casablanca en el distrito de Pachacamac, departamento de Lima.

Materiales:

Veinte (20) Vacas lecheras con metritis.

Jeringa de Infusin antibitica intrauterina sobre la base de Cefalexina, Neomicina,
Cloxacilina y Vitamina A (Metri-Cef 3).
Guantes de plstico para inseminacin.
Aretes Boviflex para identificacin.
Botas descartables o de goma.
Frascos esteriles para coleccin y anlisis de Leche.
Kit Delvotest SP NT para deteccin de antibiticos en leche.

Metodologa:

Se seleccionaron dos grupos de trabajo: Grupo A (Tratamiento): 10 vacas lecheras con

metritis. Grupo B (Control): 10 vacas lecheras sin tratamiento, todas en un promedio de
peso de 600 Kg.
En el grupo A y grupo B se tomaron muestras de leche que contengan una mezcla de los
cuatro cuartos de cada vaca, previos a la aplicacin del producto para descartar la adicin
de otros antibiticos o tratamientos previos, lo cual se consider como la muestra de hora
cero (00 h).
En el Grupo A se aplicar mediante una pipeta de inseminacin un tubo intrauterino de 30
ml de Metri-Cef 3 por vaca.

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Una vez aplicado el producto se tomaron muestras de leche de ambos grupos a las 12, 24,
36, 48, 60 y 72 horas que contengan una mezcla de los cuatro cuartos de cada vaca.
Se trabaj con el Kit Devotest SP NT de acuerdo con la metodologa descrita por el
fabricante.

RESULTADOS

CUADRO 1: Resultados de muestras de leche con kit Delvotest SP- NT del grupo tratado con
Metri-Cef 3

GRUPO A (TRATADO)

VACA 00 h 12 h 24 h 36 h 48 h 60 h 72 h
03/02 (T) 04/02 (M) 04/02 (T) 05/02 (M) 05/02 (T) 06/02 (M) 06/02 (T)
LINDA - - - - - - -
NITA - - - - - - -
LULU - + - - - - -
GLADIS - - - - - - -
LIDIA - - - - - - -
11 - - - - - - -
12 - - - - - - -
13 - + - - - - -
14 - - - - - - -
15 - - - - - - -

CUADRO 2: Resultados de muestras de leche con kit Delvotest SP- NT del grupo no tratado.

GRUPO B (CONTROL)

VACA 00 h 12 h 24 h 36 h 48 h 60 h 72 h
03/02 (T) 04/02 (M) 04/02 (T) 05/02 (M) 05/02 (T) 06/02 (M) 06/02 (T)
1 - - - - - - -
2 - - - - - - -
3 - - - - - + -
4 - - - - - - -
5 - - - - - - -
6 - - - - - - -
7 - - - - - - -
8 - - - - - - -
9 - - - - - - -
10 - - - - - - -

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Leyenda: - : Negativo a presencia de antibitico.

+: Positivo a presencia de antibitico.
h : Horas
M: Maana
T : Tarde

DISCUSION

Los resultados mostrados en el Cuadro 1 del Grupo A (Tratado) muestra que todas las vacas, se
encuentran negativos a presencia de antibiticos en leche desde el primer muestreo (12 h) post-
tratamiento y permanecen negativas hasta el muestreo final que fue hasta las 72 horas. Las
excepciones a estos resultados fueron las vacas Lul y N 3, que tuvieron resultados positivos al
primer muestreo (12 h), los cuales se pueden considerar que se trataran de reacciones cruzadas
o probables contaminaciones con desinfectantes a la hora de la toma de muestras, ya que
estas vacas en el muestreo pre-tratamiento (00 h) estuvieron negativas y considerando la alta
sensibilidad de la prueba es muy fcil la deteccin elementos extraos a los buscados en la
prueba. La interpretacin de un resultado negativo a residuos de antibiticos es que, las
muestras tienen niveles de concentracin que estn por debajo de los niveles de deteccin,
siendo el caso para Cefalexina la cual se encuentra por debajo de las 50 a 100 ppb, para
Cloxacilina 20 a 30 ppb, y, para Neomicina 300 a 600 ppb respectivamente (Tabla 1).

En el Cuadro 2 de los resultados del Grupo B (Control) sin tratamiento, se observa que todas las
vacas se mostraron negativas a residuos de antibiticos en leche, tanto en el muestreo de hora
cero (00 h) como en los siguientes muestreos, hasta el muestreo final de 72 horas; lo cual
demuestra que todas las vacas utilizadas en el experimento en ambos grupos, se mantuvieron
durante el periodo de prueba, sin tener contacto con ninguna fuente de antimicrobianos o
desinfectante que hubieran podido influenciar en los resultados obtenidos.

