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Mdulo Didctico "Recursos Genticos y Bioseguridad" 21/03/2012
TRANSGNICOS
Mdulo Didctico: RECURSOS GENTICOS y 1. Definiciones y conceptos

BIOSEGURIDAD bsicos
Lambayeque, 20 22 de Marzo de 2012 2. Obtencin de transgnicos
3. Importancia de los
transgnicos
BASES TCNICAS PARA LA SEGURIDAD DE
4. Mtodos de deteccin de OVM
BIOTECOLOGA
5. Etiquetado
Eliana Yglesias Glvez
Direccin General de Diversidad
Biolgica
1 2
Biotecnologa moderna
1. DEFINICIONES Y CONCEPTOS
Aplicacin de:
BSICOS a) Tcnicas in vitro de cidos nucleicos, includos el cido
desoxirribunucleico (AND) recombinante y la inyeccin directa de
cidos nucleicos en las clulas u organelos,
1. Biotecnologa moderna b) La fusin de clulas ms all de la familia taxonomica que
superan las barreras fisiolgicas naturales de la reproduccin y
2. OVM que no son tcnicas utilizadas en la reproduin y seleccin
tradicional.
3. Ingeniera Gentica
(Protocolo de Cartagena)
4. Transgn
Biotecnologa que involucra tcnicas de AND recombinante, la
inyeccin directa de cidos nucleicos en clulas u organelos y la
fusin de clulas ms all de la familia taxonmica (PNTP)
3 4
MINAM - GORE Lambayeque 1

Organismo Vivo Modificado (OVM) Ingeniera Gentica
Cualquier organismo vivo que posea

Conjunto de metodologas y
una combinacin nueva de material
tcnicas dirigidas a lograr la
gentico que se haya obtenido
modificacin del material
mediante la biotecnologa moderna
hereditario de una especie, con
(Protocolo de Cartagena). el fin de conferirle atributos (por
Se entiende como cualquier entidad ejemplo caractersticas del
biolgica capaz de ser transferir o individuo o capacidad de
replicar material gentico, incluidos los producir sustancias) que no los
organismos estriles, los virus y los tena hasta ese momento.
viroides (PNTP).
5 6
Transgn
Estructura de un gen
Es el gen construido mediante ingeniera gentica que se
transfiere a una especie.
Ejemplo:
Promotor 5 UTR CDS Terminador
El gen cp4 epsp tomado de la bacteria Agrobacterium
tumefaciens (cepa CP4).
3 UTR
Su origen puede ser :
Vegetal mRNA
Animal
Microbiano
Sinttico
7 8

Productos de la expresin gentica Qu son los Transgnicos?
Organismos manipulados genticamente que

incorporan genes de otras especies, dndoles
Gene 1 Gene 2 Gene 3 caractersticas diferenciales respecto al organismo
DNA
original.
Sus descendientes heredan este mismo gen del
mismo modo que los propios.
mRNA
Protena
9 10
Comparacin entre transgnesis y mejoramiento convencional Comparacin entre transgnesis y mejoramiento convencional
La Biotecnologa Moderna
introduce el gen de otra especie en
una planta y la transforma
El mejoramiento tradicional
El mejoramiento tradicional se basa en

cruzamientos y seleccin entre la
descendencia
La Biotecnologa Moderna
11 12

Versin y combinacin de genes Versin y combinacin de genes

Pueden existir diferentes versiones de un gen Evento 1
Por ejemplo, para los genes Bt se tiene Cry1a(b), Cry1a(c),
Cry9c, etc.
Por lo que se puede registrar diferentes variedades. Evento 2

La combinacin de la versin exacta del gen y su
ubicacin eventual dentro del genoma se denomina
evento
Por ejemplo, dos compaas usan el mismo gen Bt pero
localizados en diferentes posiciones dentro del ADN, por tanto, se
trata de dos eventos diferentes
13 14
2. OBTENCIN DE TRANSGNICOS Etapas en la obtencin de un transgn
Etapas en la obtencin de un transgn: Identificacin del problema que

se desea resolver:
Identificacin del problema.
Identificacin y valoracin de los
Identificacin del gen de inters para el hospedero
problemas que no pueden ser
adecuado.
fcilmente resueltos con mtodos
Construccin del transgn. convencionales.
Transformacin gentica. Identificacin del tipo de problema
Seleccin y ensayos en espacio confinado. que se quiere solucionar:
Ensayos en campo y liberacin. resistencia a plagas, sequa,
patgenos, valor nutricional, otros.
15 16

Genes utilizados y carcter conferido en

Etapas en la obtencin de un transgn plantas transgnicas
Tipo de gen utilizado en transgnesis Caracter que confiere a la planta

Identificacin del gen de inters Toxina de Bacillus thuringensis Resistencia a Insectos
Protena de la cubierta viral Resistencia a Virus
Mediante estudios de prospeccin. Quitinasas, glucanasas de plantas y de Resistencia a Hongos
otros organismos
Mejoramiento convencional. Lisozima humana y de cerdo. Otros Resistencia a Bacterias
pptidos bactericidas
Marcadores moleculares.
Genes cuyos productos afectan la Resistencia a Herbicidas
Bioinformtica. biosntesis de aminocidos, o la
fotosntesis
Genes cuyos productos afectan la Retraso maduracin de frutos
biosntesis del etileno, o la formacin de
pared celular
17 18
Etapas en la obtencin de un transgn

Construccin del transgn (constructo) Construccin del transgn (constructo)

