UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA

ESCUELA DE POSTGRADO

PROGRAMA DE MAESTRA EN INGENIERA AMBIENTAL Y

SEGURIDAD INDUSTRIAL

TEMA:

Produccin de Insulina a partir de organismos bacterianos: Escherichia coli

DOCENTE

MSc. Microb. Csar Torres Daz

ALUMNO

Ing. Jibaja Snchez, Carlos Alberto

PIURA- PER

2017
 ndice

I. Introduccin .......................................................................................................................... 3
II. Marco Terico ....................................................................................................................... 4
1. Insulina .............................................................................................................................. 4
1.1. Definicin .................................................................................................................. 4
1.2. Estructura de la insulina ............................................................................................ 6
1.3. Produccin de insulina en el ser humano .................................................................. 8
1.4. Papel que desempea la insulina en el organismo humano ..................................... 10
2. Diabetes ........................................................................................................................... 12
2.1. Definicin ................................................................................................................ 12
2.2. Tipos ........................................................................................................................ 12
1. Diabetes tipo 1. ....................................................................................................... 12
2. Diabetes tipo 2. ....................................................................................................... 12
2.3. Sntomas .................................................................................................................. 13
3. Produccin de Insulina Alternativa ................................................................................. 14
3.1. Insulina Animal ........................................................................................................... 14
3.2. Produccin de Insulina usando Escherichia coli mediante ADN Recombinante ........ 15
3.2.1. La Escherichia coli .............................................................................................. 15
3.2.2. Mtodos para obtener Insulina Recombinante .................................................... 17
1. Produccin por separado de las cadenas A y B de la Insulina ............................... 17
2. Transferencia y Clonacin del gen Insulina ........................................................... 22
3.3. Produccin de la insulina recombinante ...................................................................... 26
III. Conclusiones ................................................................................................................... 28
IV. Bibliografa ..................................................................................................................... 29

2
I. Introduccin

El presente trabajo de investigacin tiene por objetivo dar a conocer las metodologas

utilizadas por la Ingeniera Gentica para la produccin de Insulina mediante el ADN

Recombinante en la bacteria Escherichia coli.

Para ello, debemos definir qu es la insulina, cmo se genera, cul es su estructura y qu

papel desempea la insulina en el organismo humano. Adems de la diabetes,

enfermedad originada por la ausencia o el mal uso de la insulina en el cuerpo. Y como

tema central, la produccin de manera alternativa de la insulina, tanto de obtenida de

animales como la porcina o la bovina, y la obtenida por ADN Recombinante usando

bacterias como la Escherichia coli.

Como todos sabemos, la diabetes es una enfermedad que afecta a millones de personas

en todo el mundo y con el avance de la biotecnologa, se puede producir insulina para

poder combatir los dolorosos sntomas y darle mejor calidad de vida y hacerla ms

duradera.

La Escherichia coli, siendo una bacteria que vive dentro del tracto gastrointestinal,

puede ser un microorganismo muy til para ser el receptor del ADN Recombinante con

la cual se puede producir en masa la insulina, siendo sta ms pura y parecida a la

producida dentro del pncreas, a diferencia de la animal que es ms impura y genera

reacciones adversas en las personas diabticas

Con esto, se espera que el trabajo sea de fcil entendimiento y ayuda para quienes

desean hacerle uso para la realizacin de trabajos posteriores sobre el mismo tema.

3
II. Marco Terico

1. Insulina

1.1. Definicin

La insulina (del latn insula, "isla") es una hormona polipeptdica formada por 51

aminocidos, producida y secretada por las clulas beta de los islotes de Langerhans de

la glndula denominada pncreas.

La insulina ayuda a que los azcares obtenidos a partir del alimento que ingerimos

lleguen a las clulas del organismo para suministrar energa.

Su dficit provoca la diabetes mellitus y su exceso provoca hiperinsulinismo con

hipoglucemia.

