Professional Documents
Culture Documents
RESUMEN
ABSTRAC
Microbiology is one of the broadest sciences of which microbiology of food is very
important to know whether the food is healthy or contaminated, yogurt is a dairy
derivative that is made by fermentation of bacteria such as lactobacillus bulgaricus and
Streptococcus es The result of the present work obtaining 44.7 10 10 CFU / ml forming
colonies of this we say that the yogurt is with enough microbial flora recommended for
the consumption these are very important for the functioning of our body.
OBJETIVOS
Aislar las bacterias del yogurt MISKILAK y reconocer las bacterias del yogurt
INTRODUCCION
FUENTE DE ENERGIA
Como todos los organismos vivos los microorganismos requieren ciertos nutrientes
bsicos y factores fsicos para el mantenimiento de su vida, estas necesidades varan
segn el tipo de microrganismo y es necesario conocerlas para cultivarlos en el
laboratorio. El cultivo es el proceso de crecimiento de microorganismos mediante la toma
de bacterias de un sitio de infeccin (el ambiente in vivo) por mtodos de recoleccin de
muestra y crecimiento en un ambiente artificial en el laboratorio.
Otras fuentes: Los microrganismos pueden tomarlas del medio ya elaborado como
vitaminas, agua y energa como son los fototrofos y quimiotrofos.
TECNICAS DE CULTIVO
Para realizar un cultivo bacteriano es necesario tomar el asa e introducirla al fuego para
que se esterilice, dejar enfriar unos segundos y tomar la muestra que se va a estudiar; abrir
la caja Petri y flamear delante del mechero, con el asa impregnada de la muestra se efecta
un pequeo inculo en el borde, de all se parte la primera estriacin; luego de la esquina
de una de las estras de la primera estriacin se realiza la segunda estriacin y finalmente
de la esquina de una de las estras de la segunda estriacin, se realiza la tercera estriacin,
procurando hacer las estras mucho ms separadas de las dos primeras, con la finalidad
de separar las colonias que sean sembradas; se tapa la caja y se lleva a la incubadora,
colocndola de lado contrario al que se sembr y se la deja en las condiciones apropiadas
para el crecimiento de cada bacteria (temperatura, atmsfera, potencial rdox, tiempo,
etc.)
Cultivos lquidos: Al inocular un medio lquido como el agua de peptona o el caldo con
tioglicolato, el tubo se inclina y el material se extrae el asa por frotamiento contra la pared
del tubo. Cuando ste se endereza, el material se encuentra bajo la superficie del medio.
MEDIOS DE CULTIVO
Son soluciones estriles que tienen macro y micronutrientes, sustancias que permiten el
crecimiento de organismos. Un medio de cultivo es un sustrato o una solucin de
nutrientes que permite el desarrollo de microorganismos. En las condiciones de
laboratorio para realizar un cultivo, se debe sembrar sobre el medio de cultivo elegido las
muestras en las que los microorganismos van a crecer y multiplicarse para dar colonias.
Medios de cultivo complejos: Para muchos microorganismos exigentes no se conocen
aun suficientemente bien los requerimientos nutritivos. Se cultivan en disoluciones que
contienen extracto de levadura, autolisado de levadura, peptona 0 extracto de carne. Para
algunos grupos de organismos son tambin corrientes: mosto (extracto de malta), infusin
de heno, jugo de ciruelas, juga de zanahoria, leche de coco, y para hongos coprofilos
incluso extracto de excremento de caballo. Debido a los costos, a los medios de cultivo
se les afiade en lugar de sustancias puras otras complejas, como lactosuero, melazas, agua
de maz 0 extracto de soja, que son productos de desecho baratos. Los medios de cultivo
de este tipo se denominan complejos 0 no definidos.