CONCLUSION

Se concluye que la residualidad en leche de una Infusin Antibitica Intrauterina sobre la base de
Cefalexina, Neomicina, Cloxacilina y Vitamina A (Metri-Cef 3) en vacas lecheras en lactacin
es nula; dado a que, los resultados como negativos por el mtodo utilizado en el presente trabajo
se interpretan como valores de antibiticos por debajo de los niveles de deteccin y estos a su
vez son valores considerados menores al LMR.

BIBLIOGRAFIA CITADA

1. Manual Merck de Veterinaria. Quinta Edicin. Ocano Grupo Editorial. Espaa. 2000.

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2. Prescott, John F.; Baggot Desmond. Antimicrobial Therapy in Veterinary Medicine.

Second edition.1993. 557-558

3. Sumano, Ocampo. Farmacologa Veterinaria. Segunda Edicin.1998

4. http://www.capraispana.com/enfermedades/mastitis/secado.htm. El tratamiento y
prevencin de mastitis durante el perodo de secado.

5. http://www.infolactea.com/descargas/biblioteca/290.pdf. Calidad de leche y manejo

sanitario de la vaca seca. Pamela Ruegg. University of Wisconsin.

6. http://www.westfalia.com/mx/es/what_is_new/news/2007/dryoffnoticia.aspx. Control de
mastitis en vacas en seca. GEA Farm Technologies.

Lima, 15 de Marzo del 2010.

M.V. ARNALDO ALVARADO S.

rea de Pruebas Especieles
Lab de Patologia Clinica
Facultad de Medicina Veterinaria

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FOTOGRAFIAS DE LA APLICACIN DEL PRODUCTO, TOMA Y

PROCESAMIENTO DE LAS MUESTRAS.

Introduccin de pajilla de Metricef 3

Pajilla con jeringa de Metricef 3

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Introduccin de la suspensin

Metricef 3

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Toma de muestra de leche

Muestra de leche

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Retiro de leche con pipeta calibrada

Incubacin de muestras de leche con el kit Delvotest SP-NT

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Toma de resultados luego de la incubacin

