TEMA 3-Cromatografía de Gases

TEMA 3.
CROMATOGRAFA DE
GASES
TCNICAS ANALTICAS DE
SEPARACIN
1
1. INTRODUCCIN
Proceso de separacin en el que los
analitos se distribuyen entre una fase
estacionaria y una fase mvil.
Cuanto mayor sea la afinidad que una

sustancia presenta por la fase
estacionaria, ms tiempo
permanecer unida a ella y por tanto
su tiempo de retencin ser mayor.
2
1. INTRODUCCIN
Equilibrio de distribucin entre FE y FM
Objetivo
Separar sustancias principios termodinmicos
Temperatura
Aumenta Ec
Impide interacciones entre analito y FE
Elucin
3
1. INTRODUCCIN
FASE MVIL: gas
Se llama gas portador
Normalmente He, H2, N2, Ar, CO2
Depende del detector, eficacia y rapidez deseada
FASE ESTACIONARIA: columna cromatogrfica

Lquido no voltil
recubre el interior de la columna o soporte slido C. gas-liq
de reparto
Slido
El analito se adsorbe sobre las partculas slidas de la FE C.
gas-sol de adsorcin
ANALITO: trmicamente estable

Gas
Lquido voltil
4
2. COMPONENTES INSTRUMENTALES
5
1. EL PROCESO DE SEPARACIN
ELUCIN
6
3. INTRODUCCIN DE LA MUESTRA
3.1. COMPONENTES DEL INYECTOR
Septo
Debe cambiarse cada
20 inyecciones
manuales o 100 con
automuestreador
7
Tipos de septum
8
TIPOS DE FRRULAS
9
Las impurezas se acumulan en el inserto que debe
cambiarse peridicamente
La superficie del vidrio de borosilicato es cida

contiene silanoles libres, silanoles hidratados o puentes
siloxano
La desactivacin permite bloquear dichos grupos con

grupos funcionales no polares, creando una superficie
ms inerte
trimetilclorosilano o dimetildiclorosilano en tolueno o
hexano seco
Rellenos de lana de vidrio silanizada, microbolas de
vidrio, vidrio sinterizado o adsorbente
10
3.2. TIPOS DE MUESTRA
MUESTRAS GASEOSAS
Jeringas especiales con mbolo de tefln
0,5-100 mL (100 mL es necesario preconcentrar)
Vlvula de apertura y cierre: sistema de toma de muestra
Dificultad para medir volumen y Sobrepresin
Vlvulas de inyeccin
MUESTRAS SLIDAS
SHS, DHS, SPME (static heaspace, dynamic headspace, solid-
phase microextraction)
MUESTRAS LQUIDAS
Acero
1-10 L o grandes volmenes (muestras limpias, trazas)
11
3.3. DISCRIMINACIN Y
ENSANCHAMIENTO DE BANDAS
Calidad de la inyeccin:
ENSANCHAMIENTO DE BANDAS COMPOSICIN DE LA BANDA EN CABEZA DE COLUMNA

DISTINTA A LA MUESTRA/DISCRIMINACIN
Tcnica de inyeccin Inserto

Banda estrecha Analitos poco voltiles
Degradacin analitos
respecto a disolvente
Contaminacin
Volumen
Mnimo, concentrado Temperatura alta en Analitos con
inyector, termosensibles volatilidades diferentes
Temperatura columna
recondensacin
Volumen inyeccin
ensanchamiento banda
pequeo
(columnas capilares)
12
Ensanchamiento de banda cromatogrfica por la inyeccin:
Velocidad de entrada de la muestra:

Ensanchamiento en el tiempo
Inyecciones rpidas, inyector automtico
Dispersin de la muestra en la columna:

Ensanchamiento espacio
Condensacin del disolvente: 40 C por debajo p.e. disolvente
La muestra debe tener 104 ms disolvente que analito
Enfoque
A travs de la FE: elevada solubilidad de analito en FE
Trmicamente: Baja T. Espesor de FE 2 m
150 C por debajo del p.e. solutos
< 25 C, crioenfoque (CO2 o N2). Analitos muy voltiles
13
ENFOQUE MEDIANTE DISOLVENTE picos muy estrechos
El disolvente se evapora en el inyector y condensa en

cabeza de columna
Los componentes ms voltiles al tener volatilidades
similares a ste se enfocan en su cola
Inyeccin
Se desarrolla una zona

inundada por el disolvente
con los analitos disueltos
Al aumentar T se evapora
el disolvente enfocndose
los analitos en una14
banda
estrecha
La condensacin del disolvente crea una pseudofase
Disminuye la relacin de fases columna vol. gas portador/vol. fe
Modifica la constante de particin masa soluto en f. liq/en gas portador
GAP DE RETENCIN. TUBO HUECO:
Reduce la longitud de la zona inundada de la columna
Protege de contaminaciones en la columna
15
SOLVENT FOCUSSING
16
3.4. TCNICAS DE INYECCIN
Limpiar la jeringa varias veces con un disolvente adecuado
En el que est disuelto el analito
De polaridad adecuada para la FE de la columna
Tcnica sandwich o del bolo de disolvente

Primera burbuja aire:
cuando la muestra llega a la jeringa sta ya est caliente y la
vaporizacin es muy rpida (picos estrechos hasta para los
pesados)
Evita prdida de los compuestos ms voltiles (discriminacin)
Segunda burbuja aire: Evita mezcla de muestra y disolvente
Disolvente: limpia restos de muestra de la jeringa
ltima burbuja: elimina el disolvente
disolvente 17
Tcnica de aguja caliente
Se toma la muestra y se aspira aire que llena la aguja
Se calienta en inyector de 2-3 s
Se inyecta rpidamente
Adecuada en inyecciones manuales, muy reproducible
Tcnica aguja llena

