C A p t U l o

Agua y pH
Peter J. Kennelly, PhD y Victor W. Rodwell, PhD
2
Ob j e t i v Os Describir las propiedades del agua que explican su tensin de superficie,
viscosidad, estado lquido a temperatura ambiente, y poder solvente.
Despus de estudiar Usar frmulas estructurales para representar varios compuestos orgnicos
este captulo, usted debe que pueden servir como donadores de enlace de hidrgeno o como aceptores
ser capaz de: del mismo.
Explicar el papel que desempea la entropa en la orientacin, en un ambiente
acuoso, de las regiones polar y no polar de macromolculas.
Indicar las contribuciones cuantitativas de los puentes de sal, las interacciones
hidrofbicas y las fuerzas de van der Waals a la estabilidad de las macromolculas.
Explicar la relacin del pH con la acidez, alcalinidad y los determinantes
cuantitativos que caracterizan los cidos dbiles y fuertes.
Calcular el cambio de pH que acompaa a la adicin de una cantidad dada
de cido o base a una solucin amortiguada.
Describir qu hacen los amortiguadores, cmo lo hacen, y las condiciones en las
cuales un amortiguador es ms eficaz en condiciones fisiolgicas o en otras
condiciones.
Ilustrar cmo la ecuacin de Henderson-Hasselbalch puede usarse para calcular
el cambio neto de un polielectrlito a un pH dado.

ImportancIa bIomdIca de pH logartmica. El bicarbonato y otros amortiguadores en cir-

El agua es el componente qumico predominante de los organis-
mos vivos. Sus singulares propiedades fsicas, que incluyen la ca-
pacidad para solvatar una amplia gama de molculas orgnicas
e inorgnicas, se derivan de su estructura bipolar y de su excep-
cional capacidad para formar enlaces de hidrgeno. La manera
en que el agua interacta con una biomolcula solvatada influ-
ye sobre la estructura de ambas, tanto de la biomolcula como
del agua. El agua, un excelente nuclefilo, es un reactivo o un
producto en muchas reacciones metablicas. La regulacin del
equilibrio del agua depende de mecanismos hipotalmicos que
controlan la sed, de la hormona antidiurtica (ADH), de la re-
tencin o excrecin de agua por los riones, y de la prdida por
evaporacin. La diabetes inspida nefrognica, que comprende
la incapacidad para concentrar orina o para hacer ajustes a cam-
bios sutiles de la osmolaridad del lquido extracelular, se produ-
ce por falta de capacidad de respuesta de los osmorreceptores de
los tbulos renales a la ADH.
El agua tiene una propensin leve a disociarse hacia iones
hidrxido y protones. La concentracin de protones, o acidez,
de soluciones acuosas por lo general se reporta usando la escala
cunstancias normales mantienen el pH del lquido extracelular
entre 7.35 y 7.45. Las alteraciones sospechadas del equilibrio
acidobsico se verifican al medir el pH de la sangre arterial y el
contenido de CO2 de la sangre venosa. Las causas de acidosis (pH
sanguneo <7.35) son cetosis diabtica y acidosis lctica. La alca-
losis (pH >7.45) puede presentarse despus de vmitos de con-
tenido gstrico cido.
El agua Es un solvEntE
bIolgIco IdEal
Las molculas de agua forman dipolos
Una molcula de agua es un tetraedro irregular, un tanto asim-
trico, con oxgeno en su centro (figura 2-1). Los dos hidrgenos
y los electrones no compartidos de los dos orbitales sp3-hibrida-
dos restantes ocupan los ngulos del tetraedro. El ngulo de 105
grados entre los hidrgenos difiere un poco del ngulo tetra-
drico ideal, de 109.5 grados. El amoniaco tambin es tetradrico,
con un ngulo de 107 grados entre sus hidrgenos. El tomo de