35S CaVM
Promotor:
Gen marcador Inicia la transcripcin.
de seleccin: Promotor Gen de Gen de
resistencia a inters terminacin Controla la expresin del gen.
antibiticos
Los mas comnmente usados son los derivados del
virus del mosaico de la coliflor (CaMV),19S CaMV y
35S CaMV.
19 20


Construccin del transgn (constructo)
Construccin del transgn (constructo)
Genes de inters: En plantas existen tres clases de genes marcadores

Tolerancia al herbicida Glyphosato Zea mays L. (maz) seleccionable:
Roundup Ready Genes que dan resistencia a los antibiticos. Kan
Tolerancia al herbicida Phosfinotricina PPT Genes que dan resistencia a herbicidas
Glifocinato de amonio
Genes involucrados con varias vas metablicas.
Resistencia a Ostrinia nubilalis (Perforador europeo
de la mazorca)
21 22
Etapas en la obtencin de un transgn Etapas en la obtencin de un transgn

Transformacin gentica:
Transformacin gentica:
Mediada por Agrobacterium.
Por biolstica (Gene Gun).
Por electroporacin.
23 24

Etapas en la obtencin de un transgn Transformacin gentica mediada por

Transformacin gentica mediada por Agrobacterium Agrobacterium
Agrobacterium es una
bacteria que causa una
enfermedad conocida como
agalla de la corona en
plantas.
Es un parsito y puede
causar grave dao a la
planta afectada.
Se encuentra en el suelo.
25 26
Transformacin gentica mediada por Transformacin gentica mediada por

Agrobacterium Agrobacterium
Infecta en la corona de la raz o apenas por debajo del nivel del
suelo.
La relacin Agrobacterium planta es un caso
nico de transferencia de ADN entre bacterias y
Puede sobrevivir en el suelo independientemente de la planta
husped. plantas (reinos diferentes).
Infecta a la planta a travs de cortes o heridas. Esta situacin es aprovechada para emplear a la
Es un patgeno comn en plantas herbceas, arbustos leosos y bacteria como un vector natural para la
dicotiledneas. transformacin en plantas.
Las agallas producidas son estructuras globulares similares a
tumores.
27 28

Transformacin gentica mediada por Transformacin gentica mediada por

Agrobacterium Agrobacterium
Agrobacterium se usa para producir plantas

transgnicas debido a que el T-ADN es definido
por sus bordes, ms no por las secuencias que
contiene.
Por ello, los investigadores pueden sustituir la
regin codificante T-ADN por cualquier secuencia
de ADN sin que haya un efecto a partir en su
transferencia del Agrobacterium a la planta.
29 30
Transformacin gentica mediada por biolstica

Etapas en la obtencin de un transgn (Biolistic Particle Delivery System)
Mtodo fsico de transformacin de clulas mediante el

cual se bombardea con partculas de oro o tugsteno
Transformacin gentica mediada por recubiertas de ADN, de alta densidad, de tamao sub-
biolstica (Biolistic Particle Delivery System) celular que son aceleradas mediante flujo de helio
presurizado a gran velocidad para introducir ADN dentro
de clulas vivas.
Fue inicialmente propuesto para su uso con plantas
ahora tiene mayores aplicaciones.
31 32

Transformacin gentica mediada por biolstica

(Biolistic Particle Delivery System)
33 34
Etapas en la obtencin de un transgn Transformacin gentica por electroporacin
Transformacin gentica por electroporacin

La electroporacin es un proceso mediante el cual
se aplica un campo elctrico (pulsos) a una clula
Electroporador: equipo que viva por un pequeo perodo de tiempo,
crea un campo magntico ocasionando una ruptura transitoria reversible de la
que altera la permeabilidad membrana celular.
de las membranas celulares.
Esta ruptura transitoria resulta en la formacin de
poros que permiten que molculas exgenas (ADN,
protenas o drogas) ingresen a la clula.
35 36

Transformacin gentica por electroporacin 3. IMPORTANCIA DE LOS

TRANSGNICOS
Las generaciones de transgnicos.

Cultivos transgnicos.
Peces transgnicos
Otros transgnicos disponibles hoy.
37 38
Las Generaciones de Transgnicos Transgnicos de 1ra Generacin
Resistencia a las plagas:

1ra Generacin: Caractersticas introducidas como
insumos agrcolas y combate de plagas. ... la resistencia a los insectos (Maz Bt.)
resistencia al taladro. Incorpora el gen de
- plantas Bt y plantas RR.
la endotoxina Bt (Bacillus thuringiensis).
2da Generacin: Tecnologas que incluyen productos
de calidad mejorada para la nutricin y procesos Aplicaciones:
industriales ALIMENTOS FUNCIONALES. Alimento para animales.
Grasas comestibles: Margarina, aceites.
3ra Generacin: Cultivos o animales utilizados como
Edulcorantes: Bebidas de frutas, cereales y
biofbricas para la produccin de frmacos
helados.
(vacunas, enzimas industriales).
Maz molido: Harina, copos de maz.
39 40

Plantas / Lneas transgnicas Bt

Plantas transgnicas Bt
Sauka & Benintende, 2008
41 42
Transgnicos de 1ra Generacin Transgnicos de 1ra Generacin

