Abstracto

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Introduccin
La fagocitosis es un componente importante de la funcin microbicida de los neutrfilos; Sin
embargo, la fagocitosis tambin es utilizada por una variedad de tipos de clulas en varios
contextos fisiolgicos. Elie Metchnikoff, comnmente conocido como el padre de la
inmunidad innata, explor la fagocitosis en polimorfonucleares neutrfilos y macrfagos
(Gordon, 2008 ). Desde entonces, se han descrito muchas ms clulas metazoarias para
mostrar capacidad fagoctica. El objetivo principal de esta revisin es proporcionar una
visin general de la multiplicidad de funciones servidas por los fagocitos.
Las clulas fagocticas pueden organizarse en dos categoras: los fagocitos profesionales y
no profesionales (Rabinovitch, 1995). Los fagocitos profesionales o dedicados consisten
principalmente en neutrfilos polimorfonucleares, monocitos, macrfagos derivados de
monocitos y clulas de macrfagos residentes en tejidos cuya razn de ser es la
fagocitosis. Los fagocitos no profesionales incluyen todos los otros tipos de clulas que
pueden realizar fagocitosis, tales como clulas epiteliales, fibroblastos y clulas dendrticas
(DCs). Tales clulas tienen un conjunto ms restringido de objetivos y los engullen ms
lentamente. As, la capacidad fagoctica de los fagocitos no profesionales difiere
significativamente en el alcance y la eficiencia de la de los fagocitos profesionales. Tanto los
fagocitos profesionales como los no profesionales juegan un papel importante en la
inmunidad innata debido a su capacidad para englobar patgenos. Sin embargo, tambin son
vitales en el mantenimiento del estado fisiolgico saludable,2005 ; Arandjelovic y
Ravichandran, 2015 ; Wynn y Vannella, 2016 ). As, las consecuencias de la fagocitosis se
extienden mucho ms all del contexto de la inmunidad innata.
Como una forma de endocitosis mediada por receptores, la fagocitosis implica una variedad
de receptores, que son esenciales para el reconocimiento e internalizacin de mltiples
ligandos, reflejando sus diversas funciones (Gordon, 2016 ). Sin embargo, el fenotipo
macroscpico de la fagocitosis es relativamente constante. Comienza con el reconocimiento
del objetivo, es decir, la unin de un receptor fagoctico a su ligando cognado. Las partculas
extraas y clulas autnomas alteradas son los dos objetivos principales de la fagocitosis
(Gordon, 2016 ). El trmino "yo alterado" se refiere tpicamente a clulas apoptticas y
necrticas; Sin embargo, ahora se reconoce que las clulas viables pero estresadas tambin
pueden ser internalizadas por un proceso etiquetado como phagoptosis (Brown y
Neher, 2012). Las clulas auto-receptoras, en general, expresan seales de "don't-eat-me",
tales como CD47, y su receptor sobre clulas mieloides, SIRP, inhibe la fagocitosis
(Hochreiter-Hufford y Ravichandran, 2013 ). Estas seales son reguladas hacia abajo en
clulas alteradas y las "seales de comer", como la fosfatidilserina (PS), se exponen a la
superficie celular. Los receptores que reconocen las seales de comer-me implican a los que
se unen directamente a las protenas puente de unin a PS o PS (denominados colectivamente
como receptores PS), azcares alterados (reconocidos por lectinas) y trombospondina
(Hochreiter-Hufford y Ravichandran, 2013). Los receptores implicados en la fagocitosis de
partculas extraas incluyen aquellos que se unen a opsoninas (por ejemplo, Fc y receptores
del complemento), patrones moleculares asociados a patgenos (reconocidos por receptores
de reconocimiento de patrones) y receptores scavenger (Freeman y Grinstein, 2014 ). La
unin de un ligando multivalente sobre la superficie de la partcula diana da como resultado
el agrupamiento de receptores y, despus de varios pasos intermedios, en el reclutamiento de
GFTasa de la familia Rho (Tollis et al., 2010). La sealizacin subsiguiente conduce a la
formacin dependiente de actina de la copa fagoctica ya la extensin de pseudpodos
alrededor del ligando, culminando en la internalizacin. El objetivo es llevado a una vacuola-
el fagosoma- que se somete a un remodelado extenso, un proceso conocido como
maduracin, que lo hace hostil a los microbios y bien adaptado para la degradacin de la
partcula internalizada (Kinchen y Ravichandran, 2008 ). Este patrn general se aplica a
prcticamente todos los objetivos, aunque existen diferencias sustanciales dependiendo del
fagocito y el objetivo contratado.
La gran variedad de dianas fagocticas que requieren internalizacin y eliminacin refleja las
diversas funciones de la fagocitosis. Esta revisin describe varios ejemplos del proceso, ya
que se aplica a la homeostasis y remodelacin de tejidos, y tambin en el contexto de
inmunidad innata, en un intento de transmitir la multiplicidad de funciones fagocticas y la
naturaleza verstil de los propios fagocitos. En cada caso, nos esforzamos por describir los
resultados fisiolgicos de la fagocitosis y explorar a nivel molecular la cascada de eventos
iniciados por las interacciones receptor-ligando.
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Resolucin de la inflamacin
Las clulas del sistema inmune innato juegan un papel central en la inflamacin aguda. En
particular, los neutrfilos y los macrfagos son crticos en la respuesta a las perturbaciones
de la homeostasis de los tejidos. Los neutrfilos son generalmente los primeros en llegar a
los sitios de lesin y que son responsables de la eliminacin de los patgenos o estmulos
pro-inflamatorios (Butterfield et al., 2006 ; Koh y DiPietro, 2011 ; Kolaczkowska y
Kubes, 2013 ) (su funcin fagoctica En la inflamacin aguda se discute ms adelante). Los
macrfagos derivados de monocitos y los macrfagos residuales de tejidos tambin
participan en el inicio del evento inflamatorio, pero, adems, son cruciales para el desarrollo
de sucesos posteriores, especficamente, la resolucin de la inflamacin.
