Estudos Purificao e Recuperao de Bioprodutos

Filtrao e Clarificao (perguntas possveis de cair )

1) O que filtrao? Consiste na separao de clulas suspensas de um meio de

cultivo e frequentemente a primeira operao unitria do processo de
purificao.

2) O que filtrado ou clarificado? O meio resultante da filtrao, isento de clulas.

3) Em que situaes se aplica a filtrao convencional? A filtrao convencional

aplica-se a clarificao de grandes volumes de suspenses diludas de clulas,
da ordem de milhares de litros. Aplica-se tambm para produtos extracelulares
nos quais a assepsia no necessria.

4) Como ocorre a filtrao? A suspenso, sob presso, perpendicularmente

direcionada a um meio filtrante. A frao volumtrica que atravessa o meio
filtrante denominado filtrado, e da continua deposio das clulas obre o meio
filtrante resulta a formao de uma torta de filtrao.

5) Quais os componentes bsicos de uma filtrao?

Meio filtrante (Material poroso em que consiste em uma barreira que
retm os slidos de uma suspenso celular.
Filtro (suporta o meio filtrante e permite a aplicao da fora impulsora).

6) Quais so as possveis foras impulsoras de um processo de filtrao?

Gravidade: Atua a fora gravitacional. Utilizam-se filtros mais simples
para a remoo de partculas maiores.
Centrfuga: Atuao da fora centrfuga, em centrfugas que apresentam
filtros.
Aplicao de presso no fludo: A presso aplicada acima do fluido. Por
exemplo: Filtro prensa, prensa hidrulica.
Vcuo: Aplicao de presso abaixo do filtro.
 7) Por qual Lei o processo de filtrao descrito? O processo de filtrao descrito
pela Lei de Darcy, que correlaciona a velocidade do lquido que permeia o meio
filtrante, e a diferena de presso resultante do referido fluxo.

8) Como determinar a compressibilidade da torta?

Atravs da determinao do valor de (resistncia especfica da torta m/g) para
diferentes valores de variao de presso por ensaios de filtrao em escala de
laboratrio. Tendo e P, determina-se a funo linear representada por:

Log= log + S logP

Onde o coeficiente linear representa o log e o coeficiente angular representa
o valor de S.

9) O que so auxiliares de filtrao? So compostos adicionados suspenso

celular ou depositados em fina camada sobre o meio filtrante, com o objetivo de
reduzir o tempo de filtrao (reduzem de 5 a 20x). Atuam reduzindo a
compressibilidade ou a compactao da torta de filtrao e, por conseguinte,
aumentam a permeabilidade do leito.

10) Quais as limitaes dos auxiliares de filtrao?

Adsoro irreversvel da prpria molcula alvo sobre o auxiliar,
diminuindo o rendimento;
Clulas contendo produtos intracelulares no podem ser
adicionadas de auxiliares, pois o processo subsequente de rompimento
prejudicado ou mesmo inviabilizado. Alm disso, se adicionarmos
auxiliar, ser mais um componente que devemos retirar posteriormente.
Embora o valo de S seja reduzido, a viscosidade incrementada, a qual
diretamente relacionada ao tempo necessrio a uma dada filtrao.

Bacterias e fungos dependem dos auxiliares para sua reteno, pois sua dimenso e
abaixo de 10 m (dimetro filtros 10 a 1000 m).

11) Por que no recomendado realizar a filtrao de bactrias e leveduras sem

auxiliares de filtrao? Esses micro-organismos podem ocasionar um
entupimento dos poros devido a penetrao de clulas e fragmentos de miclio
no meio filtrante. Nesse caso, deve-se utilizar auxiliares de filtrao pois reduz a
compressibilidade da torta e evita o entupimento dos poros.
12) Fale sobre o Filtro Rotativo a Vcuo:

