Informe de laboratorio

Biologa celular y molecular

Diana marcela Rodrguez Daz cdigo: 65557307

Liliana Prez Ortiz cdigo: 1127072723
Eliana margarita caldern cdigo:
ngela patricia Prez cdigo:
essau castellano bedoya cdigo:

Universidad nacional abierta y a distancia UNAD

Regencia en farmacia y administracin en salud, radiologa e imgenes
diagnostica
Huila - Putumayo
 Informe de laboratorio
Biologa celular y molecular

Diana marcela Rodrguez Daz cdigo: 65557307

Liliana Prez cdigo: 1127072723
Eliana margarita caldern cdigo:
ngela patricia Prez cdigo: 1078246241
Essau castellano bedoya cdigo:

Presentado
Hernn camilo castillo

Universidad nacional abierta y a distancia UNAD

Regencia en Farmacia y Administracin en Salud, radiologa e imgenes
diagnostica
Huila - Putumayo
 TABLA DE CONTENIDO

Tabla de contenido

TABLA DE CONTENIDO ............................................................................................ 3

PRACTICA 1. BIOSEGURIDAD................................................................................ 4
PRACTICA 2. MICROSCOPIA ................................................................................. 5
Cuestionario .......................................................................................................... 5
Cuestionario ................................................................. Error! Marcador no definido.
Practica 5. Accin de lisosomas ........................................................................... 14
Introduccin .............................................................................................................. 14
Material ................................................................................................................. 14
Procedimiento ........................................................................................................... 15
Practica 6. Tejidos vegetales: Aislamiento de cloroplastos intactos ..................... 17
Introduccin .............................................................................................................. 17
Tabla de los datos experimentales obtenidos. ................................................. 19
Grfica de absorbancia (450 nm) contra tiempo de exposicin a la luz. ........ 19
Practica 7. Meiosis y Mitosis ................................................................................. 22
Cuestionario ........................................................................................................ 27
REFERENCIAS ........................................................................................................ 31
 PRACTICA 1. BIOSEGURIDAD

Cuestionario:

1- Defina que es Bioseguridad

Rta: la palabra bioseguridad se entiende por sus componentes}: bio: de bios
(griego) que significa vida, y seguridad que es referida a la calidad de ser
seguro, libre de dao, riesgo o peligro.
Bioseguridad: es el conjunto de normas y protocolos que son aplicados en
mltiples procedimientos realizados en investigaciones cientficas que se debe
seguir para conservar la salud y seguridad con el objetivo de prevenir los
riesgos o infecciones del personal que labora en el laboratorio y de la
comunidad frente a los riesgos de infeccin para evitar contaminarse.

2- Cmo puede usted evitar en el laboratorio daos a su salud?

Rta: utilizando adecuadamente los elementos de proteccin personal y teniendo
en cuenta las normas de bioseguridad las cuales son:
Utilizar la "bata de Laboratorio" debidamente abotonada y limpia y retirarla antes de
salir del laboratorio
Dar uso adecuado a los guantes para manipular muestras y cultivos de
microorganismos, evitar contaminar el rea de trabajo y los implementos
personales (esfero, libros, apuntes)
Utilizar mascarillas de respiracin
Utilizar anteojos de proteccin para evitar lesiones oculares causadas por partculas
proyectadas hacia el rostro del operador
No comer, beber, fumar ni colocar otros objetos en la boca, mientras est en el
Laboratorio.
Jams llevarse el lapicero, bolgrafo o cualquier otro implemento a la boca
No almacenar alimentos en la nevera ni en los estantes del Laboratorio
No usar jeringas o agujas para manipular lquidos o especmenes clnicos
Mantener el Laboratorio limpio y aseado
Descontaminar las reas de trabajo antes de iniciar la prctica de laboratorio, cada vez
que se derrame una sustancia y, una vez terminada la prctica.
Descartar todo el material contaminado en los recipientes destinados para ello
Lavarse las manos luego de manipular cultivos, muestras, animales y, antes de
abandonar el Laboratorio.
3- Defina el concepto de Limpieza, contaminacin, desinfeccin,
descontaminacin y esterilizacin
LIMPEZA: es la accin y efecto de eliminar la suciedad de una superficie
mediante mtodos fsicos o qumicos

CONTAMINACION: es la presencia o la acumulacin de sustancias en el

medio ambiente que afecta negativamente en entorno y las condiciones de vida,
as como la salud o la higiene de los seres vivos.
 DESINFECCION: proceso capas de eliminar prcticamente todos los
microorganismos patgenos conocidos, pero no todas las formas de vidas
bacterianas sobre objetos inanimados.

DESCONTAMINACION: es la reduccin de la cantidad de microorganismos

con el fin de disminuir el riesgo de infeccin y la carga bacteriana de los
efluentes.

ESTERILIZACIN: es el proceso mediante el cual se destruyen todos los

microorganismos variables presentes en un objeto o superficie incluidas las
esporas bacterianas.