7
8 CAPtULO 2 Agua y pH CAPtULO 2 Agua y pH 8

H
CH3 CH2 O H O
2e H

2e
H
H
CH3 CH2 O H O
105
CH2 CH3
H

fIgura 21 La molcula de agua tiene geometra tetradrica. R R II

C O H N
oxgeno fuertemente electronegativo en el agua empuja los elec- RI R III
trones en direccin contraria a los ncleos de hidrgeno, lo que
fIgura 23 Los grupos polares adicionales participan
los deja con una carga positiva parcial, mientras que sus dos pa- en la formacin de enlaces de hidrgeno. Se muestran los enlaces
res de electrones no compartidos constituyen una regin de car- de hidrgeno formados entre alcohol y agua, entre dos molculas de
ga negativa local. etanol, y entre el pptido carbonilo oxgeno y el pptido nitrgeno
Una molcula con carga elctrica distribuida de manera hidrgeno de un aminocido adyacente.
asimtrica alrededor de su estructura se denomina un dipolo.
La constante dielctrica alta del agua depende de su dipolo segundos o menos. La rotura de un enlace de hidrgeno en agua
fuerte. Como se describe de manera cuantitativa mediante la ley lquida slo requiere alrededor de 4.5 kcal/mol, menos de 5% de
de Coulomb, la fuerza de la interaccin F entre partculas que la energa necesaria para romper un enlace OH covalente.
tienen carga opuesta es inversamente proporcional a la constan- La formacin de enlaces de hidrgeno permite al agua di-
te dielctrica del medio circundante. La constante dielctrica solver muchas biomolculas orgnicas que contienen grupos
para un vaco es la unidad; para el hexano es 1.9; para el etanol, funcionales que pueden participar en la formacin de enlaces de
24.3, y para el agua, 78.5. Por ende, el agua disminuye mucho la hidrgeno. Los tomos de oxgeno de aldehdos, cetonas y ami-
fuerza de atraccin entre especies cargadas y polares en compa- das, por ejemplo, proporcionan pares solitarios de electrones
racin con ambientes libres de agua que tienen constantes di- que tienen la capacidad de servir como aceptores de hidrgeno.
elctricas ms bajas. Su fuerte dipolo y constante dielctrica alta Los alcoholes, los cidos carboxlicos y las aminas pueden servir
permiten al agua disolver grandes cantidades de compuestos car- como aceptores de hidrgeno y como donadores de tomos de
gados, como las sales. hidrgeno desprotegidos para formacin de enlaces de hidrge-
no (figura 2-3).
Las molculas de agua forman
enlaces de hidrgeno
Un ncleo de hidrgeno parcialmente desprotegido, unido de la IntEraccIn con agua
manera covalente a un tomo de oxgeno o de nitrgeno que ex- InfluyE sobrE la Estructura
trae electrn, puede interactuar con un par de electrones no com- dE bIomolculas
partidos sobre otro tomo de oxgeno o nitrgeno para formar
un enlace de hidrgeno. Dado que las molculas de agua tienen Los enlaces covalentes y no covalentes
estas dos caractersticas, la formacin de enlaces de hidrgeno estabilizan molculas biolgicas
favorece la autoasociacin de molculas de agua hacia disposi- El enlace covalente es la mayor fuerza que mantiene juntas a las
ciones ordenadas (figura 2-2). La formacin de enlaces de hi- molculas (cuadro 2-1). Las fuerzas no covalentes, aunque son
drgeno ejerce una profunda influencia sobre las propiedades de menor magnitud, hacen contribuciones importantes a la estruc-
fsicas del agua, lo que explica su viscosidad, tensin superficial tura, estabilidad y competencia funcional de macromolculas en
y punto de ebullicin excepcionalmente altos. En promedio,
cada molcula en agua lquida se asocia por medio de enlaces de
hidrgeno con otras 3.5. Estos enlaces son hasta cierto punto
cuadro 21 energas de enlace para tomos
de importancia biolgica
dbiles y transitorios, con una vida media de unos pocos nano-
tipo energa tipo de energa
H H H H
de enlace (kcal/mol) enlace (kcal/mol)
O O oo 34 o==o 96
H
H H H O
O H O SS 51 CH 99
H O H H
CN 70 C==S 108
H O
H SH 81 oH 110
fIgura 22 izquierda: asociacin de dos molculas de agua CC 82 C==C 147
dipolares mediante un enlace de hidrgeno (lnea punteada).
Derecha: agrupacin de cuatro molculas de agua con enlaces de Co 84 C==N 147
hidrgeno. Note que el agua puede servir de manera simultnea como
NH 94 C==o 164
donador y como aceptor de hidrgeno.
9 CAPtULO 2 Agua y pH
las clulas vivas. Estas fuerzas, que pueden ser de atraccin o de
repulsin, comprenden interacciones tanto dentro de la biomo-
lcula como entre la misma y el agua, que es el principal com-
ponente del ambiente circundante.
Las biomolculas se pliegan
para colocar a grupos polares
y cargados sobre sus superficies
Casi todas las biomolculas son anfipticas; esto es, poseen re-
giones con alto contenido de grupos funcionales cargados o po-
lares, as como regiones con carcter hidrofbico. Las protenas
tienden a plegarse con los grupos R de aminocidos con cade-
nas laterales hidrofbicas en el interior. Los aminocidos con
cadenas laterales de aminocidos cargadas o polares (p. ej., argi-
nina, glutamato, serina) por lo general estn presentes sobre la
superficie en contacto con agua. Un modelo similar prevalece en
una bicapa de fosfolpidos, donde los grupos con cabeza cargada
de fosfatidil serina o fosfatidil etanolamina tienen contacto con
