Etiologa de la mancha foliar del Singonio (Syngonium spp).

Estrada A. G.1; Martnez H. F.1

1
Universidad Autnoma Chapingo, Departamento de Parasitologa Agrcola.
Km 38.5 Carretera Mxico-Texcoco. Chapingo, Estado de Mxico, CP 56230
Correo electrnico: Parasitologia_4b@hotmail.com

Resumen
Las manchas foliares en Syngonium negativos en celobiosa, se concluy
spp. pueden ser ocasionadas por que Pseudomonas marginalis es el
diversas fitobacterias. El objetivo de agente causal de la manchas foliares
este trabajo fue el de identificar el en Syngonium spp.
agente causal de manchas foliares en
Palabras clave: Syngonium, mancha
singonio procedente de Xochimilco,
foliar, pudricin, virulencia.
Mxico. Se aisl y purifico al
patgeno en medio de cultivo
Abstract
diferencial: B de King, obteniendo
Leaf spots on Syngonium can be
colonias blancas grisceas y
caused by various fitobacterias. The
fluorescentes. Se corroboro virulencia
aim of this study was to identify the
mediante inoculacin en hospedante
causal agent of leaf spots in
homologo y pudricin en papa. Se
Syngonium spp. from Xochimilco,
lleg a gnero mediante la
Mexico. Was isolated and purified to
produccin citocromo oxidasa, y a
the pathogen in medium B of King
grupo por el crecimiento de colonias
obtaining grayish white colonies and
planas en medio para produccin de
fluorescent, virulence was
levana. Se determin el metabolismo
corroborated by inoculation into host
aerbico estricto con el medio Hugo &
counterpart and rot in potato. Was
Leifson, otras pruebas bioqumicas
reached genre by cytochrome
con resultados positivos fueron la de
oxidase production, and group growth
dihidrolasa de arginina, manitol,
amid flat colonies for production of
sorbitol, trehalosa, sacarosa,
levan. Aerobic metabolism strict
hidrolisis de gelatina y resultados
environmentally Hugh & Leifson Dentro de las enfermedades que
determined, other biochemical tests afectan al cultivo de singonio, destaca
with positive results were Arginine una enfermedad que se caracteriza
dihydrolase, manitol, sorbitol, por el necrosamiento o atizonamiento
trehalose, sucrose, hydrolysis of de las hojas y cuya severidad puede
gelatin and negative in cellobiose, it ser tan alta que todo el follaje muere:
was concluded to Pseudomonas Este tipo de daos puede ser
marginalis as causal agent of leaf inducido por diversos tipos de
spots in Syngonium sp. bacterias, como Pectobacterium
carotovora, P. c. pv. antroseptica, P.
Keywords: Syngonium, leaf spot, rot
chrysanthemi pv.philodendri,
and virulence.
Pseudomonas cichorii y
Introduccin Xanthomonas campestris pv.
El singonio es una de las plantas de dieffenbachiae, de las cuales slo P.
follaje ms atractivas y con mayor cichorii y P. chrysanthemi se reportan
demanda en el mercado, como patgenos de importancia
principalmente por sus hojas que cuarentenaria para Mxico
presentan diversas formas; (Annimo,1995).
virtualmente todas estas plantas son
Las bacterias Pectobacterium y
producidas en estado juvenil. Son
Xanthomonas producen manchas
extensamente usadas en la
foliares con lesiones traslcidas
decoracin de interiores, debido a su
acuosas y la primera de ellas tambin
excelente habilidad para adaptarse a
ataca a los esquejes cuando
baja intensidad de luz en
enrazan. Pseudomonas marginalis
habitaciones (Conover y Pool, 1990).
pv. marginalis se ha reportado en el
Son fciles de cultivar, crecen en
gnero Syngonium como hospedante
enredadera y se usan en macetas
secundario. Los sntomas pueden ser
colgantes cuando son pequeas,
parecidos a los ocasionados por
aunque pueden usarse para adornar
Xanthomonas y Pcctobacterium en el
jardines, decorar troncos de rboles y
follaje (Lund 1983, Bradbury 1986
paredes irregulares.
and Janse et al 1992).
Pseudomonas cichorii produce primeros sntomas son pequeas
sntomas con lesiones obscuras con manchas humedas de color marrn a
mrgenes prpuras. Esta enfermedad negro que se agrandan en
se inicia cerca de la unin de la hoja condiciones de alta humedad,
con el peciolo, donde se forman convirtindose en manchas grandes
lesiones oscuras de mrgenes hmedas de color marrn a lesiones
prpuras, las que se expanden a lo necrticas de color negro. En etapas
largo de las venas y hacia toda el avanzadas la enfermedad progresa a
rea foliar; eventualmente la planta travs de las venas y las hojas se
sufre una absicion y en ocasiones el marchitan y mueren. En tiempo seco
tallo se pudre y la planta muere. el progreso de la enfermedad puede
detenerse (Hall et al., 1971).
Los sntomas ocasionados por
Xanthomonas campestri pv. P. marginalis pv. marginalis puede
dieffenbachiae, se presentan sobrevivir en el suelo durante un
primariamente en los mrgenes de la perodo de hasta 4 meses, cuando el
hoja donde la bacteria penetra a contenido de agua del suelo es del
travs de hidtodos; as mismo, se 15-30% y una temperatura de 8 C.
observan lesiones translucidas y A niveles inferiores de humedad y / o
acuosas entre los tejidos intervenales temperaturas ms altas, la
(Miller, 1990). supervivencia es ms baja (Dealto y
Surico, 1982).
Los sntomas de P. marginalis pv.
marginalis en lechuga comienzan con El objetivo del presente trabajo fue
la limitada marchitez de los mrgenes aislar e identificar el agente causal de
de la hoja (tizn marginal). Las zonas manchas foliares en Syngonium spp.
marchitas pueden consistir en proveniente de Xochimilco, Mxico.
pequeas manchas de hasta 2-3 cm.
En etapas posteriores, estas
manchas se vuelven de color Materiales y mtodos