Idem. Pero la aguja est llena de muestra
Tcnica aguja fra

Inyeccin muy rpida de la muestra, la aguja est llena
de aire
18
Efecto de la discriminacin como consecuencia de la tcnica de
inyeccin empleada para n-alcanos de diferente nm. At. C
19
K. Grob, H.P. Neumon, J HRC & GC, 2 (1979) 15
3.5. SELECCIN DEL INSERTO
Inserto recto es menos eficiente al transferir la energa
La base metlica del inyector se enfra ms rpidamente que el
vidrio
La columna est ms fra
Previamente se evapora disolvente y voltiles y se enfra
20
El volumen de la muestra al vaporizarse < volumen del
inserto para evitar flashback
S.e. la muestra se expandir por todo el volumen
disponible.
Puede producir prdida de voltiles (discriminacin)
La muestra debe vaporizarse en la base
no en el centro
Flashback
Picos fantasma
Picos con cola
Se llena linea purga y otras
21
La lana de vidrio debe estar en la base para vaporizacin
lo ms abajo posible
Cuanto ms estrecho mejor porque aumenta la velocidad
lineal del gas portador
Estrechamiento inferior: mejor para fraccin menos voltil
Estrechamiento superior: mejor para fraccin voltil
22
Flashback. Expansin del disolvente
Inserto 4 mm y 78,5 mm tiene un volumen 1 mL
T P Volumen
Agua 250 C 0,8 bar 1L1400 L
Metanol 1L567 L
Cloruro metileno 1L380 L

Acetato etilo 1L235 L
Pentano 1L197 L
Hexano 1L176 L
Isooctano 1L139 L
23
Inserto recto 1.2 mm/ Inserto lana vidrio centro 4 mm
Inserto recto estrecho
Mejor para los ms voltiles: Evita prdida por expansin
inicial del disolvente
Vaporizacin en zona inferior y mayor velocidad lineal gas
Inserto lana vidrio en centro

Vaporizacin en el centro y
menor velocidad gas
Se pierden los ms voltiles
Los menos voltiles se
vaporizan con inyector caliente
24
Inyector Columna Modo Muestra Comentarios Muestra
concentracin a columna
Con/sin Capilar Divisin Alta Muy poca
divisin
Divisin a pulsos (pulsed split) Alta Puede ser til con Muy poca
3. INTRODUCCIN DE MUESTRA
inyecciones de gran
Sin divisin (splitless) Baja volumen Toda
Sin divisin a Baja til con inyecciones Toda

Tipos de inyectores
pulsos (pulsed de gran
splitless) volumen
Refrigeracin Capilar n/a Baja o lbil Discriminacin y Toda
en columna descomposicin
mnimas
Empaquetada Empaquetada n/a Cualquiera Toda
con purga Semicapilar n/a Cualquiera OK si la resolucin Toda
no es crtica
Vaporizacin a Capilar Divisin Alta Muy poca
temperatura Divisin a pulsos Alta Muy poca
programada (pulsed split)
Sin divisin Baja Toda
(splitless)
Sin divisin a Baja Toda
pulsos (pulsed
Splitless)
Eliminacin de Baja Inyecciones La mayora
disolvente mltiples con
analitos
concentrados y
salida de disolvente
Interfase de Capilar Direct (Directa) Baja El menor volumen Toda
voltiles muerto
Divisin Alta Flujo mximo = l00 Muy poca
ml/min 25
Sin divisin Baja Toda
(splitless)
3.6. TIPOS DE INYECTORES
3.6.1. INYECTOR PARA COLUMNAS EMPAQUETADAS
Columnas empaquetadas
3-4 mm x 1-5 m
Semicapilares
560 m
Poca resolucin
Poco habituales
26
3.6. TIPOS DE INYECTORES
3.6.2. INYECCIN CON DIVISIN (SPLIT)
Parte de la muestra sale por el split
Inyeccin de 1 l 0,5 mL de gas y parte sale por septum
Razn de divisin: 50:1-600:1 (flujo split:flujo columna)
T alta: evita prdida de slo los componentes ms voltiles
T muy alta: La muestra se descompone
Split
27
3.6.2. INYECCIN CON DIVISIN (SPLIT)
Entra en columna 0,2-2% muestra
Para una buena resolucin
Mnima cantidad de muestra 1 mL
1 ng analito
Aconsejable
Cuando concentracin > 0,1 %
Compuestos muy voltiles, los picos aparecen
inmediatamente despus del disolvente
Las muestras no pueden diluirse ms (p.e. disolventes)
Muestras sucias
Se usa una columna de alta resolucin que no admite
mucha carga
28
INYECCIN CON DIVISIN (SPLIT)
AQU
29
3.6.3. INYECCIN SIN DIVISIN (SPLITLESS)
Anlisis de trazas (<0,01%)
No tiene cmara de mezcla
Entra en la columna ~80%
La T suele ser menor
La muestra ms tiempo en inyector
Puede descomponerse
Banda ancha
Splitless
30
3.6.3. INYECCIN SIN DIVISIN (SPLITLESS)
A:
Split
T cte 75 C
Flujo divisin alto
La gua se limpia constantemente
B:
Se purga muy lentamente la gua
La muestra pasa a la columna durante
mucho tiempo
Las reas son mayores porque llega todo
C:
Splitless pero:
purga la gua a los 30 s eliminando vapores
D:
Igual a C pero:
enfriando inicialmente columna a 25C
31
3.6.4. INYECCIN EN COLUMNA (ON-COLUMN)
Liner gua la aguja para que entre en la columna que se fija

mediante un estrechamiento
Para columnas 0,25-0,3 mm DI
la mejor resolucin: jeringas de slice. Vlvula, no septum
Para columnas 0,53 mm DI jeringas estndar
On-column
32
3.6.4. INYECCIN EN COLUMNA (ON-COLUMN)
Para solutos que se descomponen por encima de su Pe
Mejor forma en anlisis cuantitativo por GC