Consiste em um tambor oco e rotativo coberto com malha metlica (coberta com
uma camada de 5 a 10 cm de terra diatomcea).
O tambor fica parcialmente submerso em um recipiente que contm a suspenso
a ser filtrada, na qual brandamente agitada para evitar a sedimentao das
clulas e tambm pode ser acrescida de auxiliares de filtrao.
A suspenso alimentada pela parte externa do tambor e da presso reduzida
no interior do mesmo promove a filtrao, durante o processo, uma fina camada
de biomassa e auxiliar acumula-se na superfcie e compactada ao longo do
ciclo de compactao da torta. A torta lavada, desidratada e raspada por uma
faca que remove uma fina camada de biomassa acumulada, expondo a
superfcie coberta por auxiliares para o prximo ciclo.
O FRV dividido em:
Zona de imerso
Zona de lavagem
Zona de secagem
Zona de remoo contnua da torta. (Essa remoo contnua da torta
representa uma vantagem em relao a outros filtros).
Desvantagem: gera elevado volume de slidos.
A lavagem reduz a perda do produto na etapa de clarificao.

13) O que filtrao tangencial? Filtrao em que o fluido de alimentao escoa

tangencialmente superfcie do meio filtrante. A tenso de cisalhamento do
fluido minimiza o acmulo de clulas e seus fragmentos na superfcie das
membranas.

14) O que caracteriza o desempenho de uma filtrao tangencial? Fluxo do Filtrado

(J) e Coeficiente de reteno de slidos em suspenso (R).

15) O que determina a eficincia da membrana? O Coeficiente de reteno de

slidos em suspenso (R), ou seja, quanto mais prximo de 1, mais aquela
membrana est retendo. Prximo de 0: A membrana no est retendo
eficientemente.

16) a)Tanto J quanto R so influenciados por dois fenmenos. Quais so?

 Polarizao por concentrao: Formao de um gradiente de concentrao de
clulas ou solutos prximos a superfcie da membrana.

Fouling: Bloqueio ou estreitamento dos poros da membrana. Resultante da

deposio de solutos no interior do meio filtrante.

b) Como reverter essa situao? possvel minimizar esses fenmenos mudando

a vazo ( vazo maior arrastaria a torta), realizar uma retrolavagem no sentido
inverso do fluxo, aplicar uma diferena de presso ou lavar com solvente que
no altere a clula.

17) Como ocorre a centrifugao? Clulas em suspenso em um meio liquido

sedimentam por ao da fora da gravidade.

18) Faa uma comparao entre centrifugao e filtrao.

Da centrifugao resultam em suspenses de clulas mais concentradas em relao
original enquanto que a filtrao d origem a uma torta relativamente seca, o que
constitui uma vantagem dela em relao centrifugao. Entretanto, a filtrao gera
grandes volumes de torta, dificulta a manuteno da assepsia e demanda significativa
mo-de-obra. Clulas microbianas devem ser separadas do meio liquido por
centrifugao, pois na filtrao causam severos problemas como o entupimento dos
filtros. Alm disso, produtos intracelulares devem passar por centrifugao, j que
auxiliares de filtrao no podem ser adicionados.

19) Quando utilizar a centrifugao? Deve-se utilizar a centrifugao para baixos

volumes de suspenso. Alm disso, a centrifugao aumenta a temperatura do
meio e pode romper a parede celular, ento deve-se saber as caractersticas da
suspenso celular antes de utiliz-la.

20) Como so classificadas as centrfugas e como operam? So classificadas em

laboratoriais e preparativas. Nas centrfugas laboratoriais devemos tirar o
precipitado somente depois do processo de centrifugao. J nas centrfugas
preparativas o sobrenadante e o precipitado j vo sendo retirados.

21) Fale sobre as centrfugas tubulares e em discos. As centrfugas tubulares podem

operar sob refrigerao. Capacidade limitada a algumas dezenas de litros,
operao descontnua. Aplica-se a suspenses a no mximo 30g/L. As
centrfugas de discos permitem o processamento contnuo de at 200m^3/h.
Pode ser tratada com suspenses de at 250 g/L.

22) O que ultracentrifugao? Centrfuga com uma velocidade de rotao muito

maior que as centrfugas tradicionais (30.000 a 50.000 rpm). Utilizada para
separao de macromolculas se solventes, fracionamento de macromolculas
em misturas e na fase final de purificao. H grande gerao de calor, por isso
possui um resfriamento.