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Bioqumica II
Bioqumica II
Volume 1 - Mdulos 1 a 3 Andrea Thompson Da Poian
Debora Foguel
Marlvia Dansa Petretski
Olga Lima Tavares Machado
Apoio:
Fundao Cecierj / Consrcio Cederj
Rua Visconde de Niteri, 1364 Mangueira Rio de Janeiro, RJ CEP 20943-001
Tel.: (21) 2334-1569 Fax: (21) 2568-0725
Presidente
Masako Oya Masuda
Vice-presidente
Mirian Crapez
Material Didtico
ELABORAO DE CONTEDO
Andrea Thompson Da Poian
Debora Foguel Departamento de Produo
Marlvia Dansa Petretski
Olga Lima Tavares Machado EDITORA PROGRAMAO VISUAL
COORDENAO DE DESENHO Tereza Queiroz Alexandre dOliveira
INSTRUCIONAL Bruno Gomes
COORDENAO EDITORIAL
Cristine Costa Barreto Jane Castellani Cristiane Matos Guimares
DESENHO INSTRUCIONAL E REVISO REVISO TIPOGRFICA ILUSTRAO
Alexandre Rodrigues Alves Equipe CEDERJ Jefferson Caador
Carmen Irene Correia de Oliveira Salmo Dansa
COORDENAO DE
Jos Meyohas CAPA
PRODUO
COORDENAO DE REVISO Jorge Moura Eduardo Bordoni
Maria Anglica Alves PRODUO GRFICA
REVISO TCNICA Andra Dias Fies
Marta Abdala Fbio Rapello Alencar
P749b
Poian, Andrea Thompson Da.
Bioqumica 2. v.1/ Andrea Thompson Da Poian.
Rio de Janeiro : Fundao CECIERJ, 2009.
132p.; 19 x 26,5 cm.
ISBN: 85-89200-75-2
1. Bioqumica. 2. Metabolismo. 3. Bioenergtica.
I. Foguel, Debora. II. Petretski, Marlvia Dansa.
III. Machado, Olga Lima Tavares. IV. Ttulo.
2009/1 CDD: 572
Referncias Bibliogrficas e catalogao na fonte, de acordo com as normas da ABNT.
Governo do Estado do Rio de Janeiro
Governador
Srgio Cabral Filho
Universidades Consorciadas
UENF - UNIVERSIDADE ESTADUAL DO UFRJ - UNIVERSIDADE FEDERAL DO
NORTE FLUMINENSE DARCY RIBEIRO RIO DE JANEIRO
Reitor: Almy Junior Cordeiro de Carvalho Reitor: Alosio Teixeira
SUMRIO Mdulo 1
Aula 1 Bioenergtica - parte I_________________________________ 11
Olga Lima Tavares Machado
Mdulo 2
Aula 4 Fotossntese I - Princpios gerais _________________________ 41
Marlvia Dansa Petretski
Mdulo 3
Aula 9 A histria da fermentao: do incio aos dias de hoje ________ 95
Marlvia Dansa Petretski / Olga Lima Tavares Machado
Aulas
1 - Bioenergtica - parte I.
2 - Bioenergtica - parte II.
Mdulo 1
3 - Conceitos fundamentais do metabolismo.
INTRODUO AO Metabolismo, cujo antepositivo grego metabol significa
METABOLISMO mudana, pode ser definido como a totalidade dos processos qumicos
do organismo. Conseqentemente podemos admitir que a clula viva seja
uma indstria qumica em miniatura, onde milhares de reaes ocorrem
em nvel microscpico.
Voc pode pensar no metabolismo celular como um elaborado
mapa rodovirio que representa as reaes que ocorrem na clula. As
reaes so arranjadas em vias metablicas intrincadas e bifurcadas, que
transformam molculas por uma srie de etapas. As enzimas aceleram
seletivamente cada etapa no labirinto de reaes. Em analogia aos sinais
de trnsito que controlam o fluxo do trfego e previnem acidentes,
existem mecanismos que controlam o metabolismo por regulao de
enzimas e, conseqentemente, mantm o balano metablico, impedindo
deficincias e excessos de metablitos.
Poderamos ento comear os nossos estudos apresentando
algumas questes:
8 CEDERJ
O mdulo Introduo ao metabolismo composto por trs aulas:
CEDERJ 9
11
AULA
Bioenergtica - parte I
objetivos
INTRODUO Uma clula viva um sistema dinmico; ela cresce, move, sintetiza
macromolculas complexas e, seletivamente, direciona substratos para um ou
outro compartimento. Todas estas atividades necessitam de energia; assim, a
clula deve obter energia do meio onde est e deve utilizar esta energia com
a maior eficincia possvel. As plantas a obtm da luz do sol; animais usam a
energia estocada nas plantas ou em outros animais que consomem.
1 2 CEDERJ
MDULO 1
Ns denotamos calor pelo smbolo q. Um valor positivo
de q indica que o calor do ambiente foi absorvido pelo
1
AULA
sistema. Um valor negativo de q indica que o sistema
perdeu calor para o ambiente.
CEDERJ 1 3
Bioqumica II | Bioenergtica - parte I
Em (A) temos a energia cintica Em (B) parte da energia cintica Em (C) a energia cintica estocada
transformada somente usada para retirar a gua (trabalho), no balde dgua suspenso pode
em calor; e uma menor quantidade de energia ser usada para dirigir uma
liberada como calor; mquina hidrulica ou para
qualquer outro trabalho.
RESUMO
Nesta aula, voc aprendeu que um sistema pode trocar energia com o
meio ambiente e assim mudar sua energia. Vimos que esta mudana
pode ocorrer na forma de calor ou trabalho. Voc deve ter em mente o
seguinte conceito:
1 4 CEDERJ
2
AULA
Bioenergtica - parte II
INTRODUO Na aula anterior, definimos energia, calor e trabalho. Falamos ainda sobre a
primeira lei da Termodinmica, ou seja, sobre a lei da conservao de energia.
Nesta aula, tentaremos explicar o porqu de algumas reaes ocorrerem
espontaneamente e o de outras necessitarem de energia para acontecerem.
Veremos ainda como nosso organismo utiliza reaes que liberam energia para
promover reaes que necessitam de energia.
Conceito de entropia
16 CEDERJ
MDULO 1
O grau de distribuio randmica ou grau de desordem chamado
2
entropia. Para demonstrarmos a mudana de entropia em um processo
AULA
simples, considere a facilidade para desorganizar um quarto e o esforo
para reorganiz-lo. Para isso, veja a Figura 2.1. Diremos ento que a
variao de entropia S ser a diferena entre a entropia do estado final
(Sf) e a entropia do estado inicial (Si), ou seja,
S = Sf Si.
CEDERJ 17
Bioqumica II | Bioenergtica - parte II
Conceito de entalpia
18 CEDERJ
MDULO 1
Na realidade, a energia livre medida pela sua variao G, e aquela
2
capaz de realizar trabalho em processos isotrmicos (processos que
AULA
ocorrem temperatura constante) e isobricos (processos que ocorrem
presso constante). Ela resulta da diferena entre a energia total (entalpia,
H) e a energia ineficaz (quantidade de entropia, TS).
G = H - TS
Energia que produz trabalho = Energia total - Energia inaproveitvel
Figura 2.2: Descrio da Energia Livre. A Energia Livre (G) mede a energia da
molcula que poderia em princpio ser usada para realizar trabalho temperatura
constante, como ocorre nos seres vivos. G medido em unidades de quilocalorias/
mol ou quilojoules/mol.
O QUE UM KJ?
CEDERJ 19
Bioqumica II | Bioenergtica - parte II
Reagentes
alternativos
U Produtos
Energia livre
DG
0
padro
W Reagentes
positivo
Y A B C D
A+B C+D
Reagentes
alternativos
Produtos
Energia livre
DG
0
Reagentes
padro
W
positivo
U B
Y V D
U+B V+D
20 CEDERJ
MDULO 1
Reagentes
2
alternativos
AULA
Produtos
Energia livre
Reagentes
DG
0
padro
positivo
W B
Y X D
W+B X+D
Reagentes
alternativos Reagentes
DG
0
Y B Produtos
Energia livre
positivo
padro
Z D
Y+B Z+D
Figura 2.4.d: Os reagentes apresentam energia livre maior do que os produtos. O equil-
brio favorece a formao dos produtos.
Responda voc agora seguinte questo: uma reao endergnica (H positivo), ou seja,
uma reao que requer energia, pode ocorrer espontaneamente dentro de uma clula?