Plantas sensibles a RR Plantas sensibles a RR
Tolerancia a Herbicidas:
La soja Roundup Ready contiene un gen bacteriano que
codifica la enzima 5-enolpiruvil-shikimato-3-fosfato sintetasa,
que participa en la sntesis de los a.a. aromticos. El vegetal
que no contiene dicho gen, es inhibido por el glifosato, de
ah su accin herbicida.
Aplicaciones:
harina, concentrados proteicos, lecitinas, aceite,...
43 44

Transgnicos de 3ra Generacin

Transgnicos de 2da Generacin
Golden Rice En animales domsticos:

Produccin de grandes cantidades de
vacunas para animales domsticos que
pueden ser ms seguras que las vacunas
tradicionales.
Pruebas para diagnstico de
enfermedades y defectos genticos.
Arroz Arroz transgnico Produccin de somatotropina
convencional enriquecido con pro- recombinante produce animales con
vitamina A menor cantidad de grasa y aumento de la
produccin de leche.
45 46
Otros transgnicos de segunda y tercera

Cultivos Transgnicos
OVGM Modificacin Fuente del gen
generacin Propsito de la
Modificacin
Escherichia coli Produccin de Produccin de
Vacas
K12 Renina Queso
Hormona del Aumentar el
Salmon Salmn
crecimiento crecimiento
Modificacin de la Procesamiento de
Eucaliptus Pinus sp.
lignina pulpa
Suplir dficit de
Arroz caroteno Daffodil Erwina
Vitamina A
Expresin de
Oveja Anticuerpos en la H. Sapiens Leche Fortificada.
leche
47 48

reas cultivadas convencionales comparadas con reas Biotech en

los principales cultivos (Millones de acres / ha), ao 2009
Estado de los Cultivos Transgnicos en el

Mundo
Para el ao 2009:
Soya, 69 millones de ha HT (77% rea total)
Maz, 41 millones de ha HT/bt (26% rea total)
Algodn, 16 millones de ha Bt/HT (49% rea total)
Canola, 6 millones de ha HT (21% rea total)
HT = Tolerante a herbicidas
Bt = Bacilllus thuringiensis
Stein & Rodriguez- Cerezo. 2009. The global pipeline of new GM crops.
49 50
rea de cultivos transgnicos por cultivo Evolucin del rea con cultivos transgnicos en el mundo
Stein & Rodriguez- Cerezo. 2009. The global pipeline of new GM crops.
51 52

Superficie de soya transgnica cultivada por pases 2003-2009 Superficie de soya transgnica por pases
53 54
Superficie de maz transgnico cultivado por pases 2003-2009 Superficie de maz transgnico por pases
2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009
Pas % % % % % % %
M.has M.has M.has M.has M.has M.has M.has
total total total total total total total
EEUU 12,7 40,0 15,4 47,0 17,2 52,0 19,3 61,0 27,6 73,0 27,8 80,0 29,7 85,0
Argentina 1,2 50,0 2 59,4 2,2 68,0 2,1 73,0 3,1 74,0 2 75,0 2,6 81,3
Brasil - - - - - - - - - - 1,3 9,2 4,1 30,0
Sudfrica 0,2 12,5 12,5 0,4 14,5 0,5 28,5 1,2 46,2 1,6 55,6 1,5 62,2 1,8 65,6
Canad 0,4 35,0 35,0 0,4 37,0 0,4 39,7 0,5 44,4 0,6 46,6 0,6 53,8 0,7 61,7
Uruguay T 3,0 3,0 T 38,0 T 56,0 T 60,3 T 56,2 0,1 55,6 0,1 56,0
Espaa T 6,7 6,7 T 12,5 T 14,8 T 18,1 0,1 21,4 0,1 21,8 0,1 22,0
Total maz
14,6 18,4 20,4 23,3 33,4 33,8 39,6
transgnico
Total maz 142,4 145,0 142,9 147,0 158,0 153,8 152,3
% transgnico 10,3 12,7 14,3 15,9 21,1 10,3 12,8
Fuente: USDA, ISAAA y CIC estimaciones
T: menos de 100.000 has; () Estimaciones
55 56

Superficie, rendimiento y produccin de maz trangnico en

ciertos pases, campaa 2008/2009 2010/2011 Cultivos transgnicos aprobados en USA
rea Rendimiento por ha Produccin
2008 / 2009 / 2010 / 2008 / 2009 / 2010 / 2008 / 2009 / 2010 /
Pas 2009 2010 2011 2009 2010 2011 2009 2010 2011
1000 ha 1000 ha 1000 ha

Ton. Ton. T on. 1000 Ton. 1000 Ton. 1000 T on. Cultivos GM aprobados para consumo humano, alimento de
mtricas mtricas mtricas mtricas mtricas mtricas
Argentina 2,500 2,700 3,200 6.20 8.44 6.88 15,500 22,800 22,000
ganado, o para procesamiento:
Brasil 14,100 12,925 13,300 3.62 4.34 4.14 51,000 56,100 55,000
Maz: 24.
Canad 1,169 1,142 1,203 9.06 8.37 9.74 10,592 9,561 11,714
China 29,864 31,180 32,450 5.56 5.07 5.33 165,900 158,000 173,000 Canola: 16.
EU-27 8,785 8,284 7,994 7.09 6.91 6.94 62,321 57,281 55,467
India 8,170 8,330 8,550 2.41 2.01 2.40 19,730 16,720 20,500 Papa: 18.
Mxico 7,318 6,280 7,000 3.31 3.24 2.99 24,226 20,374 20,900
Nigeria 4,700 4,900 4,900 1.70 1.79 1.78 7,970 8,759 8,700 Soya: 8.
Sudfrica 2,896 3,263 2,900 4.34 4.11 4.14 12,567 13,420 12,000
Ucrania 2,440 2,089 2,648 4.69 5.02 4.50 11,447 10,486 11,919
Tomate: 8.
Otros 45,062 44,452 45,618 2.46 2.41 2.47 110,939 106,926 112,657
Algodn: 13.
Total otros pases 127,004 125,545 129,763 3.88 3.83 3.88 492,192 480,427 503,857
Total EEUU 31,796 32,169 32,960 9.66 10.34 9.59 307,142 332,549 316,165
Total general 158,800 157,714 162,723 5.03 5.15 5.04 799,334 812,976 820,022
http://www.nass.usda.gov/Publications/Ag_Statistics/2011/Chapter01.pdf
57 58
Exportaciones de maz trangnico de los EEUU por pas de destino,

