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dx SX
rx m
dt ks S
rx : velocidad decrecimiento decelulas
m : velocidad especifica max crecimiento
ks : ctte Monod
S : sustrato
X : masa celular
S
m
ks S
Donde: m : mximo valor que puede alcanzar la velocidad de crecimiento cuando el sustrato
es mucho mayor que ks y las concentraciones del resto de nutrientes no ha cambiado de forma
notable, ks es el valor de la concentracin del nutriente limitante a la que la velocidad especifica
de crecimiento es la mitad de la mxima.
BIOCATALIZADOR INMOVILIZADO
Es un catalizador que acelera una reaccin bioqumica en los seres vivos. Se considera
biocatalizadores a las enzimas, hormonas y vitaminas. A su vez un catalizador es una especie
qumica que sin consumirse participa de una reaccin qumica suministrando un camino o
mecanismo de reaccin de activacin energtica, lo que permite alcanzar una mayor velocidad
de reaccin.
Enzimas: es un catalizador biolgico que acelera las velocidades de reaccin para una reaccin
especfica de una clula.
Hormonas: desde el punto de vista qumico las hormonas son sustancias muy heterogneas
desde derivados de ciertos aminocidos como la adrenalina y firoxina y protenas como la
exitocina o la insulina o esteroides como las hormonas sexuales.
Vitaminas: son un grupo de sustancias orgnicas de composicin variada, necesarias en
cantidades muy pequeas para el correcto funcionamiento de microorganismos desempean
funciones catablicas y algunos desarrollan funciones catalticas especificas en algunos
nutrientes (carbohidratos, protenas y lpidos)
Biocatalizadores inmovilizados
La inmovilizacin es el confinamiento fsico de una enzima o de una clula de una determinada
regin en el espacio, de manera que su actividad cataltica se retenga y pueda ser utilizada. La
utilizacin de biocatalizadores se realiza a travs de la inmovilizacin de enzimas o clulas de
modo que se restringen de manera parcial o total los grados de movimiento de dichos
catalizadores por unin a un soporte fijo.
En el caso de la inmovilizacin de enzimas estos pasan de su forma soluble a una forma
insoluble.
Requisitos para caracterizar un biocatalizador inmovilizado
Caracterizacin fisicoqumica:
- Forma del biocatalizador
- Dimetro del medio de pelcula hmeda
- Capacidad de hinchamiento
- Comportamiento en columnas (compresibilidad)
- Abrasin en reactores agitados
- Abrasin en reactores de lechos Fluidizados
Inmovilizacin de un biocatalizador
La inmovilizacin de un biocatalizador bien sea de una enzima o una celula consiste
en su localizacin de una regin definida del espacio manteniendo al mismo tiempo
una actividad cataltica inmovilizada. En caso concreto de las clulas muy
posiblemente su viabilidad.
Ventajas:
a) Permite la utilizacin continua del biocatalizador, dado que este queda fcilmente
retenido en el bioreactor, mientras se mantiene un flujo continuo de entrada y salida del
lquido.
b) En el caso de reacciones en discontinuo, la inmovilizacin favorece la utilizacin del
bioreactor.
c) Con la inmovilizacin se puede aumentar sensiblemente la concentracin del
biocatalizador, con respecto a un proceso en el que el mismo se encuentre en
suspensin.
Desventajas:
a) La actividad de una clula o una enzima puede quedar directamente afectada por las
condiciones a que se lleve a cabo el proceso de inmovilizacin perdiendo parte de su
actividad y viabilidad.
b) La velocidad de su difusin de sustratos y productos dentro del sistema de
biocatalizadores inmovilizados puede limitar su actividad cataltica y eficacia, cuando
dicha velocidad sea ms lenta que la velocidad de transformacin que se est llevando
acabo.
c) Desde el punto de vista del proceso global hay que tener en cuenta que la
inmovilizacin significa la incorporacin de una nueva etapa al mismo, y por tanto un
aumento de su complejidad, que tiene que verse compensado por el aumento de su
productividad.
Inmovilizacin de enzimas y clulas
En el caso de la inmovilizacin de clulas se suele reducir los efectos de las contaminaciones
accidentales del proceso, acido que la condicin de clulas contaminantes que se encuentran en
suspensin, y en concentracin menor que el de las clulas inmovilizadas, pueden ser
eliminadas mucho mas fcilmente del reactor.
En el caso de las enzimas inmovilizadas es frecuente observar un aumento de su estabilidad y su
resistencia a la desnaturalizacin y protelisis cuando se encuentran inmovilizadas.