Se voc respondeu que sim, desde que o valor em mdulo para a entropia (TS) seja maior
do que H, voc est acompanhando o nosso raciocnio. Bem, podemos ir um pouco mais adiante,
mas antes precisamos entender como a energia livre de um sistema depende da quantidade dos
vrios componentes da mistura de reao.
CEDERJ 21
Bioqumica II | Bioenergtica - parte II
K = [C]eq x [D]eq
[A]eq x [B]eq
22 CEDERJ
MDULO 1
V+
2
reagentes produtos
AULA
V-
No equilbrio v+ = v- e G = 0 , tem-se
G0 = - RT lnK
Agora pense e responda! Ser que podemos dizer que no equilbrio qumico a concentrao
dos reagentes igual concentrao dos produtos?
A resposta no. No equilbrio qumico no necessrio que a concentrao dos reagentes seja
igual concentrao do produto. O equilbrio qumico ocorre quando a velocidade da reao
nos dois sentidos idntica. No exemplo dado, o equilbrio ocorre em uma situao em que
existem mais molculas de produtos do que de reagentes. Veja a Figura 2.5:
CEDERJ 23
Bioqumica II | Bioenergtica - parte II
E a vida? Ser que ela existe quando o equilbrio qumico entre ser vivo e meio ambiente
atingido?
No. Somente quando um ser morre que o equilbrio qumico atingido. Veja a Figura 2.6.
24 CEDERJ
MDULO 1
Reaes acopladas
2
Embora muitas reaes possam ser favorecidas pela remoo
AULA
eficiente dos produtos, existem muitos casos em que isto no suficiente.
H um outro modo muito importante no qual reaes intrinsecamente
desfavorveis podem acontecer. Suponha por exemplo que ns tenhamos
uma reao endergnica que seja parte essencial de uma via que, na sua
totalidade, poderia gerar energia. Busquemos uma situao do nosso
dia-a-dia para voc entender melhor este processo: imagine que voc
queira montar uma loja para vender um produto de larga aceitao no
mercado. Com certeza voc espera ter lucros quando tudo estiver em
pleno funcionamento. Sem dvida voc dever gastar alguns recursos
para iniciar seu projeto. Assim funcionam algumas vias metablicas: voc
gasta alguma energia para tornar possvel uma das etapas da vias, que
endergnica, para que outras etapas que forneam energia cubram esse
gasto inicial e ainda liberem energia para outras funes metablicas.
Vejamos como isto fica passo a passo:
A G0 = + 10kJ/mol
C D G0 = - 30kJ/mol
A+C B+D
G0 = (+ 10kJ/mol) + (-30 kJ/mol)
G0 = - 20kJ/mol
CEDERJ 25
Bioqumica II | Bioenergtica - parte II
26 CEDERJ
MDULO 1
NH2
2
AULA
C N
N C
O- O-
CH
HC C O-
N N
O H2C O P O-
Adenina O O O
H H Fosfato
H H
OH OH
Ribose
CEDERJ 27
Bioqumica II | Bioenergtica - parte II
28 CEDERJ
MDULO 1
RESUMO
2
AULA
Nesta aula, voc aprendeu os conceitos de entropia, entalpia e energia
livre de Gibbs. Voc viu como essas grandezas se relacionam, ou seja, voc
aprendeu a segunda lei da Termodinmica. Voc aprendeu a identificar o
sentido das reaes qumicas e a importncia dos compostos ricos em energia
e das reaes acopladas. Vamos resumir esses conceitos.
CEDERJ 29
3
AULA
Conceitos fundamentais
do metabolismo
objetivos
FUNES DO METABOLISMO
ESTGIOS DO METABOLISMO
Glicose Piruvato
cidos graxos acetil-CoA
32 CEDERJ
MDULO 1
No nvel 3, se tratarmos de organismos aerbicos (aqueles que
3
necessitam de oxignio para sobreviver), a principal via o ciclo de
AULA
Krebs, onde os intermedirios do nvel 2 sofrem degradao completa
a CO2, H2O.
Por exemplo:
Estgio 1
Acares
Accares simples
simples
(principalmente glicose)
(principalmente glicose) Aminocidos cidos graxos + glicerol
Carregadores
de eltrons
reduzidos e Piruvato
ATP
Estgio 2
Carregadores
de eltrons
reduzidos e
Acetil-Co A ATP
Carregadores de eltrons
reduzidos e ATP
Cclo do
cido
ctrico
Estgio 3
Figura 3.1: Esquema
geral dos trs estgios
do metabolismo.
2CO2
H2O
CEDERJ 33
Bioqumica II | Conceitos fundamentais do metabolismo
F B
E C
A B C D E
H
A B C D E
34 CEDERJ
MDULO 1
Por outro lado, nas vias metablicas divergentes, um mesmo
3
substrato pode sofrer reaes distintas que vo determinar a rota
AULA
metablica daquela molcula.
D E F G
A B C
H I J K
CATABOLISMO E ANABOLISMO
CEDERJ 35
Bioqumica II | Conceitos fundamentais do metabolismo
H
Metano
OXIDAO
H C H
H Metanol
H C OH
Figura 3.3: Processo de oxidao da
H
molcula de metano molcula de
H Formaldedo dixido de carbono.
C O
H
H cido frmico
C O
HO
O C O
36 CEDERJ
MDULO 1
Ao contrrio da primeira impresso, as vias de sntese e degradao
3
de uma dada molcula no so as mesmas.
AULA
Quase sempre os dois caminhos so bastante distintos um do
outro. Embora apresentem reaes enzimticas e intermedirias comuns,
so vias diferentes por possurem diferentes enzimas catalisando pelo
menos parte de suas reaes.
Essa uma estratgia para evitar a redundncia e o ciclo vicioso.
Enzimas chaves vo ditar a regulao simultnea das vias opostas.
CEDERJ 37
Bioqumica II | Conceitos fundamentais do metabolismo
Sinal
modificador
Enzima
inativa A
amplificao 10 X
Enzima
inativa A
Enzima
ativa B
amplificao 100 X
Enzima
ativa B
Figura 3.4: Reaes de
ativao enzimtica em
cascata.
Enzima
inativa C
amplificao 1000 X
Enzima
inativa C
Substrato Produto
38 CEDERJ
MDULO 1
Controle por compartimentalizao
3
Outra estratgia eficiente a compartimentalizao. Em geral, a
AULA
via de sntese de uma dada molcula ocorre em um compartimento celular
distinto daquele onde ocorre a sua via de degradao. Por exemplo, a
via de degradao de cidos graxos (Aula 24) ocorre nas mitocndrias,
enquanto a via de sntese de cidos graxos (Aula 26) ocorre no citoplasma
das mesmas clulas.
Regulao hormonal
CEDERJ 39
Bioqumica II | Conceitos fundamentais do metabolismo
RESUMO
O controle do metabolismo feito por regulao dos nveis e das atividades das
enzimas. Este controle norteado por regulaes alostricas, por modulaes
covalentes, por compartimentalizao e por regulao hormonal.
40 CEDERJ
4
AULA
Fotossntese I - Princpios gerais
Bioqumica II | Fotossntese I - Princpios gerais
Fluxo de energia e
Ciclos biogeoqumicos.
Fotossntese:
Energia luminosa Energia qumica
4 2 CEDERJ
MDULO 2
4
AULA
+CO2+H2O f
r o
e t
s o
p s
i s
r
a n
t
Glicose +O2 e
o s
e
Figura 4.2: O ciclo do carbono. Vegetais e outros organismos convertem CO2 e gua em glicose e O2 atravs
do processo de fotossntese. Animais e outros organismos heterotrficos utilizam glicose e O2 no processo de
respirao celular, devolvendo CO2 e H2O atmosfera.
CEDERJ 4 3
Bioqumica II | Fotossntese I - Princpios gerais
O CICLO DO CARBONO
LUZ
ATP
!
Pense na situao atual: o CO2 fixado na forma de combustveis fsseis retorna
atmosfera rapidamente, certo? Ao mesmo tempo, diminui a cobertura vegetal. O que
acontece com o nvel de CO2 atmosfrico? Voc pode imaginar as conseqncias disso?
4 4 CEDERJ
MDULO 2
Alguns processos, entretanto, podem remover carbono por
milhes de anos. Em alguns ambientes, o material orgnico acumulado
4
AULA
mais rapidamente do que os decompositores podem quebrar. Sob estas
condies, no passado, estes depsitos formaram carvo e petrleo, os
combustveis fsseis.
FLUXO DE ENERGIA
!