Imagen 1: Origen de la Insulina

4
Imagen 2: Accin de la insulina sobre las clulas

La insulina es una hormona "Anablica" por excelencia: permite disponer a las clulas

del aporte necesario de glucosa para los procesos de sntesis con gasto de energa. De

esta manera, mediante gluclisis y respiracin celular se obtendr la energa necesaria

en forma de ATP (Adenosn Trifosfato - C10H16N5O13P3, que es

un nucletido fundamental en la obtencin de energa celular). Su funcin es la de

favorecer la incorporacin de glucosa de la sangre hacia las clulas: acta siendo la

insulina liberada por las clulas beta del pncreas cuando el nivel de glucosa en sangre

es alto. El glucagn, al contrario, acta cuando el nivel de glucosa disminuye y es

entonces liberado a la sangre. Por su parte, la Somatostatina, es la hormona encargada

de regular la produccin y liberacin tanto de glucagn como de insulina.

En resumen, permite disponer a las clulas de la glucosa necesaria para que podamos

movernos, manteniendo su concentracin regular en nuestra sangre.

5
Cuando el nivel de glucosa es elevada el Pncreas lo libera a la sangre. Su funcin es

favorecer la absorcin celular de la glucosa.

Frederick Grant Banting, Charles Best, James Collip, y J.J.R. Macleod de la

Universidad de Toronto, Canad, descubrieron la insulina en 1921. El Doctor Banting

recibi el Premio Nobel de Fisiologa o Medicina por descubrir esta hormona aunque se

demostr que el verdadero descubridor fue Nicolae Paulescu en 1921.

Imagen 3: Los descubridores de la insulina

1.2. Estructura de la insulina

La insulina es una hormona de naturaleza proteica con un peso molecular aproximado

de 6000 Daltones, formada por 2 cadenas polipeptdicas que en total tienen 51

aminocidos.

Posteriormente, en 1955, Sanger consigue descifrar su composicin, obteniendo que

estaba formada por dos cadenas de 21 y 30 aminocidos (cadenas A y B,

respectivamente) unidas por puentes disulfuro establecidos entre varios residuos de

6
cistena: 2 puentes de disulfuro ubicados entre los aminocidos A-7/ B-7, y A-20/ B-19.

Adems la cadena A, tiene tambin un puente interno de disulfuro entre los aminocidos

A-6/ A-11.

El conocimiento de la secuencia y estructura de una molcula es vital, pues ayuda a

entender cmo funciona en el organismo y las interacciones que se producen. Hay que

destacar que la insulina fue una de las primeras protenas cristalizadas, y la primera en

ser secuenciada.

Imagen 4: Estructura de la Insulina, cadena A y Cadena B

La integridad de la molcula es indispensable para ejercer las acciones farmacolgicas.

Las cadenas A o B, separadas luego de la destruccin enzimtica de los puentes de

disulfuro, carecen completamente de acciones farmacolgicas. Los aminocidos de las

posiciones B-22 y B-30, son indispensables para el mantenimiento de las acciones

metablicas de la insulina. Las acciones de crecimiento, se relacionan con los

aminocidos A-4; A- 20, A-21, B-10, B-13, y B-26.

7
1.3. Produccin de insulina en el ser humano

Un pncreas funcionando normalmente puede fabricar y liberar diariamente de 40 a 50

unidades de insulina. Adems, tiene varios cientos de unidades almacenadas y

disponibles para ser segregadas cuando se necesitan.

La insulina se produce en el Pncreas en los Islotes de Langerhans, mediante unas

clulas llamadas Beta, cuyo gen responsable de la sntesis est en el brazo corto del

cromosoma 11.

Las clulas beta fabrican insulina en diferentes etapas.

La primera es que la insulina se sintetiza en los ribosomas del retculo

endoplsmico rugoso de las clulas beta de los islotes, como pre-proinsulina,

que tiene 109 aminocidos. Este precursor pierde enzimticamente algunos

aminocidos, y se transforma en proinsulina de 83 aminocidos de cadena nica

en espiral.