agua, mientras que sus cadenas laterales de cido (acilo) graso
hidrofbicas se agrupan juntas y excluyen el agua. Este modelo
maximiza las oportunidades para la formacin de interacciones
de carga-dipolo, dipolo-dipolo, y formacin de enlaces de hi-
drgeno, favorables desde el punto de vista energtico entre gru-
pos polares sobre la biomolcula y el agua. Tambin minimiza
contactos desfavorables desde el punto de vista energtico entre
el agua y grupos hidrofbicos.
interacciones hidrofbicas
El trmino interaccin hidrofbica (o hidrfoba) alude a la ten-
dencia de compuestos no polares a autoasociarse en un ambiente
acuoso. Tal autoasociacin no est impulsada por atraccin mu-
tua ni por lo que a veces es denominado de manera incorrecta
como enlaces hidrofbicos. La autoasociacin minimiza la dis-
rupcin de interacciones desfavorables desde el punto de vista
energtico entre las molculas de agua circundantes.
Dado que los hidrgenos de grupos no polares como los
grupos metileno de hidrocarburos no forman enlaces de hidr-
geno, afectan la estructura del agua que los rodea. Las molculas
de agua adyacentes a un grupo hidrofbico tienen restriccin en
cuanto al nmero de orientaciones (grados de libertad) que les
permiten participar en el nmero mximo de enlaces de hidr-
geno favorables desde el punto de vista energtico. La formacin
mxima de mltiples enlaces de hidrgeno, que maximiza la en-
talpa, slo puede mantenerse al aumentar el orden de las mo-
lculas de agua adyacentes, con un decremento acompaante de
la entropa.
La segunda ley de la termodinmica establece que la ener-
ga libre ptima de una mezcla de hidrocarburo-agua est en
funcin tanto de la entalpa mxima (por formacin de enlaces
de hidrgeno) como de la entropa mnima (grados mximos de
libertad). De este modo, las molculas no polares tienden a for-
mar gotitas a fin de minimizar el rea de superficie expuesta y
reducir el nmero de molculas de agua cuya libertad de movi-
miento se restringe. De modo similar, en el ambiente acuoso de
la clula viva las porciones hidrofbicas de biopolmeros tienden
a estar sepultadas dentro de la estructura de la molcula o den-
tro de una bicapa lpida, lo que minimiza el contacto con agua.
CAPtULO 2 Agua y pH 9
Energa de interaccin (kcal mol1)
.50
.25
0
A
0.25
.50
3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0
R ()
fIgura 24 La fuerza de las interacciones de van der Waals
vara con la distancia, R, entre especies que interactan. la fuerza
de interaccin entre especies que interactan aumenta con la distancia
decreciente hasta que son separadas por la distancia de contacto de
van der Waals (vase la flecha marcada con A). A continuacin
sobreviene repulsin debida a la interaccin entre los electrones de
cada tomo o molcula. Si bien las interacciones de van der Waals son
en extremo dbiles, el efecto acumulativo es considerable para
macromolculas como DNA y protenas con muchos tomos en
contacto estrecho.
interacciones electrostticas
Las interacciones entre grupos cargados ayudan a dar forma a la
estructura biomolecular. Las interacciones electrostticas entre
grupos con carga opuesta dentro de biomolculas o entre las
mismas se denominan puentes de sal, los cuales tienen fuerza
comparable a la de los enlaces de hidrgeno, pero actan en dis-
tancias mayores; por ende, a menudo facilitan el enlace de mo-
lculas y iones cargados a protenas y cidos nucleicos.
Fuerzas de van der Waals
Surgen por atracciones entre dipolos transitorios generados por
el movimiento rpido de electrones de todos los tomos neutros.
Las fuerzas de van der Waals mucho ms dbiles que los enla-
ces de hidrgeno, pero abundantes disminuyen en trminos
de la sexta potencia de la distancia que separa a los tomos (fi-
gura 2-4). De este modo, actan en distancias muy cortas, por lo
general de 2 a 4 .
Fuerzas mltiples estabilizan
biomolculas
La doble hlice de DNA ilustra la contribucin de mltiples
fuerzas a la estructura de biomolculas. Si bien cada cadena de
DNA individual se mantiene junta por medio de enlaces cova-
lentes, las dos hebras de la hlice se mantienen unidas de mane-
ra exclusiva mediante interacciones no covalentes. Estas ltimas
comprenden enlaces de hidrgeno entre bases de nucletido
(formacin de pares de bases de Watson-Crick) e interacciones
de van der Waals entre las bases de purina y pirimidina apiladas.
La doble hlice presenta los grupos fosfato cargados y grupos
hidroxilo polares de los azcares ribosa del esqueleto del DNA a
agua mientras que sepulta dentro las bases nucletido relativa-
mente hidrofbicas. El esqueleto extendido maximiza la distan-
cia entre fosfatos que tienen carga negativa, lo que minimiza
interacciones electrostticas desfavorables.
10 CAPtULO 2 Agua y pH
El agua Es un EXcElEntE
nuclEfIlo
Las reacciones metablicas a menudo comprenden el ataque por
pares solitarios de electrones que residen sobre molculas ricas
en electrones llamadas nuclefilos sobre tomos con pocos elec-
trones llamados electrfilos. Los nuclefilos y electrfilos no ne-
cesariamente poseen una carga negativa o positiva formal. El