Medios de cultivo slidos: Para obtener medios de cultivo solidos se afiade a los caldos
de cultivo unas sustancias solidificantes, que dan a las disoluciones acuosas una
consistencia gelatinosa. La gelatina ya solo se utiliza en casos aislados, porque licua ya a
26-30C y muchos microorganismos son capaces de licuar la gelatina. Un solidificante
casi ideal es el descubierto en 1883 por HESSE, un colaborador de R. KOCH, al
introducir el agar en la tcnica bacteriolgica. Es un polisacarido extrado de algas
marinas, intensamente ramificado y entrelazado, de composicin compleja. Se afiade a
las disoluciones acuosas en una concentracin de 15-20 gil. EI agar funde a 100uC, pero
se mantiene Liquido al enfriarse hasta 15C de temperatura. Es atacado tan solo por pocas
bacterias. Cuando se necesitan medios sin componentes orgnicos se utiliza el gel de
slice como solidificante.
Concentracin de iones hidrogeno: Los iones H+ y OH- son los iones ms mviles de
todos; por ella, pequefias modificaciones en su concentracin tienen grandes
consecuencias. EI establecimiento de un pH inicial optimo y el mantenimiento del pH
durante el crecimiento es por ello de gran importancia. la mayora de los organismos se
desarrolla ptimamente cuando los iones H+ y OH- estn aproximadamente en igual
concentracin (pH 7,0). Muchas bacterias prefieren valores de pH superiores, un medio
ligeramente alcalino, p. ej. los nitrificantes, los rizobios, los actinomicetos, las bacterias
degradadoras de la urea. Tan solo pocas son acido tolerantes (lactobacilos, Acetobacter,
Sarcina ventriculi) o acidofilas (Thiobacillus). Los hongos prefieren valores de pH bajos;
si se inocula con tierra medios complejos a distintos valores de pH, aparecern
preferentemente hongos a pH 5,0 Y preferentemente bacterias a pH 8,0.
MICROBIOLOGIA EN LOS ALIMENTOS
Los alimentos, no slo nos proporcionan nutrientes, tambin son un excelente medio para
el crecimiento de los microorganismos. El crecimiento microbiano est controlado por
factores relacionados propiamente con el alimento, o factores intrnsecos, y tambin con
el ambiente en donde se est conservando dicho alimento, descritos como factores
extrnsecos Los factores intrnsecos, o relacionados con los alimentos, son el pH, el
contenido en humedad, la actividad o disponibilidad de agua, el potencial de xido-
reduccin, la estructura fsica del alimento, los nutrientes disponibles y la posible
presencia de agentes antimicrobianos naturales.
Los alimentos, los microorganismos y los seres humano, tienen interesantes y duraderas
asociaciones que r se desarrollaron mucho antes del inicio de la historia escrita. Los
alimentos no slo tienen un valor nutricional para quienes los consumen; a menudo
constituyen adems un medio de cultivo ideal para la multiplicacin microbiana. La
fermentacin producida por algunos microorganismos conduce a la conservacin de
alimentos en vez de a su descomposicin.
Los microorganismos pueden utilizarse para transformar alimentos crudos en delicias
gastronmicas, como los quesos, los pepinillos, las salchichas y la salsa de soja. Los
vinos, las cervezas y otros productos alcohlicos tambin se generan mediante la
actividad microbiana. Por otra parte, los alimentos tambin pueden actuar como vehculos
de transmisin de enfermedades, y la deteccin y el control de los patgenos y de los
microorganismos responsables de la descomposicin de los alimentos constituyen partes
importantes de la microbiologa de los alimentos. Durante la secuencia completa de la
manipulacin de los alimentos, desde el productor hasta el consumidor final, los
microorganismos pueden afectar a la calidad de los alimentos y a la salud humana.
Los productos crnicos y lcteos, con su elevado valor nutricional y la presencia de
hidratos de carbono, grasas y protenas fcilmente utilizables, son medios ideales para la
descomposicin por microorganismos. La protelisis y la putrefaccin son resultados
tpicos de la descomposicin de estos materiales de elevado contenido en protenas. La
leche no pasteurizada sufre una sucesin predecible en cuatro pasos durante la
descomposicin: la produccin de cido por Lactococcus lactis subsp. lactis se sigue de
la produccin adicional de cido asociada al crecimiento de ms microorganismos
tolerantes al medio cido como Lactobacillus. En este momento, las levaduras y los
mohos predominan y degradan el cido lctico acumulado, y la acidez se reduce
gradualmente. Con el tiempo, las bacterias que digieren protenas se activan, lo que da
lugar a un olor ptrido y a un sabor amargo. La leche, originalmente opaca, puede
volverse transparente con el tiempo.