A fotossntese, portanto, no somente fornece carboidratos para obteno de energia
por plantas e animais, mas tambm o principal caminho pelo qual o carbono retorna
biosfera e a principal fonte de O2 na atmosfera terrestre.
CEDERJ 4 5
Bioqumica II | Fotossntese I - Princpios gerais
Nveis de 20
oxignio na
atmosfera 10 Rpido acmulo de O2
(%) pela saturao do Fe12
nos oceanos
Bilhes
0 1 2 3 4
de anos
Origem das Hoje
clulas
Formao Primeiras Liberao de eucariticas Primeiras
da terra clulas vivas O2 a partir da fotossintetizantes vertebrados
Formao fotlise da gua
Primeiras
de oceanos Respirao plantas
Primeiras
e continentes celular e animais
clulas
fotossintetizante multicelula
Figura 4.3: Seqncia de eventos evolutivos e sua relao com os nveis de O2 atmosfrico.
Voc viu nesta aula a importncia da Fotossntese para a manuteno da vida. Nas prximas
aulas voc ver os detalhes deste processo.
4 6 CEDERJ
5
AULA
Fotossntese II
O processo de fotossntese
Bioqumica II | Fotossntese II - O processo de fotossntese
LOCALIZAO
Cloroplastos
48 CEDERJ
MDULO 2
Mergulhados no estroma esto os tilacides, estruturas formadas
5
por membranas que lembram sacos. Estes esto organizados empilhados Singular = granum
AULA
Plural = grana
como moedas, formando unidades chamadas grana.
Grana so irregularmente conectados por extenses dos tilacides
chamadas lamela. A membrana dos tilacides envolve um espao interior
chamado lmen do tilacide.
Estroma
Tilacide
Membrana Interna
Granum
Membrana Externa
Lamela
a Membrana plasmtica
b
Citoplasma Grana
Parede
Celular Membrana do
tilacide
Estroma
Espao Vacolo
com ar
Membranas interna e
externa do cloroplasto
Cloroplasto
Ncleo
Grnulo
de amido
Figura 5.3: Microscopia eletrnica de transmisso de uma clula vegetal (A) e um cloroplasto em destaque (B).
CEDERJ 49
Bioqumica II | Fotossntese II - O processo de fotossntese
AS ETAPAS
50 CEDERJ
MDULO 2
A etapa fotoqumica
5
Nesta etapa, a molcula de gua quebrada. O oxignio de duas
AULA
molculas de gua se combinam e formam O2. Os hidrognios restantes
se associam com molculas chamadas aceptores de eltrons. Neste caso,
o aceptor o NADP (Nicotinamida adenina dinucleotdeo fosfato), cuja
forma reduzida representada por NADPH. (veja a Figura 5.5).
H O
C
NH2
O CH2 O N+
H H
O P O- H Figura 5.5: Nicotinamida Adenina
H
HO HO dinucleotideo fosfato (NADP).
O NH2
N+
O P O- N+
O CH2 O N N
H H
H H
2-
HO OPO3H2
luz
RESUMINDO
Na etapa fotoqumica, a energia luminosa utilizada para quebrar
a molcula de gua e sintetizar NADPH e ATP.
CEDERJ 51
Bioqumica II | Fotossntese II - O processo de fotossntese
RESUMINDO
Temos:
luz
52 CEDERJ
MDULO 2
HISTRICO
5
At 1930, o modelo da fotossntese especulava que o dixido
AULA
de carbono era quebrado e ento a gua era adicionada ao carbono
resultante.
1 - CO2 C + O2
2 - C + H2O CH2O Cornelis Bernardus
van Niel (1897-
1985) era um
Neste modelo, era proposto que o O 2 liberado durante a engenheiro qumico
que trabalhava como
fotossntese vinha como resultado da quebra do CO2. Este modelo caiu microbiologista
estudando taxonomia
por terra graas a Cornelis Bernardus van Niel, um estudante (na poca) de bactrias.
que investigava a fotossntese em bactrias que produziam carboidratos Trabalhou na estao
marinha Hopkins,
a partir de CO2 mas no liberavam oxignio. da Universidade
de Stanford, na
Van Niel concluiu que, pelo menos em bactrias, o CO2 no Califrnia, at 1962.
Retirado de http:
quebrado em carbono + O2.
//www.asmusa.org/
Esse grupo de bactrias requer H2S (sulfeto de H) e no H2O para mbrsrc/archive/pdfs/
530287p75.pdf
a fotossntese, formando glbulos amarelos de enxofre como produto
de excreo.
Assim:
CO2 + 2H2S CH2O + H2O + 2S
Em sulfobactrias:
CO2 + 2H2 CH2O + H2O + 2S
Em plantas:
CO2 + 2H2O CH2O + H2O + O2
Esquema geral:
CO2 + H2X CH2O + H2O + 2X
CEDERJ 53
Bioqumica II | Fotossntese II - O processo de fotossntese
54 CEDERJ
MDULO 2
RESUMO
5
AULA
Voc viu nesta aula que a fotossntese ocorre no cloroplasto das clulas
vegetais e que ela pode ser dividida em etapa fotoqumica e etapa
qumica. Na primeira etapa, a molcula de gua quebrada e os
hidrognios associam-se a aceptores de eltrons. O oxignio molecular
(O2), liberado na atmosfera, tambm resultado desta etapa. Nesta fase
so sintetizados NADPH e ATP. Na etapa seguinte, estas molculas sero
a fonte de energia para a sntese de glicose.
Nas prximas duas aulas, voc ver cada uma dessas etapas
separadamente. Vamos discutir como cada uma acontece e qual a bateria
enzimtica responsvel pela catlise das reaes. Na Aula 6, veremos a
etapa fotoqumica aquela que depende de luz. Voc conhecer o papel
da clorofila e de outros pigmentos neste processo. Na aula seguinte (Aula
7), veremos como a clula vegetal utiliza o ATP e o NADPH, gerados na
primeira fase, para sintetizar glicose e outros compostos. Lembre que os
exerccios s viro no final do mdulo. Ento... estamos prontos?
CEDERJ 55
6
AULA
A etapa fotoqumica ou
fase clara da fotossntese
Figura 6.1: Espectro eletromagntico. O olho humano capaz de perceber apenas os comprimentos
de onda correspondentes ao espectro visvel. A maior parte do espectro eletromagntico invisvel.
58 CEDERJ
MDULO 2
A radiao tambm pode ser vista como partculas chamadas
6
quanta ou ftons. A quantidade de energia inversamente relacionada
AULA
ao comprimento de onda da luz.
Assim, um fton de luz violeta tem duas vezes mais energia que
o fton de luz vermelha.
A mesma parte do espectro que pode ser vista a luz visvel
tambm a radiao que dirige a fotossntese. Azul e vermelho so os dois
comprimentos de onda mais eficientemente absorvidos pela clorofila
(Figura 6.2) e, portanto, as cores mais usadas como energia para as
reaes da fotossntese.
!
No esquea!
CH2
A quantidade de energia
CH R
inversamente relacionada
CH CH3 ao comprimento de onda
H3C CH2 da luz.
N N
HC Mg CH
N N
H3C CH3
H
H2C H
CH2 H C O CLOROFILA a R = CH3
O C O O H
O CH3
CLOROFILA b R = C
CH2
O
CH CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CH3
C CH CH2 CH CH2 CH
CH3 CH3 CH3 CH3
CEDERJ 59
Bioqumica II | A etapa fotoqumica ou fase clara da fotossntese
Clorofila a
Clorofila b
- Caroteno
Ficoeritrina
Ficocianina
Clorofila a
Absoro
- Caroteno
250 300 350 400 450 500 550 600 650 700
violeta azul verde amarelo vermelho
60 CEDERJ
MDULO 2
COMO OS PIGMENTOS ESTO ORGANIZADOS?
6
Os pigmentos esto organizados na membrana tilacide em
AULA
conjuntos de poucas centenas (~300) de molculas de pigmentos. Essas
membranas so ricas em glicolipdios e contm grande quantidade
de protena. Os pigmentos esto ligados a algumas dessas protenas.
Clorofilas tambm interagem com lipdios de membrana por suas caudas
hidrofbicas.
Estes conjuntos de pigmentos e protenas esto organizados em
fotossistemas. Existem dois fotossistemas na membrana tilacide:
Fotossistema I
Fotossistema II
CEDERJ 61
Bioqumica II | A etapa fotoqumica ou fase clara da fotossntese
Energia luminosa
Energia
Complexo redutora
antena Centro de
reao
Figura 6.4: A organizao das molculas de clorofila nos fotossistemas. A maioria das
molculas de clorofila absorve luz e transfere a energia para o complexo antena,
tambm chamado molcula antena ou protena antena.