agua, cuyos dos pares solitarios de electrones sp3 tienen una car-
ga negativa parcial (figura 2-1), es un excelente nuclefilo. Otros
nuclefilos de importancia biolgica son los tomos de oxgeno
de fosfatos, alcoholes y cidos carboxlicos; el azufre de tioles; el
nitrgeno de aminas, y el anillo imidazol de la histidina. Los elec-
trfilos comunes son los carbonos carbonilo en amidas, steres,
aldehdos y cetonas, y los tomos de fsforo de fosfosteres.
El ataque nucleoflico por agua en forma tpica origina la
divisin de los enlaces amida, glucsido o ster que mantienen
juntos a los biopolmeros. Este proceso recibe el nombre de hi-
drlisis. A la inversa, cuando unidades de monmeros se unen
para formar biopolmeros como protenas o glucgeno, el agua
es un producto, por ejemplo, durante la formacin de un enlace
peptdico entre dos aminocidos:
Si bien la hidrlisis es una reaccin favorecida desde el pun-
to de vista termodinmico, los enlaces amida y fosfoster de poli-
pptidos y oligonucletidos son estables en el ambiente acuoso de
la clula. Esta conducta al parecer paradjica refleja el heho
de que la termodinmica que rige el equilibrio de una reaccin
no determina el ndice al cual proceder. En las clulas, catal-
ticos protena llamados enzimas aceleran el ndice de reacciones
hidrolticas cuando es necesario. Las proteasas catalizan la hi-
drlisis de protenas hacia los aminocidos que las componen,
mientras que las nucleasas catalizan la hidrlisis de los enlaces
fosfoster en el DNA y el RNA. Se requiere control cuidadoso de
las actividades de estas enzimas para asegurar que slo acten
sobre molculas blanco apropiadas en momentos apropiados.
Muchas reacciones metablicas
comprenden transferencia de grupo
Muchas de las reacciones enzimticas de las cuales dependen la
sntesis y desintegracin de biomolculas comprenden la trans-
ferencia de un grupo qumico G desde un donador D hacia un
aceptor A para formar un complejo de grupo aceptor, AG:
CAPtULO 2 Agua y pH 10
DG + A AG + D
Por ejemplo, la hidrlisis y la fosforlisis de glucgeno compren-
den la transferencia de grupos glucosilo a agua o a ortofosfato. La
constante de equilibrio para la hidrlisis de enlaces covalentes
favorece fuertemente la formacin de productos de divisin. Por
el contrario, en muchos casos las reacciones de transferencia de
grupo de las cuales depende la biosntesis de macromolculas
comprenden la formacin no favorecida termodinmicamente
de enlaces covalentes. Los catalticos de enzimas desempean
un papel crucial en la superacin de estas barreras en virtud de
su capacidad para enlazar directamente entre s dos reacciones
que en circunstancias normales estn separadas. Al unir una re-
accin de transferencia de grupo energticamente desfavorable
con una reaccin termodinmicamente favorable, como la hi-
drlisis de ATP, puede generarse una nueva reaccin acoplada
cuya carga general neta en energa libre favorece la sntesis de
biopolmero.
Dado el carcter nucleoflico del agua y su alta concentra-
cin en las clulas, por qu los biopolmeros como las protenas
y el DNA son relativamente estables?, adems, de qu modo la
sntesis de biopolmeros puede ocurrir en un ambiente acuoso,
en apariencia prohidroltico? Las propiedades de las enzimas
son fundamentales para ambas preguntas. En ausencia de cat-
lisis enzimtica, incluso las reacciones muy favorecidas desde el
punto de vista termodinmico no necesariamente tienen lugar
con rapidez. El control preciso y diferencial de la actividad en-
zimtica, as como el secuestro de enzimas en organelos especfi-
cos, determinan en qu condiciones fisiolgicas un biopolmero
dado se sintetizar o degradar. Los biopolmeros recin sinteti-
zados no se hidrolizan de inmediato, ya que los sitios activos de
enzimas biosintticas secuestran sustratos en un ambiente del
cual es factible excluir al agua.
Las molculas de agua muestran
una tendencia leve pero importante
a disociarse
La capacidad del agua para ionizarse, si bien es leve, tiene impor-
tancia fundamental para la vida. Dado que el agua tiene la capa-
cidad de actuar como un cido y como una base, su ionizacin
puede representarse como una transferencia de protn intermo-
lecular que forma un ion hidronio (H3 O+) y un ion hidrxido
(OH):
H2O + H2O H3O+ + OH
El protn transferido en realidad se relaciona con una agrupa-
cin de molculas de agua. Los protones existen en solucin no
slo como H3 O+, sino tambin como multmeros tipo H5 O2 + y
H 7O 3+. Sin embargo, el protn se representa de manera sistem-
tica como H+, aun cuando de hecho est muy hidratado.
Dado que los iones hidronio e hidrxido se recombinan de
manera continua para formar molculas de agua, es imposible
declarar que un hidrgeno u oxgeno individual est presente
como un ion o formando parte de una molcula de agua. En un
instante es un ion, pero al siguiente forma parte de una molcula
de agua; de modo que no se consideran iones o molculas indi-
viduales. En lugar de eso, se hace referencia a la probabilidad de
que en cualquier instante en el tiempo un hidrgeno estar
11 CAPtULO 2 Agua y pH CAPtULO 2 Agua y pH 11

