REACCIONES ENZIMTICAS

Integrantes: Paulette Diocares

Valentina Mora
Dayanne Larenas
M Beln Solis

Docente: Silvina Guzmn

Carrera: Medicina Veterinaria
Asignatura: Qumica Biolgica
Seccin: 2
INTRODUCCIN

La vida depende de la existencia de poderosos y especficos catalizadores como lo son las enzimas,
nombre que le dio el fisilogo Willy Khne.

Generalmente todas las reacciones bioqumicas son catalizadas por una enzima las cuales podemos
clasificar en 6 grupos:

1. Oxidorreductasas (oxidaciones y reducciones).

2. Transferasas (transferencia de porciones)

3. Hidrolasas (divisin hidroltica de CC,otros enlaces).

4. Liasas (divisin de CC, CO, CN y otros enlaces)

5. Isomerasas (cambios estructurales dentro de una molcula).

6. Ligasas (unin de dos molculas acopladas a la hidrlisis de ATP). (Murray, 2004)

A excepcin de un grupo de molculas de ARN cataltico, todas son protenas en las que su
actividad cataltica depende de la conformacin nativa que presentan. Esta, con su coenzima y/o iones
metlicos, se denomina holoenzima. Si la enzima se desnaturaliza, ya sea porque fue expuesta a altas
temperaturas u otros factores, la actividad cataltica suele desaparecer al perder la estructura
secundaria, terciaria y cuaternaria de su protena.

Las reacciones catalizadas se distinguen por la formacin de un complejo entre el sustrato y la

enzima, realizado esto se rebaja la energa de activacin pero, no cambian la diferencia de energa entre
los reactivos y reactantes. Si el pH fuese alterado se cambiara el grado de ionizacin de los grupos
qumicos que permanecen en el sitio activo afectando as su actividad.

La amilasa es una enzima presente en la saliva que inicia la degradacin del almidn, una principal fuente
de carbohidratos. Esta enzima hidroliza los enlaces alfa 1,4 que unen residuos de glucosa en el almidn.
Esta enzima acta desdoblando el almidn hasta alfa dextrinas para luego conseguir maltosa y en cierto
punto de esto se produce eritrodextrina. (Nelson, 2008)

Los objetivos del prctico son:

- Analizar las reacciones de la enzima catalasa frente a distintos factores qumicos.

- Identificar la reaccin de la amilasa salival frente al almidn.

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- Demostrar los efectos que producen el cambio de variaciones de ph y temperatura en las enzimas.

PROCEDIMIENTO

Reconocimiento y desnaturalizacin de la catalasa

1. Se utilizaron 4 tubos de ensayo. En dos tubos se coloc trocitos de tomate, y, en los otros dos,
trocitos de hgado de bovino. (Ver tabla 1, Ver Anexo Figura 1a)

Tabla 1
Contenido de los distintos tubos para la realizacin del experimento.
N de tubo 1 2 3 4

Contenido Trozos de tomate Trozos de tomate Trozo de hgado Trozo de hgado

2. A los tubos 1 y 3 se les agreg 3 ml de perxido de hidrgeno. Se observ la reaccin. (Ver Anexo
Figura 1b)
3. Los tubos 2 y 4 se hirvieron en un bao termoregulado durante 4 minutos. (Ver Anexo Figura 3a)
4. Se retiraron del agua y se les aadi 5 ml de perxido de hidrgeno. Se observ y compar esta
reaccin con la anterior.