amarillo-marrn a negro necrtico Se colecto una planta de singonio

seco. En Chicory y endiva los que presentaba sntomas con
manchas foliares hmedas en homologo. Se introdujo una jeringa
Xochimilco, Mxico. Se observ al con suspensin bacteriana en el rea
microscopio compuesto una de la vena principal de una hoja sana
preparacin de los tejidos afectados. y entre los espacios intracelulares de
Se seleccion ms tejido enfermo y la hoja. Para la prueba de pudricin
se lav con agua estril. Se cortaron del tubrculo de papa se lav, seco y
pequeos trozos del tejido y se les desinfecto superficialmente con
desinfecto sobre una caja Petri con etanol las capas externas de la papa.
hipoclorito de sodio al 1% durante 60 Se cortaron 3 pedazos de
segundos. Se decant el hipoclorito aproximadamente 5 mm de grosor y
de sodio y se lav tres veces con se colocaron en una caja Petri con
agua estril. Bajo condiciones papel filtro (previamente esterilizado).
aspticas, se transfirieron los cortes A cada una de las rebanadas se les
del tejido a un tubo de ensayo con realizo una incisin superficial y slo
agua destilada esterilizada y se agito a dos de ellas se les coloco colonias
por aproximadamente 10 minutos. El bacterianas, dejando una como
aislamiento se realiz en condiciones testigo. Con el objeto de humedecer
aspticas con un asa bacteriolgica el papel filtro se le adiciono
se tom una gota de suspensin y se aproximadamente 3ml de agua
sembr por estra cruzada en una destilada y esterilizada. Se tomaron
caja Petri con medio de cultivo B de resultados a las 24 horas posteriores.
King. Despus de 48 horas de Con el objeto de determinar el Gram
incubacin se seleccion la colonia en un porta objetos limpio se coloc
ms semejante con ayuda de la luz una gota de KOH. Del cultivo
ultravioleta y se sembr de nuevo en bacteriano se tom una asada y se
una caja nueva con medio de cultivo mezcl con el hidrxido durante unos
B de King y se incubo por 48 horas. segundos.