presente como ion o como parte de una molcula de agua. Dado
que 1 g de agua contiene 3.46 1022 molculas, la ionizacin del
agua puede describirse de manera estadstica. Declarar que la
probabilidad de que un hidrgeno exista como un ion es de 0.01
significa que, en cualquier momento dado en el tiempo, un to-
mo de hidrgeno tiene 1 probabilidad en 100 de ser un ion pero
99 probabilidades en 100 de formar parte de una molcula de
agua. La probabilidad real de que un tomo de hidrgeno en agua
pura exista como un ion hidrgeno es de alrededor de 1.8 109.
De este modo, la probabilidad de que forme parte de una mo-
lcula de agua es de casi la unidad. Dicho de otra manera, por
cada ion hidrgeno y cada ion hidrxido en agua pura, hay
1.8 mil millones o 1.8 109 molculas de agua. Sin embargo, los
iones hidrgeno y los iones hidrxido contribuyen de manera
importante a las propiedades del agua.
Para la disociacin del agua,
H OH 2. Se calcula el logaritmo base 10 de [H+].
K
H2O
donde los corchetes representan concentraciones molares (es-
trictamente hablando, actividades molares) y K es la constante
de disociacin. Puesto que un mol de agua pesa 18 g, 1 litro (L)
(1 000 g) de agua contiene 1 000 18 = 55.56 mol. As, el agua
pura es 55.56 molar. Dado que la probabilidad de que un hidr-
geno en agua pura exista como un ion hidrgeno es de 1.8 109,
la concentracin molar de iones H+ (o de iones OH) en agua
pura es el producto de la probabilidad, 1.8 109, veces la con-
centracin molar de agua, 55.56 mol/L. El resultado es 1.0 107
mol/L.
Ahora es posible calcular K para el agua pura:
H O H 107 107
K luciones fuertemente acdicas (pH bajo); por su parte, los cidos
H2O 55.56 dbiles se disocian slo en parte en soluciones acdicas. De
0.018 10 14 1.8 10 16 mol/L modo similar, las bases fuertes (p. ej., KOH, NaOH) no as las
La concentracin molar del agua, 55.56 mol/L, es demasiado
grande como para que la disociacin la afecte de manera signifi-
cativa, de modo que se considera que, en esencia, es constante.
As, esta constante puede incorporarse en la constante de diso-
ciacin K para proporcionar una nueva y til constante Kw (W,
de water, agua) llamada el producto ion para el agua. La rela-
cin entre Kw y K se muestra a continuacin:
H+ OH
K 1.8 10 16
H2O mol/L
K w K H2O H+ OH
1.8 10 16 mol/L 55.56 mol/L
1.00 10 14 mol/L
2
ciones de cidos o bases. Se usa Kw para calcular el pH de so-
luciones cidas y bsicas.
El pH Es El logarItmo
nEgatIvo dE la concEntracIn
dE Ion HIdrgEno
El trmino pH fue introducido en 1909 por Srensen, quien lo
defini como el logaritmo negativo de la concentracin de ion
hidrgeno:
pH log H
Esta definicin, si bien no es rigurosa, es suficiente para muchos
propsitos bioqumicos; a fin de calcular el pH de una solucin:
1. Se calcula la concentracin de ion hidrgeno [H+].
3. El pH es el negativo del valor que se encuentra en el paso 2.
Por ejemplo, para agua pura a 25C,
pH log H log 10 7 7 7.0
Este valor tambin se conoce como la potencia (power [ingls],
puissant [francs], o potennz [alemn]) del exponente, de ah el
uso de p.
Los valores de pH bajos corresponden a concentraciones
altas de H+, y los valores de pH altos corresponden a concentra-
ciones bajas de H+.
Los cidos son donadores de protones y las bases son acep-
tores de protones. Los cidos fuertes (p. ej., HCl, H2SO4) se
disocian por completo hacia aniones y protones, incluso en so-
bases dbiles (p. ej., Ca[OH]2) estn por completo disociadas
a pH alto. Muchas sustancias bioqumicas son cidos dbiles.
Las excepciones son los intermediarios fosforilados, cuyo grupo
fosforilo contiene dos protones disociables, el primero de los
cuales es fuertemente acdico. Los ejemplos que siguen ilustran
cmo calcular el pH de soluciones cidas y bsicas.
Ejemplo 1: Cul es el pH de una solucin cuya concentra-
cin de ion hidrgeno es de 3.2 104 mol/L?
pH log H
log 3.2 104
log 3.2 log 10 4
0.5 4.0