YOGURT
A partir de la leche fresca se elaboran distintos derivados; algunos de ellos, como los
quesos, se conocen desde hace muchos siglos y su preparacin se practica desde entonces
como un mtodo de conservacin, mientras que otros se han desarrollado en las ltimas
dcadas gracias a los avances tecnolgicos.
La leche usada para yogurt se tiene que estandarizar a un nivel menor de grasa y mayores
contenidos de lactosa, protenas, minerales y vitaminas; para eso se pueden aadir slidos
lcteos no grasos (leche deshidratada descremada, suero de leche, etctera), de tal forma
que la gravedad especfica aumenta de 1.03 g/ml a 1.4 g/ml y paralelamente los slidos
no grasos suben a 12%. Tambin se aaden gomas, estabilizantes, saborizantes y
edulcorantes. La pasteurizacin destruye la mayora de la microflora innata de la leche,
lo que permite un campo libre para los cultivos lcticos que se aaden posteriormente; la
interaccin de la casena k y la b-lactoglobulina provocada por el tratamiento trmico
controlado (85C/25 minutos) y favorecida por el pH y la presencia de calcio, crea una
nueva estructura que tiene una mejor capacidad de absorcin de agua que dar como
resultado un gel ms firme y terso, de mayor viscosidad que no presenta sinresis. La
homogeneizacin, despus de la pasteurizacin, estabiliza la grasa en pequeas partculas
que previenen el cremado durante la fermentacin, y mejora la textura por la interaccin
entre las casenas y los glbulos de grasa. En estas condiciones, la leche se inocula con
diversos microorganismos, como, por ejemplo, Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus
y Streptococcus salivarius ssp. thermophilus, que actan de una manera sinrgica a 40-
45C. El cido lctico, producido a partir de la lactosa, baja el pH hasta 5 en donde se
inicia la formacin del coagulo. El sabor y aroma se deben al cido lctico, adems del
acetaldehdo, la acetona, el di acetilo y a otros compuestos con grupos carbonilo.
Son muchas las variables que afectan las propiedades de estos derivados, tales como el
calentamiento, el contenido protenico, la homogeneizacin, la acidez alcanzada en la
fermentacin, el tipo de cultivo y la presencia de estabilizadores.
METODOLOGIA Y MATERIALES
Los materiales que se usaron son Matraz Erlenmeyer, Placa Petri, tubos de ensayo, pipeta
de 10ml, probeta de 100ml, esptula, balanza, pesasal, autoclave, estufa, agares y lapicero
indeleble.
RESULTADOS Y DISCUSION
Al concluir la prctica los resultados que se obtuvieron a una temperatura de 20C despus
de cultivar durante 48 horas en la estufa a 45C de las 5 muestras que se realizaron en las
placas Petri. Se llev a un contador de bacterias con lupa las muestra que tiene ms
colonias, despus de determinar se escoge la que tiene ms colonias fue la placa Petri de
muestra 104 . De acuerdo a la metodologa de hallar unidades formadoras de colonia,
1/1000 del total 447(0.1)/44.700000 se logra 44.7 105 / es el resultado
obtenido que se puede encontrar de colonias formadoras, se ha podido observar que en el
medio del cultivo existe dos tipos de colonia lo cual indica que existe dos tipos de
bacterias como lactobacilos bulgaricus y Streptococcus.
CONCLUSIONES
Se ha logrado aislar las bacterias del yogurt Miskilak procedente del distrito de Maazo
en la cual en la muestra de 104 se ha encontrado ms colonias y dos tipos de colonias
como bulgaricus y Streptococcus esto indica que en el yogurt pueden existir estos tipos
de bacterias adems se puede recomendar este yogurt por poseer flora microbiana ya que
es saludable para el sistema digestivo que ayuda en el metabolismo.
REFERENCIAS
Prescott, L., Harley, J., & Klein, D. (2004). Microbiologia (Quinta ed.).
Madrid: McGRAW-HILL-INTERAMERICANA DE ESPAA S.A.U.
ANEXO