Determinar la concentracin de las muestras y las desviaciones estandar asociadas a estas.

Las medidas de las absorban

analisis de hierro con o-fenantrolina que forman un complejo purpura cuya absorbancia mide 510 nm, una vez calibrado

PATRON MUESTRA
Soluci C (ppm) Absorbancia CFeII (ppm) Absorbancia
P1 0.2 0.0458 M1 X1 0.757
P2 0.4 0.0835 M2 X2 0.434
P3 0.6 0.119 M3 X3 0.124
P4 0.8 0.158
P5 1 0.197
P6 2 0.387
P7 3 0.58
P8 4 0.77
P9 5 0.963
9n
1.- La recta de calibracin y la prueba de correlacin significativa

Curva Patron
1.2

1
f(x) = 0.1929957295x
0.1912414207x + 0.0057995387
0.8 R = 0.9999327763
0.9999875392
Absorbancia

0.6

0.4

0.2

0
0 1 2 3 4 5 6
C ppm

Fig1. Recta de calibracin obtenida con los datos

y= a + bx
Ecuacin de la recta: A= 0.0057995 + 0.1912 CFeII
Coeficiente de regrecin r2= 0.999994

b.- Desviacin estandar de la regresion y del corte, pendiente se calculan con las siguientes expresiones:

&(8_ ( _ _) ^ )/())
&(8_ ( _ _) ^ )/())
_ =_()/(&8_ ( _ (

X
Numero C Fe II (ppm)
1 0
2 0.2
3 0.4
4 0.6
5 0.8
6 1
7 2
8 3
9 4
10 5
10 1.88888889
9 ppm

Los intervalos de confianza para el corte y la pendiente sern:

t(0.05;7) = 2.3646
_=(,)_ 0.0057995 0.00162

_=(,)_ 0.1912 0.00065

Calculo de la concentracin, el error asociado e intervalo de confianza para =0.05

Las concentraciones de las muestras se calculan por medio de la ecuacin de la recta y el error asociado y e

_^=()/( ^() )
_^=(.)/(. ^() )

_=(,)_
 _=(,)_

Muestra

m=1 1
2
3
promedio=
estas. Las medidas de las absorbancias son el promedio de 3 mediciones
cia mide 510 nm, una vez calibrado el mtodo se analizaron las 3 muestras

En la figura se ve r=0,99999, a pesar de ello hacemos la prueba t de correlacin significativa:

Las hipotesis para la prueba son:
_0 : correlacin Si texp>t(,GL) Se rechaza la hipotesis nula y se
_ acepta la hipotesisi alternariva,
: E correlacin concluyendo que si existe una
correlacion significativa entre Y yC
Los grados de libertad son: (n-2)= 7 y el estadistico t para estos grados de libertad
=0.05 es: 2.365

_ " =" (||(2&2))/(1^2 )

texp= 1080 > 2.3646

r= 0.999994
n= 9

entes expresiones:

)/())
_ =_() (&(_^ )/(8_(_ ) ))
 )/())
_ =_() (&(_^ )/(8_(_ ) ))
( _ ( ) ^ ) )

Y
A(y) (Y-) (Y-)2 (X-) (X-)2 _^2
0.0058 -0.0058 3.36E-05 -1.888888889 3.56790123 0
0.046 0.044 0.0018 3.24E-06 -1.688888889 2.85234568 0.04
0.084 0.082 0.0015 2.25E-06 -1.488888889 2.21679012 0.16
0.119 0.121 -0.0020 4.00E-06 -1.288888889 1.66123457 0.36
0.158 0.159 -0.0010 1.00E-06 -1.088888889 1.18567901 0.64
0.197 0.197 0.0000 0.00E+00 -0.888888889 0.79012346 1
0.387 0.388 -0.0010 1.00E-06 0.1111111111 0.01234568 4
0.580 0.579 0.0010 1.00E-06 1.1111111111 1.2345679 9
0.770 0.771 -0.0010 1.00E-06 2.1111111111 4.45679012 16
0.963 0.9618 0.0010 1.00E-06 3.1111111111 9.67901235 25
( )2 ( )2
1.45E-05 27.6567901 56.2

_() 1.44E-03 Sa 6.84E-04

Sb 2.74E-04
LDD 9.21E-03

n de la recta y el error asociado y el intervalo de confianza para el 95 de chance se calculan por las expresiones explicadas :

^() )

Para facilitar el calculo el discriminate de la raiz se descompone en res partes

 =/+/ =(_ "-" ) 2 =^ (_ )

en la tabla siguiente se calcula la concentracin y la desviacion estandar asociada, Sc para tres mediciones (m)
y 9 puntos de calibracin, (n)
Y Yblanco b
r p
=/+ =^ (_
Absorbancia corte en Y pendiente C Fe ppm Sy/x b =(_ "-" ) 2
/