PRACTICA 2. MICROSCOPIA

Es un instrumento ptico que est compuesto por unos lentes que son los
encargados de ampliar las imgenes que se enfocan y que son muy pequeas
para ser vistas por el ojo humano. Est diseado especialmente para poder
apreciar elementos muy pequeos y que obviamente resultan prcticamente
imperceptibles para la visin humana.
4x 10x 40x

Cuestionario
1. Qu organismos pueden observarse en la gota de agua estancada?
Se observan los protozoos que contiene esta agua estancada al observarla al
4x, 10x, y 40x

2. Son todos de igual tamao y forma?

Rta: no son de tamaos ni formas iguales

3. Se observan organismos mviles o estticos?

Rta: Se observan organismos estticos

4. Para las muestras de la letra, la hebra de hilo observadas determine:

Tela a cuadros
4x 10x 40x

Hebras de hilo de varios colores

4x 10x 40x
 Papel milimetrado

4x 10x 40x

La letra simetrica

4x 10x 40x

Cmo se manifiesta el poder de resolucin?

El poder de resolucin se manifiesta por la longitud de las ondas de

acuerdo a la radiacin que empleamos para iluminar esto quiere decir que a
menor longitud de ondas mayor es la resolucin.
 Cmo se manifiesta el poder de aumento?

Este poder se manifiesta por la capacidad que tiene el lente al aumentar el

tamao de los objetos que se estn observando.

Cmo se manifiesta el poder de definicin?

El poder de definicin se manifiesta por la capacidad que tiene el

microscopio para dar imgenes ntidas junto con los bordes definidos
dependiendo de la calidad del lente

Cmo se manifiesta el poder de penetracin o profundidad?

Este poder se manifiesta en la observacin detallada y simultaneo de los

planos de preparacin en el cual nos deja ver las cosas ms mnimas que un
objeto tiene que no lo podemos observar al ojo de una persona.

Cul es la utilidad del microscopio?

Es uno de los elementos ms importantes en los laboratorios porque de l
podemos observar las clulas que tiene un objeto, los microorganismos y las
bacterias que a simple vistas nosotros los seres humanos no los podemos
observar

Practica 3. CLULA: CRENACIN, HEMLISIS, PLASMLISIS Y TURGENCIA

Clulas sanguneas

4x 10x 40x
Muestra de sangre al ser adicionada agua destilada

4x 10x 40x

Muestra de sangre al ser adicionada NaCl al 0.6%

4x 10x 40x

Muestra de sangre al ser adicionada NaCl al 0.9%

4x 10x
Muestra de sangre al ser adicionada NaCl al 1.2%

4x 10x 40x

Clulas Vegetales
4x 10x 40x

Muestra vegetal al ser adicionad agua destilada

4x 10x 40x

Muestra vegetal al ser adicionada NaCl 0.6%

4x 10x 40x
 Muestra vegetal al ser adicionada NaCl 0.6%

4x 10x 40x

Cuestionario

1. Mencione las diferencias observadas entre el comportamiento de la clula

vegetal y animal. Explique.

Clula vegetal Clula animal

Tienen formas rectangulares Tienden a ser redondas o irregulares
Tienen cloroplastos, ellas fabrican su No tienen cloroplastos
propio alimento
Tienen pared celular ( celulosa) No poseen pared celular

2. Describe lo que sucede en una clula cuando se coloca en un medio:

a) Hipotnico, b) isotnico, c) hipertnico
La Permeabilidad selectiva ' es una propiedad de la membrana plasmtica y de
otras membranas semipermeables que permiten el paso de solo ciertas partculas a
travs de ellas.
De esta forma, pueden entrar a la clula aquellas partculas que necesite la misma y
se evita que ingresen las que no le sean tiles. De la misma forma, la clula puede
eliminar las partculas que ha generado como desecho. As se regula la entrada y
salida de sustancias a travs de la membrana y se logra el correcto funcionamiento de
la clula.
Para que una partcula pueda atravesar la membrana plasmtica debe tener un
tamao igual o menor a los poros de la membrana, debe tener la carga opuesta a la
carga de la membrana o simplemente tener carga neutra, y si es ms grande que
 los poros debe ser disuelta en una solucin, disminuyendo su tamao y as podr
entrar en la clula por medio de la membrana.

a) Medio hipotnico
Hipotnico viene del griego "hypo," que significa bajo, y "tonos," que significa
dilatarse. En una solucin hipotnica, el total de la concentracin molar de todas las
partculas disueltas, es menos que el de otra solucin o menos que el de la clula.
Si las concentraciones de solutos disueltos son menos fuera de la clula que dentro,
la concentracin de agua afuera es correspondientemente ms grande. Cuando una
clula es expuesta a condiciones hipotnicas, hay un movimiento neto de agua hacia
dentro de la clula. Las clulas sin pared celular se inflan y pueden explotar (lisis). si el
exceso de agua no es removido de la clula. Las clulas con paredes celulares a
menudo se benefician de la presin que da rigidez en medios hipotnicos.