La eliminacin no-phlogistic de las clulas inmunes activadas en el sitio de la lesin es
esencial a la resolucin de la inflamacin. La eliminacin de neutrfilos gastados es una
caracterstica prominente de este proceso, ya que las clulas moribundas pueden liberar
molculas histotxicas que prolongaran la inflamacin. De hecho, la eliminacin alterada de
los neutrfilos se ha asociado con diversas enfermedades inflamatorias crnicas, tales como
el VIH y el lupus (Torre et al., 2002 ; Potter et al,. 2003 ). Los primeros estudios de la
resolucin de la inflamacin especularon que los macrfagos mediar en la eliminacin de
neutrfilos del sitio inflamatorio. Se demostr que los macrfagos haban engullido
neutrfilos en lesiones inflamatorias in vivo;Adems, no se ha observado que los neutrfilos
activados abandonen el rea da~nada (Savill et al., 1989 , Haslett, 1992 , Cox et al., 1995 ).
Estudios posteriores que investigaron el mecanismo de captacin encontraron que la
eliminacin es desencadenada por la apoptosis de neutrfilos. Se demostr que los
neutrfilos aislados de la sangre perifrica humana experimentaban apoptosis en 24 h de
plaqueado in vitro y la fraccin de neutrfilos apoptticos se correlacionaba positivamente
con su reconocimiento e ingestin por macrfagos (Savill et al., 1989 ). Esta ocurrencia fue
validada in vivo por numerosos estudios histolgicos y por anlisis de lavados
broncoalveolares (Haslett et al., 1994 , Cox et al., 1995 , Ishii et al., 1998). Aunque las
clulas apoptticas se reconocen principalmente a travs de receptores de PS, la inmersin
de los neutrfilos moribundos se descubri que era dependiente en gran medida del receptor
de la integrina para la vitronectina (Savill et al,. 1990 ;. Fadok et al, 1998 ). El engolfamiento
mediado por PS se vuelve significativo slo en la regulacin a la baja del receptor de
vitronectina, lo que puede conseguirse mediante estimulacin prolongada con -1,3 glucano
(Fadok et al., 1998 ). Como se representa en la figura Figura 1,1 , se encontr que el ligando
diana del receptor de vitronectina a ser trombospondina, que acta como un puente molecular
para el neutrfilo apopttica mediante la participacin de PS en la superficie de las clulas
apoptticas (Savill et al,. 1992 ; Gayen Betal Y Setty,2008 ). Adems, CD36 tambin se
encontr que se unen trombospondina para atar el macrfago contra la superficie celular de
neutrfilos, facilitando la fagocitosis (Savill et al,. 1992 ; Fadok et al,. 1998 ). Tambin se ha
demostrado que el receptor LRP1, que se une a calreticulina en clulas apoptticas,
contribuye a la fagocitosis de neutrfilos apoptticos (Gabillet et al., 2012 ). Claramente, la
eliminacin de las clulas apoptticas es un fenmeno complejo y multifactorial; Es probable
que varios receptores y mecanismos desempeen funciones concomitantes. El origen y el
estado de polarizacin de los macrfagos pueden introducir complejidad adicional (Visser et
al., 1995 ).

Figura 1
Fagocitosis de los neutrfilos apoptticos por un macrfago durante la resolucin de la
inflamacin . El engolfamiento puede ser mediado por PS y / o la opsonizacin de los
neutrfilos apoptticos por la trombospondina. Las clulas apoptticas recubiertas de
trombospondina estn atadas ...
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Biognesis y eliminacin de glbulos rojos

La biognesis y la eliminacin de los eritrocitos est estrechamente ligada a la
fagocitosis. Debido a su vida relativamente corta (120 das), los eritrocitos deben producirse
constantemente (a una tasa de 2 millones de clulas por segundo en los seres humanos). El
mantenimiento de la homeostasis requiere el aclaramiento continuo de las clulas efmeras,
un proceso emprendido por los macrfagos. Como resultado, la modulacin del ciclo de vida
de los eritrocitos es una de las funciones ms destacadas de la fagocitosis (Brown y
Neher, 2012 ; Dzierzak y Philipsen, 2013 ).
La eritropoyesis dentro del mamfero adulto implica la diferenciacin escalonada de clulas
madre hematopoyticas pluripotentes dentro de la mdula sea a clulas progenitoras
megacariocito-eritroides (Psaila et al., 2016 ). Estas clulas progenitoras dirigen entonces su
diferenciacin para producir plaquetas o glbulos rojos maduros (RBCs) (de Back et
al., 2014 ; Psaila et al., 2016 ). Un paso importante en la va eritropoytica es la expulsin
del ncleo del eritroblasto comprometido, para producir reticulocitos y glbulos rojos
maduros (de Back et al., 2014 ; Psaila et al., 2016). La primera evidencia concluyente de
enucleacin va la expulsin fsica del ncleo fue proporcionada por micrografas
electrnicas de hematopoyesis en hgados de cobayo fetal (Campbell, 1968 ). Estas imgenes
muestran procesos que se extienden desde los macrfagos que rodean los ncleos que se
extruyen, lo que explica la ausencia de ncleos extracelulares libres en los sitios de
hematopoyesis (Skutelsky y Danon, 1969 ). La inmersin de los ncleos expulsados por los
macrfagos tambin se registr en otros sitios hematopoyticos, como el bazo y la mdula
sea (Manwani y Bieker, 2008 ). De acuerdo con estos hallazgos, se sabe que existen islas
eritroblsticas, que consisten en un macrfago central rodeado de eritroblastos en desarrollo,
en la mdula sea (Mohandas y Prenant, 1978). Estos macrfagos centrales dentro de las
islas son responsables del engolfamiento de los ncleos expulsados (Sasaki et
al., 1993a , b ). Los ncleos ingeridos deben entonces ser digeridos por el fago-lisosoma, un
proceso que aparentemente involucra DNasa II. La importancia de esta va se resalta por la
eritropoyesis anormal informada en ratones que carecen de esta nucleasa; Tales ratones son
severamente anmicos y mueren en la etapa embrionaria, tal vez debido a la incapacidad de
los macrfagos para digerir los ncleos engullidos sin DNasa II (Kawane et al., 2001 ).
