Microbiologa

Practica 1: esterilizacin en autoclave.

Profa. Mayela Alvarado Martnez.

Paola Vanessa Daz Ramos.

 Introduccin:

Existen varios procedimientos de Esterilizacin, los ms extendidos son: A base de

Vapor (de agua) o tambin llamado calor hmedo, en este caso se usan los
autoclaves, a base de aire caliente, para lo cual se usan los Hornos esterilizadores,
y esterilizacin en fro (a base de vapores o gases de formaldehdo o etileno), para
lo cual se utilizan dispositivos especiales. El calor hmedo en la forma de vapor
saturado bajo presin, es el medio ms confiable conocido, para la destruccin de
todas las formas de vida microbial. El poder destructor de microbios est compuesto
de dos factores, los cuales son ambos esenciales: humedad y calor. El vapor
atmosfrico (que fluye) no tiene valor para la esterilizacin quirrgica. Tambin el
agua hervida no es microbicida adecuado y su uso no debe de ser recomendado
cuando hay vapor bajo presin disponible. El vapor saturado tiene algunas
caractersticas, las cuales se convierten en ventajas, estas son:
La destruccin de las esporas bacteriales ms resistentes en un breve intervalo
de exposicin.
El control fcil de la calidad y letalidad para los materiales y suministros.
No deja residuo txico en los materiales despus del proceso de esterilizacin.
Es el agente esterilizador ms econmico.

http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10_Esterilizaci%C3%B3n
_por_calor_h%C3%BAmedo.pdf

Objetivo:
El estudiante conocer el manejo del material que se va a esterilizar antes y despus de su
uso y aprender el manejo de la autoclave y olla de presin como equipo utilizado para la
esterilizacin de material utilizado en el laboratorio microbiolgico.
Procedimiento:
Lavamos el material de laboratorio a utilizar, cajas petri y pipetas con jabn y enjuagamos
con agua normal, despus volvimos a enjuagar perfectamente cada utensilio con agua
destilada, esperamos a que se secara el material, despus en volvimos 3 cajas petri juntas
con papel canela, utilizamos cinta masking tape, en cada pipeta pusimos un poquito de
algodn en cada entrada y envolvimos igual y al final pusimos un poco de cinta testigo en
cada material envuelto.
Metimos el material ya envuelto en una lata grande de aluminio y metimos a el autoclave,
cerramos muy bien la tapa y encendimos a la ms alta temperatura hasta alcanzar 15 libras
de presin, cuando la alcanzara cerramos la vlvula de vapor hasta que bajara a cero y

esperamos 15 min de enfriamiento y sacamos material con guantes de asbesto.

 Cuestionario:

Define esterilizacin: es el proceso mediante el cual se alcanza la muerte de

todas las formas de vida microbianas, incluyendo bacterias y sus formas
esporuladas altamente resistentes, hongos y sus esporos, y virus. Se
entiende por muerte, la prdida irreversible de la capacidad reproductiva del
microorganismo.

http://www.higiene.edu.uy/cefa/Libro2002/Cap%2027.pdf

Dos mtodos qumicos y fsicos que puedes utilizar para esterilizar material
de laboratorio en microbiologa:
 Agentes fsicos: 1) El calor se puede aplicar como agente esterilizante de
dos formas: el calor hmedo el cual destruye a los microorganismos por
desnaturalizacin de las protenas y el calor seco que destruye a los
microorganismos por oxidacin de sus componentes celulares. El calor es
considerado como el mtodo de esterilizacin por excelencia siempre y
cuando el material a esterilizar soporte altas temperaturas sin sufrir ningn
tipo de dao.
2) La radiacin, o emisin y propagacin de la energa a travs de un
medio, puede ser utilizada como agente para la eliminacin de
microorganismos. As tenemos que las radiaciones ionizantes se pueden
utilizar para la esterilizacin de materiales termolbiles, como por ejemplo
materiales plsticos, y las radiaciones no ionizantes, como la luz
ultravioleta, puede ser empleada en el control de reas cerradas.

Agentes qumicos: Algunas sustancias qumicas pueden ser usadas como

agentes esterilizantes porque tienen la capacidad de promover una o ms
reacciones qumicas capaces de daar los componentes celulares de los
microorganismos (protenas, membranas, etc.)

http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10_M%C3%A9to
dos_de_esterilizaci%C3%B3n.pdf
 Investiga la accin del fenol como desinfectante: Depende de la concentracin:
A bajas concentraciones (1%) tiene accin bacteriosttica. A elevadas
concentraciones es bactericida; inactiva de forma irreversible sistemas
enzimticos esenciales (oxidasas y deshidrogenasas de membrana),
desmorona la pared celular y precipita protenas celulares. El tiempo de
actuacin oscila entre 15-20 minutos.
Antisptico y desinfectante eficaz frente a bacterias Gram positivas, Gram
negativas y hongos. Pseudomonas y algunas especies de hongos son
resistentes. Activo frente a virus lipdicos. Tiene cierta actividad frente a
virus no lipdicos. La actividad esporicida es muy limitada y exige elevadas
temperaturas. La actividad frente a micobacterias es moderada y vara
segn la formulacin.

http://www.scfarmclin.org/docs/higiene/part4/436.pdf

Conclusin:
Desarrollamos habilidades para esterilizar el material de laboratorio por mtodo
de calor hmedo en autoclave y aprendido que el empacado del material de
laboratorio para su esterilizado es de suma importancia, ya que
debemos protegerlos de la contaminacin por suciedad, polvo y bacterias para
que al emplearlos una vez ya esterilizados tengamos un ptimo resultado en
nuestros trabajos de laboratorio
El paquete debe preservar la esterilidad de su contenido hasta el momento de su
apertura, momento a partir del cual sern utilizados en rea estril.