Maz GM en los EEUU, 2000 - 2011 2008/2009 2009/2010
2008 2009 2010 2008 2009 2010
Pas de destino Ton. Ton. Ton. Pas de destino Ton. Ton. Ton.
mtricas mtricas mtricas mtricas mtricas mtricas
Japn 15,121,468 15,130,892 15,491,268 Costa Rica 630,597 610,793 610,576
Mxico 9,152,530 7,159,794 7,891,936 Cuba 785,644 670,402 499,555
Corea del Sur 7,909,635 6,039,770 7,004,990 Israel 811,983 112,509 443,070
Egipto 2,438,333 2,272,827 3,614,659 El Salvador 400,897 427,414 419,013
T aiwan 3,245,526 3,752,532 2,937,581 Panam 350,616 338,429 355,423
Canad 2,627,733 1,899,852 1,545,408 Honduras 325,436 384,387 344,898
China 3,037 148,251 1,454,887 Jamaica 239,230 241,510 253,165
Siria 662,562 493,061 1,321,350 Marruecos 351,724 707,650 237,851
Venezuela 1,142,314 1,294,919 1,054,738 T nez 183,738 73,104 227,751
Rep. Dominicana 1,041,543 964,204 898,661 Libia 113,324 138,960 190,983
Arabia Saudita 614,799 569,183 695,232 Indenedia 41,645 19,638 182,064
Guatemala 603,817 650,997 673,600 Ecuador 197,655 310,776 134,003
Colombia 2,567,149 1,234,833 661,156 Nicaragua 102,805 106,943 116,738
Per 199,561 580,665 641,797 T rinidad y Tobago 106,009 94,303 105,489
Total Mundial 53,737,407 47,501,791 50,735,249

Datos de http://www.ers.usda.gov/Data/BiotechCrops/
http://www.nass.usda.gov/Publications/Ag_Statistics/2011/Chapter01.pdf
59 60

Algodn GM en los EEUU, 2000 - 2011 Soya GM en los EEUU, 2000 - 2011
61 62
Eventos aprobados en Argentina para siembra consumo y

comercializacin
Eventos aprobados para consumo en Colombia Cultivo Caracterstica introducida Evento Insectos Herbicidas
Ao de
aprobacin
Nombre Comn Tecnologa Identificador nico Uso lepidopteros,
Maz Resistencia a insectos lepidpteros 176 1998
Ostrinia nubilalis
Algodn Bollgard MON-00531-6 Consumo humano
Tolerancia al herbicida glufosinato glufosinato de
Algodn Roundup Ready MON-01445-2 Consumo humano Maz T25 1998
de amonio amonio
Maz Yieldgard MON-00810-6 Consumo humano Maz Resistencia a insectos lepidpteros MON810 lepidopteros 1998
Maz Roundup Ready MON-00603-6 Consumo humano
Maz Resistencia a insectos lepidpteros Bt11 lepidopteros 2001
Trigo Roundup Ready MON-71800-3 Consumo humano
Maz Tolerancia al herbicida glifosato NK603 glifosato 2004
Semilla de soya Roundup Ready MON-04032-6 Consumo humano Resistencia a insectos lepidpteros
glufosinato de
Remolacha azucarera Roundup Ready KM-00071-4 Consumo humano Maz y tolerancia al herbicida glufosinato TC1507 Lepidopteros 2005
amonio
Bt Herculex I Bt Cry1F de amonio
Maz DAS-01507-1 Consumo humano Maz Tolerancia al herbicida glifosato GA21 glifosato 2005
1507 Tolerancia al herbicida glifosato y NK603 X
Maz lepidopteros glifosato 2007
Bollgard X Round MON-531-6 x MON- resistencia a insectos lepidpteros MON810
Algodn Consumo humano Tolerancia a los herbicidas glifosato y
Ready 1445-2 Maz glifosato y glufosinato de amonio, y
1507 X
lepidpteros glufosinato de 2008
NK603
Maz Bt11 SYN-BT-011-1 Consumo humano resistencia a insectos lepidpteros amonio
Tolerancia al herbicida glifosato y
Arroz Liberty LLRICE 601 Consumo humano Maz Bt11 X GA21 lepidpteros glifosato 2009
resistencia a insectos lepidpteros
Arroz Liberty LLRICE 62 Consumo humano
Maz Resistencia a insectos lepidpteros MON89034 lepidpteros 2010
63 64

Eventos aprobados en Argentina para siembra consumo y

Eventos propuestos para maz transgnico para los prximos aos
comercializacin (Cont.)
Ao de
Cultivo Caracterstica introducida Evento Insectos Herbicidas
aprobacin
Resistencia a insectos colepteros

