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UNIVERSIDAD TECNOLGICA DE PANAM

CAMPUS DR. VCTOR LEVI SASSO


FACULTAD DE INGENIERA CIVIL
LICENCIATURA EN INGENIERA AMBIENTAL

Laboratorio # 10
Enumeracin de microorganismos en muestras de suelo

Asignatura: Microbiologa
Profesora: Yarisel Gonzlez

Integrantes: Cdula:
1.Rodrguez, Zuri 7-710-1450
2.Osorio, Brayan 6-720-1035
3.Rodrguez, Susana 8-911-799
4.Nicole Francisco 8-906-159

Grupo: 1IB131 (A)

Cdigo de la asignatura: 8325

Fecha de entrega: 27-06-2017

Ao: 2017
Introduccin
A continuacin, en este informe de laboratorio presentamos una enumeracin
de microorganismos en una muestra de suelo. Lo primero que haremos es
agarrar una porcin de tierra, especficamente 10 gramos que posteriormente
pesaremos en la balanza analtica; luego utilizaremos el mtodo de dilucin en
serie para diluir estos gramos de suelo en 95 ml de agua destilada, como
resultado obtenemos una dilucin con grado 10-2. A partir de esta dilucin se
proceder a preparar 5 diluciones ms, hasta el grado 10-12
Microorganismos, hongos, protozoarios, virus entre otros son una mezcla de
seres vivientes que desarrollan su vida en la tierra y se alimentan de lo que hay
ella. Por lo que, en este laboratorio, utilizaremos dos medios de cultivo, en
donde tericamente uno es ms propicio para el crecimiento de hongos como
lo es el medio de cultivo papa- dextrosa; y el agar nutritivo es ms propicio para
crecimiento de bacterias.
Despus de la dilucin en serie, sembraremos con el aza en forma de L una
pequea cantidad de la muestra tanto en el agar nutritivo y el papa- dextrosa.
Finalmente se proceder a incubar alrededor de 18 a 24 horas en un ambiente
adecuado de temperatura.

Objetivo
Enumerar la poblacin de bacterias, actinomycetes y hongos en una
muestra de suelo
Practicar la tcnica de dilucin en serie (peso/ volumen) y recuento
en placa utilizando una muestra de suelo

Materiales
MATERIALES ILUSTRACION

Erlenmeyer

Pipeta y Propipeta
Agar papa dextrosa

Agar nutritivo

Placa petri

Vaso quimico

Agua destilada

Contenido
Introduccin
Objetivo
Materiales
Instrumentos utilizados para la experiencia de laboratorio
Marco terico
Procedimiento
Resultados
Cuadro de resultados
Conclusin
Bibliografa
Marco terico
Los microorganismos en el suelo

As, pues, lo que se tiende a considerar, sin darle importancia, como un


puado de tierra, se revela como algo de una elevada sensibilidad, como el
fruto de un desarrollado proceso de transformacin. *Tomado de Engel,
Martin. La vida animal en el suelo. Un mundo bajo nuestros pies*

Engel se refiri a que, aunque su tamao sea casi invisible para el ojo
humano, los microorganismos forman una parte importante del ciclo de la
vida del suelo y de las transformaciones que se dan en l.

Los microorganismos son los componentes ms importantes del suelo.


Constituyen su parte viva y son los responsables de la dinmica de
transformacin y desarrollo. La mayor actividad de los microorganismos se
realiza desde la superficie del suelo hasta unos 20 centmetros de
profundidad.
Las colonias de microorganismos permanecen adheridas a las partculas de
arcilla y humus (fraccin coloidal) y a las races de las plantas que les
suministran sustancias orgnicas que les sirven de alimento y estimulan su
reproduccin. La micro flora del suelo est compuesta por bacterias,
actinomicetos, hongos, algas, virus y protozoarios.
Las bacterias son los microorganismos ms abundantes y pequeos (0,1 a 1
micras). Pueden ser aerobias (crecen con oxgeno), anaerobias (crecen sin
oxgeno) o facultativas (crecen con o sin oxgeno). Si las bacterias se
alimentan de compuestos orgnicos son hetertrofas. Si se alimentan de
inorgnicos, son auttrofas. Los gneros bacterianos ms importantes
(agrcola) que transforman los compuestos orgnicos e inorgnicos y que
favorecen la nutricin de las plantas estn: Bacillus, Pseudomonas,
Azotobacter, Azospirillum, Beijerinckia.

Los hongos Conforman una importante fraccin de la biomasa total


microbiana del suelo. Crecen en forma de red extendindose como micelio
hasta su estado reproductivo donde dan origen a esporas sexuales o
asexuales. Son importantes degradadores aerobios de material vegetal en
descomposicin en suelos cidos. Los hongos metabolizan compuestos
carbonados de muy difcil degradacin como las celulosas, las hemicelulosas
y las ligninas. Tambin degradan azcares simples, alcoholes, aminocidos
y cidos nucleicos. Pueden ser parsitos o saprofitos. Son muy importantes
en suelos con desechos de cosecha. Los hongos movilizan nutrientes
minerales hacia las races de las plantas, aumentan la capacidad de retener
agua en sequa, fijan nitrgeno y fsforo.
Procedimiento
Nota: se realizaron 2 fases a la vez.

Preparacin de los medios de cultivo (agar nutritivo y papa dextrosa)


Disolucin en serie de la tierra

Disolucin en serie de la tierra


Se pes 10 g de tierra

Se disolvi en 95 ml de agua destilada.


A esta disolucin le llamaremos 10 y
revolvimos durante 2-4 minutos.