El mecanismo de la absorcin fagoctica de los ncleos expulsados no se entiende
completamente. Se ha sugerido que se pierde la asimetra de fosfolpidos y se altera la carga
superficial en la membrana que encierra el ncleo de extrusin (Skutelsky y Danon, 1969 ,
McEvoy et al., 1986 ). De hecho, se ha demostrado que la PS est expuesta en la superficie
de los ncleos expulsados, y el enmascaramiento de PS reduce significativamente la
eficiencia del engolfamiento nuclear (Yoshida et al., 2005 ). Sin embargo, la adicin de
fosfo-L-serina no inhibe la fagocitosis de los ncleos; Por lo tanto, el ligando primario
responsable de la iniciacin del engolfamiento de ncleos permanece incierto (Qiu et
al., 1995). No es sorprendente que los receptores implicados en el engolfamiento de los
ncleos extruidos no hayan sido identificados de manera concluyente.
Tras la enucleacin y la diferenciacin en RBC maduros, los eritrocitos son liberados en el
torrente sanguneo. Los eritrocitos envejecen en el torrente sanguneo a medida que se
deterioran progresivamente durante el desempeo de sus funciones esenciales (de Back et
al., 2014 ). La microvesiculacin ha sido reconocida como un mecanismo principal de la
senescencia eritrocitaria; Da lugar a una prdida irreversible de la membrana, con
disminucin de la flexibilidad de la membrana que se requiere para el movimiento a travs
de camas capilares estrechas (Antonelou et al., 2010 ). Estos RBC senescentes se eliminan
en el hgado, el bazo, la mdula sea, la sangre y el pulmn a travs de la absorcin fagoctica
tanto por los macrfagos residentes como por los monocitos (Theurl et al., 2016). La
remocin de fagocitos es absolutamente crucial para tal aclaramiento, ya que un aumento en
el nivel de hemates daados (comprometidos con la membrana) podra aumentar el nivel de
hierro circulante a niveles txicos (Hentze et al., 2010 ).
El mecanismo por el cual se engullen los eritrocitos senescentes implica la disminucin de la
regulacin de CD47, una seal anti-fagoctica "no me coma", en la superficie de los
eritrocitos (Khandelwal et al., 2007 ; Olsson y Oldenborg, 2008 ), y La regulacin positiva
de fagoctico "comer-me" seales. Esta ltima promueve el engulamiento mediado por el
complemento y mediado por PS. En el ncleo del mecanismo de engolfamiento mediado por
complemento est la protena transmembrana, banda 3. La banda 3 y su anticuerpo natural
tienen tpicamente una baja afinidad de unin entre s; Esta salvaguardia evita la
opsonizacin de eritrocitos jvenes y saludables (Arese et al., 2005). Sin embargo, con la
acumulacin de dao oxidativo, la banda 3 forma clusters que actan como sitios de unin
de alta afinidad para el anticuerpo anti-banda 3 de IgG (Kannan et al., 1991 ). A pesar del
aumento de la afinidad de unin, los niveles fisiolgicos del anticuerpo son demasiado bajos
para estimular la fagocitosis mediada por FcR. En cambio, la fagocitosis depende de la
activacin del sistema clsico del complemento por el anticuerpo, que desencadena la
opsonizacin C3b e iC3b de los RBC senescentes (Lutz et al., 1987 , 1990 ). De hecho, los
receptores CR1 y CR3 del complemento han estado implicados en la captacin de hemates
senescentes y enfermos (Gattegno et al., 1989 , Lin et al., 2015). Adems de la agrupacin
de la banda 3, los RBC senescentes muestran PS en su membrana celular (Connor et
al., 1994 , Boas et al., 1998 , Lee et al., 2011). Aunque los receptores fagocticos particulares
implicados no han sido identificados, se ha postulado que los receptores eliminadores son
responsables de la captacin mediada por PS de los eritrocitos envejecidos (Sambrano et
al., 1994 ; Terpstra y van Berkel, 2000 ).
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Remodelacin sinptica
Las conexiones sinpticas entre las neuronas establecen las redes neuronales del sistema
nervioso central (SNC). Estas conexiones intercelulares deben ser cuidadosamente reguladas
para asegurar el desarrollo normal del SNC. La sinaptognesis en el SNC humano comienza
al final de la vida fetal y contina hasta el segundo ao postnatal (Huttenlocher y
Dabholkar, 1997 ). Posteriormente, la densidad sinptica disminuye hasta la edad adulta,
antes de estabilizarse (Petanjek et al., 2011). Este perodo de poda sinptica dependiente de
la actividad es crucial para el correcto desarrollo y funcionalidad del SNC, ya que se eliminan
las conexiones superfluas para mejorar la coherencia de la comunicacin neuronal. La
importancia de la poda sinptica de desarrollo se enfatiza por la observacin de alteraciones
en estados enfermos. Por ejemplo, el aumento de densidades sinpticas se observan en
individuos con trastornos del espectro autista (Tang et al., 2014 ). La poda sinptica es el
resultado de una combinacin de varios procesos degenerativos que incluyen la
fragmentacin de membranas, el recambio proteico dependiente de proteasoma y la
degeneracin citoesqueltica (Low y Cheng, 2006 ). Los boutons sinpticos degenerantes
deben ser eliminados y las clulas gliales son actores claves en este proceso, como se muestra
originalmente enDrosophila melanogaster (Awasaki e Ito, 2004 , Watts et al., 2004 ).