Maz MON88017 colepteros glifosato 2010
y tolerancia al herbicida glifosato
Resistencia a insectos lepidpteros MON89034

Maz y colepteros, y tolerancia al X Ll glifosato 2010
herbicida glifosato MON88017
Maz Resistencia a insectos lepidpteros MIR162 lepidpteros 2011
Resistencia a lepidpteros y glifosato y

Bt11xGA21x
Maz tolerancia a los herbicidas glifosato lepidpteros glufosinato de 2011
MIR162
y glufosinato de amonio amonio
Glifosato y
Tolerancia al glifosato y a DP-098140-
Maz inhibidores de la 2011
herbicidas inhibidores de la ALS 6
ALS
Soja Tolerancia al herbicida glifosato 40-3-2 glifosato 1996
Soja A2704-12 2011
de amonio amonio
Soja A5447-127 2011
de amonio amonio
Algodn Resistencia a insectos lepidpteros MON531 lepidpteros 1998
Algodn Tolerancia al herbicida glifosato MON 1445 glifosato 2001

Tolerancia al herbicida glifosato y MON 1445 X
Algodn lepidpteros glifosato 2009
resistencia a insectos lepidpteros MON531
65 Dymond & Hurr. 2009. Plant Imports, MAF Biosecurity New Zealand.66
Plantas que han sido transformadas

Genticamente Las siete compaas de agroqumicos ms grandes
Abeto Eucalipto Pino

Top 7 Agrochemical Co's
Acelga Frambuesa Pltano
Alfalfa Frutilla Poroto
Algodn Kiwi Poroto de soya
5.9
Alamo Lechuga Remolacha 2 0 0 0 sa l e s ( $ b i l l i o n )
Arabidopsis Lirio Repollo
3.9
3.7
Arroz Maz Rosa
2.5
Arveja Man Sorgo
2.3
2.3
2.2
Camote Manzana Tabaco
Caa de azcar Maravilla Tomate
Cebada Orquidea Tulipn
r
SF
M nta
w
tis
ye
on
nt
Do
en
BA
sa
Ba
e
uP
Centeno Papa Trigo
ng
Av
on
D
Sy
Clavel Papaya Vides
Crisantemo Petunia Zanahoria
Esprrago Pera Zapallo
67 68

Definiciones y conceptos bsicos

Peces transgnicos
Los peces constituyen una importante fuente de protena,
especialmente para cubrir la demanda de alimento
La acuicultura (peces, moluscos, crustceos y algas) ha
respondido aumentando su infraestructura, con seleccin y
mejoramiento clsico para algunas pocas especies e
intensificando su produccin: de un suministro per cpita de
0,7 kg en 1970 a 7,8 kg en 2006 (FAO, 2008)
Hay mucho inters en el potencial de los peces transgnicos
para aumentar la capacidad productiva
Actualmente China es el mayor productor en el mundo
69 70
Definiciones y conceptos bsicos Obtencin de peces transgnicos

Algunas caractersticas de inters para el desarrollo de peces 1. Seleccin del ADN forneo a introducir conteniendo las
transgnicos (Hayes, 2007): caractersticas de inters
Reduccin del tiempo de desarrollo (ciclo de produccin). 2. Introduccin del DNA en los embriones de los peces
Mejorar la eficiencia en la conversin de alimento. 3. Integracin del DNA en el genoma del husped
Mejorar la gama de condiciones ambientales toleradas para un
4. Transmisin a la descendencia
buen crecimiento y desarrollo.
Uso de los peces como bio-factoras.
Esterilizacin para prevenir el flujo gnico a parientes silvestres.
Sincronizacin de la reproduccin.
71 72

Obtencin de peces transgnicos Principales especies transgnicas

Al menos 35 especies de peces transgnicos se estn
desarrollando en el mundo, conteniendo genes de otros peces,
humanos e insectos
Plasmido GM
1-3%
Huevo de cod fertilizado Cod-GM

Gadus morhua
Devlin et al
73 74
Principales especies transgnicas Especies en las que est desarrollando la

Ingeniera Gentica
Nombre Comn Nombre cientfico Atributo deseado
Pez cebra Danio rerio D6-desaturasa, fitasa
Pez dorado Carassius auratus Tolerancia al fro
Pez cebra Tilapia del Nilo Oreochromis niloticus Crecimiento
Carpa Cyprinus carpio Lactoferinas
Pez gato del canal Ictalurus punctatus Resistencia a enfermedades
Salmn atlntico Salmo salar Crecimiento y tolerancia al
fro
Trucha arco iris Oncorhynchus mykiss Crecimiento, metabolismo
de carbohidratos
Trucha arco iris Carpa

75 76

Riesgos ambientales de los peces Caso del salmn atlntico GM

transgnicos La Administracin de Alimentos y Drogas de los EEUU (FDA)
est considerando la aprobacin de salmn atlntico
Mayor competitividad por recursos y alimentos que las
genticamente modificado para consumo humano.
especies silvestres.
El salmn atlntico GM (Salmo salar) contiene un gen de
Dao a poblaciones silvestres afectando sus patrones crecimiento del salmn del pacfico (Oncorhynchus
demogrficos. tshawytscha) y un segundo gen de otra especie (Zoarces
Afectar la habilidad de especies silvestres de aparearse y americanus).
reproducirse. Un estudio reciente (Smith et al., de diciembre de 2010)
Podran comportarse como especies invasivas al tener un indicara que la evaluacin de riesgos e impactos ambientales
de la FDA para la aprobacin de este organismo GM estara
mayor rango de tolerancia ambiental.
incompleto.
77 78
Caso del pez cebra en Per (peces

