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48 Volumen 8, nmero 1, enero 2011

Evaluacin de vitamina C por HPLC en el desarrollo postcosecha del


tomate (Solanum lycopersicum v. Dominator)

Evaluation of vitamin C postharvest tomato (Solanum lycopersicum v.


Dominator) by HPLC
Manuel Elas Valle Colchao y Gilbert Rodrguez Pacar

Departamento de Ingeniera Agroindustrial, Universidad Nacional del Santa

RESUMEN

La investigacin tuvo como finalidad evaluar el desarrollo fisiolgico postcosecha del tomate procedente del
Valle de Santa, ncash. Se cosech en madurez fisiolgica, analizando el tomate hasta su madurez
sensorial. Se ha evaluado variacin del contenido de vitamina C, prdida de peso, slidos solubles, pH,
acidez titulable, ndice de madurez, ndice de respiracin, color y humedad. Se ha establecido que el
contenido de vitamina C (mg/100gr) disminuye desde 850,04 (estado 1) hasta 260,03 (estado 7). Tambin
desde el primer da hasta el ltimo los resultados en funcin a su peso disminuye en 5,79%, los slidos
solubles aumentaron de 4,00,10 a 7,50,01; el pH disminuy desde 4,380,02 hasta 4,940,03; de igual
manera su acidez titulable (6,45%0,02% - 2,69%0,01%); el ndice de respiracin inmediatamente despus
de ser cosechada aumenta significativamente de 40,420,10 hasta 71,120,96 en el estado 6, mientras que
en el estado 7 disminuye a 64,330,11 y el color del tomate, notndose un color verde a rojo total.
Descriptores: tomate, dominator, vitamina C, postcosecha, CLAR

ABSTRACT

Research was intended to evaluator tomato development postharvest comes from the Valley of Santa,
Ancash. It was harvested in physiological maturity, analyzing the tomato up to his sensory maturity. The
evaluations were content of vitamin C, lost weigh, solid solubles, pH, acidity, maturity rate, respiration rate,
color, humidity. At the end of the analysis, is established that the vitamin C (mg/100gr) content decreases from
850,04 (1 stage), to 260,03 (7 stage),. Whereas from the first to the last day, the results its weight
diminishes in 5,79 %, soluble solid increases from 4,00,10 to 7,50,01; pH decreases from 4,380,02 to
4,940,03; acidity decreases (6,45 % 0,02 % - 2,69 % 0,01 %); the rate respiration immediately after being
harvested increases significantly from 40,420,10 to 71,120,96 (6 stage), whereas in the 7 stage diminishes
64,330,11 and the color, being green color to red total.
Keywords: tomate, dominator, vitamin C, postharvests, HPLC

INTRODUCCIN informacin ayude a tomar decisiones en la


aplicacin de programas postcosecha para facilitar
El valle del Santa es unos de las principales zonas un mejor manejo, almacenamiento, conservacin,
agrcolas de la provincia ya que se cosechan gran empacado y transporte.
parte de frutas y hortalizas, siendo una de ellas el La Vitamina C es un nutrimento esencial para los
tomate, pues en el ao 2007 la superficie cosechada humanos. Una baja ingesta causa una enfermedad,
fue de 101 hectreas [1] y esto se debe al uso de por deficiencia, conocida como escorbuto. Esta
plantines que consiste en mayor aprovechamiento Vitamina est presente en forma natural en muchas
de la semilla. frutas y verduras [2, 3].

Por tal razn se consider como referencia para el Una de las principales caractersticas durante el
anlisis de su desarrollo fisiolgico postcosecha, as desarrollo fisiolgico del tomate son los cambios
de mismo modo investigar el desarrollo de los bioqumicos, como la prdida de nutrientes, en este
dems productos de la provincia, de tal forma caso la Vitamina C. Pues esta vitamina como en
obtener un buen material bibliogrfica. Y esta toda fruta y hortaliza, vara dependiendo del grado
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de madurez, aumenta su cantidad mientras estn en Patrn de Muestra Ac. Ascrbico


la planta, luego tiende a disminuir desde el inicio de
su cosecha; por lo que el tomate maduro pierde
parte del contenido de vitamina C [4, 5].