Ausencia de discriminacin, la muestra se vaporiza en
columna
No hay descomposicin, la T es ms baja
T inicial debe ser baja (p.e. 50 C) para que condensen

en columna en banda estrecha. Luego aumento brusco
La muestra debe estar muy limpia

La columna se deteriora antes
33
3.6.5.VAPORIZACIN DE TEMPERATURA PROGRAMADA
PTV
El elemento calefactor enrollado que lo calienta

rpidamente
Dispone de un circuito de refrigeracin por aire o lquido
34
3.6.5.VAPORIZACIN DE TEMPERATURA PROGRAMADA
Inyeccin de la muestra con liner fro

Evita discriminacin en la aguja
Aumento programado de la T para vaporizacin
El disolvente se elimina de forma controlada
Se puede emplear en modo split o splitless
Combina ventajas inyector con/sin divisin y on-column
Se puede enriquecer la muestra dentro del inyector
Introduciendo grandes volmenes de muestra
Liner empaquetado
La lana de vidrio puede estar en todo el liner
35
3.7. CONSUMIBLES
TIPOS DE SEPARADORES
36
3.7. CONSUMIBLES
37
3.7. CONSUMIBLES
38
CUESTIONES
1. Si la muestra se prepara mediante purga y atrapamiento,
cul sera el modo de inyeccin adecuado? Sin divisin
2. Seleccionar el modo de inyeccin adecuado en cada caso:

(a) plaguicidas a nivel de traza en un extracto de una muestra de agua de
un ro. On-column, sin divisin, inserto con adsorbente, grandes
volmenes, pulsado
(b) hidrocarburos en extracto de gasolina. Con divisin
(c) inyeccin de grandes volmenes de una muestra sucia. Con divisin

pulsado
(d) Aromas en zumo de naranja en un extracto de acetato de etilo

(volatilidad de los analitos muy prxima a la del disolvente). Con divisin
39
4.COLUMNAS
TUBULARES ABIERTAS
Largas y estrechas
Fabricadas en slice fundida SiO2
Recubiertas de poliimida (plstico que resiste 350 C)
Dimetro interno: 0,1-0,53 mm
Longitud: 15-100 m
Respecto a las empaquetadas:

Mejor resolucin
Mayor rapidez
Mayor sensibilidad
Menor capacidad de muestra
40
4.COLUMNAS
TUBULARES ABIERTAS
41
4.COLUMNAS TUBULARES
ABIERTAS
Comparacin de los picos cromatogrficos obtenidos con una
columna empaquetada (izda) y otra capilar (dcha)
Empaquetada: 1-5 m y 3-4 mm, semicapilar: 560 um
Capilares: 15-100 m y 0,1-0,53 mm
42
ABIERTAS
TIPOS:
Pared recubierta (WCOT Wall Coated Open Tubular)

Interior de la columna cubierta de FE lquida
Soporte cubierto (SCOT (Support Coated Open Tubular)
Pared interior de columna con soporte slido cubierto de FE

lquida
Capa porosa (PLOT Porous layer Open Tubular)
Pared interior de columna recubierta de FE slida
43
ABIERTAS
Las columnas FSOT son parecidas a
WCOT pero el material es diferente,
en las FSOT es slice fundida y en las
WCOT es vidrio.
Sin embargo las FSOT no estn
disponebles a dimetros > a 0.53 mm
y las WCOT s
F.S.O.T. (Fused Silica Open Tubular)
44
ABIERTAS
45
ABIERTAS
Columnas de pared recubierta (WCOT)
Recubiertas de FE liq. de 0,1-0,5 m espesor
Al disminuir espesor:
Aumenta resolucin
Disminuye tiempo de retencin
Disminuye capacidad de carga
Recubierta de soporte (SCOT)

Pared interior de columna con soporte slido cubierto
de FE lquida
Capa porosa (PLOT)

Las partculas slidas son la FE
46
ABIERTAS
Capa porosa (PLOT)
Mayor rea superficial
Mayor capacidad de carga
Ej. FE de carbn poroso de

0,2 m espesor adherida sobre
la pared interior de una columna
tubular abierta
47
ABIERTAS
Eleccin de la FE lquida
Lo semejante disuelve a lo semejante
Analito polar FE polar y viceversa
Polaridad de solutos:
48
Fases estacionarias
Polidimetilsiloxano
Polietilenglicol
49
ABIERTAS
TIPOS DE FE Y DISOLVENTES RECOMENDADOS
50
51
SKOOG,Douglas y LEARY,James. Anlisis Instrumental. 4 Edicin. McGraw-Hill. Espaa.1994
ABIERTAS
Fases estacionarias de uso
frecuente en CG capilar
52
ABIERTAS
La columna se degrada
Cuando envejece
FE se altera dejando grupos silanol descubiertos (Si-O-
H)
Aumentan las colas
La silanizacin reduce las colas porque los OH

son bloqueados con grupos no polares de
trimetilsililo
Contacto con oxgeno a altas temperaturas