62 CEDERJ
MDULO 2
Cada complexo antena possui aproximadamente 300 molculas
6
de clorofilas.
AULA
A energia absorvida pelo centro de reao e os eltrons da clorofila
passam de um estado fundamental para um estado excitado. Estes eltrons
de alta energia so ento transferidos dos centros de reao para uma
cadeia de tranportadores at o NADP para formar o NADPH.
energia
Fton
e-
Estado
fundamental
ee- -
e-
energia
Estado
excitado
energia
Molcula
aceptora de
eltrons e-
Figura 6.5: Seqncia de excitao do eltron da molcula aceptora pela luz solar.
CEDERJ 63
Bioqumica II | A etapa fotoqumica ou fase clara da fotossntese
Fotossistema I - 700nm
Fotossistema II - 680nm
64 CEDERJ
MDULO 2
Em ambos os fotossistemas, a primeira etapa a transferncia do
6
eltron excitado pela luz do centro de reao para a cadeia de transporte
AULA
de eltrons.
A fonte desse eltron a gua, e o destino final a molcula de
NADP+, que ser reduzida a NADPH.
NADPH No cloroplasto
+
fton NADP
fton Eltron de baixa energia + luz = eltron de alta
Redutase
Ferredoxina
Estroma
-
e e
Membrana PSII e
PSI Figura 6.6: As reaes luminosas da fotossntese
tilacide P680 Citocromo
Quinone P700 produzem ATP e NADPH. A energia requerida nesta
bf etapa derivada da oxidao da gua (fotlise). Em
plantas esse processo envolve dois centros de rea-
2 H2O e o fotossintticos ligados em srie por uma cadeia
plastocianina
Tilacoide O2 4H
+
2H
+ transportadora de eltrons. O fotossistema II (FSII)
usa energia luminosa para oxidar a gua a O2 e ento
Gradiente de passa os eltrons para o fotossistema I (FSI). No fotos-
prtons usados
para gerar sistema I o eltron excitado novamente pela luz e
ATP
usado para reduzir a ferredoxina. A ferredoxina
reduzida ento reduz NADP+ a NADPH.
CEDERJ 65
Bioqumica II | A etapa fotoqumica ou fase clara da fotossntese
Reao:
PQ PQH2
O OH
H3C H3C
CH3 H3C CH3
H3C
O CH3 CH3 CH3 OH CH3 CH3 CH3
A Cys S B C
S Fe S
Cys S S Cys S Cys
S Fe
Fe Fe S Fe
Cys S S Cys S Cys
S Fe S
Cys S
Figura 6.9: Ferredoxina. (A) complexo ferro-enxofre de uma protena Fe2S2 - presente em ferredoxinas vegetais;
(B) complexo ferro-enxofre de protenas Fe4S4 - presentes em ferredoxinas de bactrias; (C) estrutura tridimensional
de uma ferredoxina.
66 CEDERJ
MDULO 2
7. NADP redutase - ltimo componente da cadeia
6
transportadora de eltrons, a NADP redutase a enzima
AULA
que catalisa a reao:
e-
(P700)
Figura 6.10: Ferredoxina Fe4S4.
Fonte:http://www.life.uiuc.edu/
crofts/bioph354/4fe4s.html
Poder redutor
ferredoxina
Citocromo
o bf
(P700) e-
pc
2H+
Para o lmen do
tilacide
fton
CEDERJ 67
Bioqumica II | A etapa fotoqumica ou fase clara da fotossntese
68 CEDERJ
MDULO 2
O fluxo no cclico de eltrons
6
No caso do fluxo no cclico de eltrons, os dois fotossistemas
AULA
cooperam. Eltrons passam da H2O para o NADP+ para formar
NADPH.
Como no fluxo cclico, a luz excita um par de eltrons da clorofila
P700. Entretanto, os eltrons no retornam, mas so armazenados como
eltrons de alta energia na forma de NADPH. Este ser utilizado na fase
escura como doador de eltrons para a sntese de carboidrato.
NADP+ NADPH
ADP + Pi ATP
1
H2O /2O2 + 1H+
(P660) (P700)
Poder redutor
Citocromo Ferredoxina
2H2O o bf
Redutase
e-
O2+4H+ e-
NADP+
(P660) (P700)
NADPH
fton fton
Figura 6.13: Fluxo no cclico de eltrons na etapa fotoqumica da fotossntese. Neste caso, ATP
e NADPH so formados.
CEDERJ 69
Bioqumica II | A etapa fotoqumica ou fase clara da fotossntese
A SNTESE DE ATP
Talo 50 A
F0 (50 A) F0 (50 A)
Outras superfcies
+
Canal transportador de H
70 CEDERJ
MDULO 2
RESUMO
6
AULA
Voc viu nesta aula que a primeira etapa da fotossntese transforma energia
luminosa em energia qumica, como ATP e NADPH. O evento mais importante, que
a origem de todo o processo, a fotlise da gua. O pigmento chave, quando
se fala de fotossntese, a clorofila. Mas outros pigmentos podem absorver luz e
transferir a energia para a clorofila, que ento iniciar as reaes.
Na prxima aula voc ver como ocorre a etapa qumica, ou ciclo de Calvin. neste
ciclo que o CO2 ser utilizado como matria-prima para a sntese de molculas
orgnicas, especialmente glicose. Lembre que os exerccios sero apresentados
no final do mdulo. Portanto, no perca a viso geral da fotossntese.
CEDERJ 71
7
AULA
O ciclo de Calvin ou
etapa qumica da fotossntese
Bioqumica II | O ciclo de Calvin ou etapa qumica da fotossntese
18 ATP 18 ADP + 18 Pi
UM POUCO DE HISTRIA
14
Acares, aminocidos e
CO2 + clulas de algas em cultura
5 minutos outros compostos orgnicos
ou mais
14
Entretanto, se o tempo de incubao das algas com o CO2
era reduzido para cinco segundos, a anlise do material sintetizado
mostrava que o primeiro composto radioativo estvel formado era o
3-fosfoglicerato (3PG).
7 4 CEDERJ
MDULO 2
5 segundos 2 molculas de
14
CO2 + clulas de algas em cultura
7
3-fosfoglicerato
AULA
CH2O P A anlise do composto marcado com 14CO2 mostrava que ele era
C O inicialmente marcado no seu grupo carboxila. Calvin sugeriu que o 3PG
CHOH era formado pela carboxilao de um composto de dois carbonos. Este
CHOH composto foi, por muito tempo, procurado por vrios pesquisadores, mas
CH2O P nunca encontrado. A reao de carboxilao que realmente ocorre envolve
Figura 7.1: Ribulose 1,5 uma pentose chamada ribulose 1,5-bisfosfato (RuBP).
- bisfosfato (RuBP).
O CICLO DE CALVIN
A molcula aceptora
de CO2 a ribulose
A carboxilao de uma pentose tem como produto dois compostos
1,5-bisfosfato.
de trs carbonos cada: as molculas de 3-fosfogliceratos. A rota completa
envolve a carboxilao da pentose, a formao de carboidratos como
produto principal da via e a regenerao de RuBP. Para que isso ocorra,
existem vrias reaes catalisadas por diferentes enzimas.
Mas no esquea, no ciclo...
CEDERJ 7 5
Bioqumica II | O ciclo de Calvin ou etapa qumica da fotossntese
Figura 7.2: Estrutura tridimensional da RuBisCO. A. Esta enzima composta por oito grandes subunidades e
nove subunidades menores. Esta imagem mostra quatro subunidades de cada tipo. Ela fixa CO2 catalisando
a reao da ribulose 1,5-bisfosfato com o CO2, produzindo duas molculas de 3-fosfoglicerato. RuBisCO a
protena mais abundante do mundo. Esta abundncia, assim como a fixao de CO2, fundamental para todas
as formas de vida; B. Detalhe de A mostrando as subunidades maiores da RuBisCO que ligam o substrato da
enzima e ons magnsio.
CO2
2 molculas de
Reao 1 Ribulose 1,5-bisfosfato 3-fosfoglicerato
CH2O P
CH2O P H C OH
C O CO2 COOH
OH C OH Rubisco
COOH
H C OH
H C OH
CH2O P
CH2O P
7 6 CEDERJ
MDULO 2
Aps serem formadas, as duas molculas de 3-fosfoglicerato so
convertidas a 1,3-bisfosfoglicerato (BPG), uma molcula duplamente
7
AULA
fosforilada. Esta reao catalisada pela enzima fosfoglicerato quinase.