Microglia son las clulas gliales fagocticas del SNC de mamfero (Doherty et al., 2009 ). En
el cerebro sano, los microglia actan como centinelas dinmicos, enviando constantemente
procesos para vigilar su entorno para amenazas a la homeostasis (Kettenmann et
al., 2011 ). Es importante destacar que tambin funcionan como ama de llaves que apoyan la
neurognesis del adulto mediante la remodelacin de sinapsis en respuesta al desuso o
lesiones isqumicas (Wake et al., 2009 ; London et al., 2013). Su funcin fagoctica en la
poda sinptica de desarrollo est ahora bien establecida. Se dio a conocer en los ratones
fractalkine receptor knockout que mostraron reducciones transitorias en las poblaciones
microglial. Esta disminucin en los fagocitos fue acompaada por un aumento temporal en
la densidad sinptica (Paolicelli et al., 2011 ). Posteriormente, se observ directamente el
engolfamiento de fragmentos sinpticos por microglia en el cerebro de ratones en desarrollo
(Paolicelli et al., 2011 ; Schafer et al., 2012 ). Se determin que la actividad fagoctica de
microglia era regulada por el desarrollo y dependiente de la actividad, extendiendo la relacin
entre la fagocitosis microglial y la poda sinptica de desarrollo (Schafer et al., 2012).
El mecanismo molecular de la poda sinptica fagoctica se ha investigado con cierto detalle
en el ratn en desarrollo (Stevens et al., 2007 ; Schafer et al., 2012 ). Se demostr que la
protena en cascada del complemento, C1q, estaba localizada en regiones donde el
remodelado sinptico estaba en marcha, lo que sugiere que est involucrada la cascada clsica
del complemento (Stevens et al., 2007 ). De hecho, se encontr que C1q, C3 y CR3 eran
necesarios para la poda sinptica adecuada por la microglia, ya que los ratones knockout que
carecan de estos componentes en cascada del complemento mostraban una poda sinptica
insuficiente (Stevens et al., 2007 ; Schafer et al., 2012). Adems, se sabe que la microglia
expresa CR1 y C1q; por tanto, se puede especular que los fragmentos de C3 se producen en
el microambiente poda sinptica tras la formacin del complejo de C1q, como se muestra en
la Figura Figure22 (Korotzer et al,. 1995 ; Crehan et al,. 2013). Los otros componentes del
complejo C1 y la cascada del complemento no se muestran en la figura debido a que su
participacin en la poda sinptica no se ha establecido directamente. C3b opsoniza entonces
sinapsis o sinapsis "dbiles" con actividad reducida y se produce fagocitosis a travs del
receptor CR3 o algn receptor de unin al producto C3b que se expresa por
microglia. Aunque son necesarios ms estudios que investiguen los mecanismos moleculares
de la poda sinptica, es evidente que la fagocitosis juega un papel clave. Esto proporciona
otro recordatorio de que la fagocitosis tiene papeles no slo en la inmunidad innata y en la
homeostasis, sino tambin en el desarrollo.

Figura 2
Fagocitosis de componentes sinpticos por microglia . La cascada clsica del
complemento se inicia por la acumulacin de C1q, producida por la microglia, en las sinapsis
degenerantes. Las molculas C1q unen CR1 sobre la superficie microglial para formar el
complejo C1 ...
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Neurognesis del adulto

Se crea que la neurognesis, el desarrollo de las neuronas, era un proceso exclusivo de las
etapas embrionarias, fetales y posnatales de la vida; Sin embargo, ahora es evidente que
nuevas neuronas continan generndose en ciertas regiones del cerebro adulto de mamfero
para el mantenimiento de la homeostasis (Braun y Jessberger, 2014 ). Inesperadamente, se
encontr que la fagocitosis era necesaria para la regulacin adecuada de la neurognesis: la
eliminacin de neuroprogenitores apoptticos en sitios neurognicos adultos parece ser
esencial (Lu et al., 2011 ; Luo et al., 2016 ). Anexina V-mediada por la inhibicin de la
fagocitosis de clulas apoptticas en el cerebro de ratones adultos result en la obstruccin
de la diferenciacin neuronal (Lu et al., 2011). No est claro si la fagocitosis de los cadveres
apoptticos fue llevada a cabo por clulas precursoras neuronales (Lu et al., 2011 ), o por
microglia presentes en sitios neurognicos (Sierra et al., 2010 ; Luo et
al., 2016 ). Independientemente de la identidad de la clula fagoctica responsable, el
mecanismo implicado es probablemente PS-dependiente. Los ratones que carecan de
ELMO-1, una protena adaptadora intracelular necesaria para la transduccin de seales de
ciertos receptores PS, tenan un fenotipo neurognico que imitaba lo observado despus del
tratamiento con anexina V (Lu et al., 2011 ). An as, los receptores y ligandos exactos que
median la fagocitosis en la neurognesis (homeosttica) del adulto siguen siendo esquivos y
deben realizarse ms investigaciones.
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Clulas de Sertoli y espermatognesis

La produccin de clulas germinales masculinas, la espermatognesis, es un proceso
cuidadosamente regulado que implica la diferenciacin de las clulas madre, la
espermatogonia, a los espermatozoides (Shaha et al., 2010 ). La espermatognesis se
caracteriza por un equilibrio entre la diferenciacin celular y la proliferacin por un lado, y
la apoptosis por el otro (Russell et al., 2002 ). Se ha estimado que alrededor del 75% de las
espermatogonias en desarrollo sufren apoptosis (Huckins, 1978 ). Tal muerte celular
regulada es crtica: la inhibicin de la apoptosis de la espermatogona da como resultado un
aumento de la muerte celular y la atrofia testicular (Russell et al., 2002 ).
La aparicin extensa de la muerte celular se acompaa de una rpida eliminacin fagoctica
de las clulas apoptticas por las clulas de Sertoli, las clulas somticas que apoyan la
maduracin de las espermatogonias y mantienen la homeostasis del medio testicular
(Griswold, 1998 ; Nakanishi y Shiratsuchi, 2004 ). Se determin que la actividad fagoctica
de clulas de Sertoli, observada tanto in vitroen cultivos testiculares primarios como in vivo ,
dependa de la exposicin a PS en la superficie de clulas espermatognicas apoptticas
(Shiratsuchi et al., 1997 ; Kawasaki et al., 2002 ; Nakagawa et al., 2005). Se demostr que el
receptor B1 de cogulos contribuye significativamente a la absorcin de estas clulas en
desarrollo, ya que los inhibidores de este receptor inhiben sustancialmente el aclaramiento
de clulas espermatognicas apoptticas in vivo (Kawasaki et al., 2002 ; Nakagawa et
al., 2005 ). Es interesante observar que las clulas de Sertoli son fagocitos no profesionales,
ya que son de naturaleza epitelial, con diferentes orgenes embriolgicos de los macrfagos
(Barrionuevo et al., 2011 ). El papel central de las clulas de Sertoli en la espermatognesis
justifica y enfatiza la necesidad de fagocitos no profesionales en la homeostasis y el
desarrollo.