Se reduce modificando la superficie de la slice
Enlaces covalentes con reactivos enlazada
Enlaces covalentes consigo misma entrelazada
53
ABIERTAS
Eleccin FE slida:
Almina Al2O3
Tamices moleculares
Materiales inorgnicos o polmeros provistos de
grandes cavidades donde las molculas pequeas
penetran y se retienen parcialmente
Pueden separar H2, O2, N2, CO2 y CH4
Retienen fuertemente el agua y los gases se secan
Pueden regenerarse
Liberando agua
Mediante calentamiento a 300 C a vaco o bajo corriente de N2
54
ABIERTAS
Estructura de un tamiz molecular de zeolita

Na12(Al12Si12O48)27H2O
a) Red de aluminosilicato de un cubo-octaedro
de zeolita
b) Interconexin de ocho cubo-octaedros que
forman una cavidad en cuyo interior pueden
alojarse pequeas molculas
55
ABIERTAS
FASE ENLAZADA QUIRAL: PTICAMENTE ACTIVA
FE basada en el aa quiral
L-valina
Separa enantimeros
Separa enantimeros
voltiles derivados de
aas
56
ABIERTAS
Todos los aas naturales son L
Midiendo la fraccin de aas que se han

transformado en D en un fsil es posible
estimar la edad hasta 500 m.a.
57
ABIERTAS
Ciclodextrinas enlazadas con la FE
Tipo de FE quiral para CG o CL
Son azcares cclicos
Tienen cavidad quiral hidrfoba 0,78 mm
diam.
Los -OH se pueden bloquear con grupos
pentilo (-C5H11) o trifluoroacetilo
[-C(C=O)CF3]. Que disminuyen la
polaridad.
Permiten la separacin de enantimeros
de un determinado compuesto, ya que
cada unos de llos tiene mayor o menor
afinidad por la cavidad que se produce.
58
5.COLUMNAS EMPAQUETADAS
Soporte slido:
Partculas finas
Tierras de diatomeas (esqueletos silceos de algas)
Se silanizan para reducir puentes de H con compuestos
polares
Tefln
Para solutos que se unen con ms fuerza
Polmero qumicamente inerte CF2-CF2-CF2-
Temperatura < 200 C
Recubierto de:
Slido adsorbente
El slido mismo es la FE
59
Menor eficacia
tiles:
a escala preparativa
Para separar gases, se retienen poco
Material:
Acero inoxidable
Nquel
Vidrio
Dimensiones:
3-4 mm dimetro
1-5 m longitud
60
Gran uniformidad en tamao partcula:
Disminuye el trmino de caminos mltiples A en la Ec. Van Deemter
Aumenta resolucin
Disminuye H
Si las partculas son pequeas:

el soluto alcanza rpido el equilibrio mejora eficacia
Disminuye espacio entre partculas se requiere ms presin para forzar paso FM
Tamao partcula
m
nmero de mallas:
nmero de aberturas del tamiz por unidad de longitud
Partcula de 100/200 mallas pasa por tamiz de 100 mallas pero no de 200
16 mallas = aberturas son cuadrados de 1.18 mm
20 mallas = aberturas son cuadrados de 0.85 mm
Si una muestra pasa por 16 mallas y no por 20 tenemos partculas con dimetro
entre 0.85 y 1.18 mm. Partculas = 16/20 mallas
61
COMPARACIN DE COLUMNAS
USADAS EN CG
62
6.NDICE DE RETENCIN
Los tiempos relativos de retencin varan a medida que vara la
polaridad de la FE
(a) columna tubular abierta no polar de poli(dimetilsiloxano)

(b) columna tubular abierta muy polar de poli(etilenglicol)
(a) tr segn volatilidad

(b) tr: alcanos <cetonas< alcoholes
Cetonas: interacciones dipolares
Alcoholes: Puentes de H
63
6.NDICE DE RETENCIN
El ndice de retencin relaciona el tiempo de retencin
de un soluto con los tiempos de retencin de los
alcanos lineales
El ndice de Retencin de Kovats (I) de un alcano lineal

es igual a 100 veces su nmero de carbonos
Octano: I = 800, Nonano: I = 900
Un compuesto entre el octano y el nonano tiene un I

intermedio entre 800 y 900:
64
6.NDICE DE RETENCIN
log tr(desconocido) - log tr(n)

ndice de retencin : I 100n (N - n)
log tr (N) - log tr(n)
n: nmero de carbonos del alcano ms corto

N: nmero de carbonos del alcano ms largo
tr(n): tiempo de retencin ajustado del alcano ms
corto
tr(N): tiempo de retencin ajustado del alcano ms
largo
65
6.NDICE DE RETENCIN
El I del benceno en poli(dimetilsiloxano) es 657 por lo que eluye entre
hexano y heptano usando FE no polar
El nitropropano eluye justo despus que el heptano en la misma columna
A medida que bajamos en la tabla aumenta la polaridad de la FE
Con la ltima FE, el benceno eluye despus del decano y el nitropropano
despus del n-C14H30 (tetradecano)
66
7.PROGRAMACIN DE
TEMPERATURA Y PRESIN
Aumentando la
temperatura de la
columna:
Aumenta la presin de
vapor de los solutos
Disminuye el tiempo de
retencin
Los picos son ms
pronunciados
(a) 150 C
Los ms voltiles salen
juntos y los menos no
salen
(b) Rampa 50-250 C a
8C/min
67
7.PROGRAMACIN DE
En la CG la "afinidad" de un soluto por la FM
depende
la volatilidad del soluto

su presin de vapor,
es funcin de la estructura del compuesto y de la

temperatura.
Modificndose la temperatura, se altera tambin la
presin de vapor y, por consiguiente, la "afinidad"
de una sustancia por la FM
La temperatura debe ser compatible con la FE

empleada, pues las FE lquidas se volatilizan o se
degradan con temperaturas excesivas
68
7.PROGRAMACIN DE
Si la temperatura de la columna fuera excesivamente