4. DETECCIN DE OVM
ornamentales)
El laboratorio de Mejora Gentica y Reproduccin Animal de la Se requiere contar con metodologas que permitan
Facultad de Ciencias Naturales y Matemticas de la realizar la deteccin e identificacin de eventos
Universidad Nacional Federico Villarreal viene realizando transgnicos de manera sensible, reproducible,
ensayos experimentales con especies de peces ornamentales
rpida y de bajo costo.
Danio rerio (pez cebra).
Encontrando peces con una coloracin distinta a las lneas
que trabajaban (blanca gris) .
Con pruebas realizadas se detect que eran peces cebra
fluorescentes tipo K2.
Se lograron reproducir en condiciones controladas.
79 80

o Necesario para:
Necesario para:
Permitir la trazabilidad de las modificaciones gnticas:

En la Industria de alimentos y de las compaias de
semillas.
Para asegurar la pureza y segregacin de productos.
Por las autoridades competentes para asegurar el
Asegurar la pureza y segregacin de los productos o
cumplimiento con la legislacin.
eventos.
Capacidad de identificar productos especficos en el
Poder hacer la trazabilidad de la modificacin gentica mercado.
en los cultivos.
81 82
Principales mtodos de deteccin de OVM Principales mtodos de deteccin de OVM

Mtodos basados en el Mtodos basados en el
Deteccin de OVM anlisis de protenas: anlisis de ADN:
Para materias primas Deteccin en muestras
Se pueden aplicar en el con alto grado de
Mtodos basados en Mtodos basados en campo procesamiento
ADN protenas
No requiere personal muy Requieren equipo y
Para detectar ADN .. Para detectar nuevas
protenas especializado personal especializado
laboratorio
El formato de tiras
reactivas no requiere Los resultados son ms
Cualitativa y cuantitativa
equipo especializado precisos
Metodologa simple Metodologas ms
laboriosas
83 84

Requerimientos para la deteccin de OVM

Principales mtodos de deteccin de OVM
Mleculas Blanco:
1. Deteccin inmunoqumica de las protenas ADN o protena.
modificadas:
ELISA (Ensayo de inmunodeteccin) Captura de mleculas:
Strips o tiras reactivas Para ADN: Iniciadores.
Western Blot Para Protenas: Anticuerpos.
2. Deteccin del ADN de los OVM Materiales de referencia:

PCR (Reaccin en cadena de la Polimerasa) Controles positivos y negativos.
Calibradores para cuantificacin.
85 86
Deteccin inmunoqumica de las protenas modificadas Deteccin inmunoqumica de las protenas modificadas
Esta metodologa se basa en el reconocimiento ELISA Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay
especfico de una porcin de protena expresada por Bsicamente, esta prueba es una reaccin antgeno-anticuerpo
el OVM mediante un anticuerpo, recreando una que se lleva a cabo en una fase slida (placa de 96 pozos).
respuesta inmune. El antgeno-anticuerpo reacciona y produce un complejo estable
Puede permitir la deteccin especfica de determinado que puede ser visualizado por la adicin de un segundo
anticuerpo unido a una enzima.
anticuerpo por un eptope nico.
La adicin de un sustrato que reacciona con la enzima resulta en
Alta especificidad. una formacin de color, que puede ser medida fotomtricamente.
87 88

Deteccin inmunoqumica de las protenas modificadas

Deteccin inmunoqumica de las protenas modificadas
ELISA:
Respuesta
89 90
Tiras de flujo lateral
Tiras de flujo lateral Lnea
control
Variacin comercial de las pruebas de

ELISA que permiten obtener Lnea
de
resultados semi cuantitativos de prueba
forma sencilla y rpida.

Se emplean para la deteccin de
OVM en hojas, semillas y granos.
Como soporte se emplean tiras de
papel o plsticas, que es donde
Resultado Resultado
ocurre la reaccin. negativo positivo
91 92

Western Blot Protenas transferidas
Western Blot
Es un mtodo altamente especfico que permite
determinar si la muestra contiene la protena objetivo,
eficiente con protenas insolubles.
Se basa en la separacin de protenas de una
muestra en funcin de su tamao mediante
electroforesis y posterior deteccin mediante
anticuerpos especficos para la protena.
93 94
Ventajas Desventajas
No requiere mucha preparacin de la muestra. Faltan anticuerpos relevantes para los diversos
Ensayo relativamente rpido (2-4 horas, incluyendo eventos OVM.
preparacin de la muestra). Pueden producirse falsos positivos.
Produce resultados cualitativos o semi-cuantitativos. No todos los OVM expresan la protena en todas
Costo relativamente bajo o medio. partes de las plantas.
Aplicable para el anlisis de muestras numerosas. ELISA no son evento especifico.
95 96

