DISEO DE PROYECTO DE

INVESTIGACIN
UNIVERSIDAD NACIONAL PEDRO RUIZ
GALLO
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICAS
Departamento Acadmico de Microbiologa y
Parasitologa

EFECTO DE HONGOS AISLADOS DE TIERRA DE CULTIVO DE CAA DE

AZCAR Saccharum officinarum DEL DISTRITO DE TUMN SOBRE
BACTERIAS DEL GNERO Bacillus, Pseudomonas, Klebsiella y
Eschericchia.

Autor:
Saavedra Camacho, Johnny Leandro

Asesor:
Blgo. Carlos A. Espinoza Valera

Tipo de investigacin:
De acuerdo al objetivo de la investigacin: Bsica Experimental
De acuerdo a la respuesta al problema: Aplicada

Duracin estimada:
1 mes: (27 de junio de 2017 26 de julio de 2017)

Lambayeque 2017
MARCO TERICO
I. INTRODUCCIN
El suelo es un reservorio natural de microorganismos, capaces de originar muchos
productos biolgicamente activos, incluidas la molculas antibiticas, que frecuentemente
se producen en respuesta al estrs ambiental o la competencia con otros microorganismos.
Los metabolitos microbianos son fuentes ricas para el desarrollo de nuevos agentes
antimicrobianos, de origen natural. Siendo los actinomicetos y hongos filamentosos, la
principal fuente de los antibiticos naturales.
Existen microorganismos que benefician de forma directa la salud humana en la produccin
de antibiticos, de esta forma la industria farmacutica tambin se beneficia con el
aprovechamiento de estos microorganismos, hay bacterias que producen una gama de
antibiticos como las del gnero Streptomyces, de all se derivan antibiticos como la
tetraciclina, la estreptomicina y la eritromicina, as como de los hongos se obtienen algunos
otros del gnero Penicillium del cual se obtiene la penicilina.
La penicilina es el antibitico que revolucion el tratamiento de las infecciones bacterianas,
como la neumona, sfilis, tuberculosis y gangrena, y dio origen a la industria farmacutica.
El descubrimiento de la penicilina fue un hecho casual, que se debe al trabajo de Alexander
Fleming, bacterilogo del Hospital St. Mary de Londres, quien estaba interesado en el
desarrollo de mtodos de profilaxis y asepsia. Mientras se encontraba trabajando con
bacterias del tipo estafilococos observ que una de las placas de cultivo haba sido
contaminada por un hongo. Decepcionado, pero sorprendido, Fleming observ que
alrededor del hongo se formaba un enorme halo sin bacterias. Era evidente que el hongo
(que luego se supo era de la especie Penicillium notatum) produca algo capaz de matar a
las bacterias. Fleming llam a este principio activo penicilina notatum. El 1929 public sus
experimentos, aunque no despert el inters de la comunidad cientfica.
Las cefalosporinas son una clase antibiticos betalactmicos. Junto con
las cefamicinas pertenecen a un subgrupo llamado los cefamos. Las cefalosporinas son
similares a las penicilinas, pero ms estables ante muchas -lactamasas bacterianas y, por
lo tanto, tienen un espectro de actividad ms amplio.
Si bien los antibiticos son compuestos qumicos producidos naturalmente por los
microorganismos, y la adquisicin de resistencia a los antibiticos tambin es un proceso
natural en los seres vivos, se considera que el hombre ha influido en este acontecimiento
evolutivo. Se cree que el uso indiscriminado de antibiticos por parte del hombre, ha
acelerado el proceso de seleccin natural por el cual las bacterias ms resistentes se han
visto beneficiadas frente a las ms sensibles. Estas cepas resistentes sobreviven a la
presencia del antibitico y pueden propagarse exitosamente.
Conscientes del riesgo que significa que los antibiticos sean inocuos para los
microorganismos patgenos, diferentes centros de investigacin o compaas
farmacuticas en todo el mundo realizan extensas bsquedas de microorganismos o de
nuevas molculas antibiticas con diferentes mecanismos de accin.
 Adems, la industria farmacutica est interesada en encontrar antibiticos ms baratos y
ms seguros para la salud humana, ya que algunos de los existentes, aunque efectivos,
presentan efectos colaterales indeseables. Los nuevos antibiticos generalmente se
obtienen por modificacin qumica de los que ya se usan, para otorgarles nuevas
propiedades.

II. JUSTIFICACIN
Se justifica la ejecucin de este proyecto, con el fin de aplicar el producto biolgico obtenido
a partir de hongos productores de antibitico para comprobar el efecto antagnico sobre
cepas de bacterias que son patgenas para el ser humano. Con los resultados obtenidos y
divulgados, se lograra incrementar el conocimiento del proceso de obtencin de antibiticos
a partir de suelo agrcola y as crear protocolos para su posterior aplicacin en la prctica.

III. PROBLEMA CIENTFICO

El problema cientfico se plantea en los trminos siguientes:
Cul ser el efecto que cause los hongos aislados de tierra de cultivo de caa de azcar
en bacterias del gnero Bacillus, Pseudomonas, Klebsiella y Eschericchia?

IV. HIPTESIS
Existe la posibilidad de que los hongos aislados de tierra de cultivo de caa de azcar
puedan generar un efecto de tipo antagnico sobre bacterias que ya se mencionan y
tambin las posibles ideas de cmo se puede aplicar este proceso para posteriores
elaboraciones de antibiticos en el laboratorio.