La segunda es que la proinsulina, se transforma en insulina en el aparato de

Golgi de las clulas beta, por un proceso enzimtico que genera cantidades

equimolares, de insulina y un pptido conector o pptido C. Este pptido C est

formado de 32 aminocidos distribuidos en dos cadenas polipeptdicas A y B,

una de 21 aminocidos y otra de 30, unidas por dos puentes de disulfuro.

Adicionalmente, existe captacin de zinc, formndose molculas de zinc-

insulina.

Siguiente el pptido C se acumula en grnulos secretorios ligados al aparato

Golgi, en el citoplasma celular, la progresin de estos grnulos hacia la

membrana plasmtica, se hace a travs de microtbulos impulsados por

filamentos ciliares contrctiles y gradientes de potencial electroqumico.

8
 Para que finalmente los grnulos se fusionan a la membrana celular y son

secretados por exocitosis con participacin del calcio como activador de los

microtbulos, K, y Zn. La insulina en forma de monmeros, junto al pptido C,

estos son difundidos hacia los capilares en forma equimolar.

La insulina se almacena en las clulas Beta en grnulos secretorios, que se

preparan para liberarla en la circulacin sangunea, en respuesta al estmulo de

una concentracin creciente de glucosa en sangre. Tambin existe una pequea

secrecin de proinsulina (10% de la insulina).

Imagen 5: Secuencia de produccin de insulina en el organismo

El pptido C no tiene ninguna funcin conocida. Sin embargo, se segrega en las mismas

cantidades que la insulina y, de hecho, circula en la sangre ms tiempo que la insulina,

por lo que es un preciso marcador cuantitativo del funcionamiento de las clulas Beta.

9
As, unos niveles normales de pptidos C indican una secrecin relativamente normal

del pncreas

1.4. Papel que desempea la insulina en el organismo humano

En general, la insulina es una hormona que estimula los procesos anablicos e inhibe los

catablicos.

Aunque las ms conocidas se relacionan con el metabolismo de los carbohidratos, no

son de menor importancia las que ejerce sobre el metabolismo lipdico o el de las

protenas, ya que a corto plazo aumenta la oferta de sustratos en el interior celular para

el almacenamiento de energa y a medio plazo provoca un incremento de las actividades

enzimticas relacionadas con la formacin de reservas energticas.

La insulina tiene una importante funcin reguladora sobre el metabolismo, sobre el que

tiene los siguientes efectos:

Estimula la glucogenognesis o glucognesis que es la ruta anablica por la que

tiene lugar la sntesis de glucgeno (tambin llamado glicgeno) a partir de un

precursor ms simple, la glucosa-6-fosfato (C6H13O9P). Se lleva a cabo

principalmente en el hgado, y en menor medida en el msculo, es activado por

insulina en respuesta a los altos niveles de glucosa, que pueden ser (por ejemplo)

posteriores a la ingesta de alimentos con carbohidratos.

Inhibe la glucogenolisis, que es un proceso catablico que hace referencia a la

degradacin de glucgeno a glucosa o glucosa 6-fosfato (C6H13O9P). Se da

cuando el organismo requiere un aumento de glucosa y, a travs de este proceso,

puede liberarse a la sangre y mantener su nivel (glucemia). Tiene lugar en casi

todos los tejidos, aunque de manera especial en el msculo y en el hgado debido

10
 a la mayor importancia del glucgeno como combustible de reserva en estos

tejidos.

Aumenta el transporte de glucosa en el musculo esqueltico y en el tejido

adiposo.

Aumenta la retencin de sodio en los riones.

Aumenta la re-captacin celular de potasio y amino-cidos.

Disminuye la gluco-secrecin heptica.

Promueve la gluclisis.