baja
los constituyentes de la muestra tendrn presiones de vapor
muy bajas
permaneceran casi todo el tiempo disueltos en la FE,
su migracin por la columna ser muy lenta.
Tiempo excesivo de anlisis
picos muy anchos y de baja intensidad (cuanto ms tiempo
pasa la sustancia en la columna, ms se dispersa).
Eventualmente, el compuesto no eluye de la columna.
Si la temperatura muy elevada

implica presiones de vapor muy grandes
los compuestos apenas pasan algn tiempo disuelto en la FE,
eluyen muy rpidamente de la columna sin ser separados.
69
7.PROGRAMACIN DE
En el caso de muestras que contienen constituyentes
con presiones de vapor muy diferentes,
si la temperatura se ajusta para la separacin apropiada

de los compuestos menos voltiles (temperaturas altas),
los voltiles sern retenidos muy poco y no sern
separados.
Por otro lado,
si se hace el ajuste para separar los voltiles (temperaturas
bajas), los constituyentes pesados se presentarn sobre la
forma de picos excesivamente anchos y bajos o sern
retenidos en la columna.
Este problema puede controlarse usando la

programacin lineal de temperatura (PLT) gradiente
de T
70
7.PROGRAMACIN DE
El programa de temperatura puede ser ms complejo y
separar hasta 50 plaguicidas y PCBs:
GC-MS/MS: cromatgrafo de gases (3800 Varian) con detector de

masas (Saturn 2000 Varian). GC-ECD (6890N Agilent Technologies)
Columna 30 m x 0,25 mm x 0,25 m
He 1 ml/min
1l extracto
Inyector 250 C; modo sin divisin de flujo
Trampa (200 C), manifold (50 C) y lnea de transferencia (280 C)
PROGRAMA CROMATOGRFICO
Temperatura C C/min Tiempo (min) Tiempo final
60 2 2
180 25 10 16,8
300 4 5 51,8
71
7.PROGRAMACIN DE
Si T aumenta mucho
Descomposicin trmica de analito y FE
Generalmente los CG tienen controles electrnicos de la

presin del gas portador
Al aumentar, aumenta el caudal
Puede hacerse programacin de presin (de caudal)

Para reducir los tr de los compuestos que eluyen ms tarde
til para analitos lbiles
72
8.GAS PORTADOR
El He es el ms comn y compatible con la mayora de
detectores
En FID el N2 da mejores LODs
H2, N2 y He dan aproximadamente la misma H ptima (0,3

mm) a caudales diferentes
Los caudales ptimos aumentan en orden H2 >He > N2
Las separaciones ms rpidas se obtienen con H2 pudindose

alcanzar mayor rapidez trabajando por encima de su
velocidad ptima aunque perdiendo resolucin
73
8.GAS PORTADOR
INCONVENIENTES DEL USO DE H2 EN CG:
Puede reaccionar catalticamente con compuestos

no saturados sobre superficies metlicas
Descompone el aceite de la bomba de vaco del
detector MS
Forma mezclas explosivas con aire cuando su
proporcin es > 4% v
Es poco probable que los caudales en CG creen
peligro
Los generadores elctricos producen H2 de gran
pureza frente a las balas de H2 comprimido
74
8.GAS PORTADOR
H2 y He proporcionan mejor resolucin (menor H) que N2 a
caudales altos
Los solutos difunden ms rpidamente a travs de ellos
Menor Cux (transferencia de masa)
75
8.GAS PORTADOR
Cux
Tiempo finito que necesita el soluto para alcanzar el

equilibrio entre la FM y la FE
Aunque algo de soluto se queda en la FE, el resto que

est en la FM avanza y se ensancha la banda
H debido al tiempo de equilibrado trmino de

transferencia de masa:
Cs: coef. de tranf. Masa
a travs de la FE
H transf.masa Cu x (Cs Cm )u x
Cm: a travs de la FM
76
K= (tr-tm)/tm
8.GAS PORTADOR
Cs y Cm dependen del tipo de cromatografa
En CG con columna tubular abierta:
2 K d 2
Cs
3(k1) 2 Ds d: espesor de la FE
Ds: coef. Difus. Soluto en FE
1 6 K 11K r
2 2
Cm
24( K 1) 2 Dm
Al disminuir d disminuye H debida a la transferencia de masa
aumenta la eficacia debido a que el soluto puede difundirse
ms rpidamente desde las partes ms profundas de la FE a la
FM
77
8.GAS PORTADOR
En columnas tubulares abiertas con FE suficientemente fina
(< 0,5 mm) Cux se rige por la lentitud de difusin a travs
de la FM y en segundo lugar de la FE
Cs<<Cm
Para un soluto de ky una columna de radio r dados, el nico

factor que afecta es el coeficiente de difusin
Coeficientes de difusin: H2>He>N2
78
8.GAS PORTADOR
A veces el caudal ptimo para la separacin

es muy bajo para el funcionamiento correcto
del detector
Flujo auxiliar o make-up
Impurezas en el gas portador