Mtodo de inmovilizacin de enzimas
1. Absorcin: la inmovilizacin se produce por interaccin de tipo inico o de fuerzas de
atraccin dbiles sobre la superficie del soporte.
2. Enlace covalente: la inmovilizacin tambin se realiza sobre la superficie de un soporte
pero la interaccin entre el biocatalizador y en soporte de enlaces covalentes.
3. Enlaces cruzados o autoinmovilizacion: en este grupo no existe un soporte propiamente
dicho. Las partculas de un biocatalizador inmovilizado se logra mediante una
interaccin directa, bien por enlace covalente o bien en el caso se algunas clulas
mediante procesos de floculacin.
4. Atrapamiento: formacin de una estructura tridimensional, en presencia del
biocatalizados, que queda atrapado de forma uniforme en su interior.
5. Sistemas con membranas: conocido tambin como la microencapsulacion con
membranas preformadas. En los dos casos el biocatalizador se inmoviliza en el interior
de un espacio limitado por una membrana. En el primer caso, las microcapsulas se
producen en presencia del biocatalizador que queda incorporado en su interior. En el
segundo caso, el biocatalizador se introduce en el interior de su sistema con membranas
previamente formadas.
Dnde se lleva a cabo las
En los bioreactores o fermentadores
en que reas de la industria se utilizan los bioreactores?
Aplicaciones analticas:
- En el investigacin en general
- En el diseo de biosensores
- En el diseo de reactores enzimticos
Aplicaciones mdicas:
- Para el tratamiento de enzimas inmovilizadas
Aplicaciones industriales:
- En la industria farmacutica
- En la industria alimentaria
- En la industria qumica en general
BIOREACTORES O FERMENTADORES
Los bioreactores o fermentadores son recipientes donde se lleva acabo las reacciones
bioqumicas en donde se crean tcnicamente las condiciones ptimas para el cultivo y
multiplicacin de microorganismos para la formacin de productos optimos
El bioreactor debe ofrecer o proveer todos los servicios que son necesarios para el cultivo, tales
como mezclado, termostatizacion, suministro de oxgeno, entrada para la adicin de nutrientes,
control de pH, etc. Bsicamente un bioreactor comprende a un recipiente o tanque con agitacin
con las enzimas o clulas inmovilizadas. Una va de entrada para el sustrato y otra de salida para
el producto.
Tipo de bioreactores
Los principales tipos de bioreactores en los que se utilizan los biocatalizadores son:
- Reactores de lecho fijo
- Reactores de lecho fluidizado
- Reactores con membranas (al mismo tiempo constituyen una forma)
- (en menor proporcin pueden utilizarse en casos especficos dado que su agitacin
suele afectar la integridad fsica)
Mtodos de inmovilizacin
a) Retencin fsica
- Atrapamiento en matrices: geles y fibras
- Inclusin en membranas: micro-encapsulacin y reactores de membrana
b) Unin qumica
- Unin a soporte
- Reticulado
Ventajas
Utilizacin de reactivos comerciales o de fcil preparacin y la simplicidad del
procedimiento. Sin embargo, requieren un control muy estricto de las condiciones de la
inmovilizacin, y muchas veces se obtienen preparaciones gelatinosas, con baja resistencia
fsica.
BIOENERGTICA
La energa es la capacidad para realizar un trabajo, lo cual incluye sintetizar molculas, mover
objetos, generar luz, etc. Casi todas las actividades de la sociedad moderna dependen de alguna
forma de la energa.
Aprovechamiento de la energa
Las clulas y los organismos vivos utilizan la energa como ATP, conforme se detalla:
- Auttrofos: son microorganismos que pueden utilizar CO2 como principal y nica fuente de
energa, a partir de la energa solar mediante la fotosntesis (bacterias, vegetales).
- Hetertrofos: son organismos que utilizan molculas orgnicas complejas preformadas y
reducidas como fuentes de carbono a travs de la nutricin. Aqu se incluyen a todos los
animales y microorganismos: hongos, protozoarios y la mayora de las bacterias.
Metabolismo
Una vez incorporadas las partculas de alimentos en los animales mayores, incluido el hombre y los
microorganismos, la clula obtiene de ellas energa y materia, mediante el metabolismo, que
engloba a todas las reacciones qumicas que ocurren en el interior de la clula.
El metabolismo es la suma de las reacciones qumicas que ocurren en la clula. Tiene lugar en una
serie de reacciones catalizadas, llamadas rutas metablicas.
a) Caractersticas:
Todos los procesos que ocurren en el universo estn sujetados a las leyes de la termodinmica.
Las reacciones que se verifican en las clulas vivas no son excepciones.