3.5
Note que las dimensiones de K son mol por litro y las de Kw son
mol2 por L2. Como su nombre lo sugiere, el producto ion Kw es Ejemplo 2: Cul es el pH de una solucin cuya concentra-
igual desde el punto de vista numrico al producto de las con- cin de ion hidrxido es de 4.0 104 mol/L? Primero se define
centraciones molares de H+ y OH-: una cantidad pOH que es igual a log [OH] y que puede deri-
varse a partir de la definicin de Kw :

K w H OH
K w H
OH 10
14

A 25C, Kw = (107)2, o 1014 (mol/L) 2; a temperaturas por debajo Por ende,

de 25C, Kw es un poco menor de 1014, en tanto que a tempera-
turas superiores a 25C es un poco mayor de 1014. Dentro de las log H log OH log10 14
limitaciones declaradas del efecto de la temperatura, Kw es igual o bien
a 1014 (mol/L)2 para todas las soluciones acuosas, incluso solu- pH + pOH = 14
12 CAPtULO 2 Agua y pH CAPtULO 2 Agua y pH 12

Para resolver el problema mediante este mtodo: en casi todas las coenzimas y en casi todos los metabolitos inter-
mediarios. De este modo, el conocimiento de la disociacin de
OH 4.0 cidos y bases dbiles es bsico para entender la influencia del
10 4
pOH log OH pH intracelular sobre la estructura y la actividad biolgica. Las
separaciones basadas en carga, como la electroforesis y la cro-

log 4.0 10 4 matografa de intercambio inico, tambin se entienden mejor

log 4.0 log 10 4 en trminos de la conducta de disociacin de grupos funcio-
0.60 4.0 nales.
La especie protonada (p. ej., HA o RNH3+) recibe la deno-
3.4
minacin de cido, en tanto que la especie no protonada (p. ej.,
Ahora: A o RNH2 ) es su base conjugada. De modo similar, puede
pH = 14 pOH = 14 3.4 hacerse referencia a una base (p. ej., A o RNH2 ) y su cido
= 10.6 conjugado (p. ej., HA o RNH3+ ). Los cidos dbiles represen-
Los ejemplos anteriores ilustran de que modo la escala tativos (columna izquierda), sus bases conjugadas (al centro) y
de pH logartmica facilita la emisin de reporte y la compa- valores de pKa (columna derecha) incluyen los siguientes:
racin de concentraciones de ion hidrgeno que difieren por R CH COOH R CH pK 4 5
COO 2 2 a
rdenes de magnitud de otra, esto es, 0.00032 M (pH 3.5) y
R CH2
R CH2 pK a 9 10
0.000000000025 M (pH 10.6).
NH NH pK a 6.4
Ejemplo 3: Cules son los valores de pH de a) 2.0 102
mol/L KOH y de b) 2.0 106 mol/L KOH? El OH surge a partir H2CO3 HCO3 pK 7.2
H2PO4 HPO4 2 a
de dos fuentes: KOH y agua. Dado que el pH est determinado
por el [H+] total (y el pOH por el [OH] total), ambas fuentes Las fuerzas relativas de cidos y bases dbiles se expresan en fun-
deben considerarse. En el primer caso, a), la contribucin del cin de sus constantes de disociacin. A continuacin se mues-
agua al [OH] total es insignificante; es imposible decir lo mis- tran las expresiones para la constante de disociacin (Ka) para
mo para el segundo caso, b): dos cidos dbiles representativos, RCOOH y RNH3+.
R COOH R COO H
Concentracin (mol/L) R COO H
K a
(a) (b) R COOH

R R 2 H
Molaridad de KoH 2.0 10 2
2.0 10 6 3
R H
2

[oH ] proveniente de KoH 2.0 10 2
2.0 106


K a
[oH] proveniente de agua 1.0 107 1.0 107 R
3

[oH] total 2.00001 102 2.1 106 Dado que los valores numricos de Ka para cidos dbiles son n-
meros exponenciales negativos, Ka se expresa como pKa, donde

Una vez que se ha llegado a una decisin acerca de la importan- pK a = logK a

cia de la contribucin por el agua, es factible calcular el pH como
Note que pKa se relaciona con Ka como el pH se relaciona con
se mencion.
[H+]. Mientras ms fuerte es el cido, ms bajo es el valor de
Los ejemplos anteriores suponen que la base fuerte KOH
pKa.
est por completo disociada en solucin y que, entonces, la con-
La pKa se usa para expresar las fuerzas relativas tanto de ci-
centracin de iones OH fue igual a la del KOH ms la presente
dos como de bases. Para cualquier cido dbil, su conjugado es
al principio en el agua. Esta suposicin es vlida para soluciones
una base fuerte; de modo similar, el conjugado de una base fuer-
diluidas de bases o cidos fuertes, no as para bases o cidos d-
te es un cido dbil. Las fuerzas relativas de bases se expresan
biles. Dado que los electrlitos dbiles slo se disocian un poco
en trminos de la pKa de sus cidos conjugados. Para compues-
en solucin, es necesario usar la constante de disociacin para
tos poliprticos que contienen ms de un protn disociable, se
calcular la concentracin de [H+] (o de [OH]) producida por
asigna un nmero subndice a cada disociacin, comenzando a
una molaridad dada de un cido (o base) dbil antes de calcular
partir de la unidad en orden decreciente de acidez relativa. Para
el [H+] total (o el [OH] total) y despus el pH.
una disociacin del tipo
R NH

