Recoleccin de muestras de nematodos

Enviar muestras para su identificacin precisa

 Factores que intervienen en la biologa de los nematodos

Temperatura
Humedad
Textura del suelo

Especies crifilas Especies termfilas

M. hapla M. incognita
M. chitwoodi M. javanica
(sobreviven a temperaturas del M. arenaria
suelo menores de 0C y (no sobreviven en suelos con
eclosionan a 10C o menos). temperaturas menores de 10C y no
eclosionan a temperaturas menores
de 15C).
 MUESTREO

Cuando

Prevencin (antes de la siembra).

Durante el cultivo: sntomas que indican una posible o probable

infestacin con nematodos.

Inmediatamente despus de la campaa (temporales).

Paso siguiente
tomar muestras de las plantas afectadas y del suelo alrededor de las
races.
Llevar a analizar al laboratorio: determinar que nematodos se
encuentran presentes, y si es posible, determinar tambin sus
densidades poblacionales.
Las caractersticas del suelo y otros que tienen implicaciones en la
forma de realizar el muestreo que deben tenerse en cuenta:

La distribucin agregada de los nematodos debido al sistema

radical de la planta y el comportamiento estacional del nematodo.

Tipo de cultivo e historial del mismo.

reas plantadas con diferentes variedades.

Humedad del suelo.

Compactacin del suelo.

Tipo de suelo.

Temperatura y cambios estacinales.

Herramientas para el muestreo

Pala, azada, pala de mano, barreno,

cuchillos (para cortar races), tijeras, bolsas
de plstico de polietileno, etiquetas.

El barreno debe tener 2030 cm de longitud

y 2025 mm de dimetro, puede ser
completamente cilndrico o semi-cilndrico.

Plumones para etiquetar las bolsas de las

muestras, lpiz y cuaderno para anotar los
datos.
Nmero de muestras

Tomar un nmero suficiente de muestras para asegurarse de que

son representativas de la situacin del campo.

Cuanto mayor sea el nmero de submuestras /barrenos

combinadas por cada muestra que se tome en un campo, mayor
exactitud tendr la evaluacin.

Sin embargo, es preciso alcanzar un equilibrio entre el tiempo

necesario para tomar las muestras y los medios disponibles.
 Diseo del muestreo

Los nematodos raramente estn distribuidos de forma uniforme en el

campo, y por tanto las muestras deben tomarse de varias zonas del
campo.

Recoger muestras por separado de zonas con crecimiento pobre y de

zonas con crecimiento relativamente bueno donde estas diferencias
sean obvias para poder compararlas.

Seguir siempre el mismo procedimiento y modelo en la recogida de

muestras durante los muestreos y experimentos para que las
comparaciones entre campos, parcela, tratamientos, etc. tengan
significado.

El procedimiento de muestreo puedes ser al azar o sistemtico.

 Muestreo al azar

No se adecua a la distribucin
natural del nematodo en manchas o
parches y solo es representativo si
el rea de muestreo es pequea.
Muestreo sistemtico

Representa un modo ms estructurado de tomar muestras ya que

considera la naturaleza del campo y la distribucin del nematodo.
 rea sana

rea afectada
 Toma de muestras para diagnostico nematolgico
Para un diagnstico preciso en campo, siempre ser necesario el
anlisis de muestras de suelo y races en el laboratorio que nos
permitan confirmar la presencia de los nemtodos sospechados.

Para cultivos instalados, el mejor momento para hacer un muestreo

de las poblaciones de nemtodos en campo es desde la mitad hasta el
final de la estacin de crecimiento del cultivo, es cuando los
nemtodos estn ms activos y las densidades son ms elevadas.

Muestreo previo al cultivo, las muestras deben ser tomadas antes de

la siembra y antes de cualquier tratamiento con plaguicidas o
fertilizantes.
Las densidades de nemtodos obtenidas permitirn predecir si los
niveles en suelo son suficientemente altos como para causar daos a
los cultivos y si algunas medias de control son necesarias.

Del mismo modo, estos muestreos predictivos son tiles en cultivos

perennes en los que se efecta un seguimiento regular de las
densidades nematolgicas y segn los datos decidir en que momento
aplicar los nematicidas.
Para obtener resultados precisos tomar las siguientes precauciones:

En cultivos establecidos, tomar las muestras de suelo

en las reas perifricas a las zonas daadas.

No tomar nunca muestras en zonas donde las plantas estn

muertas.