b) Medio isotnico

Un medio o solucin isotnico es aquel en el cual la concentracin de soluto es

igual fuera y dentro de una clula. En hematologa, se dice de las soluciones que tienen
la misma concentracin de sales que los glbulos rojos. son isotnicas.[cita requerida] Por
tanto, tienen la misma presin osmtica que la sangre y no producen la deformacin de
los glbulos rojos. Aplicando este trmino a la contraccin muscular, se dice que una
contraccin es isotnica cuando la msculo permanece constante.

c) Medio hipertnico

Hipertnica viene del griego "hyper," que significa sobre y "tonos," que significa
expandirse. En una solucin hipertnica, la concentracin molar total de todas las
partculas de soluto disuelto, es ms grande que el de la otra solucin, o ms grande
que la concentracin en la clula.
Si la concentracin de solutos disueltos es mayor fuera de la clula, la concentracin
de agua es correspondientemente menor. Como resultado, el agua dentro de la clula
sale para alcanzar el equilibrio, produciendo un encogimiento de la clula. Al perder
agua las clulas tambin pierden su habilidad para funcionar o dividirse. Los medios
hipertnicos, como la salmuera o jarabes, han sido utilizados desde la antigedad para
preservar la comida, debido a que los microbios que causan la putrefaccin, son
deshidratados en esos medios hipertnicos y son incapaces de funcionar.

3. Explique en qu consisten los fenmenos de smosis y de difusin

El proceso de smosis, es un fenmeno fsico, por el cual dos fluidos de diferentes

concentraciones, separados por una membrana semipermeable (esto es, una especie
de filtro, pero con un tamao de agujero tan pequeo, que filtra las partculas a nivel
molecular), tienden a igualarse, pasando desde el lado de menor concentracin hasta
el de mayor. Por ejemplo, el agua de mar, con alto contenido en sales, y el agua dulce.
sta ltima pasara al otro lado, sin ningn gasto de energa, hacia el otro, hasta que se
mezclaran obteniendo una disolucin de igual concentracin. Realmente, el paso no es
en un nico sentido. Pero la proporcin es mucho mayor desde el lado de menor
concentracin al de mayor, que el inverso. La diferencia de presin que se crearn a
ambos lados de la membrana, es lo que se denomina presin osmtica.

Difusin

La difusin (tambin difusin molecular) es un proceso fsico irreversible, en el

que partculas materiales se introducen en un medio que inicialmente estaba ausente,
aumentando la entropa (desorden molecular) del sistema conjunto formado por las
partculas difundidas o soluto y el medio donde se difunden o disuelven.
Normalmente los procesos de difusin estn sujetos a la ley de Fick. La membrana
permeable puede permitir el paso de partculas y disolvente siempre a favor
del gradiente de concentracin. La difusin, proceso que no requiere aporte energtico,
es frecuente como forma de intercambio celular.

Difusin smosis
Movimiento espontneo de partculas Movimiento del solvente, no de las partculas
desde una zona de mayor concentracin del solvente desde la zona de menor
hay una zona de menor concentracin. concentracin hacia la zona de mayor
concentracin a travs de una membrana
Semipermeable.
La smosis requiere una solucin con un
La difusin puede ocurrir en cualquier solvente lquido.
medio y en cualquier tipo de partculas:
lquidos, gases, slidos
No intervine membrana semipermeable Se necesita de una membrana permeable
Iguala la concentracin de la partcula Iguala la concentracin con una distribucin
con una distribucin homognea en el no homognea de solvente y solutos a ambos
espacio disponible lados de la membrana semipermeable.

4. Por qu los sueros fisiolgicos que se aplican a pacientes intravenosamente

deben ser isotnicos?

Si a un paciente se le inyecta una solucin hipotnica, es decir de mayor concentracin

que el plasma de la sangre, aumentas la concentracin y esta sera mayor a la de las
clulas que estn en la sangre, por lo que, por el mecanismo de osmosis, el solvente
entra a la clula hinchndola y pudiendo hasta reventarla.

Si se le inyecta una solucin hipotnica, ocurre lo contrario, es decir, cambia la

 concentracin de solutos de la sangre disminuyndola, por ende, las clulas de la
sangre van a "vaciar" sus solutos al medio circundante por lo que la clula se achica y
se arruga.

Si la solucin es isotnica, es decir de igual concentracin que las clulas de la sangre,

entonces no pasa nada. Es por esto que inyectas este tipo de solucin cuando quieres
hidratar una persona, ya que se dice que est deshidratado cuando disminuyen las
sales dentro de las clulas, perdiendo agua (ya que las sales siempre van con su
equivalente osmtico, es decir retienen agua donde estn) y es lo que le falta a la
clula, sales, entonces las das en la concentracin que debieran estar de manera que
se equilibren ambos medios dentro y fuera de la clula, eso es la hidratacin.