3 R NH2 H

Los grupos funcionales que son cidos
dbiles tienen gran importancia la pKa es el pH al cual la concentracin del cido RNH3+ es
igual a la de la base RNH2.
fisiolgica A partir de las ecuaciones anteriores que relacionan la Ka
Muchas sustancias bioqumicas poseen grupos funcionales que con el [H+] y con las concentraciones de cido no disociado y su
son cidos o bases dbiles. Los grupos carboxilo, los grupos ami- base conjugadas, cuando
no y los steres fosfato, cuya segunda disociacin cae dentro del
R COO

rango fisiolgico, estn presentes en protenas y cidos nucleicos,
 13 CAPtULO 2 Agua y pH CAPtULO 2 Agua y pH 13
R COOH
14 CAPtULO 2 Agua y pH CAPtULO 2 Agua y pH 14

o cuando Se sustituye el pH y la pK a para log [H+] y log K a, respectiva-

R NH R 2 3
mente; entonces:
NH

HA
entonces pH pK a log
A
K a H
La inversin del ltimo trmino elimina el signo de menos
De este modo, cuando las especies asociada (protonada) y diso- y da la ecuacin de Henderson-Hasselbalch:
ciada (base conjugada) estn presentes a iguales concentraciones,
A
pH = pK a + log
la concentracin de ion hidrgeno [H+] prevaleciente es igual
desde el punto de vista numrico a la constante de disociacin,
Ka. Si se toman los logaritmos de ambos lados de la ecuacin
HA
anterior y se multiplican por 1, las expresiones quedan como La ecuacin de Henderson-Hasselbalch tiene gran valor pre-
sigue: dictivo en equilibrios protnicos. Por ejemplo,
Ka H 1. Cuando exactamente la mitad de un cido est neutra-
logKa log H lizada, [A] = [HA]. En estas condiciones,
Dado que log Ka se define como pK a y log [H+] define al A 1
pH, la ecuacin puede reescribirse como pH pK a log pK a log pK a 0

HA 1
pK a = pH
Por ende, cuando la mitad de un cido est neutralizada,
esto es, la pKa de un grupo cido es el pH al cual las especies
pH = pKa.
protonada y no protonada estn presentes a concentraciones
iguales. La pKa para un cido puede determinarse al aadir 0.5 2. Cuando la proporcin [A]/HA] = 100:1,
equivalente de lcali por equivalente de cido. El pH resultante A
ser igual a la pKa del cido. pH = pK a + log
[HA ]
pH = pK a + log (100 /1) = p Ka + 2
La ecuacin de Henderson-Hasselbalch
describe el comportamiento 3. Cuando la proporcin [A]/HA] = 1:10,
de cidos dbiles y amortiguadores pH = pK a + log (1/10) = p Ka + ( 1)
La ecuacin de Henderson-Hasselbalch se deduce a continuacin. Si la ecuacin se evala a proporciones de [A]/[HA] que
Un cido dbil, HA, se ioniza como sigue: varan desde 103 hasta 103 y se grafican los valores de pH calcu-
HA H+ + A lados, el grfico resultante describe la curva de titulacin para
un cido dbil (figura 2-5).
La constante de equilibrio para esta disociacin es

H A Las soluciones de cidos dbiles

K a
HA y sus sales amortiguan cambios del pH
Las soluciones de cidos o bases dbiles y sus conjugados mues-
La multiplicacin cruzada da
tran amortiguacin, la capacidad para resistir a un cambio del

pH despus de la adicin de un cido o una base fuerte. Dado
A K a HA

H
que muchas reacciones metablicas se acompaan de liberacin
Se dividen ambos lados por [A]: o captacin de protones, casi todas las reacciones intracelulares
estn amortiguadas. El metabolismo oxidativo produce CO2, el
HA anhdrido del cido carbnico, que de no amortiguarse produci-
H
Ka ra acidosis grave. El mantenimiento de un pH constante com-
A prende amortiguacin mediante fosfato, bicarbonato y protenas,
que aceptan o liberan protones para resistir a un cambio del
Se toma el logaritmo de ambos lados:
pH. En experimentos donde se usan extractos de tejido o enzi-
HA
log H log K a mas, el pH constante se mantiene por medio de la adicin de
A amortiguadores como MES (cido [2-N-morfolino]-etanosulf-
HA nico, pKa 6.1), ortofosfato inorgnico (pKa2 7.2), HEPES (ci-
log K a log
A do N-hidroxietilpiperazina-N'-2-etanosulfnico, pKa 6.8) o Tris
(tris[hidroximetil]aminometano, pKa 8.3). El valor de pKa res-
Se multiplica todo por 1: pecto al pH deseado es el principal determinante de cul amor-
HA tiguador se selecciona.
log H log K a log La amortiguacin se observa al usar un medidor de pH mien-
A

tras se titula un cido o una base dbil (figura 2-5). Tambin es
15 CAPtULO 2 Agua y pH CAPtULO 2 Agua y pH 15

mEq de lcali aadidos por mEq de cido 1.0 1.0

cuadro 22 Fuerzas relativas de cidos
seleccionados de importancia biolgica1
cidos monoprticos
0.8 0.8
Frmico pK 3.75

Carga neta
0.6 0.6
lctico pK 3.86
0.4 0.4
Actico pK 4.76
0.2 0.2
Ion amonio pK 9.25