Verificacin de resultados luego de la incubacin

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Delvotest SP 5 PACK - NT
Instrucciones de uso
Introduccin
El Delvotest SP NT es un sistema de anlisis de
presencia de sustancias antibacterianas en leche tales
como antibiticos y sulfonamidas. En funcin de
asegurar una optima aplicacin del producto, debe
seguirse un simple procedimiento. Ver dentro de la caja
del producto las instrucciones correspondientes.
Contenido del kit
El kit de Delvotest SP 5 PACK NT contiene: 480
determinaciones en 5 placas con 96 celdas cada una,
con un medio de agar slido contenindo una cantidad
estandarizada de esporas de Bacillus
stearothermophilus var. calidolactis, junto con nutrientes
y bromocresol prpura para testear el crecimiento del
organismo.
Las placas estn cubiertas con un film de aluminio y
consiste en seis bloques con 16 celdas rectangulares
cada una.
El kit tambin incluye cubiertas adhesivas en cantidad
suficiente para sellar las placas durante la incubacin;
descrito en las instrucciones de uso dentro de la caja.
Precaucin
Como este test es extremadamente sensible a algunas
sustancias antibacterianas (antibiticos, compuestos
sulfa y otros componentes tales como desinfectantes,
detergentes, etc.), hay que prevenir contaminaciones
con estos componentes. Es recomendable lavarse y
secarse las manos antes de comenzar el ensayo. Use
una mesada limpia.
No manipular las placas del test porque puede perder el
medio slido de agar de las celdas. Esto puede afectar
la calidad de los colores del test durante la lectura de los
resultados del ensayo.
Orientaciones
Con una placa entera se pueden analizar un mximo de
96 muestras. De acuerdo a la cantidad de muestras a
analizar, se pueden usar uno o mas de los 16 bloques.
Si el numero de muestras es menor a 16 algunas celdas
pueden quedar sin usar durante la incubacin.
Cuidado al sacar la cubierta de aluminio
Si uno o mas bloques van a ser usados cortar con un
cuchillo el papel de aluminio sobresaliente y separar con
un cuchillo o tijera.
Tener cuidado de no daar la cubierta de la parte de la
placa que no se usa porque se pueden humedecer las
celdas.
Boletn Tcnico
Adicionar la muestra de leche
Se debe pipitear en la primer celda 0.1ml de una muestra de
leche libre de antibiticos como control negativo (el control
negativo esta disponible con su distribuidor de DSM Food
Specialties).
En las siguientes celdas pipetear 0.1 ml de cada una de las
muestras a analizar. Usar para cada nueva muestra, una
punta de pipeta nueva y limpia (evitar la contaminacin de las
puntas). Las letras y nmeros alrededor de las placas estn
para facilitar la identificacin de las muestras.
Incubacin del test a 64C
Las placas o bloques se sellan cuidadosamente con las cintas
adhesivas provistas en la caja y se ponen suavemente a flotar
en un bao precalentado o en un incubador seco a una
temperatura de 64.0C 0.5C. Incubar las placas por 2 horas
y 15 minutos. Variaciones en la temperatura del bao pueden
prolongar la duracin del test y afectar la sensibilidad del
mismo.
Pida mayor informacin sobre el uso de incubadores secos a
su distribuidor de DSM.
Lectura
Comenzar leyendo el resultado de color de la muestra de
leche control negativo (primera celda) despus de un tiempo
de incubacin de 2 horas y 15 minutos.
Si el color no ha cambiado a amarillo claro, las placas deben
ser retornadas al bao hasta que se alcance a leer el color
amarillo claro en la muestra control negativo. (Es recomen-
dable repetir las lecturas a intervalos de 5 minutos.)
Los resultados deben ser ledos desde la base de la celda.
Cuando la muestra control negativo se ha tornado amarillo
claro todas las otras celdas (muestras) pueden ser ledas.
Lectura de las muestras;
Color amarillo indica ausencia de sustancias antibacterianas
en una concentracin por encima del limite del test.
Color amarillo / prpura indica la presencia de sustancias
antibacterianas cerca del limite de deteccin del test.
El nivel de deteccin con Delvotest SP 5 PACK NT para la
Penicillina G es entre 1 y 2 ng/ml y para sulfadizina es entre
25 y 100 ng/ml. Informacin adicional de todo el espectro de
sensibilidad esta disponible va su distribuidor de DSM.
Informacin adicional sobre la lectura
Lectura opcional con el software DelvoScan, consulte a su
distribuidor de DSM.
Cuando el tiempo de incubacin es determinado bajo
condiciones locales se puede usar el tiempo obtenido como
tiempo base para los prximos test del bach bajo las
mismas condiciones. Durante el almacenamiento el
tiempo de incubacin requerido aumenta gradualmente.
Test cercanos a su fecha de expiracin pueden requerir
algn tiempo mas de incubacin que uno recin
producido.
Testear diferentes tipos de productos lcteos puede
requerir otros tiempos de incubacin. Solicite mas
informacin a su distribuidor de DSM.
Almacenamiento
El test debe conservarse derecho en el envase original,
en un lugar oscuro y a una temperatura constante
debajo de 15C, impedir el congelamiento
(preferentemente entre 4C y 15C). Temperaturas
menores o fluctuaciones de temperatura, conducen a un
ablandamiento y soltura del agar con la formacin de
burbujas de aire. Almacenamiento a altas temperaturas
acortaran la vida til. La fecha de vencimiento esta
indicada junto con el numero de lote en el envase.
Muestreo
La muestra debe ser representativa del lote de leche
que se investigara. Cuando se analizan vacas
individuales evitar analizar calostro. Tener cuidado de
mezclar la leche cuidadosamente, evitando la formacin
de burbujas de aire o espuma. El anlisis esta diseado
para una muestra de 0.1 ml (+/- 10%). Bajo ninguna
circunstancia se debe usar una pipeta descartable para
mas de una muestra. Como la cantidad de muestra es
pequea, si queda una gota y contiene antibitico, la
muestra puede llevar a un resultado incorrecto.
Muestras de leche control
Para verificar las condiciones del anlisis o para
determinar el optimo tiempo de incubacin, se debe
analizar una muestra control junto con las muestras de
leche. Estas muestras consisten en leche libre de
sustancias inhibidoras. Controles negativos estn
disponibles con su proveedor de Delvotest.
No us ar agua como control negativo. Siempre usar el
mismo tipo de matriz de muestra para el control de las
muestras a analizar.
Almacenamiento de las muestras de leche
Si no es posible analizar las muestras de leche en unas
pocas horas, debern ser guardadas bajo refrigeracin a
6C o si no se analizan el mismo da, en un freezer
(-18C o menos).
Equipamiento necesario
Para incubar a la temperatura requerida de 64C
0.5C es necesario un bao de agua con agitacin con
tapa o un incubador seco. Para equilibrar la temperatura
Con el mejor de nuestro conocimiento, la informacin contenida adjunto es exacta y completa. Sin embargo, no se interpretara que el contenido
adjunto implique una garanta o caucin.
Ttb dtest SP 5 pack - NT ifu 0409s1
dejar el equipo de incubacin un tiempo suficiente a 64C. La
temperatura del bao de agua debe ser de 64.0C 0.5C y
debe ser chequeado a varias posiciones, con un termmetro
verificado, pero aun mas importante es el nivel y localizacin
de las placas del test. No colocar el bao de agua o el
incubador seco cerca de la ventana o en un lugar con
corriente de aire y tener cuidado que el nivel de agua no sea
demasiado baja, como para producir variaciones en la
temperatura.
Variaciones de temperatura o temperaturas muy altas o muy
bajas durante la incubacin conducirn a tiempos de
incubacin mas largos y se puede afectar la sensibilidad del
ensayo.
Utilizacin de bao de agua
Las placas deben ser incubadas en un bao de agua sellado
de acuerdo a las instrucciones, debiendo las placas flotar en la
superficie del agua.
Asegurar que las tiras adhesivas perforadas sean
cuidadosamente aplicadas evitando que el agua del bao de
agua entre en las celdas.
Siempre mantener la tapa del bao de agua cerca durante la
incubacin. Prevenir que cualquier condensacin de agua de
la tapa del bao de agua gotee en el test.
Si es requerida agitacin esta debe ser suave. Cuidar que el
nivel de agua no sea muy bajo a fin de evitar variaciones de
temperatura.
Utilizacin de un incubador seco
El uso de un incubador seco y/o un incubador de laboratorio
con ventilador es aconsejable solo si la distribucin de calor
del equipo y la transferencia de calor al medio es lo
suficientemente constante como para obtener resultados
confiables.
Evitar que los incubadores sean abiertos frecuentemente ya
que pueden causar variaciones de temperatura.
NOTA: La incubacin en incubadores secos es mejor ejecutada con
cintas adhesivas no perforadas.
El paquete de cintas esta perforada, por lo tanto es mas adecuada
para la utilizacin de bao de agua. Por cintas no perforadas
contacte a su distribuidor de DSM.
Por mas informacin, por favor contactarse:
DSM Food Specialties
Dairy Ingredients
P.O. Box 1 2600 MA Delft
The Netherlands
Tel: +31-15-2792355
Fax: +31-15-2793200
E-mail: info.dairy-ingredients@dsm.com
www.dsm.com/dsm/dairy
o con nuestro representante local:
 Technical Bulletin