A reao de fosforilao requer a hidrlise de uma molcula de ATP para
cada BPG formado. Lembre que uma ribulose 1,5-bisfosfato, ao sofrer
carboxilao, foi capaz de gerar duas molculas de 3-fosfoglicerato. Logo,
sero gastos 2 ATPs por ciclo.
Reao 2
ATP ADP
ATP ADP + Pi
O O
P O CH2 CH C P O CH2 CH C
O O P
OH OH
!
Voc lembra, das aulas de Bioqumica I, o que fazem as enzimas denominadas
desidrogenases?
Reao 3
NADPH NADP+
O O
P O CH2 CH C O CH2 CH C
P
O P H
OH OH
CEDERJ 7 7
Bioqumica II | O ciclo de Calvin ou etapa qumica da fotossntese
2 6
Gliceraldedo 3P ou
Frutose-6P Frutose-6P (ou DHP)
Gicose 1P
Figura 7.3: Resumo das reaes do ciclo de Calvin. O ciclo ocorre para cumprir duas funes: uma a sntese
de glicose e outras molculas orgnicas; a outra a regenerao da ribulose 1,5-bisfosfato, molcula essencial
para reiniciar o ciclo.
7 8 CEDERJ
MDULO 2
PRODUO DE GLICOSE
7
Seis molculas de CO2 podem gerar doze molculas de gliceraldedo
AULA
3-fosfato (G3P). As doze molculas de gliceraldedo-3-fosfato podem seguir
vrios destinos diferentes e, portanto, ser substrato para a sntese de muitas
outras molculas orgnicas ou regenerar o aceptor inicial de CO2 (ribulose
1,5-bisfosfato).
Duas dessas molculas de G3P so utilizadas para produzir uma
Figura 7.4: Algas fotossin- glicose-fosfato (via gliconeognese), e as outras dez so usadas para
tetizantes. Fonte: http: //
old.jccc.net/~pdecell/photosyn/ regenerar as seis molculas iniciais de ribulose 1,5-bisfosfato. Estas so
photoframe.html
necessrias para ligar outras seis molculas de CO2 e reiniciar o ciclo.
Das dez G3P envolvidas na regenerao da RBP, quatro formaro duas
molculas de frutose 6-fosfato.
Muitas das reaes do ciclo de Calvin so comuns via das pentoses-
fosfato (Aula 20). As duas molculas de frutose 6-fosfato reagem com 6
G3P. Gliceraldedo 3P pode ainda ser isomerizado a dihidroxiacetona-
fosfato (DHAP). As enzimas transcetolase, aldolase, fosfatase e outra
transcetolase geram intermedirios combinando G3P e DHAP. Estes
intermedirios incluem xilulose 5-fosfato e ribulose 5-fosfato. A ribulose
5P pode ser convertida a ribulose 1,5-bisfosfato, cuja reao requer um
ATP por molcula convertida. A converso de seis molculas de ribulose
1,5-bisfosfato, necessrias para fixar 6 CO2, requer seis molculas de
ATP. A sntese de uma molcula de glicose requer dezoito ATPs e doze
NADPHs.
Assim, o gliceraldedo 3-P, um dos produtos mais importantes
da fotossntese, usado em uma grande variedade de rotas metablicas,
tanto dentro como fora do cloroplasto. Como voc viu, ele pode, por
! exemplo, ser convertido a frutose 6-fosfato. A frutose 6-fosfato pode ser
A sntese do
glicognio convertida a glicose 1-fosfato pela ao da fosfoglicose isomerase e pela
voc ver nas
Aulas 26 e 27.
fosfoglicomutase. A glicose 1-fosfato uma molcula importante, pois
precursora de carboidratos complexos caractersticos de vegetais. Entre eles
destaca-se a sacarose, o principal acar de transporte para fornecimento
de carboidratos para clulas no fotossintetizantes; o amido, o principal
polissacardeo de reserva; e a celulose, o principal componente estrutural
O de paredes celulares. Na sntese de todas essas substncias, a glicose 1-P
P O CH2 CH C
H ativada pela formao de ADP-, CDP-, GDP- ou UDP-glicose, dependendo
OH
da espcie e da via metablica. A unidade de glicose , ento, transferida
Gliceraldedo-3P
para o terminal no redutor de uma cadeia crescente de polissacardeo,
Figura 7.5
como ocorre na sntese do glicognio.
CEDERJ 7 9
Bioqumica II | O ciclo de Calvin ou etapa qumica da fotossntese
1) 2X Gliceraldedo 3P 2Dihidroxicetona P
2X 3C 2X 3C
8) Ribulose 5P Ribulose 5P
5C 5C
9) 2 Xilulose 5P 2 Ribulose 5P
2X 5C 2X 5C
8 0 CEDERJ
MDULO 2
TRANSPORTE DE TRIOSES FOSFATO
7
As trioses fosfato (3-fosfoglicerato, 1,3-bisfosfoglicerato, gliceraldedo
AULA
3-fosfato, dihidroxiacetona-fosfato) so crticas para o metabolismo de
acares em plantas. No estroma do cloroplasto, as trioses fosfato so
usadas como substrato para a gliconeognese (sntese de glicose).
+
ATP ADP NADH NAD
ATP
Pi
ADP
1,3BPG G3P DHAP
Estroma do
cloroplasto
NADPH NADP+
!
Sntese de sacarose a reao de UDP-glicose com frutose 6P catalisada pela
enzima sacarose 6P sintase.
CEDERJ 8 1
Bioqumica II | O ciclo de Calvin ou etapa qumica da fotossntese
HOCH2 HN
H O H
H O O N
UDP-Glicose HO
OH H
O O P O CH2
O
H OH O O O
H H
H H
OH OH
HOCH2
OH
Frutose 6-P H HO
HO CH2OPO32
OH H
Figura 7.7: ATP e NADPH podem ser transferidos do cloroplasto para o citoplasma da clula vegetal por trans-
portadores especficos. Estas molculas so usadas no citoplasma como fonte de energia e equivalentes redutores
para converter as trioses fosfato em sacarose, que transportada atravs do sistema circulatrio do vegetal para
tecidos no fotossintticos (como as razes) onde ser usada no metabolismo energtico.
RESUMO
Nesta aula, voc viu que as reaes da fase escura usam ATP e NAPH produzidos
na fase clara para realizar a sntese de carboidratos a partir de CO2. O primeiro
evento do ciclo de Calvin a fixao do CO2 atravs de sua reao com a ribulose
1,5-bisfosfato para formar, em ltima anlise, duas molculas de gliceraldedo
3P (GAP). As reaes remanescentes do ciclo regeneram o aceptor inicial de
CO2, ribulose 1,5-bisfosfato. A prxima aula ser a ltima do mdulo, e nela
falaremos de fotorrespirao e regulao da fotossntese. Finalmente, teremos
tambm os exerccios e auto-avaliao do mdulo. Vamos ento Aula 8.
8 2 CEDERJ
8
AULA
Outros aspectos
importantes da fotossntese
Bioqumica II | Outros aspectos importantes da fotossntese
Fotorrespirao
84 CEDERJ
MDULO 2
RuBisCO Desta forma, a enzima inicia a via
O2 CO2
8
Ribulose conhecida como fotorrespirao, onde a
- -bisP
1,5
AULA
Ciclo de ribulose 1,5-fosfoglicerato convertida a
Calvin Cloroplastos
fosfoglicolato 3 PG fosfoglicolato (Figura 8.2).
ADP
P1
ATP
Glicolato Glicerato
O2 Peroxissomas
H2O2 (microcorpos)
Glioxilato Serine
Glicina
Glicina Serine
Mitocndrias
CO2+NH3
CEDERJ 85
Bioqumica II | Outros aspectos importantes da fotossntese
Plantas C4
!
Para plantas C4, ver tambm:
http://www.icb.ufmg.br/prodabi/grupo5/Photosynthesis/c4/c4.html
Explore a pgina: tem muita coisa legal sobre fotossntese.