Practica 5. Accin de lisosomas

Introduccin

Las sustancias que penetran en la clula por fagocitosis o pinocitosis van a

experimentar la accin de las enzimas digestivas intracelulares, contenidas en
orgnulos llamados lisosomas. Estos orgnulos son corpsculos esfricos que miden
aproximadamente 0.5 micrmetros, estn delimitados por una unidad de membrana y
contienen enzimas hidrolticas. Se han encontrado lisosomas en todas las clulas
animales y vegetales.
Los lisosomas promueven la digestin intracelular, tanto del material exgeno que
penetra en la clula por pinocitosis, como tambin el material endgeno. Este ltimo
puede estar constituido por orgnulos degenerados o por productos de desasimilacin
del metabolismo celular.

Material

Microscopio compuesto Porta y cubreobjetos.

Pipeta de un ml.
Mechero de Bunsen
6 tubos de ensaye 15 x 150 mm.
Gradilla.
Pinzas
Tela de asbesto.
Tripee Recipiente para bao Mara.
Pipeta Pasteur con goma.
Termmetro.
Hoja de papel aluminio.
 Reactivos

Solucin de Rojo Congo al 0.4%

Material biolgico
Cultivo de levaduras de pan. (30 ml.)
Cultivo de ciliados (Paramecium spp.) por cada equipo.

Procedimiento

1.- En tres tubos de ensayo, coloque en cada uno de ellos un mililitro del cultivo de
levaduras. Un tubo se pone en el refrigerador durante 10 minutos. Otro se coloca en el
bao Mara a 30C, y el ltimo se tapa con papel aluminio y se pone en un bao Mara
hirviendo durante 10 minutos.

2.- Al trmino de la exposicin de cada temperatura, se coloca de inmediato en cada

tubo 0.5 ml de rojo de Congo al 0.4%. Agite cada tubo y deje en reposo durante 5
minutos. Realice las observaciones al microscopio de cada uno de los tubos, poniendo
atencin al grado de tincin que se presenta.

3.- En base en sus observaciones seleccione el cultivo de levaduras para cumplir

mejor el objetivo de su prctica. Coloque sobre un portaobjetos unas gotas del cultivo
de levaduras con gotas del cultivo de ciliados. Observe al microscopio y realice un
esquema inicial. Siga observando cuidadosamente hasta visualizar de manera anloga
la funcin de los lisosomas en ciliados (cambio de color).

Presentacin de resultados Presentar los siguientes esquemas:

Cultivo de levaduras a 0-4C

Cultivo de levaduras a 10C
Cultivo de levaduras a 40C

LEVADURAS.

4X 10X 40X
 Cuestionario

1.- Tomando en cuenta tus observaciones experimentales, Qu ocurre con las

clulas de levadura dentro de los ciliados y por qu?

Rta: Se puede observar la decoloracin y notar como la levadura va siendo

desintegrada por los ciliados, debido al proceso de digestin intracelular de la levadura.

2.- Discuta el mecanismo que ocurre al calentar las levaduras y al agregar el

colorante.
Rta: se puede ver que al agregar el rojo cong a la levadura previamente preparada
le da coloracin a los lisosomas y se nota a los ciliados comerse a la levadura y como
cambian de color.

3.- Realice en esquemas, el origen y las funciones de los diversos tipos de lisosomas

Rta:

LOS
LISOSOMAS

PERMITE LA DIGESTION
INTRACELULAR DE
MACROMOLECULAS (SON EL
ESTOMAGO DE LA CELULAR)
EXISTEN 2 TIPOS.
LISOSOMA LISOSOMA
PRIMARIO SECUNDARIO

SE FORMAN AL
UNIRCEN CON OTRAS
SON LOS QUE SALEN VESICULAS,ADEMAS YA
DEL APARATO DE HAN REALIZADO EL
GOLGI,QUE CONTIENEN PROCESO DE LA
ENZIMAS PERO AUN NO DIGESTION Y
DEPENDIENDO DE LO
PARTICUIPAN DEL QUE HAN DIRIGIDO SE
PRIOCESO DE LA DENOMINA VACUOLAS
DIGESTION HETEROFAGICAS O
VACUOLAS
AUTROFAGICAS
 Practica 6. Tejidos vegetales: Aislamiento de cloroplastos intactos

Introduccin

La clula es la unidad bsica de la vida que contiene una amplia variedad de

distintos tipos de orgnulos. Si se requiere estudiar la funcin particular de los
cloroplastos u otro orgnulo resulta de gran valor poder aislar en estado puro el
orgnulo que interesa. La separacin de un orgnulo, por lo general se hace mediante
la tcnica de centrifugacin diferencial, la cual depende del principio de que las
partculas de tamao diverso se desplazan hacia el fondo del tubo de centrifuga a
diferentes velocidades cuando se les coloca en un campo centrfugo.

Una suspensin de material de clulas rotas se somete al principio de la fuerza

centrfuga muy baja durante un corto perodo de tiempo, de modo que solo los ncleos
y las clulas ntegras se sedimentan formando un precipitado. Con fuerzas centrfugas
cada vez mayores se pueden separar los cloroplastos y las mitocondrias en
suspensin, luego los micro somas y para finalizar los ribosomas. Este ltimo paso
requiere de una ultracentrfuga, la cual genera velocidades que producen hasta 100
000 veces la fuerza de la velocidad.