Favorece la sntesis de triacilgleceroles (triglicridos). Para ello, estimula la

produccin de acetil-CoA (por ejemplo, al acelerar la gluclisis), y tambin

estimula la sntesis de cidos grasos (componentes de los triacilgliceroles) a

partir de la acetil-CoA.

Estimula la sntesis de protenas.

Cuando solo entre un 10% y un 20 % de las clulas Beta estn en buen estado,

comienzan a aparecer los sntomas de la diabetes, pasando primero por un estado previo

denominado luna de miel, en el que el pncreas an segrega algo de insulina.

Imagen 6: Funciones de la insulina en el hombre

11
2. Diabetes

2.1. Definicin

La diabetes es una enfermedad en la que los niveles de glucosa (azcar) de la sangre

estn muy altos y el cuerpo no puede regularla.

Las personas con diabetes presentan niveles altos niveles de azcar en sangre debido a

que su cuerpo no puede movilizar el azcar desde la sangre hasta el msculo y a las

clulas de grasa para quemarla o almacenarla como energa, y dado que el hgado

produce demasiada glucosa y la secreta en la sangre. Esto se debe a que:

El pncreas no produce suficiente insulina

Las clulas no responden de manera normal a la insulina

Ambas razones anteriores

2.2. Tipos

Hay dos tipos principales de diabetes. Las causas y los factores de riesgo son diferentes

para cada tipo:

1. Diabetes tipo 1.

Puede ocurrir a cualquier edad, pero se diagnostica con mayor frecuencia en nios,

adolescentes o adultos jvenes. En esta enfermedad, el cuerpo no produce o produce

poca insulina. Esto se debe a que las clulas del pncreas que producen la insulina

dejan de trabajar. Se necesitan inyecciones diarias de insulina. La causa exacta se

desconoce.

2. Diabetes tipo 2.

Es mucho ms comn. Generalmente se presenta en la edad adulta pero, debido a las

tasas altas de obesidad, ahora se est diagnosticando con esta enfermedad a nios y

12
 adolescentes. Algunas personas con diabetes tipo 2 no saben que padecen esta

enfermedad. Con la diabetes tipo 2, el cuerpo es resistente a la insulina y no la

utiliza con la eficacia que debera.

Hay otras causas de diabetes, y algunas personas no se pueden clasificar como

tipo 1 ni 2.

La diabetes gestacional es el nivel alto de azcar en la sangre que se presenta en

cualquier momento durante el embarazo en una mujer que no tiene diabetes.

2.3. Sntomas

Un nivel alto de azcar en la sangre puede causar diversos sntomas, por ejemplo:

Visin borrosa

Sed excesiva

Fatiga

Orina frecuente

Hambre

Prdida de peso

Debido a que la diabetes tipo 2 se desarrolla lentamente, algunas personas con el nivel

alto de azcar en la sangre no presentan sntomas.

Los sntomas de la diabetes tipo 1 se desarrollan en un perodo de tiempo corto. Las

personas pueden estar muy enfermas para el momento del diagnstico.

Despus de muchos aos, la diabetes puede llevar a otros problemas serios. Estos

problemas se conocen como complicaciones de la diabetes e incluyen:

13
 Problemas oculares, como dificultad para ver (especialmente por la noche),

sensibilidad a la luz y ceguera

lceras e infecciones en la pierna o el pie, que de no recibir tratamiento, pueden

llevar a la amputacin de la pierna o el pie

Dao a los nervios en el cuerpo causando dolor, hormigueo, prdida de la

sensibilidad, problemas para digerir el alimento y disfuncin erctil

Problemas renales, los cuales pueden llevar a insuficiencia renal

Debilitamiento del sistema inmunitario, lo cual puede llevar a infecciones ms

frecuentes.

