1.0.

METODOLOGA
1.1. MTODO DE INVESTIGACIN

El Monitoreo Hidrobiolgico comprender la evaluacin de los componentes

hidrobiolgicos, tales como plancton, perifiton, macroinvertebrados bentnicos y peces.
Adems de la determinacin del contenido de metales en tejido muscular de trucha
Oncorhynchus mykiss. Para su evaluacin se emplearn los mtodos de muestreo
propuestos en el Plan de Manejo Ambiental de la Modificacin del Estudio de Impacto
Ambiental de la U.E.A. Uchucchacua, el cual fue aprobados mediante la R.D. N 637-
2014-MEM/DGAAM.

Cabe recalcar que las estaciones de monitoreo sern las establecidas en el Plan de
Manejo Ambiental de la Modificacin del Estudio de Impacto Ambiental de la U.E.A.
Uchucchacua, las cuales fueron aprobadas mediante R.D. N 637-2014-MEM/DGAAM.
La evaluacin ser realizada por especialistas nacionales y contarn con la participacin
de dos (02) apoyos locales, quienes sern capacitados por el especialista en
hidrobiologa previamente a la evaluacin de campo. Asimismo dichos apoyos podrn
ser entrevistados obtenindose informacin complementaria como el uso tradicional de
los peces por parte de la poblacin, abundancia de las principales especies, nombre
comn de los peces de la zona, etc. Dicha recopilacin de datos son de inters cientfico
para la conservacin de especies raras y endmicas.

En todos los puntos de muestreo planteados en la evaluacin hidrobiolgica (plancton,

perifiton, macroinvertebrados bentnicos y peces), se analizar de manera conjunta la
evaluacin de parmetros in situ, tales como: temperatura, potencial de hidrgeno (pH)
oxgeno disuelto (OD), conductividad elctrica (CE), mediante el empleo de un
multiparmetro porttil marca HACH. Adicionalmente en el cuerpo de agua ltico (ro
Patn) se realizar la medicin del caudal mediante un correntmetro marca Global
Water modelo 111.

PLANCTON

Son organismos microscpicos que viven suspendidos en las aguas, carecen de medios
de locomocin (o se presentan muy dbiles), se mueven o trasladan a merced del
movimientos de masas de agua o corrientes, tendiendo a proliferar en ambientes
lnticos (cochas o lagunas). El plancton se divide en fitoplancton (microalgas) y
zooplancton (microinvertebrados). En aguas continentales, los grupos fitoplanctnicos
ms representativos corresponden a algas pertenecientes a las divisiones Ochrophyta
(diatomeas), Cyanophyta y Chlorophyta. El zooplancton, que por lo general en
ambientes acuticos amaznicos se encuentra en menor diversidad y abundancia que
el fitoplancton, est representado principalmente por rotferos, cladceros, coppodos y
protozoos (Ortega et al., 2007).

Las muestras sern recolectadas con una red de plancton de 20 de dimetro de malla,
con una boca de ingreso circular de 0.13 metros de dimetro y 0.5 metros de largo. Se
filtrar 50 litros de agua colectada en la zona de orilla de cada punto de muestreo. Las
muestras sern traspasadas a recipientes plsticos de 250 mL debidamente etiquetadas
y preservadas en formol al 4% para su transporte y posterior identificacin taxonmica
en el Departamento de Limnologa del Museo de Historia Natural de la Universidad
Nacional Mayor de San Marcos (MHN-UNMSM) en Lima.

Para el anlisis de datos se desarrollarn matrices de riqueza y abundancia a nivel de

orden, familia y especies, y sern relacionados segn la temporada de evaluacin y
estaciones de muestreo por temporada. Se estimar la abundancia relativa (N), riqueza
(S), ndice de riqueza de Margalef (d), ndice de equidad de Pielou (J), ndice de
Diversidad de Shannon Wiener (H') y Simpson (1-D) a nivel de temporada y estacin
de muestreo por temporada.

PERIFITON

El perifiton vegetal son microalgas bentnicas consideradas productores primarios y

base de las redes trficas. Estos organismos tambin estabilizan el substrato y sirven
como hbitat para otros organismos (Barbour et al, 1999). Adems, crecen adheridas a
materiales sumergidos en el agua (substrato), tales como arena, madera, roca u otros
cuerpos.