0.757 0.0057995 0.1912 3.93 7.52E-03 1.11111 -0.7512005

0.434 0.0057995 0.1912 2.24 -0.4282005
0.124 0.0057995 0.1912 0.62 -0.1182005
0.4383333333

_ " =" (||(2&2))/(1^2 )

%=_/_

C Fe ppm S ca t (95%,1) t x S %Cv

3.93 0.0097 1080 1080.130 0.25%
2.24 0.0086 1080 1080.129 0.38%
0.62 0.0080 1080 1080.128 0.11%
e rechaza la hipotesis nula y se
cepta la hipotesisi alternariva,
oncluyendo que si existe una
orrelacion significativa entre Y yC

_ ) ))
_ ) ))

0.0241

ones explicadas :
_ )

s mediciones (m)

=(_ _ )/
=^ (_ ) =_ _((,) ) _=
(_ "-" ) 2 Sca
_ _ +3_()

1.0110614455 9.72E-03 3.93 0.002 1.01E-02

1.0110614455 8.55E-03 2.24 0.002
1.0110614455 7.98E-03 0.62 0.002
=(_ _ )/_= =(_ _ )/
_ +10_()

2.02E-02
0.02 0.075
En cuatro balones aforados de 50mL se introduce alicuotas de 2mL de una muestra desconocida que contiene hie
0,2,4 y 6 mL de solucion amortiguadora de acido acetico y 10 mL de solucion de sulfasalisilico para la formacion d
con agua destilada. Las absorbancias respectivas se muestran en la siguiente tabla:

Vo (mL) 2 2 2 2
Ves (mL) 0 2 4 6
Vf(mL) 50 50 50 50
A 0.082 0.338 0.54 0.756

Representat graficamente la absorvancia en funcion del volumen del estandar agregado se obtiene la lnea recta:

A
0.8
f(x) = 0.11105x + 0.0951
0.7 R = 0.9974171059

0.6

0.5

0.4

0.3

0.2

0.1

0
0 1 2 3 4 5 6 7

Ecuacin de la lnea recta A=0.0951+0.1111xVes

Pendiente: b= -0.1111 mL-1
Corte del eje de la absorbancia a= 0.0951

Para calcular la concentracin del analito es:

Cfe= 43 ppm
_=/x
_/_
Por la extrapolacin de la recta A=f(Ves) se puede calcular la concentracion del analito
El valor extrapolado coreesponde al volumen de reactivo a la cual coresponde una absorbancia igual a cero
Vo (mL) 2 2 2 2
Ves (mL) 0 0 2 4 6
Vf(mL) 50 50 50 50
A 0 0.082 0.34 0.537 0.756

CA=[_ CA= 42.8 ppm

(_^)/_ ]
desconocida que contiene hierro, Se agregan respectivamente
asalisilico para la formacion de complejo rojo. Se enrasan los balones

ado se obtiene la lnea recta:

bsorbancia igual a cero

 =(1)

=+ ........................(2)

Calibracin: Se refiere a la comprobacin de la relacin lineal dada por la ecuacin 2, asi como la optimizacion de la longitud de
una relacin exacta y precisa que permita relacionar un conjunto de datos espectroscopicos con los datos referenciales de labo
desconocidas por analizar

3. Calibracin con un patron

3.1Calibracin con un patron
Se prepara un solo patron de concentracin conocida Cp y se mide su seal dada por Yp

_=+ _ = _ ...........................3.1

_= (64&_/_ ) ........................................................ 3.2

Para la muestra, al medir su seal esta dada por:

_ = _
_ .................................................3.3
En condiciones experimentales constantes Kp=KA y la concentracin de la muestra esta dada por:

_= (64&_/_ ) ........................................................ 3.4

o la optimizacion de la longitud de onda de trabajoque genera
on los datos referenciales de laboratorio y de las muestras

A.- Ejemplo libro: Hg+2 en sangre.