Aumento de la probabilidad de sufrir un ataque cardaco o un accidente

cerebrovascular

3. Produccin de Insulina Alternativa

3.1. Insulina Animal

Durante muchos aos la insulina que se ha empleado para el tratamiento de la diabetes,

se extraa del pncreas de diversos animales, principalmente del buey (Insulina bovina),

y sobre todo del cerdo (Insulina porcina). La insulina porcina es casi idntica a la

insulina humana y posee el mismo efecto sobre el azcar en sangre.

No fue hasta 1922 cuando se administr por primera vez insulina para tratar la diabetes,

concretamente un extracto de hgado de ganado que, debido a las impurezas presentes,

produca grandes reacciones alrgicas, como por ejemplo erupciones cutneas. Los

experimentos avanzaron, intentando encontrar la dosis exacta necesaria para una

correcta respuesta del organismo, obteniendo resultados ms o menos satisfactorios.

En 1926, ao en que se consigue la cristalizacin de la protena.

14
En 1963, la insulina se convirti en la primera protena en ser sintetizada in vitro, por

Meinhofer y colaboradores, pero con un rendimiento bastante pobre, lo que impeda su

utilizacin masiva contra la diabetes.

3.2. Produccin de Insulina usando Escherichia coli mediante ADN Recombinante

As llegamos a la insulina recombinante ya que, en el ao 1978, gracias al desarrollo de

la ingeniera gentica se consigue la sntesis de la insulina mediante tcnicas

biotecnolgicas (una vez ms, es la primera protena en la que se llevan a cabo).

3.2.1. La Escherichia coli

La Escherichia coli (E. coli) es un bacilo gramnegativo de la familia de las

enterobacterias que se encuentra en el tracto gastrointestinal de humanos y animales de

sangre caliente. En individuos sanos, es decir, si la bacteria no adquiere elementos

genticos que codifican factores virulentos, la bacteria acta como un comensal

formando parte de la microbiota intestinal y ayudando as a la absorcin de nutrientes.

En humanos, E. coli coloniza el tracto gastrointestinal de un neonato adhirindose a las

mucosidades del intestino grueso dentro de pocas horas de nacido. Desde entonces

permanece en una relacin de mutuo beneficio

La bacteria Escherichia coli fue inicialmente aislada y descrita por el pediatra alemn

Escherich en 1885, quien demostr su existencia como husped habitual del intestino.

La denomin Bacterium coli commune, que puede traducirse como bacteria comn del

colon.

15
Fue en 1919 cuando Castellani y Chalmers le dieron su denominacin definitiva en

homenaje a Escherich. Escherichia se convirti rpidamente en el gnero tpico de la

familia de las Enterobacteriaceas y E. coli en la especie ms conocida de este gnero.

Imagen 7: Theodore Escherich

Caractersticas de la Escherichia coli

Tipo de reproduccin Fisin Binaria o Biparticin

Temperatura del entorno 35C 43 C

Tiempo de reproduccin 20 minutos

Temperatura lmite de crecimiento 7C

Temperatura de eliminacin 70C

pH 7.2

Actividad del agua (aw) 0.99

pH para detener el desarrollo inferiores a 3.8, o superiores a 9.5

Actividad del agua (aw) para detener
inferiores a 0.94
desarrollo

16
3.2.2. Mtodos para obtener Insulina Recombinante

Existen dos rutas para la obtencin de insulina humana utilizando microorganismos

modificados por ingeniera gentica:

1. Produccin por separado de las cadenas A y B de la Insulina

Consiste en producir por separado ambas cadenas para, posteriormente asociarlas

qumicamente y producir insulina activa.

El procedimiento llevado a cabo fue muy ingenioso, utilizando las bacterias E. coli

como factoras en miniatura para producir de forma separada las cadenas A y B de la

insulina humana, introduciendo para ello los genes que las codifican en las bacterias

mediante un vector (pBR322). Posteriormente se llevaba a cabo la purificacin,

plegamiento y unin in vitro de las cadenas, mediante la oxidacin de las cistenas para

formar los puentes disulfuro de la protena activa.