86 CEDERJ
MDULO 2
8
AULA
CO2
Co2
Pi COO
CH2
PEP
carboxilase C O
COO
Oxaloacetato
-
+ COO
NADPH+H
CH2 Clulas da bainha
+
CH2 H C OH Malate NADP
2 +
C O PO3 NADP COO
Malate
COO
fosfoenolpiruvato Ch3
NADPH Ciclo
C O piruvato + de
CO2 Calvin
AMP+PPi ATP+P
Pii COO-
Plantas CAM
Regulao da fotossntese
CEDERJ 87
Bioqumica II | Outros aspectos importantes da fotossntese
citoplasma
Ferredoxina Ferredoxina
Lmen reduzida oxidada
Figura 8.4: Regulao da
do 2e+
tilacide 2H fotossntese. Os nveis de
prtons e Magnsio no
+ 2+ Tioredoxina SH S Tiorredoxina estroma do cloroplasto
H Mg reduzida oxidada
SH S modulam a atividade da
+
Estroma do [H ] 2e+ RuBisCO. O estado redox
cloroplasto 2+ 2H das enzimas do ciclo de
[Mg ] Calvin outro importante
Enzimas do ciclo
SH S Enzimas do ciclo
Ativao da de calvin reduzidas de calvin oxidadas mecanismo de regulao
(ativas) SH S
RuBisCO (inativas) das enzimas.
88 CEDERJ
MDULO 2
Tecnicamente, clulas verdes so a nica parte autotrfica da
8
planta. O resto da planta depende de molculas orgnicas exportadas
AULA
pelas folhas nos sistemas vasculares. Na maioria das plantas, carboidratos
so transportados das folhas na forma de sacarose, um dissacardeo
(Figura 8.5). Quando chega s clulas no fotossintetizantes, a sacarose
usada na respirao celular e em uma grande variedade de vias
anablicas. Uma considervel parte da glicose usada para produzir
celulose. Celulose a molcula orgnica mais abundante na planta e
provavelmente na superfcie do planeta.
CH2OH
O HOCH2
H H O H
H
OH H
1 + 2 H HO
HO O UDP HO CH2 O P
H OH OH H
UDP-glicose Frutose-6-fosfato
UDP Sacarose 6-
fosfato sintase
CH2OH
O HOCH2
H H O H
H
1 2
OH H H HO
HO CH2 O P
O
H OH OH H
Sacarose 6-fosfato
Sacarose 6-
Pi fosfato fosfatase
CH2OH
O HOCH2
H H O H
H
1 2
OH H H HO
HO CH2OH
O
H OH OH H
Figura 8.5: Sntese de sacarose
a partir de UDP-glicose. Sacarose
O excesso de glicose usado na sntese de amido que estocado em folhas (no prprio
cloroplasto) e em clulas de armazenagem como razes, tubrculos e frutos. Isto tudo substrato
oxidativo para heterotrficos, incluindo humanos.
Nenhum outro processo qumico na Terra tem essa produtividade e nenhum mais impor-
tante para a manuteno da vida no planeta.
CEDERJ 89
Bioqumica II | Outros aspectos importantes da fotossntese
RESUMO
90 CEDERJ
MDULO 2
EXERCCIOS DE FIXAO
8
AULA
1. O que fotossntese?
c) No fotossistema I, o eltron outra vez excitado pela luz e usado para reduzir
a ferredoxina. ( )
a) produo de ATP;
e) formao de NADPH.
CEDERJ 91
Bioqumica II | Outros aspectos importantes da fotossntese
8. Por que nossos olhos detectam como verde estruturas contendo clorofila?
1. O que fotossntese?
a via metablica de sntese de glicose a partir de CO2 e H2O que ocorre em clulas
especializadas com energia derivada do sol (energia luminosa).
c) No fotossistema I, o eltron outra vez excitado pela luz e usado para reduzir
a ferredoxina ( ).
92 CEDERJ
MDULO 2
4. Quando a cadeia transportadora de eltrons est em pleno funcionamento, o
8
pH do lmen do tilacide ser menor que (maior que, menor que ou igual a) o
AULA
pH do estroma.
a) produo de ATP.
e) formao de NADPH.
8. Por que nossos olhos detectam como verde estruturas contendo clorofila?
Para responder, veja a ordem dos intermedirios do ciclo de Calvin e observe suas
estruturas. Nem todas so mostradas na aula. Pesquise nos livros de bioqumica
do plo.
CEDERJ 93
Bioqumica II | Outros aspectos importantes da fotossntese
Discuta com seus colegas e seu tutor, procure nos livros, siga a pista dada para a
pergunta anterior.
94 CEDERJ
9
AULA
A histria da fermentao:
do incio aos dias de hoje
Bioqumica II | A histria da fermentao: do incio aos dias de hoje
96 CEDERJ
MDULO 3
Suas receitas foram publicadas em um livro (Figura 9.1), considerado
9
por muitos como o primeiro livro de Bioqumica.
AULA
Hoje o processo fermentativo amplamente
conhecido e mundialmente utilizado em escala !
industrial. A cerveja um exemplo de produto obtido Acesse http://perso.magic
. f r / o r m e r r y /
a partir deste processo, onde o organismo fermentador newindex.html para
saber mais sobre Nicolas
uma levedura. Appert e suas importantes
contribuies para a
indstria de alimentos.
A IMPORTNCIA DA HISTRIA DA FERMENTAO NA e http://members.nbci
.com/_XMCM/cervas/
HISTRIA DA BIOQUMICA fabricacao.htm) se voc
quer saber mais sobre
Com base no livro de Mr. Appert, um fsico-qumico da poca como se fabrica cerveja.
CEDERJ 97
Bioqumica II | A histria da fermentao: do incio aos dias de hoje
SOLUO DO SEGREDO DA
FERMENTAO ALCOLICA
98 CEDERJ
MDULO 3
Essa passagem mostra que havia uma forte resistncia idia s/O2
c/O2 produzido
9
de que a fermentao era um processo biolgico que dependia do
AULA
metabolismo dos glbulos observados por Pasteur. Ao contrrio,
Liebig e boa parte da comunidade cientfica da poca acreditavam
que a fermentao era, na verdade, um processo meramente qumico,
c/O2
CEDERJ 99
Bioqumica II | A histria da fermentao: do incio aos dias de hoje
Pense
ficar famoso.
sobre isso!
Que conseqncias os resultados acima proporcionaram teoria
Vitalista de Pasteur e pesquisa bioqumica?
100 CEDERJ
MDULO 3
A FERMENTAO E A VIA GLICOLTICA
9
Paralelamente descoberta dos irmos Bchner, de
AULA
que a fermentao ocorria mesmo na ausncia de vida,
Arthur Harden e William John Young, dois pesquisadores
ingleses, foram contratados por uma fbrica de cerveja para
estudar a fermentao.
Em 1903, eles estabeleceram a relao de 1:1 entre gs Figura 9.6: Uma placa de estrada
na Inglaterra anunciando Young e
carbnico e etanol produzidos pela fermentao do acar. Harden. Para onde esses dois levaram
a Bioqumica?
Utilizando o extrato de levedura na presena de glicose e
medindo a produo de CO2, eles observaram que a fermentao ocorria
durante algum tempo, sendo porm interrompida aps certo perodo.
Eles observaram tambm que a fermentao alcolica da glicose,
por suco de levedura (o extrato de levedura dos irmos Bchner), era
muito aumentada pela adio de mais suco de levedura, o qual tinha sido
previamente fervido e filtrado. Este lquido fervido, por si s, era incapaz
de fermentar quando em presena de glicose. Observe o Grfico 9.1. Ele
representa o andamento da fermentao ao longo do tempo.
1200 B
1100
Dixido de carbono
1000
900
800
700
600
500
400
300 A
200
100
0 DILISE
Dilise um
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 procedimento atravs
do qual se separam
Tempo em horas molculas grandes de
molculas pequenas.
Grfico 9.1: Medida de dixido de carbono em funo do tempo de fermentao. A dilise baseia-se na
Curva A: na presena de 25 mL de suco de levedura + 25 mL de gua + 5g de glicose; capacidade de estas
Curva B: na presena de 25 mL do mesmo suco de levedura que na curva A + 25 mL molculas atravessarem
de suco de levedura fervido + 5g de glicose. os poros de uma
Pense membrana.
sobre isso! O limitante, ento, ser
O que sugere esse resultado? o tamanho, ou seja,
Harden e Young submeteram o suco de levedura fervido DILISE molculas pequenas
passam e molculas
e assim separaram duas fraes distintas (Tabela 9.1). Uma frao era grandes no passam
pelos poros. Para que
composta de molculas pequenas que passaram pela membrana de dilise. esta seletividade seja
eficiente, voc pode
Outra frao era composta de molculas grandes, que no passaram na
imaginar o tamanho que
membrana de dilise e, portanto, foram chamadas resduo. estes poros devem ter?