Hidrlisis de almidn

1. En una gradilla se ubicaron 4 tubos de ensayo, cada uno con su respectivo nmero.
2. A cada tubo se le aadi 5 ml de una solucin diluida de almidn. (Ver Anexo Figura 2a)
3. Al tubo 1 se le realiz la Reaccin de Fehling , agregando 1 ml de Fehling A y 1 ml de Fehling B.
(Ver Anexo Figura 2c)
4. Posteriormente, se calent en el bao termoregulado durante 4 minutos. Se registr el color que
tom la muestra.
5. Con el tubo 2 se ejecut la reaccin de Lugol, agregndole unas gotas de esta disolucin. Se
observ el cambio de color de la reaccin. (Ver Anexo Figura 2b)
6. A los tubos 3 y 4 se les agreg saliva. Luego se colocaron en el bao termoregulado.
7. Se retiraron los tubos del agua y, en el tubo 3 se procedi nuevamente a hacer la Reaccin de
Fehling. Se registr lo observado.
8. Tambin, en el tubo 4, se hizo nuevamente la prueba con Lugol y se compararon los resultados
para los distintos tubos. (Ver Anexo tabla 2)

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RESULTADOS

Reconocimiento y desnaturalizacin de la catalasa

Al aplicar calor en un bao termorregulado a los trozos de tomate e hgado de los tubos n2 y
n4 respectivamente, no hubo ningn tipo de reaccin. Al someter en perxido de hidrgeno a
los trozos de tomate e hgado de los tubos n1 y n3 se obtuvo burbujeo leve para el tomate y
mayor cantidad de burbujeo en el hgado (Ver Anexo Figura 1c), por consiguiente liberacin de
oxgeno en ambos tubos, pero en distinta medida. (Ver tabla 3)

Tabla 3
Resultados para los tubos al aplicar bao termorregulado y al someter a perxido de hidrgeno.
Hgado Tomate

2 2 Tubo n3: Burbujeo Tubo n1: Burbujeo leve

Bao termoregulado Tubo n4: No hay reaccin Tubo n2: No hay reaccin

Se observa mayor reaccin en el hgado que en el tomate (Ver Anexo Figura 1c)

Hidrlisis de almidn

-Para los tubos 1 y 2, que solo contenan almidn, no se observaron cambios de color, y tampoco
otro tipo de reaccin. (Ver Anexo Figura 3b)

-Para el tubo 3 con almidn y amilasa salival no se observ cambio de color. (Ver Anexo Figura
3c)

-Para el tubo 4 con almidn y amilasa salival se observ cambio de color de la reaccin a violeta.
(Tabla 3, Ver Anexo Figura 3c)

Tabla 3
Resultado para los tubos en tinciones fehling y lugol.
Fehling Lugol

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 Tubo n1 (almidon) Negativo -

Tubo n2 (almidn) - Negativo

Tubo n3 (almidn+amilasa) Negativo -

Tubo n4 (almidn+amilasa) - Positivo

DISCUSIN

Para el experimento de la catalasa, se obtuvo mayor reaccin para el hgado, ya que este posee mayor
cantidad de protenas que el tomate y debido a que la catalasa es una enzima que tiene como funcin
catalizar la conversin de perxido de hidrgeno en agua y dioxgeno, se obtiene como resultado el
burbujeo del tubo de ensayo n3, adems se obtiene liberacin de calor en el proceso, debido al
rompimiento de enlaces.

En el caso de los tubos expuestos al calor no hubo efecto porque se desnaturaliz la enzima antes de
ponerla en contacto con el perxido de hidrgeno, por lo tanto, la catalasa no acta rompiendo los
enlaces de ste. La temperatura afecta a todas las reacciones qumicas. En general, cuanto mayor es la
temperatura, mayor es la velocidad de reaccin. Las velocidades de las reacciones catalizadas por
enzimas tambin aumentan con la temperatura. Sin embargo, las enzimas son protenas que se
desnaturalizan a temperaturas elevadas. (Mckee, 2003)

Existen distintos tipos de catalasa, pero a modo general, es una enzima muy resistente y estable, la
temperatura afecta sus funciones, una vez que desnaturaliza no puede actuar. (Daz, 2003).
El experimento de la hidrlisis del almidn se basa en el mismo principio de desnaturalizacin de las
protenas para los tubos 3 y 4, para el caso del tubo 3, no se obtuvo el resultado esperado, debido que al
aplicar temperatura para aumentar su velocidad de reaccin, se super el tiempo lmite y se
desnaturaliz la amilasa salival, lo que no permiti romper los enlaces de glucosa. Adems existe como
factor la procedencia de la saliva, ya que fisiolgicamente, la amilasa salival tiene menos accin cuando
el cuerpo humano no ha comido recientemente. (Michael, 2012)

En el caso del tubo 4 se pudo observar el cambio de color de la solucin, es decir hubo rompimiento de
enlaces en el almidn por efecto de la accin de la amilasa salival.
En el caso de los tubo 1 y 2 no existi reaccin porque no haba presencia de la enzima.