Los cloroplastos cuando son aislados cuidadosamente son capaces de reducir el

colorante 2,6-Diclorofenol-Indo fenol (DCPIP), lo cual debe ser medido
espectrofotomtricamente comparado con una muestra control. La reduccin se debe a
que capta los electrones en lugar del NADPox en la parte no cclica de la fotosntesis.

Ensayar un mtodo de aislamiento de cloroplastos y observar su funcionamiento en

condiciones ptimas y con SHOCK osmtico.

Procedimiento

Las etapas realizadas se explican en el siguiente flujo de proceso:

 Cuestionario

Explique porque durante el aislamiento de cloroplastos se trabaja a bajas

temperaturas y adems porque se utiliza una solucin buffer salina.
Analice en detalle los resultados obtenidos para cada tubo.
Describir brevemente otra tcnica para determinar fotosntesis.
Nombre la materia prima y los productos para cada fase de la fotosntesis.

A continuacin se prepara los 4 tubos de ensayo envueltos en papel aluminio:

3
(este
4
Tubo 1 2 tubo no se
(Blanco)
expone a la
luz)
Solucin de
0.5 ml 0.5 ml 0.5 ml 0.5 ml
DCPIP 0.3 M.
Buffer Salino 9.5 ml 9.5 ml 9.5 ml 9.5 ml
Suspensin
cloroplastos con 0.2 ml __ __ __
SHOCK osmtico
Suspensin de
Cloroplastos __ 0.2 ml 0.2 ml __
intactos

Con el tubo 4 calibrar a 0 % Absorbancia a una longitud de onda 450 nm.

Leer la solucin de los tubos 1, 2 y 3 antes de exponer a la luz.
Exponer tubos 1, 2 y 4 a la luz a 15 cm del foco por un 1 min. Taparlos y leer la
Absorbancia de la solucin de los tubos 1, 2 y 3.
Calibrar el aparato con el tubo 4 cada vez.
Repetir cuatro veces para un total de 5 min de exposicin (cada minuto).
Graficar: Absorbancia (450 nm) contra tiempo de exposicin a la luz

Tabla de los datos experimentales obtenidos.

Tubo/Tiempo 0 10 12
4 min 6 min
de exposicin min min min
Tubo 1.
Suspensin
2.10 2.4 2.45 2.34 2.45
cloroplastos con
SHOCK osmtico
Tubo 2.
Suspensin de
Cloroplastos
3.63 3.45 3.55 3.50 3.34
intactos
(expuesto a la
luz)
Tubo 3.
Suspensin de
Cloroplastos
2.61 2.53 2.36 2.47 2.52
intactos (no
expuesto a la
luz)
Tubo 4. Blanco
- - - - -

Grfica de absorbancia (450 nm) contra tiempo de exposicin a la luz.

4
3,5
ABSORBANCIA A 450 nm

3
2,5 Tubo 1

2 Tubo 2

1,5 Tubo 3

1
0,5
0
0 min 4 min TIEMPO6(MINUTOS)
min 10 min 12 min
 Cuestionario

Explique por qu durante el aislamiento de cloroplastos se trabaja a bajas

temperaturas?

R/ Para demorar la degradacin de los componentes celulares.

Por qu se utiliza una solucin buffer salina?

R/ Para mantener un medio isotnico estable de iones (Na+, K+ y Cl-) y estabilizar

la clula evitando su desnaturalizacin.

Analice en detalle los resultados obtenidos para cada tubo.

R/ Se logra ver una gran absorbancia cuando la solucin contiene cloroplastos

Intactos y expuestos a la luz (tubo 2).
La solucin no expuesta a la luz (tubo 3) en general presenta una disminucin
En la absorbancia, indicando que se est llevando a cabo la fotosntesis.

La solucin con SHOCK osmtico (tubo 1) se observa un aumento constante en la

absorbancia.

Describir brevemente otra tcnica para determinar fotosntesis.

Todos los mtodos para medir fotosntesis se basan en la medicin del intercambio
gaseoso (CO2 O2) que ocurre durante el proceso, entre ellos los mtodos por
produccin de oxgeno, por medicin del CO2 absorbido, por porometria y recuento de
burbujas.

Ejemplo: Determinacin del oxgeno disuelto por el Mtodo de Winkler.

Inmediatamente despus de que se haya tomado la muestra de agua, se aade 2

cm3 de cloruro de manganeso al 50 por 100 en solucin y 2 cm3 de reactivo Winkler
(100 g de hidrxido potsico y 60 g de yoduro potsico en 200 cm3 de agua) usando
pipetas* que lleguen bastante debajo de la superficie. Esto puede hacer que se
derrame algo de agua de la parte de arriba. Volver a colocar la tapa, quitando el aire, y
mezclar completamente invirtiendo y girando la botella con fuerza. Se forma un
precipitado de hidrxido manganoso, pero el oxgeno del agua puede transformar
parte de ste en una cantidad equivalente de hidrxido mangnico.
 Al volver al laboratorio, dejar reposar el precipitado. A continuacin introducir*
cuidadosamente 2 cm3 de cido sulfrico concentrado, reponiendo el tapn
rpidamente y evitando la introduccin de aire o la prdida de precipitado. Mezclar
completamente por rotacin hasta que se disuelva el precipitado; el hidrxido
mangnico oxida el yoduro potsico en una cantidad equivalente a la de yodo
libre. Puede hacerse una estimacin aproximada a partir del color del yodo. La
comparacin con cristales standard en un comparador B.D.H o la titulacin darn una
determinacin ms precisa.