La determinacin de Vitamina C ha sido


ampliamente estudiada por diferentes tcnicas
analticas, teniendo en cuenta las propiedades
fisicoqumicas de la molcula. Sin embargo la
Cromatografa Lquida de Alta Resolucin (HPLC),
garantiza lmites de deteccin y cuantificacin ms
bajos, que facilita adems la eliminacin de los
efectos causados por la matriz (interferencias en
otros mtodos de anlisis); esta tcnica es utilizada Grfico 1: Curva Calibracin de Vitamina C
frecuentemente en investigaciones agroindustriales, Anlisis de Vitamina C del Tomate
bioqumica y qumica analtica [6, 7, 8, 9]. Se extrajo el jugo del tomate, se pes 5 gr, luego se
adicion 15 mL de orto fosfrico al 4.5%,
El objetivo principal de este estudio, fue cuantificar el
contenido de Vitamina C por HPLC durante el posteriormente se adicion 25 ml agua ultra pura; se
desarrollo postcosecha del tomate. A la vez evaluar llevo a la centrifuga a 4000 r.p.m. por 15 min; al
prdida peso, slidos solubles, pH, acidez, trmino se filtr en Discos de Porosidad de 0.20 um;
humedad, respiracin, color. finalmente se analiz en el HPLC y se reemplaz en
la Curva de Calibracin.
EXPERIMENTAL
Anlisis del Desarrollo Fisiolgico
Se utiliz tomate de la variedad Domintator, del Valle La determinacin del contenido de slidos solubles
de Santa. Se recolect en estado de madurez se realiz con un refractmetro (marca: Hand. Held
fisiolgica; etapa donde el tomate ha alcanzado su
Atago), haciendo la lectura de Brix directamente del
mximo desarrollo y peso, adems, ha adquirido el
color verde caracterstico; posteriormente se equipo. Para la Acidez Titulable (%cido Ctrico) se
seleccion y clasific uniformemente. Se analiz determin en base al mtodo 10.026 de la AOAC.
hasta su madurez sensorial.
El pH se determin con un potencimetro digital
La cuantificacin de vitamina C se realiz usando un (marca: Shott Gerate), por inmersin del electrodo
HPLC Shimadzu, modelo LC-10AT, con los en el jugo del tomate previa calibracin con solucin
siguientes accesorios: Columna CLC-C18 SHIM-
buffer de pH 4 y 7 a 25 C.
PACK de Dimetro Interno 4,6 mm, Longitud: 150
mm, Tamao de partcula: 5 m. Detector de Arreglo Para el ndice de Respiracin, se utiliz un
de Diodos (245 nm). Autosampler (inyector
respirmetro. Con respecto al color se midi
automtico).
mediante un colormetro C400 (knica Minolta
Curva de calibracin de Vitamina C Sensing INC, Japn). La humedad se determin por
Para la obtencin de la curva se us cido secado y diferencia de pesos de acuerdo al mtodo
Ascrbico, QP, preparando concentraciones de 0.2, 934.06 (37.1.10) del AOAC.
0.4, 0.6 y 0.8 mg/mL, se acondicion el equipo,
Tabla 1, obteniendo cromatogramas y finalmente la RESULTADOS Y DISCUSIONES
curva de calibracin, ver grfico 1.
Evaluacin de Vitamina C (mg/100gr) en el
Tabla 1: Condiciones de Trabajo desarrollo postcosecha

Metanol 65%
Fase Mvil
Agua Filtrada 35%
Tasa de Flujo 1.0 mL/min
Temperatura 40.0 C
Volumen de Muestra 5 uL
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Evaluacin de pH y Acidez Titulable (%c.


Ctrico) en el desarrollo postcosecha

Grfico 2: Evaluacin de Vitamina C (mg/100gr)

Despus de la cosecha de frutas y hortalizas sufren Grfico 4: Evaluacin de pH y Acidez Titulable


cambios bioqumicos como los carbohidratos,
pigmentos, vitaminas, minerales, protenas, sabor, Los hidratos de carbono sufren cambios bioqumicos
textura, aroma, apariencia [5]. Existen numerosos durante la maduracin. La degradacin de los
ejemplos de la influencia gentica en el contenido de polisacridos de las membranas celulares, ejercen
vitaminas. Es ms fcil encontrar una informacin una contribucin Importante sobre el aumento en
similar relativa a los efectos del grado de madurez. contenido de azucares [14]. Los cidos ctricos son
Sin embargo, los tomates son un ejemplo excelente; los ms frecuentes y abundantes en tejidos de
vara el contenido de cido ascrbico con el grado plantas comestibles. En la mayora de las frutas, el
de madurez pues es mximo cuando est todava contenido de cidos orgnicos disminuyen durante y
verde [10]. Una de las principales fuentes de despus del proceso de maduracin [15]. La
vitamina C es el camu camu con 2780 mg/100g, tendencia de los slidos solubles y del pH, durante
comparada con la naranja, el camu camu los das postcosecha fue ascendente, mientras la
proporciona 30 veces ms vitamina C [11], otras acidez titulable descendi. Los Brix varan de 4,0
fuentes son las hortalizas como es el caso de la Col para luego aumentar hasta 7,5 Brix, estado 7,
Silvestre 136 mg/100g [12]. Los requerimientos como se observa en el Grfico 3.
diarios de Vitamina C segn la Organizacin Mundial
de la Salud (OMS) recomiendan 45 miligramos [13]. Mientras que el pH vara de 4,49. De manera inversa
En el grfico 2, notamos que el contenido de sucede con la Acidez Titulable ya que de 6,45%
vitamina C del tomate en su madurez sensorial es de desciende hasta 2,69%, ver Grfico 4.
26 mg/100g, de tal forma si deseamos completar la
dieta diaria de Vitamina C sugerida por OMS Evaluacin de ndice de Madurez (Brix/%Acidez)
tendramos que consumir 100 gr., aproximadamente en el desarrollo postcosecha
2 a 3 tomates diarios, lo cual sera difcil para una
persona normal. Pero al aplicar ciertos programas
postcosecha, se podra conservar el contenido de
vitamina C, y as la dosis diaria de tomate sera
menor.