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CONCLUSIONES

La catalasa es una enzima muy resistente y estable, la temperatura afecta sus funciones, y una vez que
desnaturaliza no puede actuar en el rompimiento de enlaces. En los experimentos realizados se observ
principalmente el efecto de la temperatura en 4 tubos, de los cuales dos de ellos tenan el mismo tejido
animal y los otros, el mismo tejido vegetal.A dos tubos solo se les agreg perxido de hidrgeno y no
reaccionaron. Por el contrario, a los otros dos se sometieron al Bao termorregulado y estos
burbujearon. Se comprob entonces que, independiente del contenido, existen factores externos que
inhiben la funcin de las enzimas haciendo desaparecer sus propiedades. Tambin existen otros
elementos externos que no se pueden medir si no se tiene instrumentos de precisin para medir la
temperatura y el tiempo transcurrido de los tubos en el bao termoregulado. Respecto al siguiente
experimento, se demostr que la funcin de la amilasa consiste en degradar el almidn para formar
azcares simples. Cuando esta entra en contacto con el almidn, el cual es un polisacrido, lo desdobla
en unidades de monosacridos llamados glucosa. Lo anterior se intent demostrar con 4 tubos
diferentes. Los resultados fueron positivos o negativos dependiendo de la presencia o ausencia de la
amilasa salival respectivamente. Al no agregarle saliva a los tubos 1 y 2, estos no reaccionaron por falta
de la amilasa. En el tercer y cuarto tubo, el resultado deba ser positivo. Se concluy que esto no ocurri
porque al exponer los tubos a una alta temperatura provoc una desnaturalizacin, es decir un resultado
negativo.

REFERENCIAS

Nelson, D., Cox, M and Cuchillo, C. (2008). Lehninger Principios de Bioqumica. Barcelona: Omega.
Murray, R. K., Granner, D. K., Mayes, P. A., & Rodwell, V. W. (2004). Harper bioqumica ilustrada. El
manual moderno.
Daz, A. (2003) La estructura de las catalasas. Comit Editorial, 76.

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McKee, T., McKee, J. R. T., & McKee, J. R. (2003). Bioqumica: la base molecular de la vida. McGraw-
Hill/Interamericana,.
Michael, J., & Sircar, S. (2012). Fisiologa humana. Editorial El Manual Moderno.

ANEXOS

(a) (b) (c)

Figura 1: (a) Agregando muestra de carne y tomate para el reconocimiento y desnaturalizacin de la

catalasa. (b) Medicin de perxido de hidrgeno.. (c) Reaccin de burbujeo para tubo n3.

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 (a) (b) (c)

Figura 2: (a) Medicin de almidn para hidrlisis del almidn. (b) Medicin de lugol. (c) Medicin de
Fehling.

(a) (b) (c)

Figura 3: (a) Tubos de ensayo en bao termorregulado (b)Mantencin de color para tubos 1 y 2 en
experimento hidrolisis del almidon. (c) Resultados para tubos 3 y 4 en experimento hidrolisis del
almidon.

Tabla 2
Resumen procedimental de la hidrlisis de almidn realizado en laboratorio para los distintos
tubos
N de tubo 1 2 3 4

Contenido Almidn Almidn Almidn y Almidn y

amilasa salival amilasa salival

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Procedimiento Fehling y bao Lugol Fehling y bao Lugol y bao
termoregulado termoregulado termoregulado