Las reacciones metablicas se rigen por las leyes de la termodinmica:
1.- Ley de conservacin de la energa
2.- Aumento natural del desorden (S positivo)
3.- Energa libre de Gibbs (G): Cantidad de energa capaz de realizar trabajo durante una reaccin
a T y presin constantes, condiciones fsicas para la vida.
La energa libre es la nica energa til para los organismos, ya que la entropa es la energa
degradada."
SEGUNDA LEY
El segundo principio relaciona el (S) de un sistema durante un proceso o reaccin con el calor
absorbido por el sistema (dq) a una T(K)
dq dq
dS ; dS
T T
Irreversibles reversibles
La igualdad se refiere a un proceso reversible, mientras que la desigualdad se refiere a un proceso
irreversible.
En toda transferencia energtica se genera energa calrica la cual puede ser fijada en un tejido
utilizada como trabajo o perderse en forma de calor (entropa).
Los animales disipan el calor constantemente de modo que hay una relacin del cambio de energa
libre con el cambio de entropa y entalpa.
S H T S
G: cambio de energa
H: energa aprovechable
S: prdida de energa como calor
Calor: forma no ordenada de energa que se disipa y no puede ser fijada por el organismo
Por otra parte, la energa mide la aleatoriedad o desorden del sistema, donde S>0 (+), aumento
de la entropa del sistema; si S<0 (-), disminuye la entropa en el sistema.
A+B C+D
[C][D]
K eq
[ A][B]
G 0 G ' nRT ln K eq
0 G ' nRT ln K eq
G ' nRT ln K eq
Oxidacin: incremento de O2
Reduccin: incremento de H2
Oxidacin y Reduccin y Compuestos de alta energa
En los sistemas biolgicos la conservacin de la energa implica reacciones de oxd-red. El
resultado final de la energa liberada en estas reacciones es la produccin de compuestos de alta
energa como el ATP.
En los organismos vivos, la utilizacin de la energa derivada de las reacciones qumicas
implica reacciones de oxd-red (Redox).
En bioqumica, ms exactamente en la qumica de las clulas, las oxidaciones y reducciones
implican frecuentemente la transferencia no solo de electrones sino de tomos completos de
hidrgeno.
Qu es el ATP? (Adenosina de trifosfato)
El compuesto ms importante con fosfato de alta energa en los organismos vivos es el ATP,
este compuesto consta del ribonuclesido de adenosina al que se unen en serie 3 molculas de
fosfato.
El ATP acta como el transportador principal en los organismos vivos, es decir es el
transportador principal de energa en los organismos vivos y se genera en las reacciones
exotrmicas, para ser usado en las reacciones endotrmicas.
Compuestos de alta energa
- Fosfoenolpiruvato
- 1;3-difosfoglicerato
- Acetilfosfato
- ADP
- ATP
Compuestos de baja energa
- AMP (adenosina monofosfato)
- Glucosa-6-fosfato
Conservacin de la energa
Se conocen dos mecanismos de conservacin de energa:
- Fermentacin
- Respiracin
En cada caso el resutado es el mismo: la sntesis de ATP, una reaccin endotrmica (para
producir ATP). Esta reaccin que necesita de energa, se acopla con una u otra de las reacciones
que liberan energa (exotrmica) y que ocurren durante el catabolismo del donador de
electrones.
Son los procesos mediante los cuales determinados sustratos y nutrientes son determinados sus
En biomasa y diversos productos
Biotransformacin
Son los procesos en los que sustratos naturales o sintticos son modificados por medio
Un bioproceso se caracteriza por:
- Uso de un biocatalizador biolgico: enzimas, microorganismos, clulas vegetales,
clulas animales, hongos filamentosos, plantas y animales.
- Uso de un biorreactor: la reaccin ocurre en forma controlada
Importancia de los bioprocesos
Los bioprocesos son importantes en la:
- Salud
- Alimentacin
- Medio ambiente
- Tecnologas limpias: uso de materias primas renovables, produccin de residuos
biodegradables y bajo consumo de energa.
Bioproceso microbiano:
1. Tecnologa microbiana tradicional tales como:
a) Fermentaciones alcohlicas
b) Produccin de productos farmacuticos
c)
d) Enzimas y sustancias qumicas
e)
1. Biorremediacin
La
Las cepas industriales se depositan en colecciones de cultivos que sirven como almacn.