En muestreos previos a un cultivo, tomar las submuestras en

distintas sectores distribuidas regularmente por la superficie
de la parcela.
 El mtodo para disminuir errores en la estimacin, es el de
tomar un nmero elevado de submuestras en diferentes
puntos del campo y agruparlas en una muestra compuesta,
en la que se estimar el nmero promedio de nemtodos.

Dividir los campos mayores de 1 ha en parcelas de 1 hectrea y

muestrear estas parcelas por separado. Tener en cuenta historial de
cultivo, tipo de suelo u otras variables.

Tomar de 10 a 50 sub-muestras (barrenos) y combinarlas para hacer

una muestra compuesta que pese 12 kg.

Colocarla la muestra compuesta con cuidado en una bolsa,

etiquetarla y cerrar las bolsas con las muestras.
Recoleccin de muestras de races
Las races se pueden recolectar al mismo tiempo y de los mismos
puntos que las muestras de suelo, y en general, se deben guardar
en la misma bolsa que el suelo, ya que de esta forma, el suelo
ayuda a conservar las races evitando su desecacin.
Generalmente, aunque depende del cultivo, 25100 g de
races por muestra compuesta son suficientes.
Una mayor cantidad cuando las races son grandes y
gruesas como en el caso del banano o cuando se trata de
rboles.
Evitar tomar muestras de plantas muertas o aquellas
que estn en avanzado estado de senescencia, ya que
los nematodos habrn emigrado de estas plantas a
otras fuentes de alimento.
Recoleccin de muestras de tejido vegetal areo

Se deben recolectar hojas, tallos, semillas,

u otras partes del vegetal que presenten
sntomas y de donde se sospeche que
existan nematodos.

Es importante seleccionar las muestras de

un nmero de plantas afectadas, las cuales
deben compararse con porciones de tejido
vegetal no afectado de diferentes plantas.
 Cuidado de las muestras

Recolectar las muestras en bolsas de

plstico resistentes, y etiquetarlas de forma
clara y sistemticamente.

Los nematodos son muy sensibles y perecederos.

Las muestras NO deben dejarse nunca expuestas a la

luz solar ni dentro de un vehculo cerrado estacionado
al sol. Tampoco debe transcurrir mucho tiempo desde
su recoleccin hasta su procesamiento.
Las muestras, se deben colocar en una bolsa o en cajas
de cartn y colocarlas en zonas sombreadas donde las
condiciones sean ms frescas.
Cuando no es posible procesar las muestras inmediatamente, stas
se pueden almacenar en un refrigerador (aproximadamente 10C)
durante dos semanas como mximo.

Sin embargo, hay que tener en cuenta que la supervivencia del

nematodo decrece con el tiempo y que los nematodos procedentes
de ambientes calurosos pueden sufrir dao al refrigerarlos.
Protocolo de diagnostico para la prevencin de problemas nematolgicos

Objetivo: Determinar las densidades de nemtodos para predecir daos en el cultivo establecido o los
siguientes.
Que muestrear?
Recolectar muestras de suelo.
Dnde muestrear?
Dividir el campo en reas con un historial de cultivos comn, u homogneas respecto a otras variables
como textura del suelo.
La profundidad varia: Pastos: 0-10 cm; hortcolas y cereales: 0-20 cm; frutales y vides: 10-30 cm (eliminar
los 5 cm superiores para minimizar la influencia de la sequa, malas hierbas y cultivos de cobertura.
Cmo muestrear?
Usar una pala, o un barreno para recolectar suelo y races, tomar entre 30 y 60 muestras de 100 cc por ha
y depositarlas en un cubo, mezclar y retener 1000 g de suelo y 100 g de races para el anlisis en
laboratorio.
Cundo muestrear?
Las muestras previas a un cultivo, deben ser recolectadas unas 4-6 semanas antes de plantarlo, con
vistas a la toma de decisiones en funcin de los resultados obtenidos.
Informacin requerida
La mayor informacin posible deben ser enviados junto a la muestra.
Cultivo y variedad: anterior y a sembrar
Superficie muestreada
Descripcin de sntomas y su distribucin en cultivos anteriores
Textura del suelo, profundidad, y variabilidad
Frecuencia de riego y/o lluvia
Tratamientos con fertilizantes, fitosanitarios y respuesta obtenida.
 Protocolo de diagnostico nematolgico en cultivos establecidos
Objetivo: Determinar si los nemtodos estn implicados en un determinado dao al cultivo.
Que muestrear?
Identificar los sntomas y anotar su distribucin (al azar, regular, etc.).
Buscar una gradacin en los sntomas (i.e. suave, moderado, severo) y muestrear plantas con diferentes
grados de severidad separadamente. Tomar adicionalmente muestras de plantas sanas. No tomar
muestras muy daadas o muertas.
Recolectar muestras de races y suelo. Cuando se sospeche de nematodos que atacan flores, hojas y
tallos, recolectar tambin tejidos afectados
Dnde muestrear?
En los bordes de las zonas afectadas y en zonas donde se concentra el crecimiento radicular
La profundidad varia: Pastos: 0-10 cm.; hortcolas y cereales: 0-20 cm.; frutales, vides y ornamentales: 10-
30 cm. (eliminar los 5 cm. superiores).
Cmo muestrear?
Usar una pala, o un barreno para recolectar suelo y races, tomar entre 30 y 60 muestras de 100 cc por ha y
depositarlas en un cubo, mezclar y retener 1000 g de suelo y 100 g de races para el anlisis en
laboratorio.
Informacin requerida
Formularios completos con la mayor informacin posible deben ser enviados junto a la
muestra. En particular los siguientes datos son importantes
Cultivo y variedad, del cultivo anterior, presente y siguiente
Superficie muestreada
Descripcin de los sntomas y su distribucin
Textura del suelo, profundidad, y variabilidad
Frecuencia de riego y/o lluvia
Tratamientos con fertilizantes, fitosanitarios y respuesta obtenida.
Interpretacin del resultado de los anlisis de nematodos