CEDERJ 101
Bioqumica II | A histria da fermentao: do incio aos dias de hoje
2 25 0 0 0 48 0,154
0 0 0 25 48 0,251
Pense
sobre isso!
Levando-se em considerao os resultados, que caracterstica
teria, ento, o ativador da fermentao?
102 CEDERJ
MDULO 3
Grfico 9.2: Efeito da adio de fosfato na
130 fermentao.
9
120 C Mistura da reao: 25 mL de suco de levedura
AULA
110 + 20 mL de gua + 5 g de glicose.
Dixido de carbono
Tempo em minutos
Pense
sobre isso!
Qual seria ento o destino do fosfato inorgnico?
Utilizando um sal de prata, Harden e Young foram capazes de
isolar, por precipitao, um composto fosforilado com seis carbonos
(6C) e dois fosfatos, e identificaram como sendo frutose-1,6-bisfosfato,
denominado ster de Harden e Young, o primeiro intermedirio da via
glicoltica identificado. Na poca, os autores ficaram em dvida se o
composto era uma hexose difosfatada ou duas trioses monofosfatadas. Pense
sobre isso!
Como voc faria para provar que este composto realmente
participa do processo fermentativo?
A seguir, Otto Meyerhoff, um pesquisador alemo, trabalhando
com msculo de r, peito de pombo e de coelho, mostrou que o msculo
se contraa na ausncia de oxignio e isso resultava na produo de
cido ltico.
Esse processo pode ser ativado por duas fraes do extrato de
msculo, uma termossensvel (frao sensvel ao calor, tambm chamada
zimazes) e outra termorresistente (frao insensvel ao calor, chamada
cozimazes). Mas este no foi o nico paralelo entre a fermentao da
levedura e os msculos do pombo: Meyerhoff testou Pi nos msculos
e obteve os mesmos resultados de Harden e Young. Assim, sabendo
que a glicose consumida pelo extrato de levedura na fermentao,
resultando em etanol e dixido de carbono, e que a adio de glicose em
macerados de msculo de coelho resultava no aparecimento de lactato,
Otto Meyerhoff levantou a possibilidade de as protenas envolvidas nos
dois processos serem tambm semelhantes. Pense
sobre isso!
Que experincia voc faria para testar esta hiptese?
CEDERJ 103
Bioqumica II | A histria da fermentao: do incio aos dias de hoje
DROGA EFEITO
1. Fluoreto de sdio Acmulo de 2-fosfoglicerato e a
seguir 3-fosfoglicerato.
2. Cloro-acetal-fosfato (CAP) Acmulo de dihidroxicetona fosfato e
frutose 1,6-bisfosfato.
3. Iodoacetato Um sbito acmulo de gliceraldedo
1,3-bisfosfato seguido do seu rpido
desaparecimento e de um grande
acmulo de frutose 1,6- bisfosfato.
Pense
sobre isso!
A partir destes dados, deduza as possveis etapas envolvidas na
degradao da glicose.
104 CEDERJ
MDULO 3
intermedirios e D o produto final.
9
AULA
Se um determinado inibidor interrompe a reao B D, qual
dos intermedirios ser acumulado? O que no ser mais produzido?
Utilize esta lgica para cada uma das linhas da tabela e encontre
as reaes isoladamente.
CEDERJ 105
10
AULA
Gliclise: oxidao
de glicose a piruvato I
Bioqumica II | Gliclise: oxidao de glicose a piruvato I
INTRODUO Na aula anterior, voc conheceu a histria da Gliclise e soube como se chegou
ao conhecimento disponvel sobre esta via metablica. Agora podemos falar um
pouco mais sobre ela, suas funes, seus intermedirios, enzimas, cofatores etc.
Essa uma via importante, pois a glicose (que voc j conhece da Bioqumica I)
, quantitativamente, o principal substrato oxidvel na maioria dos seres vivos:
dos microorganismos ao homem. A gliclise a principal via para a utilizao da
glicose e ocorre no citosol da maioria das clulas, sendo considerada, portanto,
uma via universal. Ela pode ocorrer se o oxignio estiver disponvel (aerobiose)
ou na total ausncia dele (anaerobiose).
Esquema 10.1
108 CEDERJ
10 MDULO 3
A GLICOSE COMO INDICADOR METABLICO
AULA
na glicemia so indicadores do estado fisiolgico do organismo.
Assim, quando a glicemia est baixa (hipoglicemia), as clulas tm
um comportamento metablico distinto daquele que ocorre quando a
glicemia est alta (hiperglicemia).
Hiperglicemia indica um estado fisiolgico de fartura e, portanto,
de armazenamento ou biossntese (anabolismo como voc viu nas aulas
de introduo ao metabolismo).
Hipoglicemia indica um estado fisiolgico de privao, mesmo
que momentnea, e as clulas respondem derivando seu metabolismo
para a degradao (catabolismo).
Os nveis sangneos de glicose so mantidos dentro de uma
faixa estreita, graas a diferentes vias metablicas de sntese de glicose
(gliconeognese) ou armazenamento de glicose na forma de glicognio
(glicogenognese), em contraposio a vias de oxidao de glicose
(gliclise). Esse processo, que procura manter os nveis de glicose no sangue
constantes, chama-se homeostase e finamente regulado por hormnios.
Pequenas variaes nesse nvel indicam, para as clulas, o que fazer.
Glicognio um
polmero de glicose.
Gliconeognese ou neo-
glicognese sntese de
Glicose glicose a partir de precur-
sores no glicdicos.
Glicogenognese sn-
tese de glicognio.
Gliclise e ciclo Via das
Fotossntese Gliconeognese Gliclise quebra da
de Krebs pentoses-
glicose.
fosfato
Glicogenlise quebra
do glicognio.
CEDERJ 109
Bioqumica II | Gliclise: oxidao de glicose a piruvato I
O OH OH
NH 2
N
O P O- N Adenina
N N
O CH2 O
H H
H H
OH OH -
NAD+
(oxidado)
Figura 10.3: Nicotinamida adenina dinucleotdeo NAD. O NAD pode estar na sua
forma oxidada NAD+ ou na sua forma reduzida NADH.
Para que esta via ocorra, existem etapas que consomem energia
(atravs da hidrlise de ATP - Figura 10.4): etapas endergnicas, onde a
molcula de glicose preparada para ser clivada; e etapas que sintetizam
ATP: etapas exergnicas, onde molculas de ATP so formadas a partir
da energia liberada durante o processo oxidativo.
fosfoster
NH 2
Ligaes Figura 10.4: Adenosina
fosfoanidras N
N trifosfato ATP. Em
destaque, a ligao
N
fosfoster entre a
O O O N adenosina e o fosfato e
as ligaes fosfoanidras,
O P O P O P O
g b a CH2 O entre fosfatos.
O O O H H
H H
OH OH -
Adenosina
AMP
ADP
ATP
110 CEDERJ
10 MDULO 3
No processo completo, associando-se consumo e formao de
ATP, temos um saldo lquido de duas dessas molculas. Vale ressaltar
AULA
que, na realidade, conservamos parte da energia liberada nesse processo
oxidativo na formao de ligaes sterfosfato (ligaes ricas em energia)
entre a molcula de ADP e fosfato inorgnico (Pi). Uma viso geral deste
processo apresentada na Figura 10.5.
Como produtos desta via temos, alm de ATP e NADH, duas
molculas de piruvato. O destino deste piruvato depende da clula e da
presena ou ausncia de oxignio, como veremos mais adiante.
2 piruvato
Lactato CO2
2+ Etanol
H2
2O + CO2
2
CEDERJ 111
Bioqumica II | Gliclise: oxidao de glicose a piruvato I
112 CEDERJ
10 MDULO 3
Esta reao dependente de energia, sendo, portanto, acoplada
clivagem de uma molcula de ATP e catalisada pela enzima hexoquinase.
AULA
(Figura 10.6).
a b
Figura 10.6: Hexoquinase e seu mecanismo de ao. A seta indica o substrato (glicose)
em (a) se aproximando do stio ativo. Em (b) a mudana conformacional induzida pela
ligao do substrato (fit induzido).
CEDERJ 113
Bioqumica II | Gliclise: oxidao de glicose a piruvato I
114 CEDERJ
10 MDULO 3
Reao 3: Frutose 6P Frutose 1,6-bisfosfato
O O O
AULA
6 6 1
- O P O CH 1 - O P O CH CH 2 O P O-
2 O ATP ADP 2 O
- CH 2 OH
O- O-
2+
O 5 Mg 5
H HO 2 H HO 2
H OH H OH
4 3 4 3
OH H OH H
frutose 1,6-bisfosfato
Frutose 6-fosfato
G = -14,2 kJ/mol
Figura 10.7: Fosfofrutoquinase (PFK). A PFK uma enzima chave da gliclise. Preste ateno nas
caractersticas da enzima e da reao que ela catalisa. Esta reao um importante ponto de
regulao da via, como veremos na prxima aula.