Deterioran la columna
Deben ser de alta pureza
Deben pasar por filtros de oxgeno, agua e
impurezas orgnicas
79
9. DETECTORES
ANLISIS CUALITATIVO:
Detectores que permiten anlisis cualitativo:
MS
Transformada de Fourier
Libreras de espectros
Comparacin con tr (no fiable)
Co-cromatografa: fortificar la muestra con el analito que se sospecha
Uso de dos columnas con distintas FE
ANLISIS CUANTITATIVO:
rea de pico
A mano (si el pico tiene forma gaussiana):
rea = 1,064 x altura de pico x w1/2
Altura de pico (cuando son muy estrechos)
80
9.1. Detector de Conductividad trmica, TCD
Utilizado particularmente con columnas empaquetadas,

detecta H2O, CO, CO2 e H2
La velocidad de prdida de calor de un cuerpo caliente hacia

un cuerpo ms fro es proporcional a la conductividad trmica
del gas que separa estos cuerpos
81
9.1. DETECTOR DE
CONDUCTIVIDAD TRMICA (TCD)
Universal
Sencillo
Sensibilidad limitada a nivel traza y columnas <0,53 mm
Mide la modificacin de la conductividad trmica del gas
portador, ocasionada por la presencia de substancias eludas
La conductividad trmica mide la capacidad de una
sustancia para transferir calor de una regin a otra ms fra
82
9.1. DETECTOR DE
El He es el ms usado
He e H2 dan la mejor sensibilidad
H2 es el de ms conductividad
Todos los analitos disminuyen su
conductividad
Primera ley Fick: flujo masa:
mol dc
Flujo 2 J D
m s dx
83
3.1. DETECTOR DE
El eluato pasa por filamento caliente de wolframio-renio
Disminuye la conductividad del gas
El filamento de calienta
Aumenta su resistencia elctrica
Vara el voltaje
El detector mide esa variacin
84
3.1. DETECTOR DE
Generalmente se usa una columna de referencia conectada
a otro filamento
Minimiza las diferencias de flujo al variar T
Rango lineal: 104
La sensibilidad
Aumenta con el cuadrado de la corriente del filamento
Puede quemarse
Inversamente proporcional al caudal
Aumenta con la diferencia de T entre filamento y bloque
exterior
85
3.2. DETECTOR DE
IONIZACIN DE LLAMA (FID)
Consiste en una llama de
hidrgeno-aire y una placa
colectora
El efluente de la columna pasa

a travs de la llama, que ioniza
las molculas orgnicas
Los iones se recogen en un

electrodo de polarizacin
negativa y producen una seal
elctrica
Es sensible y es el detector
ms ampliamente utilizado,
Es destructivo
Empleado para hidrocarburos, poco 86
sensible a compuestos muy oxidados

9.2. DETECTOR DE IONIZACIN DE
LLAMA (FID)
El eluato se quema y los tomos de C (excepto carbonilos
y carboxilos) producen radicales CH que producen CHO+
Mide las variaciones de la corriente de ionizacin en la

llama que produce la presencia de sustancias eludas
CH + O CHO+ + e-
Slo uno de 105 tomos de C produce un ion
La produccin es proporcional al n C ionizables
La corriente se produce entre:
Punta del quemador: nodo

Colector: ctodo
87
9.2. DETECTOR DE IONIZACIN DE
LLAMA (FID)
88
9.3. DETECTOR DE CAPTURA
ELECTRNICA (ECD)
Utiliza un emisor beta radiactivo

(63Ni) (gran energa) para ionizar
parte del gas portador y para
producir una corriente entre un par
de electrodos.
Cuando las molculas orgnicas que

contienen grupos funcionales
electronegativos, pasan por el
detector, capturan algunos de los
electrones y reducen la corriente
medida entre los electrodos.
Empleado frecuentemente para 89

compuestos halogenados: plaguicidas, PCBs, PBBs,
ELECTRNICA (ECD)
Selectivo
Molculas con halgeno
Carbonilos conjugados
Nitrilos
Fsforo
Nitrocompuestos
Compuestos organometlicos
Insensible a:
Hidrocarburos
Alcoholes
90
Cetonas
ELECTRNICA (ECD)
Gas de make-up:
N2
Ar con 5% metano
La humedad disminuye la sensibilidad
Muy sensible
91
ELECTRNICA (ECD)
92
9.4. DETECTOR DE
FOTOIONIZACIN (PID)
Utiliza luz ultravioleta (UV) para ionizar las molculas de gas.

Puede detectar componentes orgnicos voltiles (VOCs),
compuestos aromticos y no saturados.
No responde a hidrocarburos saturados o halohidrocarburos
Una lmpara genera energa UV que ioniza las molculas del

analito en estado gaseoso.
Los electrones libres resultantes colisionan con los electrodos del

instrumento, produciendo una corriente.
La magnitud de la corriente es proporcional a la concentracin de

analito.
93
9.4. DETECTOR DE
FOTOIONIZACIN (PID)
94
9.5. DETECTOR FOTOMTRICO
DE LLAMA (FPD)
Emplea una llama pequea de hidrgeno.
Los compuestos orgnicos que poseen tomos de Pb,

S, P o Sn, se atomizan en la llama y estos elementos
sufren un proceso de excitacin en la misma,
emitiendo una radiacin que es cuantificada por el
tubo multiplicador que posee el sistema.
Detector fotomtrico de llama pulsado (PFPD):

Anlogo al anterior pero funcionando la llama de forma
pulsante, lo que incrementa la sensibilidad de la seal
para determinados analitos.
95
9.5. DETECTRO FOTOMTRICO
DE LLAMA PULSADO (PFPD)
96
97
9.6. OTROS DETECTORES
Detector de emisin atmica (AED): Se basa en el

uso de un plasma donde va a tener lugar la
atomizacin de todos los compuestos. Parte de estos
tomos se ionizan y excitan electrnicamente emitiendo
energa
Todos los elementos de la tabla peridica producen
emisin
Detector selectivo de masas (MSD): En l tienen

lugar tres etapas, ionizacin y/o fragmentacin del
analito, separacin en el analizador y obtencin de la
seal elctrica cuando estos iones/fragmentos llegan al
electromultiplicador.
98
Detector microculombimtrico (CD): Esta formado
por cuatro electrodos de los cuales, dos se usan para la
produccin de un in qumica y electrolticamente
activo. Mide la cantidad de electricidad consumida en
el proceso.
Detector de quimioluminescencia (QLD): Se basa

en el uso de un gas reactivo que interacciona con el
analito dando lugar a la formacin de un compuesto
electrnicamente excitado. El paso de ste al estado
fundamental produce la emisin de energa que se
cuantifica con un fotomultiplicador.
99
REACCIONES QUE SE SUPONE QUE PRODUCEN LA