Los anlisis nematolgicos son una herramienta fundamental a la

hora de tomar decisiones sobre control.

Sin embargo estos anlisis no tienen gran valor si la toma de

muestras no se ha realizado de forma que sean representativas del
rea seleccionada, o si las muestras no llegan al laboratorio bien
conservadas.

En general, la produccin vegetal va disminuyendo en el tiempo

conforme aumentan las densidades de nemtodos en suelo.
 UMBRALES DE ACCIN

Pequeas perdidas de produccin a

densidades menores de 10 nemtodos T
E
por g de suelo, (este es el llamado
lmite de tolerancia T), las perdidas
aumentan conforme las densidades de

Produccin
nemtodos pasan a ser mayores.
Aunque se observen perdidas a
densidades entre 10 y 20 nemtodos
por g de suelo, estas no seran
suficientes como para justificar el uso
de un tratamiento (este es el llamado
umbral econmico de dao E) por 0 10 20 30 40 50

encima de l, el tratamiento del suelo Densidad de nematodos

con un nematicida sera recomendable.

Tanto el lmite de tolerancia como el umbral econmico dependen
de las condiciones agronmicas y ambientales locales, por lo que
el xito de un sistema predictivo estar supeditado a la existencia
de datos locales sobre las perdidas causadas por nemtodos.

No obstante, y simplemente como algo referencial el siguiente Cuadro

muestra lmites de tolerancia y umbrales econmicos de dao,
expresados en nemtodos o huevos por 100 g de suelo, para diversos
cultivos y nemtodos en reas de clima mediterrneo.

Los valores estn basados en diversas publicaciones con datos

sobre umbrales de dao en zonas de clima mediterrneo
Cultivo nematodo Lmite de tolerancia Umbral econmico
Avena Ditylenchus dipsaci 1 25
Ctricos Tylenchulus semipenetrans 10 100
Coles spp. Meloidogyne 1 5
Coles spp. Pratylenchus 20 100
Cucurbitceas spp. Meloidogyne 2 50
Fresa Meloidogyne spp. 1 2
Fresa spp. Pratylenchus 2 5
Frutales hueso Meloidogyne spp. 10 200
Frutales hueso Pratylenchus spp. 10 300
Maz Meloidogyne spp. 10 100
Papa Meloidogyne spp. 10 100
Papa Globodera rostochiensis 50 1500
Papa Globodera pallida 10 300
Pimiento Meloidogyne spp. 3 30
Tabaco Meloidogyne spp. 1 40
Tomate Meloidogyne spp. 2 20
Tomate Pratylenchus spp. 10 100
Trigo Heterodera avenae 250 1000
Trigo Pratylenchus thornei 1000 3000
Vid Meloidogyne spp. 20 200
Vid Pratylenchus spp. 20 300
Vid Tylenchulus semipenetrans 50 400
Vid Xiphinema spp. 1 4
Zanahoria Meloidogyne spp. 1 10
Alguna investigaciones han demostrado que no siempre una mayor
Pi de Meloidogyne al momento del transplante se correlaciona con
una mayor Pf en suelo o niveles de dao o agallamiento en races.

Algunos modelos de prediccin descritos tratan de establecer el

dao potencial en la produccin de un cultivo con el nivel inicial
de densidad de un nematodo, a estas poblaciones se les
denomina umbral de tolerancia y umbral econmico de dao.