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Fagocitosis de microbios
Como se mencion en la Introduccin, las clulas fagocticas se pueden dividir en fagocitos
profesionales y no profesionales (Rabinovitch, 1995 ). En esta seccin, revisaremos cmo el
proceso por el cual los microbios son engullidos vara entre los diferentes tipos de clulas
fagocticas.
Los neutrfilos son los fagocitos ms eficientes: un solo neutrfilo puede engullir hasta 50
bacterias. Adems, la fagocitosis por los neutrfilos es muy rpida, requiriendo a menudo
slo unos pocos segundos (Segal et al., 1980 ). Los neutrfilos no slo son rpidos y
eficientes, sino tambin relativamente abundantes, constituyendo el 50-60% de todos los
leucocitos en la sangre humana. Tambin son las primeras clulas que se reclutan desde el
torrente sanguneo a un sitio infectado (Mayer-Scholl et al., 2004). Como los neutrfilos son
clulas circulantes, primero necesitan salir del torrente sanguneo y trans-migrar a travs del
endotelio por un proceso denominado diapedis para llegar al sitio de la infeccin. Los
quimioatrayentes, secretados por los microorganismos o por las clulas husped en el sitio
de la infeccin, guan la extravasacin de neutrfilos. Una vez que los neutrfilos llegan a
los sitios de infeccin, se produce la fagocitosis del patgeno.
Los neutrfilos expresan receptores que reconocen los determinantes fagocticos que son
intrnsecos a los patgenos (es decir, PAMPs). Estas se caracterizan por las lectinas de tipo
C Dectin-1-que unen -glucano-y Dectin-2-que pueden unirse a una amplia gama de ligandos
sobre la superficie de hongos, micobacterias e incluso clulas cancerosas (Kerscher et
al., 2013 , Kimura et al., 2016 ). Mientras que el reconocimiento de los PAMPs puede
desencadenar la fagocitosis, la inmersin microbiana es ptima cuando los objetivos son
opsonizados, es decir, recubiertos con componentes de suero que son reconocidos por
receptores fagocticos eficaces. Las opsoninas ms abundantes en suero son las
inmunoglobulinas y ciertos componentes de la cascada del complemento; estos son
reconocidos por receptores de Fc (FcR) y por los receptores del complemento (CR),
respectivamente (Figura(Figura 3).3 ). Los neutrfilos circulantes (quiescentes) expresan
FcRII (CD32) y FcRIII (CD16), pero slo los bajos niveles de FcyRI (CD64)
(Hoffmann,2009), que se encuentra en cambio en monocitos y macrfagos; Los neutrfilos
tambin expresan FcR, el receptor de IgA. Adems, expresan los receptores del
complemento CR1 (CD35) y CR3 (CD11b / CD18 o MAC-1) que se unen a la molcula
opsnica C3b (e iC3b).
figura 3
Fagocitosis de bacterias por neutrfilos . La fagocitosis de las bacterias es a menudo
mediada por la opsonizacin de su superficie con molculas de IgG y C3b, que son
reconocidas por los receptores Fc (FcRs) y los receptores del complemento (CRs),
respectivamente. ...
Curiosamente, las vas opsnicas pueden funcionar sinrgicamente: las molculas de IgG
unidas al patgeno pueden desencadenar la cascada del complemento a travs de la va
clsica, resultando en opsonizacin secundaria de la diana con C3b y acelerando as el
proceso fagoctico (van Kessel et al., 2014). Por el contrario, la IgA no activa el sistema del
complemento.
Hay otros receptores expresados por neutrfilos que no son fagocticos per se , sino que
facilitan y mejoran la fagocitosis, un proceso conocido como cebado. El cebado ocurre
cuando los fagocitos estn expuestos a agentes, tales como lipopolisacrido (LPS), TNF- o
GM-CSF (Aida y Pabst, 1990 , Khwaja et al., 1992 ) antes o en el momento en que
encuentran sus objetivos . LPS y varios otros componentes microbianos capaces de cebado
son reconocidos por los receptores Toll-like (TLR). Es de destacar que los neutrfilos
expresan la mayora de los TLRs conocidos, incluyendo TLR2 que se une al cido
lipoteicoico de bacterias gram-positivas, y TLR4 que se une a LPS de bacterias
gramnegativas (Prince et al., 2011). El cebado puede potenciar la expresin de receptores
fagocticos, tales como FcRI. De hecho, el aumento de la expresin superficial de FcyRI se
utiliza a menudo como un marcador para la infeccin bacteriana (Hoffmann, 2009).
La fagocitosis de los neutrfilos culmina con la eliminacin de los microorganismos
ingeridos. Los grnulos citoplasmticos que son caractersticos de los neutrfilos (un tipo de
granulocito) son fundamentales en la respuesta microbicida. Los neutrfilos contienen tanto
grnulos citoplasmticos como pequeas vesculas secretoras que se fusionan con fagosomas
nacientes y maduros. Los grnulos se dividen aproximadamente en tres tipos: grnulos
primarios (azurfilos), grnulos secundarios (o especficos) y grnulos terciarios (o
gelatinasas). Los tipos de grnulos no son completamente distintos entre s, y hay especies
intermedias. Los grnulos azuroflicos contienen una variedad de sustancias antimicrobianas,
tales como enzimas lticas variadas, pptidos antimicrobianos que incluyen las defensinas, y
mieloperoxidasa, una enzima que cataliza la produccin de cido hipocloroso. Los grnulos
secundarios contienen receptores fagocticos (por ejemplo, FcRs y CRs) y tambin el
complejo NADPH oxidasa que produce especies reactivas de oxgeno (ROS). Los grnulos
terciarios contienen receptores y enzimas que degradan la matriz extracelular para facilitar la
extravasacin y migracin de los neutrfilos al sitio de inflamacin (Faurschou y
Borregaard,2003 ; Kolaczkowska y Kubes, 2013 ).