QUIMIOLUMINESCENCIA DEL AZUFRE
compuesto de azufre H SO productos

2 -O 2 llama
SO O3 SO2 * O2
SO2 * : estado excitado
SO2 * SO2 h
100
Compuestos del S en gas natural
a) FID, los comp. Org. S no se detectan porque estn
muy diluidos; b) QLD, insensible a hidrocarburos
101
Detector de nitrgeno-fsforo.
Es bsicamente el mismo FID, pero se le adiciona un metal alcalino,
por lo que en algn momento se le llam (AFID) detector de
ionizacin de llama alcalino, tambin se le ha llamado detector de
ionizacin (TID), detector termoinico de llama (FTD), detector
especfico termoinico (TSD).
Posee un alambre de Pt recubierto de NaOH colocado en la llama o

fuente de silicato de rubidio o cesio productora de metales inicos
alcalinos
102
Detector de N-P
La presencia del lcali en la llama, aumenta la

volatilidad de los compuestos que contienen N, P,
halgenos, sulfuro, As, Sn y Pb aumentando la
corriente y por tanto la sensibilidad
Sensibilidad 300 veces que el FID para P y 15

veces para otros
Anlisis de frmacos (la mayora contienen N) y

plaguicidas organofosforados. Tambin responde a
hidrocarburos
Caractersticas Detectores
Detector Lmite de Rango lineal Comentarios Tratamiento

deteccin g soluto
TCD 10-5-10-6 103-104 Detector No destructivo

universal
FID 10-12 106-107 Detector Destructivo
universal
ECD 10-14 102-103 Detector No destructivo
selectivo
FPD 10-13 102 Detector Destructivo
Selectivo S,P,
Pb, Sn
NPD 10-8-10-14 105-107 Detector Destructivo
Selectivo N,P
MSD 10-12 Segn tipo Detector Destructivo

detector universal
104
DETECTORES GC
Detector Comentarios Detector
TCD Detector universal Muy poco sensible
FID Detector universal Poco sensible comp. muy oxidados (no carbonilos ni
carboxilos)
ECD Detector selectivo Molculas con halgeno
Carbonilos conjugados
Nitrilos
Fsforo
Nitrocompuestos
Compuestos organometlicos
PID Detector selectivo VOCs. No HC saturados ni haloHC
FPD Detector S,P, Pb, Sn

Selectivo
NPD Detector N,P, halgenos, sulfuro, As, Sn y Pb
Selectivo
AED Emisin Toda la Tabla Peridica
MSD Detector universal Destructivo
105
106
9.7. CROMATOGRAFA DE GASES
ESPECTROMETRA DE MASAS
Alta sensibilidad
Universal y selectivo-especificidad
El mejor detector de CG
El ms costoso
Informacin cualitativa y cuantitativa
107
ANALIZADORES DE MASA
TRAMPA DE IONES
CUADRUPOLO
MODOS DE ADQUICISIN
BARRIDO COMPLETO
MONITORIZACIN DE UNA REACCIN SELECCIONADA
(MS/MS)
DETECCIN DE UN ION SELECCIONADO
MODOS DE IONIZACIN
IMPACTO ELECTRNICO
IONIZACIN QUMICA
108
BARRIDO COMPLETO
MS/MS
109
Ionizacin electrnica
Las molculas que entran en la fuente de ionizacin
se convierten iones por ionizacin electrnica
Los electrones emitidos por un filamento caliente

(como el de una bombilla) son acelerados a travs
de un potencial de 70 V antes de que interacten
con las molculas que entran.
Algunas molculas (0,01%) de analito (M)

absorben entre 12 y 15 eV, que es suficiente para
su ionizacin:
110
Casi todas las molculas estables tienen un nmero par de
electrones.
Cuando se pierde un electrn, el catin que resulta con un

electrn desapareado se designa por M+ el ion molecular.
Despus de la ionizacin, el ion M+ normalmente tiene

suficiente energa interna residual (~1 eV) para romperse
en fragmentos.
La fuente de iones tiene una placa repulsora, que se

encuentra a un pequeo potencial positivo, y que empuja
los iones hacia el tubo analizador, y asimismo, unas placas
focalizadoras, que se encuentran tambin a un pequeo
potencial, y que focalizan el haz de iones.
111
La energa cintica de los electrones de 70 eV es
mucho mayor que la energa de ionizacin de las
molculas con las que colisionan.
MOLCULA DE FORMALDEHDO:
Los electrones que se pierden ms fcilmente son los

procedentes del orbital no enlazante (pares
solitarios), localizados en el oxgeno, de una energa
de 11,0 eV.
Esto significa que 11,0 eV es suficiente para eliminar un

electrn no enlazante del formaldehdo.
Para eliminar un electrn enlazante de una molcula

de formaldehdo se requieren 14,1 eV,
y para eliminar el electrn de mxima energa

enlazante de la molcula neutra se requieren 15,9 eV.
112
La interaccin con electrones de 70 eV eliminar con muchsima
probabilidad los electrones que tienen la mnima energa de
ionizacin.
El ion molecular resultante, M+, puede tener un exceso tan grande de

energa que se rompa en fragmentos, hasta tal grado que el pico de
M+ puede ser pequeo e incluso estar ausente en un espectro de
masas.
Figura:
no presenta el pico M+ que debera tener de una m/z 226.
picos de m/z 197, 156, 141, 112, 98, 69 y 55, correspondientes a prdidas
de fragmentos del ion M+.
Estos picos suministran claves para deducir la estructura de la molcula.