Usando una pipeta pasamos 1 ml del


frasco 10, a otro que contiene 99 ml
de agua destilada. A este le llamamos
10 y revolvimos 1 minuto. Repetimos
el procedimiento con los dems
frascos.
1 ml del 10, a uno con 99 ml de agua
destilada. Sera el 10
Repetimos el mismo procedimiento por
la misma cantidad de agua en el frasco
10.10 y 10.
Disoluciones de los agares
Disolucin de la Disolucin del ilustraciones
papa dextrosa agar-nutritivo

a) Pesamos 3.9 g de 1. Pesamos 2.3 g de


papa-dextrosa agar-nutritivo en
la balanza
analtica

b) En un tubo de 2. En un tubo de
ensayo ensayo
colocamos 100 ml colocamos 100 ml
de agua destilada de agua destilada

c) En un Erlenmeyer 3. En un Erlenmeyer
calentamos calentamos
aproximadamente aproximadamente
40 ml de agua 40 ml de agua
destilada del tubo destilada del tubo
de ensayo de ensayo

d) Disolvimos el 4. Disolvimos el
agar en el vaso agar en el vaso
qumico qumico

e) Vertimos en el 5. Vertimos en el
Erlenmeyer y Erlenmeyer y
cocinamos, cocinamos,
quitando todo quitando todo
residuo de agar residuo de agar
del vaso qumico del vaso qumico
y revolviendo con
y revolviendo con
un policial.
un policial.
I. Dividimos 1 ml aproximadamente de los agares en diferentes placas petris y
dejamos enfriar

II. Usando un Asa de siembra casera (en forma de L) pasamos del frasco que
contena 10 una muestra de dilucin, al frotis

III. Esperamos por unos minutos y guardamos de forma vertida en la incubadora


durante 18-24 horas.

IV. Luego se procede al conteo en placas


Resultados
a. Conteo en placas y descripcin de la morfologa.
Crecimiento de bacterias y hongos del suelo
Grado
de
dilucin
de la
Medio de cultivo Agar Nutritivo Medio de cultivo Papa dextrosa
muestra
102
#Colonias(C) y #Colonias(C) y
Ilustracin Ilustracin
hongos(H)/Descripcin hongos(H) /Descripcin

C=12 C=24
H= menor de 30 H=0
Forma: puntiforme Forma: puntiforme
Margen: entero Margen: entero
Elevacin: Elevacin: convexa
convexa Superficie: rugosa
Superficie: Comportamiento
rugosa con la luz: opaca
Comportamiento
con la luz: opaca

C=15 C=2
H=1 H=0
Forma: Forma:
puntiforme, puntiforme y
irregular circular
Margen: Margen:
ondulada ondulada
Elevacin: Elevacin: relieve
relieve y convexa
Borde: ondulado Borde: ondulado
Superficie: Superficie:
brillante y rugosa rugosa
Comportamiento Comportamiento
con la luz: con la luz: opaca
traslcida y opaca y traslcida
No se observ No se observ
ningn ningn
crecimiento crecimiento

C=12 No se observ
H=ms de 300 ningn
Forma: circular, crecimiento
irregular,
puntiforme
Margen:
ondulado
Elevacin: plana
Borde: liso y
arrugado
Comportamiento
con la luz:
traslcida y
opaca
C=30 No se observ
H=2 ningn
Forma: crecimiento
puntiforme y
circular
Margen:
ondulada
Elevacin: plano
Borde: irregular
Superficie: lisa y
plana
Comportamiento
con la luz:
traslcida
b. Microorganismos por gramo de suelo.
Pasado el tiempo de incubacin, se realiza un recuento del nmero de
colonias que aparecen por placa. A continuacin, se estima en nmero
de unidades formadoras de colonias que existen en 10 gramo de la
tierra utilizada, teniendo en cuenta que para calcular los UFC/g de suelo
se requiere de 30 a 300 colonias significativas. Por lo tanto, utilizaremos
el Factor de dilucin 1x10-12, el cual present 30 colonias significativas
en el agar nutritivo.
FD: factor de dilucin=1x10-12
FDD: factor decimal de dilucin=1/1x10-12
UFC: unidades formadoras de colonias=#BACTERIAS
/ = (# )


= ( ( ) ) = .

Esto es un indicador de que para ser la ltima dilucin existe una gran cantidad de
bacterias en el suelo.

Solo para comparar vemos UFC en un suelo normal o ideal en los


respectivos grupos funcionales.
Conclusin

La diversidad de las especies en el suelo, ayuda al mismo a transformar la


materia a su beneficio.
Este laboratorio nos ayud a comprender la cantidad de seres que viven en
el suelo o del tiempo que necesitan para alimentarse y crecer. Nuestro
nmero de bacterias u hongos dependi de la serie o frasco que utilizamos
para sacar nuestra muestra, como ya sabemos mientras ms pura o menos
diluida este el frasco ms cantidad de bacterias tiene y ms incontable se
vuelve.
La utilizacin de los agares es necesaria para dar un lugar ptimo para el
crecimiento ya sea de hongos o bacterias y poder distinguir su morfologa.
Llevando los estudios de los microorganismos del suelo ms all de tan
solo una simple observacin, podramos decir que la funcin de los
microorganismos en el suelo es ms que una alimentacin bsica, sino que
tambin ayudan al medio ambiente directamente trabajando por un
ecosistema sostenible.

Bibliografa
Libro Brock -Biologa de los microrganismos. Michael T. Madigan, John M. Martinko

http://porquebiotecnologia.com.ar/index.php?action=cuaderno&opt=5&tipo=1&note=87

http://biologiadelsueloudea20132.blogspot.com/p/microbiologia-del-suelo.html

http://www.webs.ulpgc.es/hbg/PRACTICAS/PROBLEMAS/CALCULOS-UFC.pdf

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