La colecta de muestras de perifiton ser realizada mediante el raspado de piedras con

una navaja y/o cepillo de cerdas duras y lavadas con agua destilada mediante el empleo
de una piseta hasta quitarle toda la capa de perifiton. El rea de colecta ser ubicada
sobre piedras de dimetro entre 15 y 20 cm y sumergidas entre 20 y 30 cm, evitando
que estn expuestas y/o en un flujo variable, en total se realizaran tres rplicas de 4 cm2
cada una, de modo que el rea total de muestreo ser de 12 cm2. Las muestras
colectadas sern fijadas directamente en formol al 4%, utilizando goteros de plstico de
1 mL y agua destilada; una vez fijadas se proceder a etiquetar cada frasco conteniendo
la muestra de perifiton y se proteger con cinta adhesiva para su posterior envo al
Departamento de Limnologa del MHN-UNMSM para su respectiva identificacin
taxonmica y determinacin de densidad.

La identificacin de los componentes de esta comunidad se realizar al nivel taxonmico

ms bajo posible de acuerdo a la bibliografa disponible. Para el anlisis de datos se
desarrollarn matrices de riqueza y abundancia a nivel de orden, familia y especies, y
sern relacionados segn la temporada de evaluacin y estaciones de muestreo por
temporada. Se estimar la abundancia relativa (N), riqueza (S), ndice de riqueza de
Margalef (d), ndice de equidad de Pielou (J), ndice de Diversidad de Shannon
Wiener (H') y Simpson (1-D) a nivel de temporada y estacin de muestreo por
temporada.

Macroinvertebrados Bentnicos

Los macroinvertebrados bentnicos constituyen un importante componente de los

ecosistemas acuticos ya que cumplen una funcin ecolgica fundamental debido a su
posicin dentro de la cadena trfica. Adems, son bastante apropiados para evaluar los
impactos especficos del ambiente debido a que son particularmente sensibles a los
cambios y tienen naturaleza sedentaria, lo que permite un anlisis espacial de los
efectos de las perturbaciones. Por ello, se han elaborado numerosos mtodos e ndices
para su anlisis (Barbour et al., 1999; Rosenberg & Resh, 1993).

En los ltimos aos, los macroinvertebrados acuticos han ganado protagonismo como
indicadores biolgicos de la calidad del agua, funcionando como una importante
herramienta para monitoreo de los recursos hdricos (Hurtado et al., 2005; Rosenberg y
Resh, 1993). Esto se debe a que tales organismos responden rpidamente a variaciones
ambientales y son fundamentales para el entendimiento de la estructura trfica y el
funcionamiento de los ecosistemas acuticos (Lampert y Sommer, 2007).

La colecta de muestras de macroinvertebrados bentnicos ser realizada mediante el

empleo de una red Surber de marco metlico de 0.09 m2 y abertura de malla de 500 ,
removindose el substrato durante un minuto. Las muestras colectadas sern colocadas
en frascos de 500 ml rotulados y fijadas con alcohol al 70% para su identificacin
taxonmica y determinacin de densidad en el Departamento de Limnologa del MHN-
UNMSM.

En cada estacin se realizar la colecta, tratando de representar los hbitats presentes,

tales como:
 Substrato duro (cantos rodados, piedras, grava);
Substrato blando (fango, limo, arcilla, arena);
Hbitats, que independientemente del substrato, estaban cubiertos por vegetacin
acutica sumergida (macrfitas, algas y material alctono).

Para el anlisis de datos se desarrollarn matrices de riqueza y abundancia a nivel de

Orden, Familia y especies, y sern relacionados segn la temporada de evaluacin y
estaciones de muestreo por temporada. Se estimar la abundancia relativa (N), riqueza
(S), ndice de riqueza de Margalef (d), ndice de equidad de Pielou (J), ndice de
Diversidad de Shannon Wiener (H') y de Simpson (1-D) a nivel de temporada de
muestreo y estacin de muestreo por temporada.

ndices Ecolgicos de Calidad de Agua

La calidad del agua ser determinada a travs de los ndices ecolgicos como %EPT y
BMWP/Col, los cuales incluyen a los insectos de los rdenes Ephemerptera,
Plecptera y Trichptera como bioindicadores de buena calidad de agua.

El ndice %EPT, expresa el nmero total de individuos de los rdenes Ephemerptera,

Plecptera y Trichptera en proporcin a la abundancia total encontrada. Estos insectos
son considerados mayormente como organismos de aguas limpias y su presencia
generalmente est relacionada a aguas de buena calidad. Valores mayores >50 %,
indican buena calidad de agua (ver Cuadro N 1).

Cuadro N 1: Clasificacin de Calidad de las Aguas segn el ndice % EPT

EPT% Significado

75 - 100 Muy buena. Calidad biolgica ptima.

50 - 74 Buena. Calidad normal. Polucin dbil.

25 - 49 Regular. Polucin moderada. Eutrofizacin.