Bsquedas en libreras.
113
Si se disminuye la energa cintica de los electrones en la

fuente de ionizacin, p. ej. a 20 eV, habr mucho menor
rendimiento de iones y mucha menos fragmentacin se
observar una mayor abundancia de iones moleculares.
Normalmente se utiliza una energa de 70 eV, porque

proporciona pautas de fragmentacin reproducibles, que
pueden ser comparadas con los espectros de una librera.
El pico ms intenso en un espectro de masas se llama pico

base.
Las intensidades de los dems picos se expresan como

porcentajes de la intensidad del pico base
114
Ionizacin qumica
Produce menos fragmentacin que la ionizacin
electrnica.
La fuente de ionizacin se llena con un gas

reactivo, como metano, isobutano o amoniaco,
a una presin de ~ 1 mbar.
Los electrones energetizados (100-200 eV)

convierten el CH4 en una variedad de productos
reactivos: CH4 + e- CH4+ + 2 e-
CH4+ + CH4 CH5+ + CH3
CH4+ CH3+ + H
CH3+ + CH4 C2H5+ + H2
115
Ionizacin qumica
El ion CH5+ es un gran dador de protones, y reacciona con
el analito para dar MH+, que de ordinario es el ion ms
abundante en los espectros de masas por ionizacin
qumica
CH5+ + M CH4 + MH+
El ion molecular, M+, se puede formar mediante reacciones

como:
CH4+ + M CH4 + M+
La especie MH+ se llama molcula protonada, no ion

molecular
116
Ionizacin qumica
El pico MH+, de m/z 227, es el segundo pico ms intenso del espectro.
tienen menos fragmentos que en un espectro por ionizacin electrnica.
Para controlar el grado de fragmentacin de MH+; en lugar de metano se usan como

gases reactivos amoniaco e isobutano.
Estos reactivos se unen a H+ con ms fuerza que el metano, y comunican menos

energa a MH+, cuando el protn pasa de la forma protonada a M.
M(C2H5)+
117

TEMA 3-Cromatografía de Gases

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TEMA 3-Cromatografía de Gases

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TEMA 3.

Cuanto mayor sea la afinidad que una

FASE ESTACIONARIA: columna cromatogrfica

ANALITO: trmicamente estable

La superficie del vidrio de borosilicato es cida

La desactivacin permite bloquear dichos grupos con

ENSANCHAMIENTO DE BANDAS COMPOSICIN DE LA BANDA EN CABEZA DE COLUMNA

Tcnica de inyeccin Inserto

Velocidad de entrada de la muestra:

Dispersin de la muestra en la columna:

El disolvente se evapora en el inyector y condensa en

Se desarrolla una zona

Tcnica sandwich o del bolo de disolvente

Tcnica aguja llena

Tcnica aguja fra

Agua 250 C 0,8 bar 1L1400 L

Cloruro metileno 1L380 L

Inserto lana vidrio en centro

Sin divisin a Baja til con inyecciones Toda

Liner gua la aguja para que entre en la columna que se fija

Para columnas 0,53 mm DI jeringas estndar

Para solutos que se descomponen por encima de su Pe

Mejor forma en anlisis cuantitativo por GC

T inicial debe ser baja (p.e. 50 C) para que condensen

La muestra debe estar muy limpia

El elemento calefactor enrollado que lo calienta

Inyeccin de la muestra con liner fro

2. Seleccionar el modo de inyeccin adecuado en cada caso:

(b) hidrocarburos en extracto de gasolina. Con divisin

(c) inyeccin de grandes volmenes de una muestra sucia. Con divisin

(d) Aromas en zumo de naranja en un extracto de acetato de etilo

Respecto a las empaquetadas:

Pared recubierta (WCOT Wall Coated Open Tubular)

Soporte cubierto (SCOT (Support Coated Open Tubular)

Pared interior de columna con soporte slido cubierto de FE

Capa porosa (PLOT Porous layer Open Tubular)

Pared interior de columna recubierta de FE slida

F.S.O.T. (Fused Silica Open Tubular)

Recubierta de soporte (SCOT)

Capa porosa (PLOT)

Ej. FE de carbn poroso de

La silanizacin reduce las colas porque los OH

Contacto con oxgeno a altas temperaturas

Estructura de un tamiz molecular de zeolita

Midiendo la fraccin de aas que se han

Si las partculas son pequeas:

(a) columna tubular abierta no polar de poli(dimetilsiloxano)

(a) tr segn volatilidad

El ndice de Retencin de Kovats (I) de un alcano lineal

Octano: I = 800, Nonano: I = 900

Un compuesto entre el octano y el nonano tiene un I

log tr(desconocido) - log tr(n)

n: nmero de carbonos del alcano ms corto

la volatilidad del soluto

es funcin de la estructura del compuesto y de la

La temperatura debe ser compatible con la FE

Si la temperatura de la columna fuera excesivamente

Si la temperatura muy elevada

si la temperatura se ajusta para la separacin apropiada

Este problema puede controlarse usando la

GC-MS/MS: cromatgrafo de gases (3800 Varian) con detector de

Generalmente los CG tienen controles electrnicos de la

Puede hacerse programacin de presin (de caudal)

En FID el N2 da mejores LODs