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CAMARA DE RECUENTO NEUBAUER

La cmara de conteo es un aparato de vidrio ptico especial de precisin. Se


utiliza para contar clulas u otras partculas en suspensiones bajo el microscopio.
Las cmaras de conteo se utilizan principalmente para el anlisis de sangre
(conteo de leucocitos, eritrocitos, trombocitos) Pero las cmaras de conteo sirven
tambin para el conteo de bacterias, esporas del moho y para cualquier tipo de
recuento citolgico.

QU ES UNA CAMARA DE RECUENTO Y DONDE SE UTILIZA?

En una placa base rectangular y gruesa de vidrio ptico especial, del tamao de
un porta-objetos, en el tercio medio se hallan cuatro ranuras longitudinales, que
transcurren en paralelo con respecto a los laterales cortos. Las dos superficies
laterales ms grandes estn sin trabajar y sirven para la rotulacin. El puente
central y los dos puentes exteriores estn rectificados planos y pulidos. La
superficie del puente central es ms profunda que los dos puentes exteriores. En
el puente central (fondo de la cmara) estn grabadas las redes de conteo.

PRINCIPIOS DE CONSTRUCCION

Las cmaras de conteo son aparatos de precisin. Se utilizan principalmente en


laboratorios mdicos. El puente interior (fondo de la cmara) y los dos exteriores
se rectifican y pulen. Gracias a este mecanizado se consiguen superficies
especialmente planas y el puente interior (fondo de la cmara) enfrente de los
puentes exteriores se rebaja exactamente en la profundidad de la cmara deseada
Despus de estas operaciones de trabajo, en la mquina divisora se graba con un
diamante la red de conteo correspondiente (sistema). Finalmente se efecta la
fase de impresin y secado al horno. Todas las cmaras de conteo se someten a
un riguroso control final

FABRICACION Y EXPLICACIONES DE LA CALIDAD

Las desviaciones de lmites

Para la profundidad de la cmara en la zona de una red de conteo + 2 %


del valor nominal
Para las distancias inferiores a 0,4 mm entre cualquieras lneas + 2 m
Para las distancias superiores a 0,4 mm entre cualquieras lneas + 0,5 %
del valor nominal Para los ngulos de la distribucin de red + 1 grado
El ancho de las marcas no podr ser superior a 5 m.
La tolerancia de planeidad

Para el fondo de la cmara en la zona de una red de conteo 2 m


Para las superficies de apoyo en la zona de una red de conteo 2 m
Para las lminas cubreobjetos 3m

EXIGENCIAS EN CUANTO AL CONTROL DE CALIDAD

Quitar del sacudidor la pipeta bien mezclada y rechazar las primeras gotas.
Limpiar, secando, desde el exterior la pipeta y luego mantenerla inclinada hasta
que se haya formado una pequea gota en la punta de la misma. Esta gota se
sita en el punto entre el cubreobjeto y la cmara de conteo. Por capilaridad se
llena la hendedura entre el cubreobjeto y el fondo de la cmara. Antes de que la
solucin de sangre pueda hincharse en los bordes de la parte de la cmara,
deber haberse retirado de nuevo ya hacia un lado la punta de la pipeta. Si son
visibles las burbujas de aire o si el lquido se hincha sobre los bordes en las
ranuras, deber limpiarse la cmara y alimentarse de nuevo.

ALIMENTACION DE LA CAMARA NEUBAUER

Quitar del sacudidor la pipeta bien mezclada y rechazar las primeras gotas.
Limpiar, secando, desde el exterior la pipeta y luego mantenerla inclinada hasta
que se haya formado una pequea gota en la punta de la misma. Esta gota se
sita en el punto entre el cubreobjeto y la cmara de conteo. Por capilaridad se
llena la hendedura entre el cubreobjeto y el fondo de la cmara. Antes de que la
solucin de sangre pueda hincharse en los bordes de la parte de la cmara,
deber haberse retirado de nuevo ya hacia un lado la punta de la pipeta. Si son
visibles las burbujas de aire o si el lquido se hincha sobre los bordes en las
ranuras, deber limpiarse la cmara y alimentarse de nuevo.

Pipetas de mesclado de sangre utilizadas

Pipeta de eritrocitos (perla roja)

Pipeta de leucocitos (perla blanca)

Dejar reposar la cmara por 3 minutos, para que las clulas se asienten.
Colocar la cmara en la platina del microscopio. Con el objetivo de 10x enfocar el
rea cuadriculada de la cmara y enseguida cambiar al objetivo 40x para contar
las clulas.

TCNICA DE CONTEO

Se cuenta todas las celdas dentro de una zona de medicin definida: ejemplo
Recuento de leucocitos en una rea de 4 mm utilizando los cuadros enumerados
1, 3, 7,9; se debe incluir en el recuento los leucocitos que se observan sobre las
lneas de cada cuadrado revisado

Calculo de nmero de leucocitos en un mm3de sangre:

1. usar la siguiente formula Leucocitos /mm3= leucocitos contados x10x20


4Leucocitos /mm3=leucocitos contados x502.
2. notificar el resultado como el numero de leucocitos que hay en 1 mm3 de
sangre sin diluir

Ejemplo; en los cuatro cuadros se conto 188 clulas. Leucocitos por mm3=
188x50.

Resultado que se notifica: 9400 leucocitos /mm3de sangre

Resultado de los glbulos rojos:

Contar los eritrocitos en un rea de 0.2mm2 utilizando los cuadrantes A,B,C,D y E


, se debe incluir en el recuento las clulas que se observan sobre las lneas de
cada cuadro revisado.

LIMPIEZA DE LAS CMARAS DE RECUENTO

Inmediatamente despus del conteo realizado, se quita el cubreobjeto y la cmara


de conteo se limpia con agua o - en caso de necesidad - con una solucin
limpiadora suave. A continuacin, la cmara se seca con un pao blando o se lava
con acetona.
FRMULA DE LA CMARA DE NEUBAUER

Clculos en la Cmara de Neubauer.

Cuadrado 1

rea = 1 mm x 1mm = 1 mm2


Volumen = 1 mm2 x 0,1
mm = 0,1 mm3 = 1 x 10- Concentracin = Total Clulas Contadas x 10.000
4 ml Nmero de Cuadrados

Cuadrado 2
rea = 0,25mm x
0,25mm = 0,0625 mm2
Volumen = 0,0625mm2 Concentracin = Total Clulas Contadas x 160.000
x 0,1 mm = 6,25 x 10-3 Nmero de Cuadrados
mm3 = 6,25 x 10-6 ml
Cuadrado 3

rea = 0,2 mm x 0,2 mm = 0,04 mm2


Volumen = 0,04mm2 x
0,1 mm = 4 x 10-3
mm3 = 4 x 10-6 ml Concentracin = Total Clulas Contadas x 250.000
Nmero de Cuadrados

Cuadrado 4

rea = 0,05 mm x 0,05 mm = 0,0025 mm2


Volumen = 0,0025mm2
x 0,1 mm = 2,5 x 10-
4 mm3 = 2,5 x 10-7 ml Concentracin = Total Clulas Contadas x 4 x10^6
Nmero de Cuadrados

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