0 - 24 Mala calidad. Polucin muy fuerte.

Fuente: Carrera y Fierro, 2001

ndice BMWP/Col

El ndice BMWP/Col (Biological Monitoring Working Party) es un mtodo cualitativo

(presencia / ausencia), simple y rpido, que requiere nivel taxonmico de familia. A cada
una de las familias de individuos se le otorga un puntaje que va de 1 a 10, basado en la
tolerancia de los diferentes grupos a la descomposicin orgnica (Hauer & Lamberti,
1996). La suma de los puntajes de todas las familias da el puntaje total BMWP/Col.

Cuadro N 2: Clasificacin de Calidad de las Aguas segn el ndice BMWP/Col

Calidad de Valor
Clase Significado
Agua BMWP/Col
Aguas muy limpias, no
I Muy buena 121
contaminadas
II Buena >150 ,<101-120> Aguas limpias, no contaminadas
Se evidencia efectos de la
III Aceptable 61-100
contaminacin
Aguas moderadamente
IV Dudosa 36- 60
contaminadas
V Crtica 16-35 Aguas muy contaminadas
Aguas fuertemente contaminadas
VI Muy crtica < 15
situacin crtica
Fuente: Roldn, 2003

NECTON (PECES)

Es el grupo ms numeroso de todos los vertebrados; poseen locomocin y pueden

desplazarse en toda la columna de agua. Se encuentran en los niveles ms altos de la
cadena trfica en los ecosistemas acuticos.

El monitoreo de necton (peces) ser realizado mediante el uso de una atarraya de 3 m

de dimetro, con una apertura de malla de 0.02 cm, durante aproximadamente 2 horas
por estacin de monitoreo. Los peces capturados sern colocados en un balde de 20 L
con agua obtenida del mismo cuerpo de agua para proceder con la medicin in situ de
la talla (con la ayuda de un ictimetro), peso (con una balanza digital de 0.1 g de
precisin) y la identificacin solo de truchaOncorhynchus mykiss.

Se seleccionarn 02 a 03 ejemplares de trucha Oncorhynchus mykiss para su posterior

anlisis de metales en tejido muscular, mientras que los dems individuos capturados
se liberarn a su ambiente natural.

Los peces que no pudieron ser identificados en campo sern fotografiados in situ para
luego ser fijados con formol al 10 % por 48 horas y conservadas con alcohol al 70 %.
Posteriormente, se proceder al etiquetado de las muestras colectadas (cdigo de
muestra, procedencia, fecha, datos de la persona a cargo de la colecta). Cabe precisar
que el formol y alcohol sern reutilizados para la preservacin de las muestras
colectadas durante todo el monitoreo. Al final de la evaluacin el excedente mnimo ser
reutilizado para el embalaje de las muestras para su transporte al laboratorio.

La separacin e identificacin de aquellas especies que no pudieron ser identificados

en campo se llevar cabo en el laboratorio de Ictiologa del Museo de Historia Natural
usando claves taxonmicas para cada grupo especfico como las de Baumgarther
(2012) para los Characiformes; Albert (2001) para Gymnotiformes, Kullander (1986)
para Perciformes y Burgues (1989) para Siluriformes; as como descripciones originales
de las especies; la clasificacin se realizar en base a Reis et al., 2003; Ferraris et al.,
2007 y Ortega et al., 2012. El material identificado ser debidamente etiquetado y
depositado en la coleccin del Museo de Historia Natural de la UNMSM.

En el caso de los especmenes de trucha Oncorhynchus mykiss seleccionados para el

analisis de contenido de metales, todo los individuos sern enjuagados con agua
destilada para eliminar restos del proceso de captura y sern colocados en bolsas
plsticas, preservndose en hielo (EPA 200.3:1991). Todas las muestras sern
congeladas y etiquetadas para su posterior envo al laboratorio Certimin S.A. en donde
sern analizadas mediante el mtodo de ICP.

1.2. TIPO DE INVESTIGACIN

El tipo de Investigacin hidrobiolgica es descriptiva para el Monitoreo Hidrobiolgico

en la Unidad Econmica Administrativa (U.E.A.) Uchucchacua.

1.3. DISEO DE LA INVESTIGACIN

Para la evaluacin se eligi, entre otros grupos, al plancton, macroinvertebrados

bentnicos, perifiton (animal y vegetal) y peces. La mayora de los grupos taxonmicos
seleccionados son conocidos y bajo los cuales existen clasificaciones que indican su
grado de amenaza, sensibilidad a la presencia del hombre; por lo tanto existen valores
de referencia.