O O O H
6
O
O P O CH 2 CH 2 O P O- C
O CH 2 O P O-
O O- HCOH O
5
H HO 2 C O O- +
H OH aldolase CH 2 O P O-
4 3
C H2 OH
OH H O-
Dihidroxiacetona Gliceraldedo
Frutose 1,6-bisfosfato 3-fosfato 3-fosfato
CEDERJ 115
Bioqumica II | Gliclise: oxidao de glicose a piruvato I
C O O HCOH O
CH 2 O P O-
Triose fosfato CH 2 O P O-
isomerase
O- O-
Dihidroxiacetona Gliceraldedo
fosfato 3-fosfato
116 CEDERJ
10 MDULO 3
AULA
Clivagem de um
acar-fosfato de seis
carbonos em dois
acares- fosfato de
trs carbonos.
CEDERJ 117
11
AULA
Gliclise: oxidao
de glicose a piruvato II
Bioqumica II | Gliclise: oxidao de glicose a piruvato II
INTRODUO Nesta aula continuaremos a falar da gliclise. Dessa vez, exploraremos a etapa
de pagamento ou de sntese de ATP. Lembre-se de que:
Na primeira fase, dois ATPs foram hidrolisados para fosforilar a molcula
de glicose.
Os produtos da primeira fase so duas molculas de gliceraldedo 3P, um
acar fosforilado de trs carbonos.
O
Reao 6: O H + + + O O P O
NAD NADH + H
C O C
O
HCOH + HO P O HCOH
2 Gliceraldedo 2
CH2OPO3 O 3-fosfato CH2OPO3
desidrogenase
Gliceraldedo Fosfato 1,3
3-fosfato inorgnico Bifosfoglicerato
bifosfoglicerato
DG = 6,3 kJ/mol
0
120 CEDERJ
11 MDULO 3
Parte da energia que foi liberada no processo oxidativo
(transformao de gliceraldedo em glicerato) foi conservada na formao
AULA
de uma molcula de 1,3-BISFOSFOGLICERATO, que possui, ento, um potencial 1,3 - B I S F O S F O G L I -
CERATO
energtico maior do que o G3P. Nesta reao, uma molcula de NAD+
a primeira
reduzida a NADH + H+. Esta uma reao tpica, catalisada por uma molcula de alta
classe de enzimas denominadas desidrogenases ligadas ao NAD+. energia formada
na gliclise.
Na etapa seguinte, a energia conservada na molcula de 1,3-
bisfosfoglicerato (BPG) ser utilizada na formao de uma molcula de
ATP (ligao ster-fosfrica entre ADP + Pi), sendo o BPG convertido,
ento, em 3-fosfoglicerato (3PG).
Reao 7:
O
O P 2+ O P O
Mg O O
O O P O + P C + P
C
O fosfoglicerato
P
O quinase HCOH
HCOH 2
Rib Adenina CH2OPO3 O
2
CH2OPO3 ADP 3fosfoglicerato Rib Adenina
1,3 ATP
bifosfoglicerato DG0 = 18,5 kJ/mol
CEDERJ 121
Bioqumica II | Gliclise: oxidao de glicose a piruvato II
Reao 8:
O O O O
C C O
Mg2+
HC OH O HC O P O
fosfoglicerato
CH2 O P O mutase CH2 OH O
O 2-fosfoglicerato
3-fosfoglicerato G= 4,4 kJ/mol
Reao 9: O O- O O-
H2O
C O C O
H C O P O- C O P O-
enolase
HO CH 2 O - CH 2 O-
2-fosfoglicerato Fosfoenolpiruvato
fosfoenolpiruvato
G= 7,5 kJ/mol
O
O O O O
C O P 2+ + C O P O
Mg , K
C O P O + P C O + P
Piruvato
Ch2 O O quinase Ch3 P
Fosfoenolpiruvato Rib Adenina Piruvato O
Rib Aden
ATP
DG = 31,4 kJ/mol
0
122 CEDERJ
11 MDULO 3
Devemos lembrar que, nesse segundo estgio, partimos de duas
molculas de gliceraldedo 3P e, portanto, duas molculas de piruvato,
AULA
duas de NADH + H+ e quatro molculas de ATP foram formadas. Ao
calcularmos o rendimento energtico em termos de formao de ATPs,
veremos que foram gastas duas molculas no primeiro estgio da via e
que foram ressintetizadas quatro molculas, ou seja ocorreu formao
lquida de duas molculas de ATP (Figura 11.1).
!
Fase de pagamento
Converso oxidativa de
gliceraldedo 3-fosfato
em piruvato e a formao
acoplada de ATP e NADH.
CEDERJ 123
Bioqumica II | Gliclise: oxidao de glicose a piruvato II
Fermentao ltica
Fermentao alcolica
piruvato acetaldedo
piruvato
descarboxilase
acetaldedo etanol
lcool
desidrogenase
124 CEDERJ
11 MDULO 3
2o destino Quando em condies aerbicas, o piruvato
transferido para as mitocndrias e, aps converso em acetil-Coenzima A
AULA
(Acetil-CoA), oxidado em CO2 no ciclo do cido ctrico. Os equivalentes
do NADH + H+ produzidos na via glicoltica so tambm levados para
as mitocndrias, onde sero transferidos para aceptores especficos,
em um processo que veremos mais tarde e que denominado cadeia
transportadora de eltrons.
!
Enzimas chaves da via glicoltica:
HEXOQUINASE FOSFOFRUTO-
QUINASE PIRUVATO QUINASE
CEDERJ 125
Bioqumica II | Gliclise: oxidao de glicose a piruvato II
RESUMO
126 CEDERJ
11 MDULO 3
Nas trs ltimas aulas, voc conheceu uma das vias metablicas
mais importantes do metabolismo energtico. No perca de vista a
AULA
totalidade dessas aulas, pois, mais importante que saber detalhes da via
metablica, a compreenso do seu sentido fisiolgico, ou seja, para
que ela serve. Isso vai orientar voc quanto ao que precisar ser fixado
realmente. No deixe de entender os conceitos de mxima economia, de
molculas de alta energia, de acoplamento entre reaes. Tais conceitos
so universais quando se trata de Bioqumica e entend-los facilita a
compreenso dessa e de cada uma das outras vias metablicas que voc
ver na Bioqumica II.
O prximo mdulo chama-se respirao celular. Ele fala das vias
complementares gliclise que ocorrem na presena de oxignio (ciclo
de Krebs ou ciclo do cido ctrico e cadeia transportadora de eltrons).
Portanto, no esquea que a gliclise tambm parte desse processo.
EXERCCIOS
b) duas molculas de piruvato so formadas por cada molcula de glicose que entra
na via;
CEDERJ 127
Bioqumica II | Gliclise: oxidao de glicose a piruvato II
a) aldolase;
b) enolase;
c) piruvato carboxilase;
d) piruvato quinase.
a) requer ATP;
a) libera energia;
128 CEDERJ
11 MDULO 3
7 . Com relao ao processo de fermentao alcolica (etanlica), podemos dizer que:
AULA
produzem lactato;
9. Como voc explicaria a existncia de uma mesma via metablica presente desde
os microorganismos at os seres mais complexos que conhecemos?
10. Voc reparou que todos os compostos da via glicoltica, exceto a molcula
de piruvato, encontram-se fosforilados? Pense/especule sobre uma razo
para este fato.
CEDERJ 129
Bioqumica II | Gliclise: oxidao de glicose a piruvato II
a) enolase;
b) aldolase;
d) piruvato quinase.
130 CEDERJ
11 MDULO 3
4. A converso de gliceraldedo 3P a 1,3-bisfosfoglicerato:
AULA
b) inibida por frutose-1,6 bisP;
a) libera energia;
CEDERJ 131
Bioqumica II | Gliclise: oxidao de glicose a piruvato II
9. Como voc explicaria a existncia de uma mesma via metablica presente desde
os microorganismos at os seres mais complexos que conhecemos?
10. Voc reparou que todos os compostos da via glicoltica, exceto a molcula
de piruvato, encontram-se fosforilados? Pense/especule sobre uma razo
para este fato.
132 CEDERJ
I SBN 85 - 8920 - 075 - 2
cdigo
de barras
9 788589 200752