El plsmido bacteriano ms ampliamente usado es el pBR322 (plsmido de Bolvar y

Rodrguez), ste posee un origen de replicacin en E. coli multicopiativo o relajado, un

tamao pequeo y posee 20 sitios de corte nicos para enzimas de restriccin de los

cuales 6 se encuentran dentro del gen de resistencia a la tetraciclina, otros dos dentro de

su promotor y tres dentro del gen de resistencia a la ampicilina. De modo que las clulas

de E. Coli que porten este plsmido sern resistentes a ambos antibiticos mientras que

las que porten un plsmido recombinante sern sensibles a aquel antibitico en cuyo gen

se ha producido la insercin de DNA exgeno y resistentes al otro. As resulta sencilla

la seleccin de bacterias transformadas con el plsmido recombinante.

17
Imagen 8: Plsmido pBR322 mostrando algunos sitios de restriccin tiles para la clonacin.

Imagen 9: Gen A y Gen B de la insulina dentro de un plsmido

18
La estrategia seguida para la produccin de insulina humana recombinante, es en primer

lugar; sintetizar qumicamente las cadenas de ADN con las secuencias correspondientes

a las cadenas de glicocola y fenilalanina, siendo necesarias 63 nucletidos para la

primera y 90 para la segunda, ms un triplete para sealar el fin de la traduccin.

Adems, para facilitar la separacin de los productos sintetizados, se aadi a cada gen

el triplete correspondiente a la metionina

Los genes sintticos A y B se insertaron por separado en el gen bacteriano responsable

de la -galactosidasa presente en un plsmido. Los plsmidos recombinantes se

introdujeron en E. coli donde se multiplicaron, fabricando un ARNm que tradujo una

protena quimrica, en la que una parte de la secuencia de la -galactosidasa estaba

unida por una metionina a la cadenas de glicocola o de fenilalanina de la insulina. Como

ninguna de las cadenas de insulina contiene metionina, esto se aprovech para separar

las cadenas de la insulina del resto de protena quimrica rompindola con bromuro de

ciangeno un producto qumico que separa la protena de fusin de la -galactosidasa;

es decir destruye la metionina.

Una vez purificadas las dos cadenas, se unen mediante una reaccin que forma puentes

disulfuro y se obtiene insulina humana pura, siendo el producto final, insulina humana

biosinttica idntica en todos los aspectos a la insulina purificada del pncreas humano.

19
Imagen 10: Produccin de insulina a travs de la bacteria E. coli

20
Imagen 11: Produccin de insulina por medio de la E. Coli

21
2. Transferencia y Clonacin del gen Insulina

Se basa en la produccin de pre-proinsulina que es procesada hasta insulina madura

mediante mtodos enzimticos.

Procedimiento

1) El ADN que se va a clonar se asla y se trata con una enzima de restriccin para crear

fragmentos que acaben en secuencias especficas.

2) Estos fragmentos se ligan a molculas de plsmido que han sido cortadas con la

misma enzima de restriccin, obtenindose un vector recombinante.

3) El vector recombinante se transfiere a clulas huspedes bacterianos, generalmente

por transformacin, un proceso en el que las molculas de DNA cruzan la membrana de

la clula husped transfirindose a su interior.

4) La clula husped se hace crecer en una placa de cultivo, donde formar colonias.

Puesto que las clulas de cada una de las colonias provienen de una sola clula inicial,

todas las clulas de la colonia, y los plsmidos que contienen, son genticamente

idnticas, o clones. Se rastrean las colonias para identificar las que han incorporado el

plsmido recombinante.

Los vectores plasmdicos penetran en las clulas de E. coli mediante un proceso de

transformacin inducido por cloruro clcico o mediante electro-poracin a 3-24 kV /cm,

que es eficaz en bacterias tanto Gram-positivas como Gram-negativas.

Si bien estos son los pasos a seguir para la obtencin de insulina recombinante, al

insertar en el plsmido bacteriano el gen entero de la insulina, se obtendra como

resultado la pre-proinsulina.