2. Tecnologa microbiana con organismos alterados mediante Ingeniera gentica
- Fabricacin de hormonas
- Moduladores del sistema inmune
- Vacunas
Rendimientos (YP/S)
El rendimiento terico mximo de sustrato en producto mediante un ejemplo
92
YP / S 0,51
180
Clculo de rendimiento del sustrato limitante
N en nutriente: 21,2%
( NH 4 ) 2 SO4
N en clulas: 7,5%
%NS 21, 2
YX / S 2,8
% N clula 7,5
x 6
( NH 4 ) 2 SO4 S0 S f 2,14 g / l
Yx / S 2,8
Yx / S 2,8
Sf 0
x 6 g / l
Microorganismos
Los M.O. para ser mutables deben manipularse a escala industrial, en efecto, la produccin con
rendimiento slo es
A fin de hacer un producto econmicamente competitivo, por fermentacin microbiana, el
medio de debe ser barato y los recipientes de cultivo extremadamente grandes.
Requisitos de un M.O. industrial
- Producir la sustancia de inters
- Crecer rpidamente en un medio de cultivo barato
- Elaborar el producto en un periodo corto
- Desarrollarse en un cultivo puro y en gran escala
- Ser genticamente estable, pero susceptible de manipulacin gentica
- Cultivos que se mantengan durante periodos largos en el laboratorio y a escala
-
- Facilidad para inocular en grandes fermentadores
- No debe ser peligroso para el hombre o
- Retirar fcilmente las clulas de cultivo; es decir, que lo posibilite.
Clases de productos industriales a obtenerse de los microorganismos
a) Metabolitos de los microorganismos (microbianos)
- Alcoholes
- Acido actico
- Acido lctico
- Aminocidos
- Vitaminas
- Antibioticos
- Esteroides
- Alcaloides
b) Enzimas
- Para digestin de almidones, lpidos y protenas
- Para la sntesis de antibiticos semisintticos
3. Clulas microbianas
- Protena unicelular: levaduras, algas, bacterias y hongos.
- Clulas para la inoculacin como las bacterias fijadoras de N2, micorrizas, los inculos
para la fermentacin de lcteos y embutidos.
Usos industriales de la levadura y de los productos de la levadura:
- Produccin de levadura
- La levadura del panadero: produccin de panes
- Levadura desecada: como alimento suplementario
- Levadura desecada como prenso para animales.
- Produccin de productos de levadura
- Extracto de levadura para medios de cultivo
- Vitaminas D y E
- Enzimas para la industria alimenticia: invertasa (suerasa), y galactosidasa
- Productos para investigacin bioqumica: ATP, NAD, ADN
- Productos de fermentacin de levaduras
- Produccin de etanol como alcohol industrial y aditivo para la gasolina
- Glicerol o glicerina (CH3CH2CH3(OH)3)
- Alcohol para bebidas (vino, cerveza)
- Bebidas destiladas (wisky, ron)
Fermentacin
Es el proceso por el cual las clulas pueden obtener energa, sin llevar a cabo un proceso de
fosforilacin oxidativa. Las fermentaciones son propias de los m.o. como las bacterias y
levaduras, las cuales se llevan a cabo en un biorreactor mediante los cuales se transforma los
sustratos en un medio de cultivo en metabolitos o biomasa.
El proceso de la fermentacin es muy importante en la industria para convertir granos de
cereales en bebidas alcohlicas (el mosto en vino, la cebada en cerveza).
Fermentaciones industriales
Se llevan a cabo en fermentadores o biorreactores. En estos, el sustrato es convertido a un
compuesto o metabolito con la ayuda de un m.o.
Tipos de fermentaciones
En trminos genricos las fermentaciones pueden ser:
F. naturales: cuando las condiciones ambientales permiten la interaccion de los m.o. con los
- Reduccin de la produccin
Temperatura superior de la ptima
- Choque trmico
- Induccin a una respuesta de estrs
- Produccin de proteasas celulares
C) pH
Durante el crecimiento en un fermentador los metabolitos son liberados al medio lo que
puede generar un cambio de pH del medio de cultivo, por lo que es necesario tener
presente que:
- las bacterias crecen a pH neutro
- los hongos crecen a pH cido
- la mayor parte de los m.o. crecen ptimamente en un rango de pH=5,5 a 8-5
Problemas de aplicacin
1. calcular la variacin de energa libre estndar catalizada por la enzima
fosfoglucomutasa
G-1-P G-6-P
Solucin
G ?
[G 1 P] 1mM
[G 6 P] 19mM
G RT ln K eq
G G nRT ln K eq
[G 6 P] 19mM
K eq 19
[G 1 P] 1mM
K eq 19
8,315 J 298 K ln(19)
G
mol K
G 7,3kJ / mol
Como G es (-), la reaccin es exergnica (espontnea) que produce energa de la
posicin 1 a la posicin 6.