0 0 cidos diprticos
2 3 4 5 6 7 8
pH Carbnico pK1 6.37

pK2 10.25
fIgura 25 Curvas de titulacin para un cido del tipo HA.
El punto grueso, en el centro de la curva, indica la pKa de 5.0. Succnico pK1 4.21

factible calcular la desviacin de pH que acompaa a la adicin pK2 5.64

de cido o base a una solucin amortiguada. En el ejemplo, la Glutrico pK1 4.34
solucin amortiguada (un cido dbil, pKa = 5.0, y su base con-
jugada) se encuentra, al inicio, en uno de cuatro valores de pH; pK2 5.41
se calcula el cambio de pH producido cuando se aaden 0.1 mEq
cidos triprticos
de KOH a 1 mEq de cada solucin:
Fosfrico pK1 2.15
pH inicial 5.00 5.37 5.60 5.86 pK2 6.82
[A]inicial 0.50 0.70 0.80 0.88
pK3 12.38
[HA]inicial 0.50 0.30 0.20 0.12
Ctrico pK 3.08
([A]/[HA])
inicial
1.00 2.33 4.00 7.33 1
pK2 4.74
La adicin de 0.1 meq de KOH produce
pK3 5.40
[A]final 0.60 0.80 0.90 0.98

[HA]final 0.40 0.20 0.10 0.02 1

([A ]/[HA])
final 1.50
log ([A]/[HA])
final
0.18
pH final 5.18
pH 0.18
Note que el cambio de pH por mEq de OH aadido depende
del pH inicial. La solucin se resiste a cambios del pH con mayor
eficacia a valores de pH cercanos a la pKa. Una solucin de un
cido dbil y su base conjugada amortigua de manera ms efi-
caz en el rango de pH de pKa 1.0 unidades de pH.
La figura 2-5 tambin ilustra la carga neta en una molcula
del cido como una funcin del pH. Una carga fraccionaria de
0.5 no significa que una molcula individual porta una carga
fraccionaria sino que la probabilidad es de 0.5 de que una mo-
lcula dada tenga una carga negativa de unidad en cualquier
momento dado en el tiempo. La consideracin de la carga neta
sobre macromolculas como una funcin del pH proporciona la
base para tcnicas de separacin, como la cromatografa de in-
tercambio de ion y la electroforesis.
La fuerza del cido depende
de la estructura molecular
Muchos cidos de inters biolgico poseen ms de un grupo que
se disocia. La presencia de carga negativa adyacente obstaculiza
Nota: los valores tabulados son los valores de pK a (log de la constante de
disociacin) de cidos monoprticos, diprticos y triprticos seleccionados.
4.00 9.00 49.0
0.60 0.95 1.69 la liberacin de un protn desde un grupo cercano, lo que au-
5.60 5.95 6.69 menta su pKa. Esto queda de manifiesto a partir de los valores de
0.60 0.95 1.69 pKa para los tres grupos que se pueden disociar de cido fosfri-
co y cido ctrico (cuadro 2-2). El efecto de la carga adyacente
disminuye con la distancia. La segunda pKa para el cido succ-
nico, que tiene dos grupos metileno entre sus grupos carboxilo,
es de 5.6, mientras que la segunda pKa para el cido glutrico,
que tiene un grupo metileno adicional, es de 5.4.
Los valores de pKa dependen
de las propiedades
del medio
La pKa de un grupo funcional tambin est profundamente in-
fluida por el medio circundante. El medio puede aumentar o
disminuir la pKa dependiendo de si el cido no disociado o su
base conjugada es la especie cargada. El efecto de la constante
dielctrica sobre la pKa se observa al aadir etanol al agua. La
pKa de un cido carboxlico aumenta, mientras que la de una
amina disminuye porque el etanol aminora la capacidad del agua
para solvatar una especie cargada. De este modo, los valores pKa
de grupos que se estn disociando en los interiores de protenas,
estn muy afectados por su ambiente local, lo que incluye la pre-
sencia o ausencia de agua.
16 CAPtULO 2 Agua y pH
rEsumEn
El agua forma agrupaciones enlazadas por hidrgeno consigo
misma y con otros donadores o aceptores de protones. Los enlaces
de hidrgeno explican la tensin superficial, viscosidad, estado
lquido a temperatura ambiente y el poder solvente del agua.
Los compuestos que contienen O o N pueden servir como
donadores o aceptores de enlaces de hidrgeno.
Las macromolculas intercambian enlaces de hidrgeno de
superficie interna por enlaces de hidrgeno con agua. Las fuerzas
entrpicas dictan que las macromolculas exponen regiones
polares a una interfaz acuosa y sepultan regiones no polares.
Los puentes de sal, las interacciones hidrofbicas y las fuerzas
de van der Waals participan en el mantenimiento de la estructura
molecular.
El pH es el logaritmo negativo de [H+]. Un pH bajo caracteriza a
una solucin cida, mientras que un pH alto denota una solucin
bsica.
La fuerza de cidos dbiles se expresa mediante la pKa, el Wiggins PM: Role of water in some biological processes. Microbiol
logaritmo negativo de la constante de disociacin de cido. Los
CAPtULO 2 Agua y pH 16
cidos fuertes tienen valores de pKa bajos, en tanto que los
dbiles muestran valores de pKa altos.
Los amortiguadores resisten a un cambio del pH cuando se
producen o consumen protones. La capacidad amortiguadora
mxima ocurre 1 unidad de pH a uno u otro lado de la pKa.
Los amortiguadores fisiolgicos son bicarbonato, ortofosfato
y protenas.
rEfErEncIas
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