Evaluacin de Slidos Solubles (Brix) en el


desarrollo postcosecha

Grfico 5: Evaluacin de ndice de Madurez

La medida del grado de madurez de las frutas. Es la


relacin de grados Brix/acidez. El ndice aumenta
con la maduracin, ya que se incrementa los slidos
solubles y disminuye la acidez [5]. La variacin del
ndice de Madurez se incrementa de 0,62 (estado 1)
hasta 2,79 (estado 7); entre el 6 y 7 existe un
Grfico 3: Evaluacin de Slidos Solubles (Brix) aumento considerablemente, como se muestra en el
grfico 5.
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cromoplastos de las clulas y sntesis de carotenos,


Evaluacin de ndice de Respiracin (mg entre los que destaca el licopeno. Como
CO2/Kg.Hr) en el desarrollo postcosecha consecuencia de ello, el parmetro a* cambia de
valores negativos (color verde) a positivos (color
rojo) [5]. En el estado 1; se observa que el producto
esta totalmente de color verdes es por eso que en el
grfico 7 el tono rojo es mucho mayor al verde
amarillo; y as va variando los tono en forma inversa;
tanto as que el final en el estado 7; el tono rojo es
mucho mayor que el tono verde.

Evaluacin de Materia Seca y Humedad en el


desarrollo postcosecha

Grfico 6: Evaluacin de ndice de Respiracin

Durante la maduracin, existe un tremendo aumento


en la cantidad de etileno producido. Este aumento
usualmente es acompaado por un aumento en la
tasa de respiracin de la fruta (un fenmeno llamado
el climaterio). La tasa de respiracin y de produccin
de etileno usualmente depende de la temperatura de
almacenamiento, edad de la fruta y del
cultivar/hbrido [15]. En la grfica 6 se puede
apreciar un aumento de respiracin ya que se trata
Grfico 8: Evaluacin de Materia Seca y Humedad
de un fruto climatrico; pero en el estado 7
disminuye. Al sexto estado se presenta el mayor Evaluacin de Peso en el desarrollo
valor de respiracin (71,12 mg CO2/kg.hr 0,36 postcosecha
Kcal/kg.hr). El ndice promedio de Respiracin fue
56,55 mg CO2/kg.hr 0,29 Kcal/kg.hr.

Evaluacin del color en el desarrollo


postcosecha

Grfico 9: Evaluacin de Peso


El agua se pierde al ambiente como vapor de agua
movindose desde los espacios intercelulares
existentes en el parnquima hacia la atmsfera
exterior, la liberacin puede darse a travs de las
Grfico 7: Evaluacin de Tono Rojo, Verde Amarillo
lenticelas, las estomas o la cutcula [16]. Con los
valores obtenidos en el laboratorio y mostrados en el
grfico 9, se puede deducir que la prdida de peso
del tomate es uniforme. Se considera que pierde
5,79% de su peso desde el primer hasta su madurez
sensorial.

Cromatogramas de Vitamina C
Figura 1: Variacin de Color
El color del tomate, verde al principio y rojo cuando
madura, se debe a la degradacin de clorofila en los
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Figura 3: Estado 1 Figura 8: Estado 6

Figura 4: Estado 2 Figura 9: Estado 7


En los cromatogramas, Figuras de arriba, se nota la
aparicin de un pico que por el tiempo de retencin
(4.36 min) se considera la presencia de Vitamina C,
y tambin, a su lado, se observa su respectiva rea.

CONCLUSIONES

El tomate, despus de cosechada contina


respirando, madurando y en algunos casos iniciando
el procesos de senescencia, todo lo cual implica una
Figura 5: Estado 3 serie de cambios como Prdida de Peso, Slidos
Solubles, pH, Acidez, Humedad, Respiracin,
Vitaminas, Color; que son determinados para cada
fruta.
El contenido de vitamina C disminuye
considerablemente en un 70%, esto se debe a que
el tomate es un producto climatrico y por ende
despus de su cosecha utiliza sus reservas como los
carbohidratos y los cidos orgnicos hasta su
senescencia; pues esto es unos de los factores que
degrada la vitamina C.
Figura 6: Estado 4 Aplicando alguna Tecnologa Postcosecha como por
ejemplo Tipo de Empaque y Temperatura de
Almacenamiento, se podra lograr una buena
conservacin nos slo del contenido de vitamina C
sino tambin de los dems nutrientes del tomate.

AGRADECIMIENTO

Al Jefe MSc. Gilbert Rodrguez Pacar y Tcnica


Ing. Soledad Quezada Berr de Laboratorio de
Investigacin y Desarrollo de Productos
Figura 7: Estado 5
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Agroindustriales de la Universidad Nacional del


Santa; por su asesoramiento incondicional.

REFERENCIAS

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Per (2008).
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[15] A. A. Kader, Respiration and gas exchange of


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[16] Sena, Manual de Fisiologa, Reino Unido
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E-mail: manuelvallecolchao@hotmail.com
giropape@yahoo.com

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