Titulacin: girar para mezclar; a continuacin, usando una pipeta, llevar 100 cm3 de
la botella de muestra a un recipiente cnico. Titular inmediatamente con solucin N/80
normalizada de tiosulfato sdico hasta que solamente quede un dbil color amarillo;
agregar unas pocas gotas de solucin de almidn recin preparadas, y a continuacin
aadir ms tiosulfato gota a gota justamente hasta que desaparezca el color azul. Cada
cm3 de tiosulfato utilizado es equivalente a 1 mg de oxgeno por litro; as, x cm3 de
tiosulfato implican una concentracin de oxgeno de x mg por litro.

Nombre la materia prima y los productos para cada fase de la fotosntesis.

A Sachs se debe la formulacin de la ecuacin bsica de la fotosntesis:

6 CO2 + 6 H2O + Energa solar C6H12O6 + 6 O2
(Dixido de carbono + agua + Energa Lumnica Glucosa + Oxigeno)

DCPIP
El 2,6-diclorofenolindofenol es un compuesto qumico utilizado como tinte
redox. Cuando se oxida, DCPIP es azul con una absorcin mxima a 600 nm; cuando
se reduce, DCPIP es incoloro.
DCPIP se puede usar para medir la tasa de fotosntesis. Es parte de la familia
de reactivos de Hill. Cuando se expone a la luz en un sistema fotosinttico, el tinte se
decolora por reduccin qumica. DCPIP tiene una mayor afinidad por los electrones que
la ferredoxina y la cadena de transporte de electrones fotosinttica puede reducir
DCPIP como un sustituto de NADP+, que normalmente es el portador final de
electrones en la fotosntesis. A medida que DCPIP se reduce y se vuelve incoloro, el
aumento resultante de la transmitancia de la luz se puede medir usando
un espectrofotmetro.

(Color azul) (Incoloro)

 Practica 7. Meiosis y Mitosis

Objetivo

Aprender a diferenciar los periodos del ciclo celular.

MATERIAL

Microscopio
Aceite de inmersin.
Acetocarmin
Metanol,
Bistur
Micro preparado que ilustran los de mitosis y meiosis.

Procedimiento
1. Con ayuda de una pinza retire la capa externa marronacea o roscea y lave con
abundante agua, esto se realiza para eliminar restos de sustancias con las que
frecuentemente han sido tratadas para inhibir o redactar la germinacin de las raicillas.

2. Llene un vaso de precipitados con agua y coloque un bulbo de cebolla sujeto con dos o
tres palillos de manera que la parte inferior quede inmersa en el agua.

3. Pngalo a germinar a 25C a temperatura ambiente durante 3 das, al cabo de estos

aparecern numerosas raicillas en el crecimiento de unos 3 o 4 cm. De longitud.

4. Revise diariamente y procure que la corona no se deseque para lo cual es necesario

rellenar con agua cada 24 horas.

5. Cuando las races tengan entre 0.5 y 1 cm de longitud, realice cortes de raz de
aproximadamente 2 -3 mm a partir del pice.

6. Colquelas en una lmina portaobjetos. Adiciona una gota del colorante acetocarmin.

7. Coloque el cubreobjetos con mucho cuidado sobre la raz. Con ayuda de la punta de
una lanceta, de unos golpecitos sobre el cubreobjetos sin romperlos, de modo que la
raz quede extendida.
8. Use papel absorbente para retirar el exceso de colorante realice una suave presin
evitando que el cubreobjetos resbale si la preparacin est bien aceptada no hay
peligro de obtura por mucha presin que se realice.

9. Selle todos los bordes del cubreobjetos con esmalte trasparente para evitar que se
seque y de esta manera conservar la preparacin durante varios das.

10. Coloque la preparacin al microscopio e inicie la observacin con el objetivo de 10x e

identifique las clulas.

11. Cambie al objetivo de 40x para detallar las clulas. Observe los ncleos y cromosomas
en color rosceo morado.

12. Ubique el objetivo de 100x y escriba sus observaciones notando las diferencias en
cada uno de los aumentos mencionados.

13. Trate de observar determinadamente las preparaciones y distingan clulas en interface

y clulas en divisin y dentro de estas, las diferentes etapas de la mitosis.