Para grfico
Cp ppb Abs (u.a.) Yp (nm) Kp
1.75 0.474 0.270857 Error por calibraci
0.5
CA ppb Abs (u.a.) YA (nm) KA 0.45
1.33280591 0.361 0.270857 0.4
0.35
0.3

Absorbancia
0.25
A.- Para azul de metileno 0.2
0.15
0.1
Cp ppm Abs (u.a.) Yp (nm) Kp
0.05
0
1.3 1.35 1.4 1.45 1.5 1
Concent

B.- Para Ag@Chako

Cp ppm Abs (u.a.) Yp (nm) Kp

10

C.- Para mezcla AM+Ag@chako

CA ppm Abs (u.a.) Yp (nm) Kp
10
 Error por calibraci con un punto

1.35 1.4 1.45 1.5 1.55 1.6 1.65 1.7 1.75 1.8
Concentracin
 Ejemplo: En las tablas se muestran las absorbancias ledas para 6 patrones de un complejo de Fe II con o-fenantrolina y tres mu
Obtener la recta de calibracin y su ecuacin respectiva calculada por los mnimos cuadrados as como el error de la regresin
Determinar la concentracin de las muestras y las desviaciones estandar asociadas a estas. Las medidas de las absorbancias so

PATRON MUESTRA
CFeII (ppm) Absorbancia CFeII (ppm) Absorbancia
2 0.164 1 0.107
5 0.425 2 0.721
8 0.628 3 1.538
12 0.951
16 1.266
20 1.582
a.- Curva patron

Curva Patron FE (II)

1.8
1.6
f(x) = 0.0782591793x + 0.0142786177
1.4 R = 0.9995851346
1.2
Absorbancia

1
0.8
0.6
0.4
0.2
0
0 5 10 15 20 25
C ppm

Fig1. Recta de calibracin obtenida con los datos

Ecuacin de la recta: A= 0.0143 + 0.0783 CFeII
Coeficiente de regrecin r2= 0.9996

b.- Desviacin estandar de la regresion y del corte, pendiente se calculan con las siguientes expresiones:

&(8_ ( _ _) ^ )/
_ =_()/(&8_ ( _ ( )
)
 Numero C Fe II (ppm)
1 2
2 5
3 8
4 12
5 16
6 20
6 10.5

Los intervalos de confianza para el corte y la pendiente sern:

2.78
0.0143 0.02707
_=(,)_

_=(,)_ 0.0783 0.00222

Las concentraciones de las muestras se calculan por medio de la ecuacin de la recta y el error asociado y el inter

_^=()/( ^() )
_^=(.)/(. ^() )

_=(,)_

Muestra
1
2
3
plejo de Fe II con o-fenantrolina y tres muestras de aguas frescas tratadas de igual manera que los patrones
adrados as como el error de la regresin y de la pendiente.
estas. Las medidas de las absorbancias son el promedio de 3 mediciones
minimos cuadrados

x y
2 0.164
5 0.425
8 0.628
12 0.951
16 1.266
20 1.582

entes expresiones:

^ )/ _ =_() (&(_^ )/(8_(_ ) ))

( _ ( ) ^ )
 A(y) (Y-) (Y-)2 (X-) (X-)2 _^2
0.164 0.1709 -0.0069 0.00004761 -8.5 72.25 4
0.425 0.4058 0.0192 0.00036864 -5.5 30.25 25
0.628 0.6407 -0.0127 0.00016129 -2.5 6.25 64
0.951 0.9539 -0.0029 0.00000841 1.5 2.25 144
1.266 1.2671 -0.0011 0.00000121 5.5 30.25 256
1.582 1.5803 0.0017 0.00000289 9.5 90.25 400
( )2 ( )2
ppm 0.00059005 231.5 893

_() 0.01214547 Sa 0.00973843

Sb 0.00079825
_=_ +3_() Ymin= 0.05073642 LDD 0.465

=(_ _ )/

n de la recta y el error asociado y el intervalo de confianza para el 95 de chance se calculan por las expresiones explicadas :

^() )

Para facilitar el calculo el discriminate de la raiz se descompone en res partes

=/+/ =(_ "-" ) 2 =^ (_ )

en la tabla siguiente se calcula la concentracin y la desviacion estandar asociada, Sc para tres mediciones (m)
y 6 puntos de calibracin, (n)
r p
Absorbancia corte en Y pendiente C Fe ppm Sy/x b =/+ =^ (_ )
=(_ "-" ) 2
/
0.107 0.0143 0.0783 1.18390805 0.15511459 0.50000 -0.0927
0.721 0.0143 0.0783 9.02554278 -0.7067
1.538 0.0143 0.0783 19.4597701 -1.5237

C Fe ppm S ca t (95%,1) t x S %Cv

1.18 0.1103 12.710 12.8203 9.32%
9.03 0.1432 12.710 12.8532 1.59%
19.46 0.2267 12.710 12.9367 0.00%
(_ ) ))
 ppm

presiones explicadas :

_ )

a tres mediciones (m)

_ " =" (||(2&2))/(1^2 )

=^ 2 (_ ) SCA t (95%,6)
(_ "-" ) =_ _((,) )
_ texp
1.419301035 0.11034466 1.18 0.03 2.78 1,943
1.419301035 0.14316672 9.03 0.03 2.78 1,943
1.419301035 0.22668914 19.46 0.03 2.78 1,943