Algunos kits de diagnstico basado en ELISA

Algunos kits de diagnstico basado en ELISA (Cont.)
Compaa Nombre del Kit Formato de la prueba
Compaa Nombre del Kit Formato de la prueba
EnviroLogix Inc., USA Cry 1Ab & Cry1Ac in Bt corn ELISA
and cotton
Agdia Inc., USA Bt- Cry 1Ab, -Cry1Ac, -Cry1c, DAS-ELISA Cry2A, Cry1C, Cry1F, Cry3B ELISA
-Cry2A, -Cry3A, -Cry9C and Cry9C in Starlink Corn
DAS-ELISA Immunostrips Cry9C Quickstix (1 kernel in 800 in 5
Biogenetic Services Cry 1Ab (Corn Mon809, 810, ELISA (about 0.15% detection min.)
Inc., USA Bt 11, E-176) level) Neogen Corporation, CP4 Lateral flow assay (Soybeans
Cry9C (Corn CBH 351, ELISA (about 0.04% detection USA 0.1%; corn 0.125%)
Starlink) level) Cry9C Lateral flow assay
Cry1F (Corn Herculex) ELISA (corn 0.125%)
CP4 (EPSPS Soybean RR) ELISA (about 0.05% detection Strategic Diagnostics RUR Soya Meal, Soya Grain, ELISA
level) Inc., USA Bt 1 Maize, Bt 9 Maize
97 98
Flujograma para el anlisis de OVM usando ADN Deteccin del ADN de los OVM
Alimento no Estndar de referencia Material de

La deteccin de una secuencia especfica de ADN
GM (y control -) (y control +) Alimento GM es uno de los mtodos ms utilizados para la
Extraccin de ADN
identificacin y cuantificacin de OVM y sus
productos derivados.
Pureza del ADN
Los mtodos que permiten la deteccin cualitativa,
Amplificacin del ADN semicuantitativa o cuantitativa de OVM.
Electroforsis Se emplea la tecnologa de la PCR, ya sea en

punto final (convencional) o en tiempo real.
Interpretacin y
documentacin
99 100

Deteccin del ADN de los OVM Deteccin del ADN de los OVM
Control de calidad del PCR:

Factores intrnsecos de la muestra que
afectan la amplificacin: Controles positivos y negativos.
Integridad de ADN molde. Controles de extraccin (blancos)
Tamao del amplicn. Iniciadores (primers) validados.
Presencia de sustancias inhibidoras. Todo el anlisis realizado (al menos) en duplicado.
Protenas.
Otros: EDTA, NaOH, SDS y otros detergentes.
101 102
103 104

Caso de deteccin de OVM

Deteccin del ADN de los OVM
empleando PCR Multiplex en el
Per
PCR Multiplex
Variacin de la tcnica de PCR
en la cual se usan dos o mas
sets de primers en un nico
tubo de mezcla.
Tiene por objetivo lograr la
amplificacin simultnea de
mltiples segmentos de ADN.
Debe ser estandarizado.
105 106
Ventajas Desventajas
Alta sensibilidad, lmites de deteccin al 0,1% del ADN No todos los tejidos contienen la misma cantidad de ADN.
presente. Requiere facilidades e instrumentacin de laboratorio
El PCR semi-cuantitativo puede brindar un estimado relativamente avanzadas y personal altamente calificado.
aproximado del nivel de contaminacin. Costo ms o menos alto.
El PCR en tiempo real puede proporcionar una Puede demandar tiempo (generalmente ms de 24 horas
cuantificacin bastante precisa en un rango menor al 10% para tener resultados)
ADN altamente estable. Se deben tomar precauciones para evitar contaminacin.
107 108

Evento t14/t25 liberty link maize (tolerante a herbicida)

Algunos kits de diagnstico basado en PCR
Compaa Nombre del Kit Matrices primarias

Applied Biosystems TaqManR GMO Maize 355 Alimentos e ingredientes procesados
Detection Kit incluyendo harina, comidas, semillas,
granos, tejidos de plantas y aceites.
Applied Biosystems TaqManR GMO Soy 355 Alimentos e ingredientes procesados
Detection Kit incluyendo harina, comidas, semillas,
granos, tejidos de plantas y aceites.
BioteCon Diagnostics Round-up Ready Soya Productos de la soya.
GmbH
EnviroLogix QualiPlate Kit for Roundup Roundup Ready corn, Roundup
Ready Corn, Event 603 and Ready cotton, Soybean and soy
Cotton flour BMC Bioinformatics Database Open Access
GMDD: a database of GMO detection methods
EnviroLogix QuickStix Kit for Roundup Algodn RR, habas y canola Wei Dong1, Litao Yang1, Kailin Shen2, Banghyun Kim3, Gijs A Kleter4, Hans JP Marvin4, Rong Guo5, Wanqi
Ready Bulk Grain Liang1 and Dabing Zhang*
109 110
5. ETIQUETADO DE ALIMENTOS
Porqu es importante el etiquetado de los alimentos ?
TRANSGNICOS
Llevan informacin bsica sobre el contenido de
nuestros alimentos.
Los consumidores tienen derecho a saber que estn
comprando o consumiendo.
111 112

Base Legal Generalidades

La Constitucin Poltica del Per en el Artculo 65
establece la defensa de los consumidores y usuarios, y A nivel internacional se han implementado niveles
garantiza el derecho a la informacin sobre los bienes y umbrales mnimos para el marcaje de alimentos GM.
servicios que se encuentran a su disposicin en el mercado.
En la Unin Europea, la regulacin umbral especifica
Ley 29571, Cdigo de Proteccin y Defensa del que los productos alimentarios deben ser etiquetados
Consumidor, Artculo 37 sobre Etiquetado de Alimentos como GM siempre que los ingredientes contengan
Genticamente Modificados: Los alimentos que incorporen productos derivados de organismos GM en una proporcin
componentes genticamente modificados deben indicarlo superior al 0.9%.
en sus etiquetas.
Debern implementarse mtodos eficientes para la
deteccin en alimentos altamente procesados.
113 114
Legislacin comparada: Brasil