V. OBJETIVOS

Determinar si los hongos aislados de tierra de cultivo de caa de azcar pueden generar
un efecto antagnico sobre bacterias.
Obtener de manera adecuada un producto biolgico de tipo antibitico a partir de ste
aislamiento.
MARCO METODOLGICO

I. MATERIAL INSTRUMENTAL Y EQUIPO DE LABORATORIO

Placas de Petri.
Viales.
Tubos de ensayo.
Cepas bacterianas de Bacillus, Pseudomonas, Klebsiella y Eschericchia.
Muestra biolgica de tierra de cultivo de caa de azcar de distrito de Tumn.
Asa bacteriolgica y micolgica.
Mechero.
Alcohol y algodn.
Gradilla.
Jeringas.
Solucin salina esterilizada.
Frasco de papilla esterilizado.
Caldo nutritivo.
Agar papa dextrosa.
Horno.
Autoclave.

II. TCNICAS, MTODOS Y PROCEDIMIENTO

Se extrajo muestra de suelo agrcola de los campos de cultivo de caa de azcar en el

distrito de Tumn y se introdujo en un frasco previamente esterilizado.
Se elimin elementos que pudieran ser contaminantes en la tierra de cultivo para escoger
solamente 10 gr de muestra.

Luego se prepar una suspensin con 10 gr de tierra de cultivo escogida y con 50 ml de

solucin salina esterilizada, despus se agit manualmente la suspensin obtenida por 10
minutos para poder homogeneizarla.

Una vez obtenida y agitada la suspensin de tierra de cultivo se procedi a realizar la

siembra en agar papa dextrosa usando la tcnica agotamiento y estra, para el aislamiento
del hongo.
 Despus de observar el aislamiento de los hongos procedentes de tierra de cultivo se
procedi a obtener el cultivo puro de stos en viales con agar papa dextrosa ms
antibitico, tambin se prepar caldo nutritivo para proceder a sembrar el hongo obtenido.

Se procedi a servir en tubos de ensayo el caldo nutritivo preparado, luego se sembr el

cultivo puro del hongo obtenido en los tubos con caldo nutritivo y se mand a incubar por
72 horas a 30C.

Despus de la incubacin se observ crecimiento de los hongos en los tubos de ensayo

para luego sembrar este mismo hongo en un cuarto del rea de la placa con agar nutritivo
y se mand a incubar a 30C por 72 horas.
 Despus de la incubacin de las placas con hongo se procedi a realizar la siembra de
bacterias del gnero Bacillus, Eschericchia, Pseudomonas y Klebsiella para comprobar el
efecto antagnico del hongo de tierra de cultivo sobre ellas.

III. RESULTADOS

Aspergillus sp. Nro. 1 Aspergillus sp. Nro. 2

Bacillus sp. Eschericchia Klebsiella sp. Pseudomonas

sp. sp.
Aspergillus sp. Inhibicin (+) Inhibicin (+) Inhibicin (+) Inhibicin (+)
Nro. 1
Aspergillus sp. Inhibicin (-) Inhibicin (+) Inhibicin (-) Inhibicin (-)
Nro. 2
CONCLUSIONES
Se logr generar el efecto antagnico de hongos aislados de tierra de cultivo de caa de
azcar sobre bacterias de gneros Bacillus, Eschericchia, Klebsiella y Pseudomonas.
Se logr obtener un producto biolgico a partir de estos hongos aislados de tierra de
cultivo de caa de azcar.
Se logr entender el protocolo y proceso de obtencin de antibitico a partir de hongos
de tierra de cultivo.

DISCUSIN
Se utilizan microorganismos que tericamente pueden ser inhibidos por la presencia del
hongo que se est estudiando. Los microorganismo pueden ser Staphylococcus aureus,
Streptococcus, Bacillus, Pseudomonas, Enterobacterias, etc.
Se puede preparar el microorganismo sensible llevndolo hasta la dilucin 0,5 del tubo
de MacFarland y proceder a realizar antibiograma con el hongo ya obtenido por un
mtodo conocido como rayado de palillos y despus de incubacin observar resultados.

CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES

Primera semana Segunda semana Tercera semana Cuarta semana

Preliminares Ejecucin Ejecucin Comunicacin

Contacto con la Se comenz el Se van obteniendo Preparacin del

realidad, visita a los proyecto en resultados de todo lo informe final con todo
cultivos de caa de laboratorio el con los realizado en el lo hecho a lo largo de
azcar en el distrito materiales y proyecto y se la realizacin del
de Tumn y muestras ya recolectaron datos presente proyecto
extraccin de mencionados, para analizar y para su posterior
muestra para trabajar trabajando de posteriormente presentacin.
en laboratorio de manera eficiente los realizar tablas donde
microbiologa y pasos del protocolo colocaremos dichos
parasitologa de la de obtencin de resultados.
Universidad Nacional antibitico y efecto
Pedro Ruz Gallo antagnico de
hongos sobre
bacterias.
PRESUPUESTO

Material e insumos Costo

Placas de Petri S/ 30.00

Viales S/ 6.00

Tubos de ensayo S/ 2.00

Asa bacteriolgica y micolgica S/ 2.00

Jeringas S/ 2.00

Solucin salina esterilizada S/ 5.00

Pasaje (Chiclayo Tumn) S/ 7.00

TOTAL S/ 54.00

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
Goodman y Gilman. Bases Farmacolgicas de la Teraputica. Mc Graw Hill
Interamericana. 2 volmenes. 10 Edicin. 2001.
http://dspace.ups.edu.ec/bitstream/123456789/12142/1/UPS-QT09705.pdf
Prescott, L. M., Harley, J. P., y Klein, D. A. Microbiologa. 4 edicin. McGraw-Hill
Interamericana, 1999.
Madigan, M. T., Martinko, J. M., y Parker, J. Brock Biologa de los Microorganismos. 10
edicin. Prentice-Hall. Madrid, 2003.