Presentacin de resultados

MEZCLA CON GLISEROL

1. El glicerol es una molcula de tres carbonos similar al alcohol. Aparece naturalmente
en el cuerpo como un componente de la grasa almacenada; un pequea cantidad
tambin est presente en los fluidos corporales como glicerol libre. Cuando el glicerol
es ingerido, es absorbido e incrementa la concentracin (trmino tcnico: osmolaridad
o tonicidad) del fluido en la sangre y en los tejidos. La concentracin de estos fluidos se
mantiene constante a travs del cuerpo, por lo cual el agua consumida con glicerol no
es excretada hasta que el glicerol extra es o eliminada por los riones o degradado por
el cuerpo (Freund y cols 1995).

MEZCLA CON BUTANOL

2. El n-butanol se emplea como disolvente de pinturas, lacas, barnices, resinas naturales

y sintticas, gomas, aceites vegetales, tintes y alcaloides. Se utiliza como sustancia
intermedia en la fabricacin de productos qumicos y farmacuticos, y en las industrias
de cuero artificial, textiles, gafas de seguridad, pastas de caucho, barnices de laca,
impermeables, pelculas fotogrficas y perfumes. El sec-butanol se utiliza tambin
como disolvente y producto qumico intermedio, y se encuentra en lquidos hidrulicos
de frenos, limpiadores industriales, abrillantadores, decapantes de pinturas, agentes de
flotacin para minerales, esencias de frutas, perfumes y colorantes.

MEZCLA CON METANOL

3. El Metanol se usa en sistemas de refrigeracin, por ejemplo en plantas de etileno, y
como anticongelante en circuitos de calentamiento y enfriamiento. Sin embargo, su uso
como anticongelante en motores ha disminuido drsticamente gracias al uso de
productos derivados del glicol. El Metanol se adiciona al gas natural en las estaciones
de bombeo de las tuberas para prevenir la formacin de hidratos de gas a bajas
temperaturas y se puede reciclar despus de que se remueve del agua. El Metanol
tambin se usa como un agente de absorcin en depuradores de gas para remover,
por ejemplo, dixido de carbono y sulfuro de hidrogeno. Una gran cantidad de Metanol
se usa como solvente. El Metanol puro no se usa comnmente como solvente, pero se
incluye en mezclas solventes.

MEZCLA DE ACIDO CITRICO

4. o es un inhibidor de la cristalizacin de sales de calcio (quelante clcico) y su

estimacin puede ser de valor en la investigacin de un paciente con riesgo de
nefrolitiasis. Adems, es un potente inhibidor de la aglomeracin de cristales de oxalato
de calcio preformados.
Se sabe que la formacin de clculos se debe a cambios fisicoqumicos que ocurren en
la orina, entre los ms importantes el desequilibrio entre los constituyentes formadores
de clculos y los inhibidores as como el pH urinario. Un nmero importante de
inhibidores han sido identificados, pero el pirofosfato, el magnesio y el citrato son
responsables del 77% de esta inhibicin. Resulta interesante que slo el citrato
contribuye con el 50% de esta actividad inhibitoria.
Ha sido ampliamente reconocido que la composicin de electrolitos urinarios es
frecuentemente anormal en pacientes con nefrolitiasis clcica. Adems de la
hipercalciuria otros desrdenes identificados incluyen hiperuricosuria, hiperoxaluria y
excesiva acidez en la orina.
 MEZCLA DE OXALATO DE AMONIO

5. Tambin llamada anticoagulante de Wintrobe. Contiene oxalato de amonio, oxalato de

potasio, formol y agua.
Para
5ml de sangre se utilizan 0.5ml de la mezcla de anticoagulante
(desecado en estufa a 37C o a temperatura ambiente antes de
utilizarlo); esta solucin anticoagulante acta como tal para fijacin
de calcio y debe usarse siempre desecado para no diluir la sangre.
MEZCLA DE SSN BUFFER SALINO

1. Preparacin de mezclas
2. CLASIFICACIN DE LAS SOLUCIONES INTRAVENOSAS
3. CRISTALOIDES O COLOIDES
4. Cristaloides Mantienen equilibrio hidroelectroltico. Aportan energa El
50% del volumen tarda 15 en abandonar el espacio intravascular. Coloides Actan
como expansores plasmticos. Efectos hemodinmicos ms rpidos y duraderos.
Favorecen perfusin tisular.
5. Hipotnicas SS1/2 o SS0,45% SSN o SS0,9% Isosmticos Lactato de Ringer
Glucosadas 5% AD; SSN Hipertnicas SS 3%; ss7,5% Glucosadas 10% y 50% TIPOS
DE CRISTALOIDES
6. Las soluciones ms sencillas estn formadas por dos componentes llamados
soluto y solvente. El soluto es la fase dispersa y se encuentra en menor proporcin en
la solucin. LAS SOLUCIONES SON MEZCLAS HOMOGNEAS FORMADAS POR
DOS O MS SUSTANCIAS.
7. Cuando las clulas estn en una solucin isotnica,
 Cuestionario

Qu etapa de la meiosis y mitosis observo?

RTA:
En muchas formas, la meiosis es muy similar a la mitosis. experimentan
cuatro etapas: profase, metafase, anafase y telofase.

Qu proceso se est desarrollando en las etapas observadas?