Realizado lo anterior se procedi a Se realiz la prueba de fluorescencia

las pruebas de patogenicidad. La a las colonias purificadas, en
primera se realiz por el mtodo de ausencia de cualquier tipo de luz con
inyeccin sobre el hospedante una lmpara de luz ultravioleta y se
determin el metabolismo oxidativo para la prueba, se adiciono
y/o fermentativo de la glucosa aproximadamente 1ml de aceite
empleando el mtodo descrito por mineral estril. Se incubo a 28C por
Hugh y Leifson. Con el asa 72 horas. Las pruebas bioqumicas
bacteriolgica ya esterilizada y con Manitol, Sorbitol, Trehalosa,
enfriada se tom una muestra de la celobiosa y Sacarosa se realizaron en
bacteria y se sembr por picadura 2 condiciones de asepsia tomando con
tubos con medio Hugo & Leifson el asa bacteriolgica crecimiento
procurando llegar al fondo. A un tubo bacteriano y sumergindolo sobre los
se le adiciono 2 mm aceite mineral reactivos, desintegrando la colonia
para que estuviese en condiciones bacteriana de forma que se disperse.
anaerobias y al otro no. La prueba de Se incubaron a 28C. Realizado esto
produccin de levana tambin se se procedi a las prueba de hidrolisis
llev acabo, tomando el asa de gelatina en donde se sembr la
bacteriolgica se sembr la bacteria bacteria por picadura en un tubo con
en forma de puntos discretos sobre la gelatina nutritiva, se incubo a 28C
superficie de medio para la durante cuatro das. Posteriormente
produccin de levana. Se incubo a manteniendo por unos cinco minutos
28C durante 48 horas cuidando que el tubo en el congelador se tom el
la tapa de la caja quedara hacia resultado.
arriba. La prueba de produccin de
Resultados
citocromo oxidasa se llev acabo con
un asa donde se adiciono Del aislamiento en medio B de King,

crecimiento bacteriano sobre el disco se obtuvieron colonias blanco

respectivo para la prueba, al cabo de lechosas con un pigmento verde

10 segundos se tom el resultado. fluorescente vistas bajo luz

ultravioleta (figura 1). Las pruebas de
Otra prueba fue la de dihidrolasa de
patogenicidad; en el tubrculo de
arginina donde se introdujo el asa
papa (figura 2) y en el hospedante
previamente flameada, enfriada y
homologo es decir en singonio (figura
con cultivo bacteriano al tubo con
3) dieron resultado positivo ya que en
medio de cultivo correspondiente
ambos se expres el sntoma. La hmeda (figura 7), la prueba de
reaccin de KOH resulto negativa dehidrolasa tambin fue positiva
indicando que la bacteria es Gram cambiando a un color rosa (figura 8),
negativa (figura 4). Se obtuvo que la otras pruebas tambin positivas
bacteria es de metabolismo aerbico fueron las de utilizacin de: manitol
estricto con la prueba de oxidacin y (figura 9), sorbitol (figura 10),
fermentacin de la glucosa (figura 5). trehalosa (figura 11), sacarosa
La prueba de citocromo oxidasa (figura 12). La prueba de utilizacin
resulto positiva, las colonias de celobiosa fue negativa: no cambio
cambiaron de coloracin a un rosa de color. La prueba de hidrolisis de
(figura 6), la prueba de produccin de gelatina tambin tuvo resultado
levana fue negativa obtenindose positivo.
colonias planas de consistencia

Fig. 2. Prueba de patogenicidad en tubrculo de

Fig. 1. Fluorescencia de las colonias
papa: ntese la pudricin de aspecto hmedo en
bacterianas en medio B de King.
el corte de la derecha.
 A B