La segunda ola de leucocitos para llegar al sitio infectado consiste en monocitos, que se
diferencian en macrfagos y DCs. Existen tres subpoblaciones de monocitos: clsica, no
clsica e intermedia. Los monocitos clsicos constituyen el 80-90% de los monocitos totales
de sangre; Son virtualmente todas las clulas circulantes. El otro 10-20% est compuesto por
los monocitos no clsicos o de patrulla, y los monocitos intermedios. La fraccin de clulas
no clsicas es probablemente una subestimacin, ya que los monocitos patrulladores se
adhieren al endotelio y por lo tanto son difciles de cuantificar con precisin. Las
subpoblaciones de monocitos se identifican por su abundancia relativa de dos marcadores:
CD14 (un co-receptor LPS) y CD16 (FcRIII). Los monocitos clsicos tienen niveles
elevados de CD14 y virtualmente ninguna expresin de CD16 (CD14 +, CD16 - ); Los
monocitos no clsicos expresan niveles ms bajos de CD14 y altos niveles de CD16 (CD14 + ,
CD16 ++ ), y los monocitos intermedios expresan altos niveles de CD14 y bajos niveles de
CD16 (CD14 ++ , CD16 + ). A pesar de que los monocitos patrulladores se adhieren al
endotelio vascular y por lo tanto estn ms cerca de los tejidos donde generalmente ocurren
las infecciones, los monocitos clsicos son los primeros en llegar al sitio infectado. No hay
informacin sobre la capacidad de las diferentes subpoblaciones de monocitos para realizar
fagocitosis in vivo , pero los datos limitados obtenidos in vitroSugieren que tanto los
monocitos clsicos como los intermedios pueden fagocitar activamente, mientras que los
monocitos no clsicos son menos eficaces (Mukherjee et al., 2015 , Zhou et al., 2015 ).
Los macrfagos derivados de monocitos expresan una amplia gama de receptores fagocticos
(como revisado por Freeman y Grinstein, 2014 ), tales como FcRs y CRs para dianas
opsonizadas, receptores de scavenger y lectinas de tipo C (por ejemplo, receptor de manosa
y dectinas) para hongos. Como se describe para los monocitos, no todos los macrfagos son
iguales; Difieren segn la naturaleza de sus precursores y de las seales que los monocitos /
macrfagos encuentran en rutaY en el sitio de la infeccin. Ms sencillamente, los
macrfagos pueden adquirir un fenotipo antiinflamatorio (denominado M2) o un fenotipo
proinflamatorio (denominado M1). Estos diferentes fenotipos estn asociados con distintas
matrices de receptores fagocticos; Por ejemplo, los macrfagos antiinflamatorios expresan
ms receptores efferocticos que los macrfagos inflamatorios y pueden por lo tanto limpiar
y resolver las consecuencias de un ataque de neutrfilos. Por el contrario, los macrfagos
inflamatorios expresan ms FcRs y por lo tanto pueden ingerir IgG-opsonized objetivos de
manera ms eficaz (Levin et al., 2016 ). Las propiedades de los fagosomas tambin difieren
en los dos tipos principales de macrfagos: mientras que los fagosomas de los macrfagos
anti-inflamatorios se acidifican rpidamente (Canton et al., 2014), Los de los macrfagos
pro-inflamatorios permanecen neutrales e incluso pueden llegar a ser alcalinos, parecido al
comportamiento de los fagosomas en los neutrfilos. En los dos ltimos casos, la falta de
acidificacin del fagosoma se atribuye a la generacin masiva de superxidos que a su vez
consumen protones durante la reaccin de dismutacin.
Se ha observado una interaccin entre monocitos y neutrfilos durante la infeccin por
hongos. La lectina de tipo C Mincle tiene expresin recproca en monocitos circulantes y
neutrfilos: cuando se expresa en neutrfilos, est ausente en monocitos y viceversa, y se ha
sugerido que este patrn de expresin tiene implicaciones fisiolgicas (Vijayan et al., 2012 )
. Los neutrfilos que expresan Mincle son capaces de ingerir y matar Candida albicans ,
mientras que los monocitos que muestran Mincle no ingieren o matan eficazmente los
hongos, sino que provocan una respuesta inflamatoria.