RTA:

LA MEZCLA DEL GLISEROL EN LA SANGRE: que las molculas del soluto son
muy grandes y se separan.

BUTANOL: Es ms liviano que el glicerol.

METANOL: Cujalo la sangre.

ACIDO CITRICO: Oscureci la sangre.

OXALATO DE AMONIO: Aclaro la sangre.

Qu tipo de clulas se estn observando?

RTA: Se pueden observar la clula diploide y la clula haploide.

Cuntos cromosomas poseen las clulas en mitosis?

RTA: Cada una de las clulas humanas posee 46 cromosomas.

Cuntos cromosomas poseen las clulas en meiosis?

RTA: En la meiosis la cosa es ms complicada, debido a que las cel. Se duplican

cierto!! (96 cromosomas) pero pasa que los cromosomas se dividen (ojos los
cromosomas, no las cel.) en cromatides(que pueden ser consideradas como
cromosomas) por lo tanto de la meiosis el resultado es de184 cromatides,, la diferencia
entre ambos radica en que los las cel. Resultantes en la meiosis poseen cromosomas
partidos a la mitad que se denominan cromatides..
 CONCLUSIONES

En esta prctica de laboratorio entendimos que las normas de bioseguridad son muy
importantes para el desarrollo del aprendizaje y el ponerlas en prctica estaremos
cuidando nuestra salud y la de nuestros compaeros.

Los microscopios son herramientas fundamentales para el conocimiento de algunos

organismos que no podemos ver a simple vista.

Se pudo observar que en nuestro medio ms de una forma de vida y que cada una
es importante y ejerce un papel fundamental dentro de nuestra existencia.

Los cloroplastos son los orgnulos de las clulas vegetales donde se realiza la
fotosntesis al convertir la energa lumnica en energa qumica (ATP).

En la prctica se realiz un protocolo para el aislamiento de cloroplastos de hojas de

espinaca que permiti conocer los principales reactivos, soluciones, materiales
biolgicos, equipos, y condiciones necesarias para reproducir la funcin de los
cloroplastos en condiciones de laboratorio.

En las reacciones de las soluciones se desprendi oxgeno, el cual fue difcil de

detectar.

El DCPIP se emple como un aceptor de electrones reemplazando la ferredoxina y

el NADP.

Se explic el de mtodo de Winkler como otra alternativa para determinar la

fotosntesis.
 PREGUNTAS

- que es diclorofenol

Es un derivado del clorado del fenol con la frmula qumica C6H4Cl2O

Utilizado principalmente en la preparacin del herbicida cido 2,4-
diclorofenoxiactico.
Esta sustancia puede ser absorbida por los tejidos biolgicos por exposicin a agua
en la que se encuentre disuelto o a travs de la ingestin de pescado contaminado.
Tambin se est expuesto, por inhalacin, en las industrias en las que se usa como
producto como tratamiento de madera, textiles, papel y fabricacin de pesticidas,
desinfectantes.

- Cascada de coagulacin

El proceso de coagulacin que lleva a la hemostasia consiste en un conjunto complejo

de reacciones de proteasas en el que participan aproximadamente 30 protenas
diferentes.22 Estas reacciones convierten fibringeno, una protena soluble, en
filamentos insolubles de fibrina, que, con las plaquetas, forman un trombo estable.

Factores de coagulacin

Fa
Caractersticas
ctor

I Fibringeno, protena soluble del plasma

II Protrombina, est pegada a la membrana plaquetaria (Sustancias Adsorbidas).

III Factor tisular, se libera del endotelio vascular a causa de una lesin

IV Calcio

V Proacelerina, (factor lbil) pegada a la membrana plaquetaria

VII Proconvertina (Factor estable)

VIII Factor anti hemoflico A, est pegado a la membrana plaquetaria

Factor Christmas o beta adrenrgico (tambin llamado anti hemoflico B), est pegado a
IX
la membrana plaquetaria

X Factor de Stuart-Prower, est pegado a la membrana plaquetaria

XI Factor antihemoflico C

XII Factor de Hageman

XIII Factor estabilizante de la fibrina

XIV Protena C o autotrombina II-A, dependiente de la vitamina K

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https://es.wikipedia.org/wiki/Permeabilidad_selectiva consultado el da 3 de noviembre
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Definicin de la reaccin del butanol en la sangre
https://www.ecured.cu/Butanol

Definicin de la reaccin del metanol en la sangre

http://documentacion.ideam.gov.co/openbiblio/bvirtual/018903/Links/Guia19.pdf

Definicin de la reaccin del cido ctrico en la sangre

https://www.infobioquimica.com/wrapper/CDInterpretacion/te/bc/010.htm

Definicin de la reaccin del oxalato de amonio en la sangre

https://quimicoclinico.wordpress.com/2008/03/27/anticoagulantes/

Definicion de la reaccin de ssn buffer salino en la sangre.

https://es.slideshare.net/robertomanotasm/clasificacin-delassolucionesintravenosa-
ssssss

Definicin de las etapas de la meiosis y mitosis.

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