Las variables biolgicas para describir los componentes biolgicos son riqueza,
abundancia y diversidad. Se determinarn ndices de diversidad tales como: Shannon-
Wiener (H) y Simpson (1-D), entre otros ndices especficos a cada grupo biolgico.
Para los anlisis, se calcularn las diversidades alfa promedio y sus varianzas, tal que
permitan generar comparaciones entre cuerpos de agua y entre periodos distintos de
evaluacin a futuro.
En el anlisis cualitativo se incidir en la identificacin de especies que se encuentran
cubiertas por una norma legal de alcance nacional. Cabe destacar que la informacin
obtenida en campo ser reforzada con la informacin bibliogrfica.

1.4. POBLACIN Y MUESTRA

El nmero de estaciones para el monitoreo hidrobiolgico, ha sido considerado de

acuerdo al programa de monitoreo aprobado en el Plan de Manejo Ambiental de la
Modificacin del Estudio de Impacto Ambiental de la UEA Uchucchacua (R.D. N 637-
2014-MEM/DGAAM).

En el Cuadro N 3 y Mapa M-03 se presentan las coordenadas de las dos (02)

estaciones de monitoreo hidrobiolgico.

Cuadro N 3: Estaciones de Monitoreo Hidrobiolgico

Coordenadas UTM WGS 84
Estacin de Zona 18S
Referencia
Monitoreo
Este (m) Norte (m)

PA-40 Laguna Ailcocha (salida) 315548 8822548

PA-90 Ro Patn 309687 8817805

Fuente: informacin proporcionada por BUENAVENTURA. R. D.N 637-2014-MEM/DGAAM.
1.5. INSTRUMENTOS Y EQUIPOS

Se lista a continuacin los instrumentos y equipos que se emplearn en el muestreo

hidrobiolgico (Cuadro N 4).

Cuadro N 4: Lista de Equipos de Campo

Detalles Caractersticas

Cmara fotogrfica digital Nikon, con memoria de 8gb

Navegador Personal (GPS) Garmin Etrex V, con memoria de 2 gb.

Ictimetro Krauss & Henke, 50 cm con divisiones de 0.5 cm

Balanza de campo Digital de 1 kg.

Disco Secchi Artesanal (20 30 cm de dimetro)

Multiparmetro HACH (pH, CE, OD y T)

Linterna de mano Eveready

Radio de largo alcance Motorola

Red surber Artesanal

Atarraya Artesanal

La metodologa del uso de los principales equipos de campo se detalla a continuacin:

Multiparmetro

Para la medicin de los parmetros de campo como: temperatura, oxgeno disuelto,

conductividad y pH, se utilizar un equipo porttil Multiparmetro, el mismo que ser
operado de acuerdo a las especificaciones tcnicas de su respectivo manual y ser
calibrados y/o verificado antes de iniciar los trabajos de campo. El certificado de
calibracin del laboratorio tiene una duracin de un ao.

Equipo Fotogrfico

Se utilizar una cmara fotogrfica digital para los registros fotogrficos de las
estaciones de muestreo (vista panormica) y para complementar la descripcin de
estaciones de muestreo. Asimismo, se realizar un registro fotogrfico de las
metodologas de colecta de plancton, perifiton, macroinvertebrados bentnicos y peces;
y de las especies de peces capturadas para la galera fotogrfica. Esta cmara
fotogrfica ser utilizada de acuerdo a las especificaciones tcnicas de su respectivo
manual.
Los equipos de muestreo y los materiales sern almacenados apropiadamente para
evitar la contaminacin externa. Los parmetros fsico-qumicos como: temperatura,
oxgeno disuelto, conductividad y pH, seran medidios in situ.

En los cuadros N 5 y N 6 se presenta el material adicional a emplear.

Cuadro N 5: Lista de Materiales de Colecta

Descripcin

Cinta duck tape

Bolsa Ziploc grandes (aprox. 30 x 40 cm)

Bolsa Ziploc pequeas (aprox. 25 x 30 cm)

Bolsas plsticas grandes (50 x 80 cm)

Recipientes plsticos (0.5 L y 0.25 L)

Cuadro N 6: Lista de Materiales de Preparacin

Descripcin
Alcohol 70%
Formol 4% y 10%
Agua Oxigenada 30 vol.
Pinza relojero
Tijera quirrgica (pequea)
Guantes (manoplas de auscultacin) de ltex (o neopreno)
Papel toalla (rollo)
Jeringas de 1, 5 y 10 ml.
Baldes de diferentes tamaos
Etiquetas marcadoras
Reglas metlicas
Gasa
Algodn (1 rollo de 500 gr)