SIEMBRA DE MUESTRAS BIOLOGICAS PARA EL

AISLAMIENTO DE NESSIERIA

PROCEDIMIENTO

Con el asa de Kolle esterilizada a la llama y enfriada, realizar la siembra de las cepas y
los especmenes clnicos en las placas de Agar Thayer Martin (para el aislamiento de
Neisseria).
A partir de los especmenes clnicos y las cepas, realizar y colorearlos con mtodo de
Gram.
Trabajar con cuidado procurando no contaminarse.
Observar las lminas coloreadas con el objetivo de inmersin e identificar los
microorganismos e estudio.

NEISSERIA GONORREAE

Diplococo gram (+)

Para su crecimiento es exigente nutricionalmente, 35 a 37 centgrados.
Catalasa (+) y oxidasa (+).
Producen acido a partir de glucosa.
Aerobio y mvil.
No forman esporas.

AGAR SANGRE

Permite reconocer la presencia de algn tipo de hemolisis.

Produce hemolisis en colonias de Neisseria gonorreae

AGAR THAYER MARTIN

 Medio selectivo.
Las dificultades que presenta la recuperacin de N. gonorrhoeae y N. meningitidis de los
materiales clnicos.
Se deben a las exigencias nutricionales de estos microorganismos, y en los materiales de origen
genital, oral o anal, al desarrollo invasor de la abundante flora saprfita.
El medio de Thayer-Martin permite el correcto aislamiento y recuperacin de las neisserias
patgenas dentro de las 24 h, con una ausencia casi total de contaminantes.
El medio de cultivo se prepara a partir del Agar Base GC, con el agregado de hemoglobina, un
suplemento de enriquecimiento (Britalex).
Una mezcla antimicrobiana (VCNT: Vancomicina, colistina, nistatina y trimetoprima).

Las colonias de gonococos y meningococos obtenidas en este medio selectivo son

usualmente opacas, grisceas, convexas, de 1-4 mm de dimetro. Luego de 48 h de
incubacin pueden transformarse en colonias mucoides. Coloracin de Gram:
diplococos Gram negativos. Se sugiere proseguir con este esquema de identificacin.

OBSERVACIN AL MICROCOPIO

Coloracin de Gram: diplococos Gram negativos.

PRUEBA DE OXIDASA

Durante la prueba la enzima oxidasa en

presencia
de oxigeno, citrocromo C y el reactivo de la
oxidasa, este se oxida para producir un
compuesto colorido llamado indofenol, el
reactivo mas usado es el reactivo de kovacs
oxidasa.