22
Imagen 12: Esquema de produccin de la insulina

Para realizar los marcadores de forma radiactiva o con un marcador fluorescente en el

ADN desnaturalizado de las bacterias se puede efectuar con variaciones de temperatura

o con productos qumicos. Cuando estas son marcadas, la cadena complementaria del

ADN de la bacteria se enlaza con el gen de la insulina. De esta manera sabemos cul es

la bacteria que tiene el gen deseado de la insulina, en donde esta misma puede colocarse

como medio de cultivo para que se pueda duplicar el gen de la insulina, tambin es

conocida como la tcnica de hiperhibridacin del cido nucleico.

El resultado es una insulina humana (denominada comercialmente Humulin), ms

barata de producir, potente y segura, ya que no mostraba los problemas que producan

23
las homlogas animales. Empez a distribuirse a principios de los aos 80 como

tratamiento contra la diabetes, siendo (una vez ms) la primera protena recombinante

aprobada como medicamento.

Hoy en da, prcticamente todos los diabticos son tratados con algn tipo de insulina

recombinante, pues se han conseguido numerosos anlogos con diferentes cualidades

(de efecto retardado, ms potente, etc).

Imagen 13: Humulin, frmaco obtenido por la accin del ADN Recombinante

No obstante, la investigacin no termina aqu. En los ltimos aos se est consiguiendo

que otros organismos genticamente modificados produzcan insulina humana, con

numerosas ventajas. Por ejemplo, cientficos argentinos han obtenido vacas transgnicas

que producen leche enriquecida en pro-insulina humana, que evitaran tener que

purificar la protena, pues nicamente habra que consumir la leche. Lo mismo ocurre

con el crtamo (Carthamus tinctorius L., azafrn bastardo), que se ha modificado para

que produzca insulina humana en sus semillas.

24
Imagen 14: Obtencin de insulina a partir de leche bovina

Imagen 15: Crtamo (Carthamus tinctorius L., azafrn bastardo).

25
3.3. Produccin de la insulina recombinante

La produccin de insulina humana en E. coli a partir de 1980 y su aprobacin para uso

clnico en 1982 revolucionaron la biotecnologa.

La insulina es el primer caso de protena producida por ingeniera gentica, esto fue

posible por el desarrollo de tcnicas que permitieron transferir informacin gentica de

un organismo a otro y expresar esa informacin en el organismo husped.

Imagen 16: Comparacin entre la insulina producida por cerdos y la recombinante

26
La biotecnologa est presente en la vida cotidiana, y ofrece sus beneficios. La salud

humana es uno de los aspectos que se ha visto favorecido a partir de los avances

cientficos logrados en las ltimas dcadas.

En la actualidad, varios laboratorios farmacuticos producen insulina humana, tanto a

partir de levaduras, como de bacterias (Escherichia coli); y sin ningn riesgo para la

salud, es decir que la vida de millones de diabticos en el mundo depende de la insulina

humana recombinante.

27
III. Conclusiones

1. La insulina ayuda a que los azcares obtenidos a partir del alimento que ingerimos

lleguen a las clulas del organismo para suministrar energa.

2. La insulina es una hormona de naturaleza proteica formada por 2 cadenas

polipeptdicas que en total tienen 51 aminocidos: dos cadenas de 21 y 30

aminocidos (cadenas A y B, respectivamente) unidas por puentes disulfuro

establecidos entre varios residuos de cistena.

3. La diabetes es una enfermedad en la que los niveles de glucosa (azcar) de la sangre

estn muy altos y el cuerpo no puede regularla.

4. Anteriormente, la insulina que se ha empleado para el tratamiento de la diabetes, se

extraa del pncreas de diversos animales, principalmente la Insulina bovina, y sobre

todo la Insulina porcina. La insulina porcina es casi idntica a la insulina humana y

posee el mismo efecto sobre el azcar en sangre.