Como se mencion anteriormente, neutrfilos, monocitos y macrfagos derivados de
monocitos son atrados a sitios de infeccin, movindose hacia arriba un gradiente de seales
atrayentes. Sin embargo, los primeros respondedores verdaderos son los fagocitos que
residen en los tejidos que se infectan, es decir, los macrfagos del tejido. Los macrfagos del
tejido se sintonizan con el medio ambiente en el que residen a travs de la exposicin a
factores especficos del tejido que afectan su morfologa y funcin. Originalmente se crea
que los tejidos macrfagos se diferenciaban de los monocitos derivados de clulas madre
hematopoyticas. Recientemente, sin embargo, Gomez et al. (Gmez Perdiguero y
otros, 2015) Demostr que los macrfagos del saco de yema de embrin son una fuente
suficiente para la generacin de macrfagos en el hgado, la piel y el sistema nervioso
central. Otro estudio mostr que los monocitos fetales son los precursores de los macrfagos
alveolares (AM), que colonizan las vas respiratorias unos das despus del nacimiento
(Guilliams et al., 2013 ). Adems, ahora es evidente que las AM son capaces de auto-
renovarse sin requerir la participacin de macrfagos derivados de monocitos, incluso
despus del agotamiento de macrfagos alveolares debido a la infeccin por influenza
(Hashimoto et al., 2013). Los monocitos fetales requieren GM-CSF-que es secretado por el
epitelio alveolar-para diferenciarse en AMs. Por consiguiente, las AM en ratones deficientes
en GM-CSF no estn completamente diferenciadas y estn funcionalmente limitadas; Como
se predijo, la adicin de GM-CSF exgeno restableci su desarrollo (Guilliams et
al., 2013). Los macrfagos alveolares parecen tener un fenotipo que es intermedio entre los
estados de polarizacin M1 y M2 cannicos. Esto se refleja en su patrn nico de expresin
de marcadores: el anlisis transcriptmico mostr que expresan CD69, TLR2 y 4, CXC-
ligando de quimioquina (CXCL) 9,10 y 11 y CC-quimioquina ligando 5 (CCL5),
caracterstico de M1 , Pero tambin CD206, MARCO, metaloproteinasa de matriz (MMP) 2,
7 y 9, la protena tirosina quinasa MER, protena especfica de detencin del crecimiento 7,
CD163, estabilina 1, arginasa y el receptor A3 de adenosina, que son tpicas de las clulas
M2 (Shaykhiev et al., 2009 ). Existen otros receptores encontrados en AMs, como CD11c
(Guth et al., 2009 ; Zaynagetdinov et al., 2013), Que se encuentra tambin en los macrfagos
de la mucosa intestinal, la lectina Siglec-F que se une al cido silico y se encuentra
predominantemente en los eosinfilos (Feng y Mao, 2012 ; Misharin et al., 2013 ). Se
exponen continuamente a microorganismos inhalados ya otras partculas, las AM muestran
menor capacidad fagoctica en comparacin con los macrfagos intersticiales pulmonares
(Hussell y Bell, 2014 ). Un estudio in vivo demostr que en ratones infectados
con Streptococcus pneumoniae los neutrfilos fueron reclutados a los pulmones donde
engullieron las bacterias, mientras que el papel principal de las AMs fue resolver la
inflamacin mediante la limpieza de los neutrfilos apoptticos (Knapp et al., 2003). Estos
hallazgos sugieren que el hbrido M1 / M2 fenotipo de las AM es necesario, por un lado, el
efecto de una respuesta inflamatoria para reclutar neutrfilos, mientras que sirve para resolver
la inflamacin por la absorcin de apoptosis neutrfilos en el otro.
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Fagocitosis de las clulas tumorales

La respuesta de los fagocitos a las clulas malignas puede ser ambivalente: los macrfagos
M1 estn asociados con la supresin tumoral (Yuan et al., 2015 ), mientras que los
neutrfilos, los monocitos clsicos y los macrfagos asociados a tumores (TAM), que estn
ampliamente polarizados hacia el fenotipo M2, promover la tumorignesis y la ayuda en la
evasin del sistema inmune (Chanmee et al,. 2014 ; Figura Figure44 ).

Figura 4
Macrfagos asociados a tumores . Se ilustra la interaccin entre un macrfago (azul) y una
clula tumoral (verde). La insercin muestra las protenas de membrana implicadas en la
evasin y promocin de clulas tumorales. CD47 es una seal de "no me comen"
expresada ...
El reclutamiento de TAM a tumores puede ser mediado por M-CSF, uno de los factores que
impulsa la polarizacin de los macrfagos M2. El M-CSF es producido y secretado por las
clulas tumorales, que tambin pueden secretar otros factores promotores de M2, tales como
IL-10 y CCL-2. Los TAM a su vez, secretan factor de crecimiento epidrmico (EGF), que
promueve la angiognesis e induce la secrecin de ms M-CSF por las clulas tumorales,
generando as un bucle de retroalimentacin positiva (Goswami et al., 2005 ; Hernndez et
al., 2009 ; Figura figure4).4 ). En las clulas metastsicas, la molcula 1 de adhesin celular
vascular (VCAM-1) es sobre-expresado e interacta con 41 integrina macrfagos, tambin
conocido como antgeno muy tardo 4 (VLA-4) (Figura (Figure4).4). Esta interaccin activa
la va PI3K / Akt en la clula metastsica, promoviendo su supervivencia en un medio rico
en leucocitos (Chen et al., 2011 ).
En marcado contraste con los efectos promotores de metstasis y tumores de los TAM y otros
fagocitos, los macrfagos M1 y, curiosamente, patrullando monocitos, tienen efectos
antitumorales (Hanna et al., 2015 ). Hanna et al. Mostr que patrullar monocitos en el
pulmn reduce las metstasis tumorales y reclutar clulas asesinas naturales. La actividad
tumoricida de estos fagocitos refleja el equilibrio entre las seales de "comerme" y "no
comerme". Las clulas tumorales expresan la seal de "comerme" calreticulina en su
membrana plasmtica. La calreticulina es una protena chaperona del retculo
endoplasmtico que participa en el plegamiento y control de calidad de N-
glicosiladas. Cuando escapa del retculo y se transloca a la membrana plasmtica, la
calreticulina sirve como un ligando fagoctico, es decir, una seal de "comerme". El mensaje
de tales ligandos se puede suprimir mediante seales de "no me comen", tales como las
proporcionadas por CD47, un ligando para SIRP, un receptor que lleva ITIM que inhibe la
fagocitosis. Chao et al. ( 2010 ) demostraron que el bloqueo de CD47 en las clulas
tumorales, mientras que la activacin de la translocacin de calreticulina conduce a la
fagocitosis de las clulas tumorales. En las clulas apoptticas, la translocacin de
calreticulina a la membrana sirve como un ligando "coma" que es reconocido por CD91
(LRP-1) en el macrfago, lo que desencadena la efferocitosis (Gardai et
al., 2005 ). Claramente, se necesitan ms estudios para entender la interaccin entre los
macrfagos y las clulas cancerosas.