Fig. 3. Prueba de patogenicidad en hospedante homologo (singonio). A) Hoja testigo, B) Hoja

inoculada con la bacteria, ntese el avance de la mancha de aspecto hmedo

Fig. 5. Reaccin negativa de

Fig. 4. Reaccin positiva de KOH,
indicando que la bacteria es Gram
negativa
oxidacin y fermentacin de
la glucosa en medio de
Escrutinio (Hugh & Leifson),
indicando que la bacteria es
aerbica estricta.
Fig. 6. Prueba positiva de
produccin de citocromo
oxidasa: ntese la coloracin
rosa del crecimiento
bacteriano

Fig. 7. Prueba negativa Fig. 8. Prueba Fig. 9. Prueba Fig. 10. Prueba positiva
de produccin de positiva de positiva de manitol de sorbitol.
levana: obsrvense las dehidrolasa de
 colonias planas y de arginina.
consistencia hmeda.

Fig. 11. Prueba positiva Fig. 12. Prueba Fig. 13. Prueba Fig. 14. Prueba positiva
de produccin de cido positiva de sacarosa. negativa de de hidrolisis de gelatina
a partir de trehalosa celobiosa

Discusin en el tubrculo de papa como en el

hospedante homologo y al obtener
De la planta de singonio colectada en
los mismos sntomas (iniciales) se
Xochimilco, Mxico, con manchas
confirm que se tena a el agente
foliares hmedas, delimitadas por
causal por lo que se procedi a
nervaduras y translucidas a contraluz
identificar a gnero: Con la
(Miller, 1990), se procedi a
produccin de la enzima citocromo
identificar el agente causal teniendo
oxidasa que dio resultado positivo se
confirm que la bacteria pertenece al
en cuenta que estos sntomas son gnero Pseudomonas. Como las

tpicos de bacterias fitopatgenas, se colonias produjeron un pigmento

sospechaba de Pseudomonas fluorescente se procedi a separar a
marginalis y Pseudomonas cichorii. Al nivel de grupo: syringae de

utilizarse el medio diferencial B de fluorescens. Con el crecimiento en

King para el aislamiento se detect medio para produccin de levana se

que la bacteria perteneca al gnero determin que la bacteria perteneca

Pseudomonas ya que floreci usando al grupo fluorescens ya que las
luz ultravioleta, despus de realizar colonias que crecieron fueron de

las pruebas de patogenicidad tanto forma plana y de consistencia

hmeda, es decir la prueba fue CABI. 2010. Crop Protection
negativa. Las pruebas que se Compendium. Global Module.
realizaron para identificar la especie Wallingford, RU: CABI Publishing.
fueron muy satisfactorias siendo
Flores A. M. 2000. Monografa de
positivas: la de dihidrolasa de
enfermedades bacterianas en plantas
arginina, las de utilizacin de manitol,
ornamentales. Chapingo, Mxico. 110
sorbitol, trehalosa y sacarosa, la
pp.
prueba de utilizacin de celobiosa dio
negativa y la prueba de hidrolisis de Martnez B. L. 1998. Diagnstico y

gelatina tambin resulto positiva control de enfermedades del singonio

observndose una licuefaccin de la (Syngonium spp.) en Cuautla Mor., y

misma. Por los resultados obtenidos Xochimilco, Df, Mx. 52 pp.

se identific a Pseudomonas Rodrguez, M. M. 2011.

marginalis coincidiendo con Dealto y Enfermedades bacterianas en
Surico, 1982). Hortalizas. 1 Edicin. Universidad
Autnoma Chapingo, Texcoco,
Mxico. 229-233 p, 279 pp.
Conclusin.
Schaad, N.W., Jones, J.B., and Chun,
De acuerdo a los resultados
W. 2001. Laboratory Guide for
obtenidos el agente causal de las
Identification of Plant Pathogenic
manchas foliares del singonio
Bacteria. The American
colectado en Xochimilco, Mxico, es
Phytopathological Society Press. St.
la bacteria Pseudomonas marginalis.
Paul, Minnesota, USA. 373 p.

The American Phytopathological

Bibliografa. Society. 2001. Plagas y
enfermedades de las plantas en
maceta con flores. Edit. Mundi
prensa. 89 pp.