Legislacin comparada: Brasil
Decreto 4680 del 25 de Abril de
2003:
Art.2.- Art.3.-
U(nombre del producto) U"(nombre del animal) alimentados con la dieta

transgnico, contiene (nombre que contienen ingredientes modificados
del ingrediente o ingredientes) genticamente" o "(nombre del ingrediente)
GM(s), producto fabricado a producido a partir de animales alimentados con
partir de (nombre del producto) piensos que contienen ingredientes modificados
transgnicoU genticamente."
Contenido de OVM: 4% - 1%
115 116

Legislacin comparada: Espaa Legislacin comparada: Otros

Australia Nueva Zelanda:
Reglamento 178/2004 de la Ley 9/2003 En la etiqueta se debe consignar, al lado del nombre del
alimento o ingrediente, las palabras genticamente
Los operadores garantizarn que: modificado
a) En el caso de los productos pre-envasados la etiqueta
contendr la siguiente indicacin: Este producto Noruega:
contiene organismos modificados genticamente, o U debe estar etiquetado en Noruego y/o Ingls con las
bien: Este producto contiene (nombre de los palabras Contiene (nombre del organismo) genticamente
organismos) modificado genticamente modificado y/o Contiene organismos genticamente
modificados
117 118
Ejemplos: Unin Europea Ejemplos: Unin Europea
Espaa
Holanda Etiquetado en la Unin

Especfica que este producto ha sido
Europea Holanda, donde
producido con maz no modificado
muestra que contiene aceite de
genticamente
soya genticamente modificado
119 120

Ejemplos: Unin Europea Cundo etiquetar
El etiquetado se efecta:
En base a Productos Finales
En base al proceso de Produccin
Cundo hay que etiquetar?

En cumplimiento de la ley
El solicitante presenta solicitud
Como condicin de el otorgamiento del permiso
Francia
Gestin de Riesgos
121 122
GRACIAS
Correo electrnico de contacto
eyglesias@minam.gob.pe
http://pe.biosafetyclearinghouse.net
123

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Mdulo Didctico "Recursos Genticos y Bioseguridad" 21/03/2012

Mdulo Didctico: RECURSOS GENTICOS y 1. Definiciones y conceptos

MINAM - GORE Lambayeque 1

Organismo Vivo Modificado (OVM) Ingeniera Gentica

Cualquier organismo vivo que posea

MINAM - GORE Lambayeque 2

Productos de la expresin gentica Qu son los Transgnicos?

Organismos manipulados genticamente que

El mejoramiento tradicional se basa en

MINAM - GORE Lambayeque 3

Versin y combinacin de genes Versin y combinacin de genes

Por lo que se puede registrar diferentes variedades. Evento 2

2. OBTENCIN DE TRANSGNICOS Etapas en la obtencin de un transgn

Etapas en la obtencin de un transgn: Identificacin del problema que

MINAM - GORE Lambayeque 4

Genes utilizados y carcter conferido en

Tipo de gen utilizado en transgnesis Caracter que confiere a la planta

Etapas en la obtencin de un transgn

Construccin del transgn (constructo) Construccin del transgn (constructo)

MINAM - GORE Lambayeque 5

Etapas en la obtencin de un transgn

Genes de inters: En plantas existen tres clases de genes marcadores

Etapas en la obtencin de un transgn Etapas en la obtencin de un transgn

MINAM - GORE Lambayeque 6

Etapas en la obtencin de un transgn Transformacin gentica mediada por

Transformacin gentica mediada por Transformacin gentica mediada por

MINAM - GORE Lambayeque 7

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Transformacin gentica mediada por biolstica

Mtodo fsico de transformacin de clulas mediante el

MINAM - GORE Lambayeque 8

Transformacin gentica mediada por biolstica

Etapas en la obtencin de un transgn Transformacin gentica por electroporacin

Transformacin gentica por electroporacin

MINAM - GORE Lambayeque 9

Transformacin gentica por electroporacin 3. IMPORTANCIA DE LOS

Las generaciones de transgnicos.

Las Generaciones de Transgnicos Transgnicos de 1ra Generacin

Resistencia a las plagas:

MINAM - GORE Lambayeque 10

Plantas / Lneas transgnicas Bt

Sauka & Benintende, 2008

Transgnicos de 1ra Generacin Transgnicos de 1ra Generacin

MINAM - GORE Lambayeque 11

Transgnicos de 3ra Generacin

Golden Rice En animales domsticos:

Otros transgnicos de segunda y tercera

MINAM - GORE Lambayeque 12

reas cultivadas convencionales comparadas con reas Biotech en

Estado de los Cultivos Transgnicos en el

MINAM - GORE Lambayeque 13

MINAM - GORE Lambayeque 14

Superficie, rendimiento y produccin de maz trangnico en

1000 ha 1000 ha 1000 ha

Exportaciones de maz trangnico de los EEUU por pas de destino,

Total Mundial 53,737,407 47,501,791 50,735,249

MINAM - GORE Lambayeque 15

Eventos aprobados en Argentina para siembra consumo y

MINAM - GORE Lambayeque 16

Eventos aprobados en Argentina para siembra consumo y

Resistencia a insectos colepteros

Resistencia a insectos lepidpteros MON89034