Delvotest SP - NT
Test Sensitivity or Detection levels

Introduction
Delvotest SP-NT, SP MINI NT and SP 5 PACK NT are broad spectrum antibiotic residue test systems
offering the possibility to verify the presence of a multitude of different antimicrobial substances in milk.
An indication of the sensitivity of Delvotest SP-NT has been given in the specification sheet of this product.
However, apart from the specified sensitivities for Penicillin G and Sulphadiazine, a substantial number of
other antibiotics and inhibitory substances can be detected at or close to the levels such as those defined by
the Maximum Residue Level (MRL). Table 1 gives an overview of the indicative detection levels of Delvotest
SP -NT for different antibiotic residues and sulphonamides.

Table 1
Indicative data on detection levels with Delvotest SP - NT in ppb (parts per billion or ng/ml) in commingled
raw bovine milk. Drugs listed are a sample selection only of the total detection spectrum of Delvotest SP -
NT.

Detection level Detection level

Drugs
At control time Reading time 3 hours

-lactams
penicillin 1-2 2-3
ampicillin 4 6-7
amoxicillin 2-3 3-5
ceftiofur 25 - 50 50 - 100
cephapirin 4-6 6-8
cloxacillin 20 20 - 30
dicloxacillin 10 10 - 20
oxacillin 10 10

Sulphonamides
sulphadiazine 25 - 50 100 -150
sulphamethazine 25 - 100 100 - 250

Tetracyclines
tetracycline 250 - 500 800
oxytetracycline 250 - 500 800

Macrolides
Tylosin 30 50
Spiramycin 400 - 600 800 - 1000
Erythromycin 40 - 80 200

Others
Trimethoprim 50 - 100 200 - 300
Dapsone 0.5 - 1 1 2.5

Aminoglycosides
Gentamycin 50 200
Neomycin 100 - 200 300 - 600
The data indicated in the table are based upon readings judged as being yellow/purple to purple and are to be
regarded as an indication. It is recommended that positive test results are always confirmed. Variations in
incubation times and temperatures, operators and storage conditions may have an influence on the reading
result found.

Definitions
Drug : Active ingredient of cattle medication such as antibiotics and sulphonamides.

Spectrum : Total number of different active ingredients that can be detected by Delvotest SP - NT
at or below the required detection level.

Detection level : The lowest concentration at which a drug is still detected by the test, at control time or at
a fixed reading time of 3 hours.

Control time : Time at which the test agar containing the negative control sample has just changed to
yellow.

For more information please contact: or our local representative :

DSM Food Specialties
Dairy Ingredients
P.O. Box 1 2600 MA Delft
The Netherlands
Tel.: +31-15-2792355
Fax: +31-15-2793200
E-mail: info.dairy-ingredients@dsm.com
www.dsm.com/dfs/dairy

"To the best of our knowledge, the information contained herein is accurate and complete.
However, nothing contained herein shall be construed to imply any warranty or guarantee".

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