5. Existen dos rutas para la obtencin de insulina humana utilizando microorganismos

modificados por ingeniera gentica: Produccin por separado de las cadenas A y B

de la Insulina y Transferencia y Clonacin del gen Insulina.

6. La produccin por separado de las cadenas A y B de la Insulina, consiste en

producir por separado ambas cadenas para, posteriormente asociarlas qumicamente

y producir insulina activa.

7. La transferencia y clonacin del gen Insulina, se basa en la produccin de pre-

proinsulina que es procesada hasta insulina madura mediante mtodos enzimticos.

8. En la actualidad, varios laboratorios farmacuticos producen insulina humana, tanto

a partir de levaduras, como de bacterias (Escherichia coli); y sin ningn riesgo para

la salud, es decir que la vida de millones de diabticos en el mundo depende de la

insulina humana recombinante.

28
IV. Bibliografa

1. Soto, lvaro. Insulina. Monografas.com Recuperado de

http://www.monografias.com/trabajos14/insulina/insulina.shtml

2. Colaborador Invitado. 2012. xitos transgnicos: La Insulina. Naukas: Ciencia, escepticismo

y humor. Recuperado de http://naukas.com/2012/01/05/exitos-transgenicos-la-

insulina/

3. Annimo. 2017. Insulina. Wikipedia. Recuperado de

https://es.wikipedia.org/wiki/Insulina

4. BD. 2017. Cuidado para la diabetes. Mxico. BD. Recuperado de

https://www.bd.com/mexico/diabetes/main.aspx?cat=3258&id=3310

5. Gonzles, Juan. 1978. Consiguen insulina idntica la humana a partir de una

bacteria comn. EEUU. El Pas. Recuperado de

https://elpais.com/diario/1978/09/09/sociedad/274140009_850215.html

6. Flores, Beatriz. 1994. Produccin de insulina humana por tcnicas de ADN

recombinante. Ciencias, nm. 34, abril-junio, pp. 61-62. [En lnea]. Recuperado de

7. http://www.revistaciencias.unam.mx/pt/186-revistas/revista-ciencias-34/1758-

producci%C3%B3n-de-insulina-humana-por-t%C3%A9cnicas-de-adn-

recombinante.html

8. Snchez, Francis. 2016. Cmo la bacteria E. coli podra sintetizar insulina humana? Prezi

Inc. Recuperado de https://prezi.com/zvz59wxcuwuy/como-la-bacteria-e-coli-podria-

sintetizar-insulina-humana/

9. Clonacin de un fragmento de DNA. Recuperado de

http://lnx.futuremedicos.com/Revista_future/Articulos&Trabajos/Basicas/bq/clonaci

on_DNA.htm

29
10. Protenas Recombinantes. Recuperado de

http://www.porquebiotecnologia.com.ar/index.php?action=cuaderno&opt=5&tipo=1

&note=49

11. Annimo. 2017. Fisin Binaria. Wikipedia. Recuperado de

https://es.wikipedia.org/wiki/Fisi%C3%B3n_binaria

12. Canet. Juan. 2016. Escherichia coli: caractersticas, patogenicidad y prevencin (I).

Betelgeux. Recuperado de http://www.betelgeux.es/blog/2016/01/19/escherichia-coli-

caracteristicas-patogenicidad-y-prevencion-i/

13. Soto, V., Hernndez, J., Morales, J., & de la Cruz, O. 2008. Produccin de insulina a

partir de organismos bacterianos: Revisin bibliogrfica para la tcnica molecular.

Mxico. Revista de divulgacin Kuxulkab. Universidad Jurez Autnoma de

Tabasco

14. Moreno, J. 2012. Monografa de produccin de insulina recombinante mediante

ingeniera gentica. Ecuador. Unidad acadmica de ingeniera qumica, biofarmacia,

industrias y produccin. Facultad de biofarmacia. Universidad catlica de Cuenca.

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