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Presentacin del antgeno
Adems de su papel en la inmunidad innata mediante la eliminacin de patgenos, desechos
celulares y clulas apoptticas, los fagocitos tambin participan en la respuesta inmune-
adaptativa mediante la presentacin de antgenos a los linfocitos. La fagocitosis es un evento
importante en la presentacin de antgenos. Las DC son clulas presentadoras de antgenos
(APC) profesionales, mientras que los neutrfilos, macrfagos e incluso clulas epiteliales
pueden presentar antgenos, pero con una eficiencia considerablemente menor. Los DCs se
derivan de clulas madre hematopoyticas de la mdula sea, y se dividen en tres
subpoblaciones: DCs convencionales (CDCs), DC plasmocitides (pDCs) y DCs derivados
de monocitos (moDCs). La diferenciacin de monocitos en moDCs ocurre en los sitios de la
infeccin (Schraml y Reis e Sousa, 2015). La capacidad nica de los DC de presentar
antgenos se debe, al menos en parte, a la manera en que sus fagosomas maduran. Al igual
que otros fagocitos profesionales, los DC engullen patgenos pero en lugar de destruirlos
completamente -como lo hacen los macrfagos y los neutrfilos- los fagosomas de DC
realizan protelisis controlada, lo que favorece la generacin de pptidos adecuados para la
unin por molculas complejas de histocompatibilidad (MHC) Los antgenos a las clulas
linfoides en la membrana plasmtica (Savina y Amigorena, 2007 ). Los antgenos que son
engullidas y degradados en el fagosoma se cargan a molculas MHC clase II
(Cresswell, 1994 ; Figura Figura5).5). En algunos casos, tales antgenos pueden llegar al
citosol y luego son trasladados al retculo endoplsmico, donde se asocian con molculas del
MHC clase I para su eventual entrega a la superficie celular, un proceso denominado
presentacin cruzada (Joffre et al., 2012 ).

Figura 5
Presentacin clsica del antgeno por una clula dendrtica . Las clulas dendrticas
engullen un objetivo, como las bacterias, formando un fagosoma. La degradacin bacteriana
controlada en el fagosoma genera pptidos que se utilizan para la presentacin de antgenos
en molculas del MHC de clase II. ...
Antes de su activacin, los DC se denominan inmaduros y expresan una gran variedad de
receptores fagocticos, tales como FcRs y receptores scavenger, as como TLRs
(Guermonprez et al., 2002 ). Los receptores fagocticos expresados por las tres
subpoblaciones de DC no son idnticos. Por ejemplo, los moDCs expresan tanto FcR
activadores como inhibidores, mientras que los cDC y moDCs expresan una proporcin ms
alta de FcR inhibitorios (Guilliams et al., 2014 ). La formacin y maduracin de fagosomas
en DC se controla y se adapta a la presentacin de antgenos. Mientras que los neutrfilos y
los macrfagos se ocupan principalmente de eliminar el patgeno, los DCs ejercen una
proteolisis suave para generar pptidos de tamao apropiado que se pueden utilizar para la
presentacin. De hecho, Nagl et al. ( 2002), Mostr que los macrfagos ingerir y matar a E.
coli y S. aureus ms eficientemente que DC. Por consiguiente, los DCs derivados de la
mdula sea tienen niveles ms bajos de proteasas que los macrfagos (Delamarre et
al., 2005 , Savina et al., 2006). Adems, los fagosomas de los DC inmaduros no se
acidifican. Esto se ha atribuido al montaje parcial de la V-ATPasa, el principal transportador
de protones lisosmicos, y / oa la actividad aumentada de la NADPH oxidasa 2 (NOX2), que
genera cantidades copiosas de superxido; La dismutacin de este ltimo al perxido de
hidrgeno consume protones, elevando el pH luminal del fagosoma. El pH ms alcalino
conduce a una menor actividad proteoltica, lo que favorece la generacin de pptidos
adecuados para la presentacin de antgenos (Figura (Figura55 ).
La fagocitosis desencadena un drstico cambio fenotpico en los pases en desarrollo. Este
llamado proceso de maduracin implica cambios morfolgicos y funcionales sustanciales. La
absorcin del antgeno asociada con la fagocitosis -y en menor grado con la
macropinocitosis- es seguida por una prdida virtual en la actividad macropinoctica y una
marcada capacidad fagocitaria de reduccin (Garrett et al., 2000 ); En particular, la
endocitosis mediada por receptor persiste en las clulas maduras (Platt et al., 2010). La base
molecular de la baja regulacin de la fagocitosis es poco conocida. Los cambios
experimentados por la DC madura minimizan la adquisicin de antgenos adicionales, al
tiempo que optimizan la presentacin de los adquiridos por la clula inmadura. Los CD
maduros migran al ganglio linftico, donde presentan antgenos y activan el sistema inmune
adaptativo (Guermonprez et al., 2002 ).
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Observaciones finales
Desde que Metchnikoff descubri la fagocitosis en el contexto de la inmunidad innata, los
roles funcionales del fenmeno se han multiplicado. La importancia de la fagocitosis en la
homeostasis y remodelacin de los tejidos es ahora ampliamente apreciada, as como su papel
en el acoplamiento de la inmunidad innata y adaptativa a travs de la presentacin del
antgeno. Estos descubrimientos ms recientes han desenmascarado la existencia de una
mirada de receptores, vas de transduccin de seales y rutas de trfico de membrana que
slo se entienden parcialmente. La base molecular de la versatilidad funcional de los
fagocitos y de la fagocitosis est empezando a desentraarse. Anticipamos el descubrimiento
de seales adicionales asociadas con la formacin y maduracin del fagosoma que sern
transportadas a otros organelos y pueden dirigir la transcripcin de genes que a su vez
informarn a las clulas y tejidos circundantes del estado metablico de los fagocitos. Estas
ideas especulativas son susceptibles de pruebas experimentales, que esperamos sean objeto
de futuras investigaciones.
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Contribuciones de autor
JL, SG y ZR concibieron y escribieron la revisin.
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Fondos
Con el apoyo de la subvencin FDN143202 de los Institutos Canadienses de Investigacin
en Salud.

Declaracion de conflicto de interes

Los autores declaran que la investigacin se realiz en ausencia de relaciones comerciales o
financieras que pudieran interpretarse como un posible conflicto de intereses. El revisor YA
y el editor de Manipulacin declararon su afiliacin compartida, y el Editor de Manejo afirma
que el proceso cumpli con los estndares de una revisin justa y objetiva.
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Expresiones de gratitud
Damos las gracias al Dr. Spencer Freeman por su ayuda en el diseo de las cifras.
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Notas